纤维结合素多肽衍生物的化学合成及对骨髓瘤组织株K562的…

应用固相多肽合成技术，人工合成了一种衍生于纤维结合素的六肽ＧＲＧＤＳＳ。用高效液相层析进行纯度鉴定，并观察六肽对骨髓瘤细胞株Ｋ５６２的体外抑制作用，实验结果表明，六肽在７２ｈ内对骨髓瘤细胞的抑制率为３１％，多肽的结构对功能有一定的影响，根据竞争抑制原理，设计和合成多功能的多肽可为临床医学治疗肿瘤开辟一个新的途径。     

Laminin五肽对胃癌细胞系MGc－803的体外抑制作用

描述了Ｌａｍｉｎｉｎ五肽（ＹＩＧＳＲ）对胃癌细胞系ＭＧｃ－８０３的体外抑制作用，在多肽浓度为１ｍｇ／ｍｌ时抑制率高达７３％．抑制作用的机理可能是Ｌａｍｉｎｉｎ五肽竞争了肿瘤细胞上Ｌａｍｉｎｉｎ受体，从而封闭了肿瘤细胞对基底膜的结合及增殖．因此，利用Ｌａｍｉｎｉｎ五肽一类的药物有可能为肿瘤术后防止扩散提供一个新方法．     

抗纤维结合素单克隆抗体与自身抗原组蛋白免疫交叉反应的…

应用免疫扩散和Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ分析证实了抗纤维结合素（ＦＮ）单克隆抗体与自身抗原组蛋白发生免疫学交叉反应。通过计算机技术进一步分析了交叉反应的分子基础。在组蛋白和ＦＮ之间有５个氨基酸序列同源性区域被发现。同源性区域与Ｐｏｌｌａｒｄ所预测的组蛋白抗原决定族相一致。根据抗原抗体反应的物理学，化学和免疫学特性，讨论了单克隆抗体与不相关抗原发生交叉反应的可能原因。包括：１．分子模拟－氨基酸序列同源     

抗纤维结合素单克隆抗体与自身抗原组蛋白免疫交叉反应的分子基础研究

应用免疫扩散和ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ分析证实了抗纤维结合素（Ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ，ＦＮ）单克隆抗体与自身抗原组蛋白（Ｈｉｓｔｏｎｅｓ）发生免疫学交叉反应。通过计算机技术进一步分析了交叉反应的分子基础。在组蛋白和ＦＮ之间有５个氨基酸序列同源性区域被发现。同源性区域与Ｐｏｌｌａｒｄ所预测的组蛋白抗原决定簇相一致（Ｐｏｌｌａｒｄ，１９９０，Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ）。根据抗原抗体反应的物理学，化学和免疫学特性，讨论了单克隆抗体与不相关抗原发生交叉反应的可能原因。包括：１．分子模拟－－－氨基酸序列同源性；２．不相关抗原共享的构型表位；３．抗原抗体反应时空间电荷分布；４．反应介质的诱导。组蛋白与某些单克隆抗体发生的交叉反应性揭示了在自身免疫性疾病中抗组蛋白自身抗体产生的可能致病原因。     

文蛤多肽对体外培养宫颈癌Hela细胞的抑制作用

采用蒸馏水抽提,有机溶剂沉淀大分子蛋白,Sephadex G-25分子筛柱层析等技术从文蛤肉分离纯化,得到一种低分子量的蛋白多肽,命名为Mer2.实验结果表明,Mer2对宫颈癌Hela细胞有明显的抑制效应,Mer2对宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用呈量效与时效关系.经40 μg/mL Mer2处理,体外培养宫颈癌Hela细胞生长缓慢,细胞形态发生明显改变,细胞生长抑制率达78.1%,并出现明显的凋亡峰,凋亡率为25.5%.     

文蛤多肽对体外培养人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用

研究了文蛤多肽对体外培养的人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用,结果表明,经5.0μg/mL文蛤多肽处理的体外培养的人肝癌细胞(SMMC-7721)生长缓慢,倍增时间延长,细胞生长抑制率达89.4%;处理后的癌细胞形态发生明显改变,处于G0/G1期的细胞明显增多,而S期和M期细胞减少,出现明显的凋亡峰,凋亡率为22.3%.实验结果表明,文蛤多肽能有效地抑制体外培养肝癌细胞的增殖活动,可通过改变肝癌细胞的形态及细胞周期而明显抑制细胞的增殖.     

