基于TRPM8通道研究Menthol对哮喘小鼠气道反应性及肺组织病理学的影响

【】：目的：研究TRPM8通道在支气管哮喘发病机制中的作用以及Menthol对哮喘小鼠气道反应性及肺组织病理学的影响。方法：观察Menthol对TRPM8野生型(+/+)和敲除型(-/-)小鼠气道反应性及肺组织病理学改变的影响。结果：Menthol可缓解肺组织病理进程,而Menthol对TRPM8-/-型哮喘小鼠无改善作用。     

基于TRPM8通道研究薄荷醇对哮喘小鼠气道反应性及肺组织病理学的影响

研究TRPM8通道在支气管哮喘发病机制中的作用,以及薄荷醇(Menthol)对哮喘小鼠气道反应性及肺组织病理学的影响。观察Menthol对TRPM8野生型(+/+)和敲除型(-/-)小鼠气道反应性及肺组织病理学改变的影响。Menthol可缓解肺组织病理进程,而Menthol对TRPM8-/-型哮喘小鼠无改善作用。     

大黄酸抑制气道平滑肌收缩机制研究

目的研究大黄酸是否抑制气道平滑肌收缩及其机制。方法取SPF级BALB/c♂小鼠气管环,将气管环置于恒温灌流系统中,通过JH-2型张力换能器记录气管环张力值。使用80 mmol/L钾(K+)收缩气管环,待气管环张力达到稳定后,分别加入终浓度为1. 00、3. 16、10.00、31. 60、100.00、177. 80、200. 00μmol/L的大黄酸,加入等量的溶剂作为对照。用膜片钳记录L-型电压依赖性钙通道(L-type voltage-dependent calcium channel,LVDCC)电流,大黄酸可以抑制LVDCC电流。用TILL钙成像系统测量平滑肌细胞内钙浓度变化。结果当加入177. 80μmol/L大黄酸时,气管环舒张比率达到最大,为(92. 7±8. 0)%,抑制LVDCC介导的电流、LVDCC介导的钙内流,以及钙内流引起的收缩。结论大黄酸可通过抑制LVDCC抑制气道平滑肌收缩。     

马棘根乙醇提取物舒张小鼠气道平滑肌

为研究马棘根乙醇提取物(EEIP)逆转小鼠气道平滑肌(ASM)的收缩及其机制,利用张力测量系统测量小鼠气管环张力,MTT法检测EEIP对16HBE细胞存活率的影响,肺切片技术测量肺内支气管的收缩与舒张,钙成像系统测量ASM细胞内Ca2+水平,动物肺功能仪测量活体小鼠呼吸系统阻力(Rrs).结果表明:EEIP能够完全逆转...     

凤尾草乙醇提取物舒张小鼠气管平滑肌作用机理

为探究凤尾草乙醇提取物(ethanol extract of Pteris multifda Poir,EEPM)舒张高钾与乙酰胆碱(ACh)预收缩的小鼠气管平滑肌的作用机理,利用张力换能器探究了EEPM对高钾和ACh预收缩的离体小鼠气管环中相关离子通道的影响,并利用肺功能仪检测了活体水平上EEPM对小鼠呼吸气道阻力(...     

鸡骨香乙醇提取物舒张小鼠气道平滑肌的作用机理研究

为研究鸡骨香乙醇提取物(EECC)舒张小鼠气道平滑肌的作用机理.在组织水平上,利用生物机能系统,检测EECC对气管张力的影响.在细胞水平上,利用膜片钳系统,记录EECC对L型电压依赖性钙通道(VDLCCs)电流的影响.在活体水平上,利用肺功能仪,检测EECC对小鼠呼吸系统阻力(Rrs)的影响.实验发现在组织水平上,EE...     

