用dystrophin cDNA1－7的三个亚探针检出四个新的TaqⅠ限制性片段长度多态

报道在ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因内新发现四个ＴａｑⅠ限制性片段长度多态，用ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎｃＤＮＡ１—２ａ检测到的ＴａｑⅠ等位片段是４．０ｋｂ（Ａ１）和３．３ｋｂ（Ａ２），用ＣＤＮＡ２ｂ—３检测到的ＴａｑⅠ等位片段是７．２ｋｂ（Ａ１）和６．８ｋｂ（Ａ２）。用ｃＤＮＡ５ｂ—７检测到两对新的ＴａｑⅠ等位片段，分别是１０．０ｋｂ（Ａ１）和８．４ｋｂ（Ａ２），以及２．５５ｋｂ（Ｃ１）和１．６ｋｂ（Ｃ２）片段。在４５个ＤＭＤ／ＢＭＤ家系的基因检测中，这四对新的等位片段，在部分家系的上下代传递中分别呈孟德尔遗传学分离。它们的实际观察杂合体频率依次是：０．２９，０．０７，０．０４和０．１８，预期杂合体频率是０．２０，０．０６，０．０２和０．２０。这些新的ＴａｑⅠ限制性片段长度多态，已在杜氏肌营养不良症家系的遗传连锁分析及致病基因携带者的诊断中，显示出较高的；临床应用价值。     

家蚕核型多角体病毒gp64基因的定位及克隆

以苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒ＡｃＭＮＰＶ的膜表面糖蛋白基因ｇｐ６４作为探针，对经不同内切酶酶切的家蚕核型多角体病毒基因组ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析，发现ＢａｍＨⅠ酶切产生的４．２ｋｂ和７．６ｋｂ片段呈阳性杂交，经ＤＮＡ片段回收，将４．２ｋｂ片段进行了克隆     

形成多角体家蚕重组病毒通用转移载体构建

从家蚕核型多角体病毒（ＢｍＮＰＶ）通用转称载体ｐＢＫ２８３和粉纹夜蛾核型多角体病毒（ＴｎＮＰＶ）转移载体ｐＳＸＩＶＶＩ＋Ｘ３系列出发，构建了一个７．２ｋｂ能形成多角体且可以用于克隆含不同读码框外源基因的ＢｍＮＰＶ通用转移载体系列ｐＢＭＸ３．ｐＢＭＸ３系列以ＢｍＮＰＶ多角体结构基因上游的１．９ｋｂ和下游１．３ｋｂ的片段作为与ＢｍＮＰＶ基因组进行体内同源重组的同源序列；ｐＳＸＩＶＶＩ＋Ｘ３系列的ＳＸＩＶ双启动子用于外源基因的表达；ＡｃＮＰＶ的多角体基因作为重组病毒形成多角体的基因．以ＢｍＮＰＶ－ＬａｃＺ（ｏｃｃ－ｇａｌ＋）为出发株病毒，ｐＢＭＸ３系列的重组病毒筛选有ｏｃｃ＋和ｇａｌ－两个遗传标记     

恶臭假单胞菌萘质粒ⅠNL基因的克隆及酶切图谱

恶臭假单胞菌（ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｐｕｔｉｄａＧ７）携带的质粒ＮＡＨ７，经限制性内切酶ＥｃｏＲＩ切割后，产生含有萘降解酶全部基因（２４，６ｋｂ）的片段，此片段插入到载体ｐＵＣ１１９的多克隆位点，构成了ｐＫＡＯ质粒，此质粒经ＨｐａＩ，ＥｃｏＲＩ酶切获得的５．１ｋｂ片段亚屯隆到ｐＵＣ１１９中，衍生出ｐＮＮ１质粒，绘制出内切酶图谱。从ｐＮＮＩ质粒上切下含目的基因ｎａｈＩ、ｎａｈＮ和ｎａｈＬ的ｋｐｎＩ－ｋｐｎＩ片段（２．３ｋｂ）．正向插入载体ＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＳＫ＋中获得重组质粒ｐＮＮ２，反向插入为ｐＮＮ３，将其转化到大肠杆菌ＸＬ１－Ｂｌｕｅ中，目的基因得以大量增殖。     

酿酒酵母不同嗜杀菌株的比较及相互作用

以酿酒酵母两种不同类型的嗜杀菌株ＳＫ４（Ｋ１型）和ＥＲＲ１（Ｋ２型）为材料，分析了不同嗜杀酵母的嗜杀特性．证明两株菌产生的毒素蛋白的最适条件不同，最适ｐＨ和温度分别为４．８、１６℃和４．２、２２℃，但均对在对数生长期的敏感细胞作用最显著．ＳＫ４和ＥＲＲ１的嗜杀质粒的比较表明：Ｍ１－ｄｓＲＮＡ质粒和Ｍ２－ｄｓＲＮＡ质粒分子量分别为１．７ｋｂ和１．５ｋｂ，两株菌的Ｌ－ｄｓＲＮＡ质粒均为４．０ｋｂ．用高温和紫外线处理嗜杀酵母，嗜杀活性随之消失．     