磷酸化处理对蚕蛹多肽结合钙能力的影响

为探索磷酸化处理对多肽结合钙能力的促进作用,以蚕蛹多肽为研究对象,采用不同种类和添加量的磷酸化试剂对其进行磷酸化改性,再与CaCl₂反应制备蚕蛹多肽结合钙复合物,并对样品进行钙和磷含量测定、磷酸化位点检测、红外光谱分析和扫描电镜分析。研究结果表明:Na₃PO₄、NaH₂PO4、(NaPO₃)₆ 3种试剂可与蚕蛹多肽发生磷酸化反应,改性后蚕蛹多肽结合钙含量可从145.12mg/g提高至202.32mg/g ;不同种类磷酸化试剂处理对多肽的结合钙能力无显著性差异,但磷酸化程度对肽结合钙能力有较大影响;多肽结合钙复合物中钙含量随磷酸化试剂的增加先升高后下降,当采用质量分数为0.50%的NaH₂PO₄时,改性后蚕蛹多肽结合钙含量达到最大值。红外光谱和磷酸化位点检测表明:NaH₂PO₄处理可使蚕蛹酶解产物中的17种肽段被磷酸化,增加磷酸化位点22个;肽段主要通过与丝氨酸和苏氨酸上的—OH反应接入磷酸基团。研究表明,磷酸化改性方法可显著提高多肽结合钙能力,希望为高效的补钙制品开发提供新的思路和方法。     

多肽C端衍生物的反向固相合成新方法

新设计了一种多肽C-端衍生物的合成方法。本方法结合了Fmoc-SPPS技术与TAEC技术的优点,室温反应,反应条件温和,易于监测,反应过程中所需采取的保护基最少,后处理简单高效,与正向固相合成互补,可高效地合成多种多肽以及多肽C-端衍生物。     

纤维粘连蛋白在人滋养上皮的不同定位与功能

从正常人不同发育时期,不明原因流产,增殖型和侵蚀型葡萄胎滋养细胞角度,用免疫组织化学方法观察纤维粘连蛋白（FN）的显微定位,比较研究其不同定位与滋养上皮增殖,生长，分化,凋亡，迁移和浸润的关系。结果显示 正常人不同发育时期,FN在早孕合体滋养细胞基底膜和绒毛外滋养细胞膜呈阳性着色,在中期非合体结处的滋养细胞质呈免疫反应阳性,在足月滋养细胞呈阴性着色; 不明原因流产,FN在合体滋养细胞核内呈阳性着色; FN在增殖型葡萄胎滋养细胞膜和绒毛外滋养细胞质呈强阳性着色;FN在侵蚀型葡萄胎滋养细胞质呈阳性着色。提示FN胞质定位与滋养上皮迁移和侵蚀密切相关,FN基底膜定位与滋养细胞分化密切相关,FN胞膜定位与滋养细胞增殖相关,FN的阴性着色与滋养细胞衰老,FN胞核转位与滋养细胞凋亡可能相关。     

牛乳酪蛋白源ACE抑制肽的稳定性和毒理特性研究

研究目的：创新要点：研究方法：重要结论：酸碱热处理对牛乳酪蛋白源血管紧张素转化酶（ACE）抑制肽的抑制活性、游离氨基、色泽及其毒理特性的影响。在pn9.0-12．0的热处理条件下,牛乳酪蛋白源ACE抑制肽的抑制活性降低,色泽加深。热处理后的ACE抑制肽对Caco-2细胞和ECV-304细胞没有毒性作用。以ACE抑制活性、游离氨基、色差值和细胞存活率为检测指标,研究了酸碱热处理对ACE抑制肽的稳定性和毒理特性影响。高温和碱性热处理能破坏酪蛋白源ACE抑制肽的稳定性（见图1～3）。     

KA2012HRS复合提取液对K562细胞凋亡的诱导作用和细胞周期的阻滞作用相关研究

KA2012HRS复合提取液是以新鲜海参为主料的口服生物制剂,具有良好的抗疲劳、提高免疫力的功效.研究发现KA2012HRS复合提取液具有良好的体外抗肿瘤活性,同时可有效克服P-gp介导的肿瘤多药耐药,并且具有一定的肿瘤细胞选择性.对KA2012HRS复合提取液抗肿瘤机理进行了初步研究,结果表明:KA2012HRS复合提取液与K562/S细胞相互作用后,可将其细胞周期阻滞在S期,并使其线粒体膜电位显著降低,从而诱导该细胞发生凋亡.本研究提示,KA2012HRS复合提取液将具有良好的开发前景.     