千里光石油醚提取物舒张气道平滑肌的作用机制研究

目的:为研究千里光石油醚提取物(PEESS)对小鼠气管平滑肌(ASM)的舒张作用及机理.方法:使用80 mmol·L-1 KCl或100μmol·L-1 Ach刺激小鼠离体气管环、小鼠气管平滑肌细胞(ASMCs)、肺部支气管以及在体小鼠气管,进行了气管环张力、细胞内Ca2+浓度、气管环面积及小鼠呼吸系统阻力检测.结果:...     

槟榔对动物胃肠运动的影响

从在体、离体水平观察槟榔（Areca catechu L.)对动物胃肠运动的影响，并初步探讨其作用机理。结果表明，槟榔明显增高家兔十二指肠肠管的张力，减小收缩波平均振幅，不影响收缩频率；山莨菪碱、异搏定能减弱槟榔对十二指肠肠管张力的增高作用。槟榔对小鼠胃肠推进运动有显著加强作用。由研究结果得到提示：槟榔兴奋家兔十二指肠，此效应可能由胆碱能M受体介导，且涉及家兔十二指肠平滑肌细胞膜上对异搏定敏感的Ca^2 通道。槟榔煎剂能促进小鼠胃肠推进运动。     

桔梗皂苷对慢性支气管炎小鼠气道重塑的干预作用研究

探讨桔梗皂苷(kikyosaponin,简称KS)对慢支小鼠气道重塑的干预作用机制.将50只健康小鼠分成正常对照组,模型组和桔梗皂苷低、中、高剂量组,除正常组外,其余4组动物均采用烟熏加浓氨水吸入法建立慢支模型,然后分别用药物进行治疗.实验结束后,取各组小鼠肺组织进行石蜡制片,苏木精-伊红(HE)染色分析气管管壁厚度变化,Masson染色分析肺组织胶原沉积,采用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件测量总管壁厚度(WAt/Pbm)、内壁厚度(WAi/Pbm)、平滑肌厚度(WAm/Pbm)以代表气道重塑指标;生化法检测肺组织中羟脯氨酸(Hyp)含量;免疫组织化学染色法观察MMP-9在肺组织中的表达;蛋白印迹术分析MMP-9和TIMP-1在肺组织中的表达水平.HE染色显示,模型组肺组织中支气管明显狭窄,管腔及肺泡中含有大量炎性分泌物,且气道重塑的三项指标均异常增高;免疫组化和三色法显示,模型组小鼠支气管和肺泡细胞中有大量的MMP-9表达,且有胶原蛋白增加明显,生化检测发现模型组小鼠肺组织中Hyp含量亦异常升高,且MMP-9和TIMP-1表达水平升高显著,与正常对照组相比,差异十分显著(P<0.01).在连续用药30 d后,与模型组相比,桔梗皂苷各剂量组能明显抑制慢支小鼠支气管胶原纤维增生,改善气道重塑各项指标;减少MMP-9和TIMP-1表达水平,使气管重塑得到显著的减轻(P<0.05,P<0.01,P<0.01).结果显示,桔梗皂苷可明显减轻慢支小鼠气道重塑的病理改变,其干预机制可能是通过清除慢支小鼠肺组织中的炎性因子和自由基的含量,同时又能抑制MMP-9和TIMP-1的表达,从而达到减少胶原蛋白的沉积以减轻气管狭窄而达到逆转气道重塑之目的.     

