以阿魏酸为底物生物合成香兰素

概述了香兰素的应用和市场概况．重点综述了以阿魏酸为底物生物合成香兰素的4种途径（非氧化脱羧反应、侧链还原、不依赖于辅酶A的去乙酰反应和依赖于辅酶A的去乙酰反应）以及目前国内外的生产情况．     

异质型乙酰辅酶A羧化酶及其生产3-羟基丙酸的研究进展

乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)催化底物乙酰辅酶A的羧化,是脂肪酸从头合成的起始限速酶.近年来,在一些嗜热古细菌、丝状不产氧光合细菌等中发现的ACCase还参与一种新型固定二氧化碳的3-羟基丙酸循环代谢途径.ACCase与丙二酰辅酶A还原酶直接催化该循环的起始两步反应,合成代谢特征中间物3-羟基丙酸(3-HP).本文围绕参与脂肪酸从头合成和3-羟基丙酸循环的异质型ACCase,系统介绍和总结异质型ACCase组成差异、催化过程、亚基构象变化和表达调控特点,扩展对ACCase结构与功能多样性和分子进化的理解.同时描述了利用异质型ACCase工程改造合成3-HP,为绿色、高效生物合成3-HP提供理论依据和重要策略.     

嗜热厌氧产乙醇杆菌乙醇代谢途径的初步研究

以乙醇产量和细胞密度的提高为目标,从碳源和氮源入手,对嗜热厌氧产乙醇杆菌THermoanaerobacter ethanolicus JW200的培养基作了初步优化以提高乙醇代谢途径中的关键酶的得率,便于提纯.葡萄糖浓度的提高对乙醇的产生有明显的诱导作用,但当葡萄糖浓度高于2%,乙醇产量反而下降.酵母粉对乙醇产量没有促进作用,单纯提高酵母粉浓度对细胞密度无显著影响,而同时提高葡萄糖和酵母粉浓度至2.0%,OD600最高可达2.0.2%葡萄糖,0.5%酵母粉对单位细胞乙醇产量的诱导效果最佳.T.ethanolicusJW200粗酶液中未检测到丙酮酸脱羧酶的活性,经亲和柱Cibacron Blue-3GA部分纯化,在NAD洗脱蛋白中检测到辅酶A依赖型乙醛脱氢酶的活性,表明辅酶A依赖型乙醛脱氢酶是该菌乙醇代谢途径中的关键酶,它和乙醇脱氢酶共同作用,将乙酰辅酶A转化成乙醇.     

NaCl刺激保加利亚乳杆菌对丙酮酸代谢及相关酶活性的影响

分析NaCl刺激保加利亚乳杆菌与冻干存活率的关系。高效液相色谱法分析葡萄糖、有机酸、乙酰辅酶A(Acetyl-CoA)以及胞内能量代谢变化;顶空气相色谱法测定乙醛含量;分光光度法和比色法测定关键酶活性。结果显示:NaCl刺激保加利亚乳杆菌对丙酮酸的代谢有显著影响,葡萄糖代谢速率提高48.18%(P<0.01),乳酸生成速率提高8.93%(P<0.01),关键中间代谢产物Acetyl-CoA的含量增加约31.35%(P<0.01);而乙酸含量出现负增长,乙醛生成速率降低22.86%(P<0.05)。胞内ATP代谢变化明显促进糖代谢速率;乳酸脱氢酶、乙酸激酶、磷酸乙酰转移酶的活性均有增加,而乙醛脱氢酶活性减弱。结果表明,NaCl刺激保加利亚乳杆菌对自身糖代谢的加快,丙酮酸代谢碳流向的重新分配以及关键酶活性的改变,可能与提高保加利亚乳杆菌的冻干存活率相关。     

肉鸭肝脏脂肪酸合成酶活性及脂肪酸合成途径的研究

利用放射线检测器和分光光度计,对肉鸭肝脏中参与脂肪酸合成的酶类:乙酰辅酶-A羧化酶,脂肪酸合成酶,NADP-苹果酸脱氢酶,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶等酶的活性进行了测试分析.结果表明,肉鸭肝脏的各种脂肪酸代谢酶类的活性表现为:42日龄比21日龄的显著增加,显示随着日龄的增加,鸭肝脏合成脂肪的能力也显著增强.鸡的肝脏进行脂肪酸合成所必需的NADPH主要是由NADP-苹果酸脱氢酶参与的丙酮酸-苹果酸途径提供.与此相比,鸭的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的活性非常高,显示鸭的脂肪酸合成途径与鸡不同,脂肪酸的合成不仅仅有丙酮酸-苹果酸途径参与,戊糖磷酸循环也起到关键性的作用.     