哺乳动物核仁蛋白基因编码多个内含子snoRNA

核仁小分子ＲＮＡ（ｓｎｏＲＮＡ）是真核生物核糖体合成中一类重要的调控分子,广泛地存在于酵母和哺乳动物中．ｓｎｏＲＮＡ基因组织具有高度的多样性．在哺乳动物中,除Ｕ３、Ｕ８、Ｕ１３和７－２／ＭＲＰＲＮＡ是独立转录之外,其它ｓｎｏＲＮＡ都是由宿主基因（ｈｏｓｔｇｅｎｅ）内含子编码的［１］．目前已发现多种类型的宿主基因如核糖体蛋白基因,热激蛋白基因（ｈｓｃ７０）,细胞周期调控蛋白基因（ＲＣＣ１）以及一些转录和翻译起始因子基因等．本文报道通过对人、小白鼠（Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ）和大鼠（Ｒａｔｔｕｓｎｏｒ…     

人凝血Ⅸ因子乳腺特异性表达载体在离体细胞和小鼠乳腺细胞中表达的 …

以小鼠ＭＡＲ元件，牛β－酪蛋白基因５’端２．０ｋｂ调控顺序，人凝血Ⅸ因子小基因构建乳腺组织特异性表达载体。     

一个家蚕基因组MAR的克隆及其初步分析

家蚕（Ｂｏｍｂｙｘｍｏｒｉ）基因组大片段ＤＮＡ经ＢａｍＨＩ完全酶解后,克隆到质粒ｐＵＣ１８中而构建成一个家蚕基因组文库．通过与家蚕细胞核基质的体外结合,从该文库中筛选到一个包含ＭＡＲ的克隆ｐＣ１１ｅ,其中外源插入片段Ｃ１１ｅ长约２．３ｋｂ．Ｃ１１ｅ的限制性酶谱分析及其酶切片段的体外结合实验表明,ＭＡＲ位于Ｃ１１ｅ上的ＳｐｈＩ和ＨｉｎｃⅡ位点之间,长１．０ｋｂ．由于这是家蚕中发现的第一个ＭＡＲ,因此我们称之为ＢｍＭＡＲ１．进一步借助ＤＮａｓｅＩ敏感性分析和ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｌｏｔ,对ＢｍＭＡＲ１在家蚕细胞内与核基质结合的情况以及它与人β干扰素（ｈｕＩＦＮ－β）基因５′上游ＭＡＲ之间的同源性进行了研究．     

重组人钙调素的表达及其McAb的制备与精子CaM定位

用基因重组技术构建人钙调素基因Ⅲ（ｈＣａＭⅢｃＤＮＡ）表达载体ｐＢＶ／ｈＣａＭⅢ,并在大肠杆菌ＤＨ５α中经热诱导获得可溶性ＣａＭ蛋白的高效表达．将纯化的重组ｈＣａＭ与异型双功能剂ＳＰＤＰ及鼠血清白蛋白（ＭＳＡ）交联,免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠,用常规细胞融合技术制备单克隆抗体（ＭｃＡｂ）,得到３株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞．间接ＥＬＩＳＡ和斑点免疫结果证实,三种单克隆抗体均与自制的ｒｈＣａＭ和ＣａＭ标准品起特异反应．用免疫组化法对精子中ＣａＭ定位,发现ＣａＭ主要分布于精子头颈部,不育组ＣａＭ＋精子率（（４５．０±７．５）％）显著低于生育组（（６８．５±１０．５）％）．     

THE ANISOTROPY OF FLUX DYNAMICS FOR YBa_2Cu_3O_7

ＴＨＥＡＮＩＳＯＴＲＯＰＹＯＦＦＬＵＸＤＹＮＡＭＩＣＳＦＯＲＹＢａ２Ｃｕ３Ｏ７ＤｉｎｇＳｈｉｙｉｎｇＲｅｎＣｏｎｇＹｉＨｕａｊｕｎ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈｙｓｉｃｓ，ＮａｔｉｏｎａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＳｏｌｉｄＳｔａｔｅＭｉｃｒｏｓｔｒ...     