桔梗皂苷对慢性支气管炎小鼠气道重塑的干预作用研究

探讨桔梗皂苷(kikyosaponin,简称KS)对慢支小鼠气道重塑的干预作用机制.将50只健康小鼠分成正常对照组,模型组和桔梗皂苷低、中、高剂量组,除正常组外,其余4组动物均采用烟熏加浓氨水吸入法建立慢支模型,然后分别用药物进行治疗.实验结束后,取各组小鼠肺组织进行石蜡制片,苏木精-伊红(HE)染色分析气管管壁厚度变化,Masson染色分析肺组织胶原沉积,采用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件测量总管壁厚度(WAt/Pbm)、内壁厚度(WAi/Pbm)、平滑肌厚度(WAm/Pbm)以代表气道重塑指标;生化法检测肺组织中羟脯氨酸(Hyp)含量;免疫组织化学染色法观察MMP-9在肺组织中的表达;蛋白印迹术分析MMP-9和TIMP-1在肺组织中的表达水平.HE染色显示,模型组肺组织中支气管明显狭窄,管腔及肺泡中含有大量炎性分泌物,且气道重塑的三项指标均异常增高;免疫组化和三色法显示,模型组小鼠支气管和肺泡细胞中有大量的MMP-9表达,且有胶原蛋白增加明显,生化检测发现模型组小鼠肺组织中Hyp含量亦异常升高,且MMP-9和TIMP-1表达水平升高显著,与正常对照组相比,差异十分显著(P0.01).在连续用药30 d后,与模型组相比,桔梗皂苷各剂量组能明显抑制慢支小鼠支气管胶原纤维增生,改善气道重塑各项指标;减少MMP-9和TIMP-1表达水平,使气管重塑得到显著的减轻(P0.05,P0.01,P0.01).结果显示,桔梗皂苷可明显减轻慢支小鼠气道重塑的病理改变,其干预机制可能是通过清除慢支小鼠肺组织中的炎性因子和自由基的含量,同时又能抑制MMP-9和TIMP-1的表达,从而达到减少胶原蛋白的沉积以减轻气管狭窄而达到逆转气道重塑之目的.     

天灸对哮喘模型大鼠气道重构的影响

目的:观察天灸防治支气管哮喘中对气道重构的影响.方法:采用卵蛋白等致敏建立大鼠哮喘模型,肺组织行HE染色,镜下观察支气管平滑肌、胶原的病理改变,气道腔直径和面积.结果:天灸组胶原含量、气道平滑肌厚度明显低于模型组(P<0.05或P<0.01),气道内腔直径、面积明显大于模型组.结论:天灸可防止气道增厚,具有抑制气道重建的作用.     

紫堇总生物碱对血压和离体主动脉平滑肌张力的影响

紫堇总生物碱经耳脉静脉注射家兔,观察血压变化;制备离体主动脉平滑肌条,将其固定于灌流肌槽中记录离体主动脉平滑肌条张力变化.观察了紫堇总生物碱对家兔动脉血压的影响以及对去甲肾上腺素(NA)诱发的离体主动脉肌条的收缩的影响.结果表明,静脉注射紫堇总生物碱可引起动脉血压降低(P<0 05);单独加入紫堇总生物碱未观察到离体血管紧张性的改变,但在NA作用的基础上加入紫堇总生物碱后,引起离体血管收缩效应减弱(P<0 05).因此,紫堇总生物碱具有降低血压和抑制NA引起的血管的收缩效应.     

Heat activation of TRPM5 underlies thermal sensitivity of sweet taste

TRPM5, a cation channel of the TRP superfamily, is highly expressed in taste buds of the tongue, where it has a key role in the perception of sweet, umami and bitter tastes. Activation of TRPM5 occurs downstream of the activation of G-protein-coupled taste receptors and is proposed to generate a depolarizing potential in the taste receptor cells. Factors that modulate TRPM5 activity are therefore expected to influence taste. Here we show that TRPM5 is a highly temperature-sensitive, heat-activated channel: inward TRPM5 currents increase steeply at temperatures between 15 and 35 degrees C. TRPM4, a close homologue of TRPM5, shows similar temperature sensitivity. Heat activation is due to a temperature-dependent shift of the activation curve, in analogy to other thermosensitive TRP channels. Moreover, we show that increasing temperature between 15 and 35 degrees C markedly enhances the gustatory nerve response to sweet compounds in wild-type but not in Trpm5 knockout mice. The strong temperature sensitivity of TRPM5 may underlie known effects of temperature on perceived taste in humans, including enhanced sweetness perception at high temperatures and 'thermal taste', the phenomenon whereby heating or cooling of the tongue evoke sensations of taste in the absence of tastants.     