兔成骨细胞的体外培养及生物学行为观察

以一月龄幼兔的颅顶骨为材料 ,采用组织块法 ,进行细胞的原代培养并传代之 .结果显示 :(1)原代细胞具有成骨细胞的形态特征 ,经 6次传代后细胞形态变化不明显 ;(2 )细胞具有较强的碱性磷酸酶 (AL P)活性且稳中有升 ;(3)细胞培养液和细胞内均含有骨钙素 ;(4)连续培养 1个月后 ,成骨细胞有矿化结节形成 ;(5 )骨片经 4次贴壁仍有细胞爬出且细胞形态相同 .该结果表明所培养的细胞具有成骨细胞的生物学行为 ,为骨细胞生物学和骨组织工程的研究提供了一种客观而有效的手段     

灵芝抑制肿瘤微环境中Treg细胞功能的机制

为探究灵芝抑制肿瘤的可能机制,分别采用灵芝三萜、多糖及三萜多糖配伍对H22荷瘤小鼠模型进行干预,检测瘤体重量、体积,流式细胞法检测肿瘤组织中Treg细胞比例,RT-PCR法检测趋化因子CCL22、受体CCR4和FOXP3 mRNA表达水平,IHC法检测FOXP3蛋白表达水平,ELISA法检测IL-10、TGF-β1、IL-2含量.结果显示,灵芝能抑制H22肿瘤生长,配伍组抑瘤率(47.8%)明显高于三萜组(21.4%)和多糖组(30.8%);灵芝能降低肿瘤微环境中Treg细胞比例,配伍组比例(1.93%)明显低于三萜组(3.04%)和多糖组(2.18%);灵芝能显著降低相关mRNA的表达、FOXP3和IL-10、TGF-β1水平,增加IL-2水平.因此,灵芝可通过减少Treg细胞向肿瘤组织浸润、抑制其分泌细胞因子,同时增加IL-2水平来促进抗肿瘤免疫,且三萜和多糖合用可能存在协同作用.     

槐果碱对人红白血病K562细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用

研究了槐果碱对人红白血病细胞株K562的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用，应用流式细胞仪进一步观察槐果碱对K562细胞周期的影响。结果表明：槐果碱对K562细胞生长有明显的抑制作用，且这种抑制作用呈浓度依赖性、时间依赖性。细胞经0．8g／L、1．0g／L的槐果碱作用48h后，即呈现典型的细胞凋亡形态学变化，作用72h后DNA凝胶电泳出现片段的梯形条带。流式细胞仪分析显示，用1．0g／L槐果碱使K562细胞阻滞于G0／G1期，作用72h后G0／G1细胞比例由38．0％上升到56．2％。槐果碱对人红白血病细胞K562的增殖具有明显的抑制作用，并能诱导其发生凋亡。     

DADS对人小细胞肺癌细胞株NCI—H446增殖的影响

目的探讨二烯丙基二硫（diallyldisulfide,DADS）体外抑制人肺癌细胞株NCI—H446细胞增殖作用。方法采用MTT、细胞计数、细胞活力检测DADS对体外培养的人肺癌H446细胞的抑制增殖作用;倒置显微镜观察DADS对体外培养的人肺癌H446细胞的形态学改变。结果IVIqT结果显示,DADS作用H446细胞后,明显抑制细胞增殖且抑制率呈现浓度时间依赖性关系;细胞计数结果表明,DADS作用H446细胞后其细胞群体倍增时间延长;形态学变化观察,随着DADS浓度递增,细胞逐渐稀疏,数量明显减少。结论DADS对人小细胞肺癌H446细胞株具有抗增殖作用,且与药物浓度及作用时间相关。     

大蒜素纳滤提取及对粪肠球菌的体外抑菌研究

以白皮大蒜为原料,研究大蒜素的纳滤提取条件和大蒜素对粪肠球菌Enterococcus faecalis的体外抑菌特性．研究结果表明：0.45 μm膜过滤后的大蒜液在压力0.6 MPa、温度36℃操作条件下经孔径300 Da的纳滤膜纳滤后,大蒜原料中大蒜素的有效提取率为81.9%,纳滤液中大蒜素含量为2.07 mg/mL．大蒜素对E. faecalis的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度在好氧和厌氧培养条件下无明显差异,分别为15 mg/mL和23 mg/mL．20 mg/mL的大蒜素对E. faecalis