摄糖过多损健康

一位大学生多年来患神经衰弱,体质差,每当学习疲劳时,就以白糖水来补充热量。这样,白糖越吃越多,神经衰弱越来越严重。最后在一次赶写论文时突发了糖尿病。这是什么原因呢? 脑力劳动者食糖过多,会导致体内缺乏硫胺素(维生素B_1)。这是因为糖代谢过程中产生的乳酸、丙酮酸等中间产物,要靠含有硫胺素的脱羧辅酶分解为二氧化碳和水排出体外。若糖摄入过量,脱羧辅酶的需要量亦要增加,而食物中硫胺素来源有限,一旦缺乏则影响乳酸、丙酮酸等代谢产物的分解。     

微分脉冲极谱法研究稀土离子对乳酸脱氧酶活性的影响

根据前文黄瓜根系伤流液中微量Ｌａ＾３＋，Ｅｕ＾３＋明显影响氨基酸代谢的结果，用记时电流法研究了稀土对氮同化过程中硝酸还原酶和谷氨酸脱氢酶活性的影响，酶活性的变化以辅酶ＮＡＤＨ氧化电流在反应中的衰减速度来表示。用微分脉冲极谱法研究稀土离子对丙酮酸转化为乳酸反应中乳酸脱氢酶活性的影响，以反应产物ＮＡＤ＾＋的还原电流的大小表示酶活性的变化。研究结果表明Ｌａ＾３＋在低浓度下对酶活性有微弱的促进作用其他稀土     

丙酰辅酶A的体外酶法合成

丙酰辅酶A(丙酰-CoA)是一种重要的代谢中间物,可以用来生产丙烯酸、3-羟基丙酸、β-羟基戊酸和聚酮化合物。将天然的琥珀酰辅酶A合成酶、甲基丙二酰辅酶A变位酶、甲基丙二酰辅酶A脱羧酶在大肠杆菌中克隆并过表达,采用这3种纯化的酶体外催化合成丙酰-CoA,评价了琥珀酸生产丙酰-CoA代谢途径。琥珀酸可经琥珀酰辅酶A合成酶催化生成琥珀酰-CoA,琥珀酰-CoA再由甲基丙二酰辅酶A变位酶催化生成甲基丙二酰-CoA,最后甲基丙二酰-CoA经甲基丙二酰辅酶A脱羧酶催化生成丙酰-CoA。反应产物经高效液相色谱分析,检测到目标产物丙酰-CoA,结果证明了从琥珀酸体外合成丙酰-CoA的代谢途径的可行性。     

丙酮酸脱氢酶复合体的研究进展及应用

综述了丙酮酸脱氢酶复合体（PDHc）的组成、结构功能、调控机制、缺陷疾病及在医学和农业中的应用.丙酸酸脱氢酶系是定位在线粒体中的多酶复合体,它是由丙酮酸脱氢酶（E1）、二氢硫辛酸乙酰转移酶（E2）、二氢硫辛酸脱氢酶（E3）和一些辅助因子组成.高等生物中PDHc活性的调节主要是通过对其E1的磷酸化和去磷酸化来实现的,而细菌的PDHc的活性主要是通过别构效应来调节,PDHc缺陷导致代谢障碍,组织受损.     