The principle of temperature-dependent gating in cold- and heat-sensitive TRP channels

The mammalian sensory system is capable of discriminating thermal stimuli ranging from noxious cold to noxious heat. Principal temperature sensors belong to the TRP cation channel family, but the mechanisms underlying the marked temperature sensitivity of opening and closing ('gating') of these channels are unknown. Here we show that temperature sensing is tightly linked to voltage-dependent gating in the cold-sensitive channel TRPM8 and the heat-sensitive channel TRPV1. Both channels are activated upon depolarization, and changes in temperature result in graded shifts of their voltage-dependent activation curves. The chemical agonists menthol (TRPM8) and capsaicin (TRPV1) function as gating modifiers, shifting activation curves towards physiological membrane potentials. Kinetic analysis of gating at different temperatures indicates that temperature sensitivity in TRPM8 and TRPV1 arises from a tenfold difference in the activation energies associated with voltage-dependent opening and closing. Our results suggest a simple unifying principle that explains both cold and heat sensitivity in TRP channels.     

芦丁镉对兔子血压和离体主动脉平滑肌的影响

芦丁镉金属配合物经耳脉静脉注射家兔,观察其血压变化;制备离体主动脉平滑肌条,将其固定在灌流肌槽中,记录离体主动脉平滑肌条张力的变化。观察芦丁镉对家兔动脉血压的影响以及对去甲肾上腺素(NA)诱发的离体主动脉肌条收缩的影响。结果表明,静脉注射芦丁镉可引起动脉血压的降低(P<0.05);而在灌流槽中单独加入芦丁镉时不能观察到离体血管紧张性的改变,但是在NA作用的基础上再加入芦丁镉后,便可使离体血管收缩效应减弱(P<0.05)。因此,芦丁合镉金属配合物具有降低血压和抑制NA引起的血管的收缩效应。     

The menthol receptor TRPM8 is the principal detector of environmental cold

Sensory nerve fibres can detect changes in temperature over a remarkably wide range, a process that has been proposed to involve direct activation of thermosensitive excitatory transient receptor potential (TRP) ion channels. One such channel--TRP melastatin 8 (TRPM8) or cold and menthol receptor 1 (CMR1)--is activated by chemical cooling agents (such as menthol) or when ambient temperatures drop below approximately 26 degrees C, suggesting that it mediates the detection of cold thermal stimuli by primary afferent sensory neurons. However, some studies have questioned the contribution of TRPM8 to cold detection or proposed that other excitatory or inhibitory channels are more critical to this sensory modality in vivo. Here we show that cultured sensory neurons and intact sensory nerve fibres from TRPM8-deficient mice exhibit profoundly diminished responses to cold. These animals also show clear behavioural deficits in their ability to discriminate between cold and warm surfaces, or to respond to evaporative cooling. At the same time, TRPM8 mutant mice are not completely insensitive to cold as they avoid contact with surfaces below 10 degrees C, albeit with reduced efficiency. Thus, our findings demonstrate an essential and predominant role for TRPM8 in thermosensation over a wide range of cold temperatures, validating the hypothesis that TRP channels are the principal sensors of thermal stimuli in the peripheral nervous system.     

紫红獐牙菜对在体及离体肠肌的影响

目的：研究紫红獐牙菜对豚鼠离体肠肌及小鼠小肠推进功能的影响。方法：采用炭末推进法、离体标本运动实验法分析紫红獐牙菜对在体及离体肠肌的作用及可能的机理。结果：两个剂量组的紫红獐牙菜对乙酰多余胆碱及组胺引起的豚鼠离体肠肌痉挛均有显著的解痉作用（P〈0．05）；高剂量的紫红獐牙菜对小鼠小肠推进运动也有明显抑制作用（P〈0．05）。结论：紫红獐牙菜对动物在体及离体肠肌的收缩均有明显的抑制作用。