克隆蓝藻Calothrix sp.PCC7601 cpcB2A2基因的初步研究

从蓝藻Ｃａｌｏｔｈｒｉｘｓｐ．ＰＣＣ７６０１染色体ＤＮＡ中分离出含藻蓝蛋白基因ｃｐｃＢ２Ａ２的略３．８ＫｂＤＮＡ片段，与质粒ｐＵＣ１８重组，构建成一种重组质粒，ｐＰＣ２１８－ＰＣＺ，转化Ｅ．ｃｏｄｉＪＭ１０９，获得了一系列克隆子，经斑点分子杂交和限制性内切核酸酶分析，筛选出了初步认为含有ｃｐｃＢ２Ａ２基因的克隆子。     

环状芽孢杆菌中具有强启动活性DNA片段的结构与功能分析

作者曾用启动子探针型载体ｐＳＵＰＶ１从环状芽孢杆菌Ｃ－２菌株（ＢａｃｉｌｌｕｓｃｉｒｃｕｌａｎｓＣ－２）中克隆到一个具有强启动功能的２．４ｋｂ片段ＢＣ６．对该片段作作的进一步缺夫分析表明,其３’端约０．７ｋｂ片段具有单独的基因启动子功能,序列分析表明ＢＣ６片段３′端有典型的原核生物的基因启动子结构,现有ＢＣ６的５’端的１．２ｋｂＸｈｉＩ片段的重组于ｐＢＲ３２２的ＥｃｏＲＩ位点,观察其对两侧具有不同     

水稻线粒体atp6基因的克隆及其结构分析

以玉米线粒体ａｔｐ６基因为探针所作的Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂文结果显示，水稻野败型细胞质雄性不育系与其保持系（珍汕９７Ａ，Ｂ）的ａｔｐ６基因存在结构上的差异。不育系只有一个ａｔｐ６基因拷贝，而相应的保持系却有两个拷贝．从保持系线粒体ＤＮＡ的Ｌａｍｄａ ＥＭＢＬ３基因文库中筛选出了以上两个ａｔｐ６基因克隆，并根据制作的物理图谱将它们分别定位在２．７５ｋｂ的ＰｓｔＩ／ＰｖｕⅡ和１．６３ｋｂ的Ｓａｌ／ＥｃｏＲ     

四环素产生菌质粒DNA的分离检测及遗传学分析

用７％蔗糖的ＹＥＭＥ液体培养基培养四环素产生菌金色链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ａｕｒｅｏｆａｃｉｅｎｓ）９１－０６，以链霉菌遣传操作法为基础，从该菌体中分离到质粒ＰＳＡ３１４，分子量约为２８．５ｋｂ（１８．８ＭＤ）。该质粒经酶切分析表明，具有２个ＢａｍＨＩ位点和１个ＥｃｏＲＩ位点，用吖啶橙处理获得无质粒珠，其在孢子形成和菌落形态方面出现明显差异。     

Ran结合蛋白RanBP1的同源基因M3的克隆与功能分析

以Ｒａｎ结合蛋白ＲａｎＢＰ１的保守区域作为探针,低严谨条件下杂交筛人视网膜ｃＤＮＡ文库,得到阳性克隆Ｍ３,它与鼠ｚｈｘ－１基因高度同源。ＲＨ作图将其定位于８ｑ２４．１￣ｑ２４．３。拼接ＥＳＴ序列并填补缺口,得到Ｍ３ ｃＤＮＡ全长４９３４ｂｐ,与Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ得到的主要转录本长度一致。此ｃＤＮＡ全序列包括２６２２ｂｐ开放阅读框,编码８７３氨基酸,含有２种翻译调控元件ｕＵＡＧ和ＴＴＡＴＴＴ     

水稻花发育相关MADS-box基因的克隆

以水稻幼穗总ＲＮＡ为模板,利用３′－ＲＡＣＥ克隆了８个接近于全长的水稻ＭＡＤＳ－ｂｏｘ 基因的ｃＤＮＡ．在ＧｅｎＢａｎｋ 的数据库中查询表明,其中２个ＦＤＲＭＡＤＳ１,ＦＤＲＭＡＤＳ２分别与已报道的水稻ＭＡＤＳ－ｂｏｘ 基因Ｏｓ－ＭＡＤＳ５和ＯｓＭＡＤＳ４５有极高的同源性,另外６个为新的尚未见报道的水稻ＭＡＤＳ－ｂｏｘ 基因．系统进化树分析表明ＦＤＲＭＡＤＳ１,ＦＤＲＭＡＤＳ２和ＦＤＲＭＡＤＳ４可能与Ｃ组基因的功能相关;ＦＤＲＭＡＤＳ３,ＦＤＲＭＡＤＳ６和ＦＤＲ－ＭＡＤＳ７可能与Ａ 组基因的功能相关     