乙酰辅酶A在物质代谢中的作用

<正> 新陈代谢是生命的最基本特征。在糖类,脂类和蛋白质氨基酸的新陈代谢中,乙酰辅酶 A的作用,至今还很少单独讨论。笔者认为无论在合成代谢还是分解代谢中,乙酰辅酶 A 都是一个很活跃的化合物,在新陈代谢及其相互联系中有着非常重要的作用。一、乙酰辅酶 A 是糖类、脂类和蛋白质氨基酸等有机物分解代谢的共同中间产物。糖类,脂类和蛋白质氨基酸等有机物在分解代谢中,都要经过乙酰辅酶 A 的阶段,即乙     

运动发酵单胞菌丙酮酸脱羧酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

以总DNA为模板，采用PCR技术克隆得到运动发酵单胞菌(Zymamonas mobilis）丙酮酸脱羧酶(pyru—Vate decarboxylase)基因pdc，将该基因连接到表达裁体pSE380上，得到重组质粒PSE—pdc,将此重组质粒转化到受体菌E．coliDH5α中，挑取重组菌株．经IPTG诱导后，在乙醛指示平板检测到丙酮酸脱羧酶活性．SDS—PAGE电泳结果显示出明显的特异性蛋白质条带：其分子量约为60KD．     

十二种脊椎动物不同组织中乳酸脱氢酶同工酶酶谱的比较研究

乳酸脱氢酶(LDH)是参与糖代谢的一种重要的酶,能可逆地催化丙酮酸和乳酸的相互转变。乳酸脱氢酶在动物界、酵母和细菌中以多种酶分子的形式——同工酶出现。由于同工酶与代谢调节、分子遗传、生物进化以及个体发育等方面关系密切,因而同工酶的研究进展很快,乳酸脱氢酶同工酶尤为迅速。在脊椎动物LDH同工酶的比较研究方面,1961年Vesell     

天然酵母菌利用海藻酸生成乙醇的代谢机理研究

天然酵母菌利用褐藻生成乙醇可以规避传统生物乙醇生产方法的不足,正在成为能源领域关注的热点之一,但是其代谢机理尚不明确。考察了不同碳源对季也蒙酵母(Meyerozyma guilliermondii)发酵生产乙醇的影响;通过高效液相色谱法(HPLC)和气相色谱法(GC)测定了海藻酸代谢过程中重要中间产物含量的动态变化。结果表明：季也蒙酵母可以直接利用甘露糖醛酸和古洛糖醛酸这两种单体进行乙醇发酵;在发酵过程中,中间产物丙酮酸、3-磷酸甘油醛和乙醛的浓度均呈现先增大后减小的趋势,但3-磷酸甘油醛的浓度变化较小。建立了海藻酸的代谢途径模型,并通过乙二胺四乙酸(EDTA)添加试验和镁离子浓度控制试验初步验证了该模型,推测海藻酸的代谢途径为：酵母菌产生胞外海藻酸裂解酶,将海藻酸裂解成寡聚海藻酸,随后进一步降解为低聚体;进入酵母菌细胞后,低聚体转化为糖醛酸单体等前体物质,随后转化为3-磷酸甘油醛、丙酮酸等中间产物,然后在丙酮酸脱羧酶及乙醇脱氢酶的作用下,最终生成乙醇。     

湖北省旅游气候舒适度分析

乙酰辅酶A羧化酶为多功能蛋白酶,芳氧苯氧类和环己二酮类为其主要的抑制剂类型.但是由于这两类除草剂的长期以及火面积使用.杂草很快产生了抗性.该文对乙酰辅酶A的性质、羧基转移酶的晶体结构及其与除草剂分子盖草能的结合方式作了简单的讲述,同时重点讨论了杂草对乙酰辅酶A羧化酶抑制剂产生抗性的原因,为合理药物设计提供了基础.     

兔子和小鼠不同组织苹果酸脱氢酶活性的研究

本文采用苹果酸脱氢酶(M DH)催化过程中辅酶Ⅰ氧化还原型转化的特征,测定了兔子和小鼠不同组织M DH的比活力和米氏常数(km),比活力在370~1 055单位/m g蛋白之间,km范围为3.57~6.49×1-0 5m o l/L.快速老化小鼠病理模型的km增大10倍,为1.49~5.64×10-4m o l/L.     

