B链氨端去二肽(B1—2)羧端去五肽(B26—30)胰岛素的初步晶体学研究

为了研究各种胰岛素类似物的结构特征和B链羧端肽段的运动特征,在对各种胰岛素类似物广泛的结构比较基础上,梁栋材等人提出了胰岛素分子与其受体分子相互作用的两性表面,阐述了胰岛素分子在与受体结合过程中B链羧端肽段的运动及构象变化特征.Derewenda等人对B29-Al交联胰岛素的研究结果表明,由于B29-Al肽键的联结限制了B链羧端的运动,导致胰岛素失活.其它B链羧端的人变异胰岛素和修饰胰岛素的研究工作     

胰岛素受体研究进展

胰岛素受体属多肽类的细胞膜受体之一,为了确定胰岛素如何在细胞内转变为细胞的代谢活动,人们对该受体的纯化及其结构特点研究做出了巨大的努力.在研究时发现:v-erb-B 肿瘤基因与人类上皮生长因子(EGF)受体是相同的,而胰岛素受体与肿瘤基因的产物尽管不同,但在氨基酸排列顺序上有很多相似之处,因此在了解胰岛素受体结构时,往往借助于肿瘤基因和EGF 来进行研究.目前通过DNA的氨基酸顺序已间接测定了胰岛素受体的氨基酸顺序.胰岛素受体是     

B链氨端去三肽(B1-B3)猪胰岛素的初步晶体学研究

晶体结构的研究表明,三方二锌猪胰岛素分子的B链N端肽段呈一种伸展结构,并相当程度地露于分子的表面,运动性较大。随着周围溶液环境的改变,如在四锌胰岛素中所表现的那样,其取向可做较大幅度的改变,其中分子Ⅱ中的Bl-B8残基由原来的伸展变为α-螺旋,由于B链N端肽段的一级序列,尤其是其中的B1-B3残基,在不同种属中的变化较大,一段时间以来,占主导的看法是认为它与分子的免疫活性相关,而与其生物活性关系不大。Des-Phe~(Bl)-Ins的研究结果支持了这一观点,它几乎保留了天然胰岛素的全部生物活性,同时免疫活性明显下降。但是,随着研究的继续深入,有关Des-(Phe-Val)~(Bl-2)-pig Ins,Des-(Phe-ValAsh)~(Bl-3)-pig Ins,Des-(Phe-Val-Asn-Gln)~(B1-4)-human Ins,Des-(Phe-Val-Asn-Gln-His)~(B1-5)-human Ins等的研究表明,这系列衍生物的生物活性随着N端氨基酸的逐步减少而明显下降。因此,人们越来越认为B链N端残基可能直接参与和胰岛素受体的相互作用。     

人血清胰岛素放射受体测定法的初步观察

近年来对胰岛素的作用机理有了较清楚的认识(图1)。用特异性受体法测定血清胰岛素更能反映生物活性胰岛素的水平;能筛选分子突变的胰岛素;也有助于对胰岛素作用过程和胰岛素受体病的研究。为此,我们于1982     

从胰岛素A及B链重合成胰岛素以及A及B链肽段的合成

胰岛素是一种蛋白质激素,其基本单位是由一条带有一个含-S-S-键小环的肽链 A经二个-S-S-键和另一条肽链 B 连接而成,并具有一定构象。早在这两条肽链的氨基酸排列次序以及三个-S-S-键的位置尚未弄清楚以前,许多科学工作者曾企图用氧化方法使因还原而完全失活的胰岛素重行恢复活力,但都未成功。自从胰岛素的壹级结构阐明后,并没有人很快地去尝试胰岛素的合成,而是在含有两个半胱氨酸基的肽氧化成环规律以及新的 S-保护基的探索方面做了     

精氨酸~(B31)—人胰岛素的初步晶体学研究

胰岛素是迄今研究得最为广泛和深入的一种激素蛋白质,在其大量有关结构-功能关系知识积累的基础上,试图通过蛋白质工程构建新型胰岛素分子(如具有长效、高效、低免疫原性等)以改进糖尿病的临床治疗,已成为目前胰岛素研究的一个重要方向。 近年来,利用半合成和基因突变技术修饰胰岛素B链末端残基已获得明显的长效效应(如文献),深入了解这类修饰胰岛素长效作用的结构基础对寻求更优异的分子设计具有重要意义,这就需要这些衍生物的精确三维结构知识,本文报道一种经半合成制备的长效胰岛素——精氨酸-人胰岛素的初步晶体学研究。     