H2株甲肝减毒活疫苗K7的核苷酸全序列分析

应用ＲＴ－ＰＣＲ获取Ｈ２株甲肝减毒活疫苗（Ｋ７）的ｃＤＮＡ片段，经末端终止测序ＰＣＲ试剂盒和全自动测序仪（ＡＢＩ３７７）作序列测定，用Ｍａｘｔｒｉｇｅｎｅ软件进行计算机分析，Ｋ７疫苗病毒的核苷酸全长含７４４３个碱基．Ｋ７对比其亲代Ｈ２株，减毒的ＨＭ１７５株以及ＨＭ１７５野毒株，同源性分别为９９．７５％，９９．９５％和９９．６１％；彼此间在Ｐ１和Ｐ２连接区１６８个碱基的同源性为９９．４％～１００％，均为ⅠＢ基因亚型．前三者在５’非编码区均有１３１～１３４位和２０３位５个碱基缺失，且结构蛋白基因区序列完全一致．本文用分子病毒学方法证实了Ｋ７疫苗的优异纯毒水平，也为开展甲型肝炎分子流行病学工作提供了基础资料     

中国人群DMD基因含外显子片段的限制性带型和RFLPs研究（Ⅰ）──BglⅡ片段的杂交带型及限制性片段长度多态的频率

采用ＤＭＤ基因的全长ＣＤＮＮ（４ｋｂ）为杂交探针，分析了中国人群ＤＭＤ基因含外显子片段（ｅｘｏｎ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｆｒａｇｍｅｎｔ）的ＢｇｌⅡ限制性片段和ＲＦＬＰｓ．新揭示出四个ＢｇｌＩＩ片段，ＤＭＤ基因全长范围内含外显子的ＢｇｌⅡ限制性片段总数至少为５９个，这为制作ＤＭＤ基因的ＢｇｌⅡ部分限制图奠定了重要基础；另分析了四个ＢｇｌⅡＲＦＬＰｓ在中国人群中的等位频率，在ｃＤＮＡ２ｂ－３、ｃＤＮＡ４－５ａ和ｃＤＮＡ５ｂ－７三个亚克隆探针的杂交带型中，杂合体频率预期值（ＥＨＦ）分别是０．３３、０．３３和０．４４，实际观察值为：０４０、０．４０、０．４８，表明有较高的临床应用价值．此外，在ＢｇｌⅡ／２ｂ－３和ＢｇｌⅡ／４－５ａ的带型中，还分别发现一个新的罕见等位片段．     

恶臭假单胞菌萘质粒I N L基因的克隆及酶切图谱

恶臭假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ Ｇ７）携带的ＮＡＨ７，经限制内切酶ＥｃｏＲ１切割后，产生含有萘降解酶全部基因（２４．６ｋｂ）的片段，此片段插入到载体ＰＵＣ１１９的多克隆位点，构成了ＰＫＡＯ质粒，此质粒经Ｈｐａ １，ＥｃｏＲＩ酶切获得的５．１ｋｂ片段亚克隆到ｐＵＣ１１９中，衍生出ｐＮＮ１质粒，绘制出内切酶图谱，绘制出内切酶图谱，从ＰＮＮ１质粒上切下含目的基因ｎａｈＩ、ｎａｈＮ和ｎ     

微肥对不同菌根真菌菌丝体生长的研究

通过不同微肥对 Ｌａｃｃａｒｉａ ｌａｃｃａｔａ Ｓ２３８ 与 Ｇｙｒｏｐｏｒｕｓ ｃｙａｎｅｓｃｅｎｓ等菌根真菌菌丝体生长的研究证实：１） 浓度为 ０．０１％ 的 Ｎａ２ Ｂ４ Ｏ７ 对 Ｌ．ｌａｃｃａｔａ Ｓ２３８ 的菌丝体生长促进作用明显，其它浓度的 Ｎａ２ Ｂ４ Ｏ７ 以及 Ｍ ｎ Ｓ Ｏ４、（ Ｎ Ｈ４ ）６ Ｍｏ７ Ｏ２４、 Ｚｎ Ｓ Ｏ４ 对 Ｌ．ｌａｃｃａｔａ Ｓ２３８ 均有抑制作用．在培养 Ｌ．ｌａｃｃａｔａ Ｓ２３８ 时应单独添加低浓度的 Ｎａ２ Ｂ４ Ｏ７， 以促进其正常生长；２） Ａ 处理的 Ａ１ 对 Ｇ．ｃｙａｎｅｓｃｅｎｓ 菌丝体生长具有一定的促进作用，但不是很显著，其它微肥对其生长具有明显的抑制作用