两个桂花品种花色色素相关基因的差异表达

结合桂花花青素、类胡萝卜素的含量与转录组测序检测到的花色代谢相关基因的差异表达,对品种为‘橙红丹桂’和‘早银桂’的花色变化过程进行了初步研究。结果发现:苯丙氨酸裂解酶、4-香豆酸—Co A连接酶、乙酰辅酶A合酶、查耳酮合酶、R2R3-MYB1、细胞色素P450、番茄红素ε环化酶基因的表达与花青素和类胡萝卜素含量变化相似,这两类色素代谢路径上的其他基因均在‘早银桂’中表达量较高。此外,这种现象很可能是多酚氧化酶(PPO)、细胞色素P450基因在转录因子R2R3-MYB调控下差异表达所致,并且还发现桂花类黄酮的代谢路径是从柚皮素开始转向二氢槲皮素进而在DFR、ANS催化下形成矢车菊色素。     

2-KGA混菌发酵过程的结构模型及实验验证

探讨了古龙酸混菌发酵过程中普通生酮古龙酸菌(Ketogulonicigenium vulgare)和巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)的交互作用机制.分析了K. vulgare以L 山梨糖为碳源时的代谢途径,建立了K. vulgare的宏观动力学模型,引入了一阶闭环调节器模型来描述糖酵解等酶系的建立过程.该模型描述了K. vulgare中物质流和能量流的平衡关系,据此可解得比碳源消耗速率、比生长速率、比乙酰辅酶A生成速率、比氧消耗速率等关键反应速率.结合生物反应器模型可获得操纵变量与状态变量之间的关系.实验验证了上述模型的有效性.     

重组Pichia酵母(Muts)发酵过渡阶段关键酶活分析

重组Pichia酵母表达系统的发酵存在从利用甘油为碳源生长到利用甲醇为碳源表达外源蛋白的发酵表达过渡阶段。Pichia酵母过渡阶段碳源代谢途径关键酶酶活分析表明：甲醇诱导3h AOX2酶活为0,4h时突然增加到0．05U,继续诱导,酶活缓慢增加;在过渡阶段甲醛脱氢酶和6-P-葡萄糖脱氢酶分别增加了6．1倍、2．5倍,而丙酮酸脱氢酶和异柠檬酸脱氢酶分别下降为原酶活的29．4％及16．4％,表明甲醇诱导后甲醇完全氧化代谢途径得到强化,而糖酵解途径和三羧酸循环途径代谢作用减弱。     

豆油对红霉素生物合成的影响及作用机制分析

在摇瓶培养过程中,培养基中加入豆油可使红霉素的效价从3038U／mL(不加豆油)提高到5221U／mL。但对丙酰辅酶A合成酶及红霉素链霉菌H18丙酸激酶的比活力无显著影响。使用HPLC检测发酵液中α-酮戊二酸(α—KG)的含量,结果发现加豆油后α—KG含量有明显提高。据此推测了豆油经过红霉素链霉菌H18代谢后进入红霉素合成的可能途径是：通过三羧酸循环代谢产生琥珀酰辅酶A,琥珀酰辅酶A异构化产生2一甲基丙二酰辅酶A,2-甲基丙二酰辅酶A作为红霉素的前体最终促进红霉素的合成。     

维生素对乳酸菌细胞活性和代谢途径相关酶活性的影响

研究了拟干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)发酵生产乳酸过程中,添加维生素对菌体生长、细胞活性、产酸,以及在碳流代谢中与乳酸生物合成密切相关的4种酶[乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸果糖激酶(PFK)、丙酮酸脱氢酶(PDC)和丙酮酸羧化酶(PC)]活性的影响。结果显示:维生素添加促进了菌体生长,使乳酸产量提高了42.47%;同时降低了发酵过程中菌体的死亡率,降低的最大幅度可达53.46%;PFK和LDH的活性比对照有提高,最大幅度达62.30%和126.65%,PDC的活性在发酵中期也有一定的提高,但PC的活性变化很小。实验结果表明:组合维生素的添加可以提高乳酸菌的活性,同时使代谢通量有利于乳酸生成。