哺乳动物细胞中可能存在着新的葡萄糖转运蛋白质

已知的葡萄糖转运蛋白分子量大约为55kD,是一种具有重要生物功能的膜蛋白质。它担负着将细胞膜外的葡萄糖转运到细胞内的任务,为细胞提供能量来源。 肌肉和脂肪细胞吸收葡萄糖的分子机制是细胞外的胰岛素作用于细胞膜,与膜上胰岛素受体结合,受体就将信号传给细胞内贮存的葡萄糖转运蛋白质(目前尚不清楚这个信号是如何传递的),葡萄糖转运蛋白质接收信号后就大量地向细胞膜上转移,迅速将膜     

[D-Ala]~(B_0)猪胰岛素单晶培养及其X射线晶体学分析

胰岛素是一种重要的激素,多年来人们对其结构与功能的关系进行了多方面的研究,三方二锌猪胰岛素晶体结构分析结果为进一步的研究工作奠定了十分重要的基础。人们在探讨胰岛素分子与其受体相互关系时,对B链N端肽段发生了浓厚的兴趣。为此,应用改变B链N端一级结构的方法对其生物学功能进行了广泛的研究。研究结果表明胰岛素分子B链N端肽段氨基酸残基的加减使其生物活力和免疫活力在不同程度上受到影响。因此,测     

胰岛素介体的产生与诱导的激素活性的关系

最近对胰岛素作用机理的研究指出,胰岛素与它的靶细胞受体结合后,激活细胞膜上的蛋白水解酶,或磷脂酶C而导致膜上某种糖蛋白或磷脂水解,产生多肽样或磷脂样的化学介体。它们能在无细胞系统中模拟胰岛素的各种作用,如,调节胰岛素敏感的酶的活性,以及在完整细胞中模拟胰岛素的一些生物功能,包括调节cAMP水平、腺苷酸环化酶活性、抗     

激素受体研究动向

激素发挥其生理作用的第一步,是识别它的专一性受体并与之结合。人们研究了各种激素与其受体相互作用的性质,并根据受体在靶细胞上的位置把激素分为两大类:①多肽和蛋白激素,例如胰岛素、生长激素、催产素等,它们的受体在细胞膜的外表面;②甾体激素和甲状腺等,其受体在细胞里面。     

锝-99m标记亲水性药物与胰岛素偶联作为脑转运体的初步研究

由于血-脑屏障(BBB)的存在, ^99mTc-EC和^99mTc-MAMA’-BA等非脂溶性^99mTc配合物不能进入动物脑组织中. 利用血-脑屏障上富含特异性胰岛素受体蛋白这一特点, 将水溶性^99mTc-EC和^99mTc-MAMA’-BA与胰岛素偶联后, 经过分离, 得到了两种新的^99mTc标记偶联物: ^99mTc-EC-胰岛素和^99mTc-MAMA’-BA-胰岛素, 其放化纯度可达到90%以上, 且具有较好的体外稳定性, 期望它们的脑摄取比未偶联胰岛素的相应^99mTc标记小分子配体能够有所提高, 以从原理上证明: 难以进脑的非脂溶性小分子^99mTc标记配合物与胰岛素偶联后, 可形成一种脑转运体, 通过脑毛细血管内皮细胞膜上富含的特殊受体蛋白(如胰岛素受体蛋白)等, 经过胞吞胞吐作用将^99mTc标记物内化进脑. 随后进行的小鼠体内生物分布实验结果表明, 两种偶联物的确都较相应的小分子^99mTc标记配合物脑摄取有所提高, 脑摄取比值最高能够达到4~6倍(2~3 h). 这样将可开辟一条难以进脑的^99mTc标记配合物穿过血-脑屏障进脑的新途径, 对目前正在进行的^99mTc标记神经受体显像剂药物克服BBB障碍, 具有潜在的研究价值.     

胰岛素受体自身抗体的初步研究

1976年,Flier首先发表了3例胰岛素受体自身抗体(AIRA)引起胰岛素极度耐药的报道。此后相继有同类的病例报告达20余例。我院于1987年发现2例相似的患者,采用笔者     

Ⅱ.从天然胰岛素A及B链重合成结晶胰岛素

天然胰岛素的拆合(以下简称拆合)就是指:用化学办法将天然胰岛素分子的三个硫硫键打开,将胰岛素分子分为沒有生物活力的A、B两条肽链,然后,经过适当处理使此两条链在试管內,重新通过硫硫键接合起来,成为与天然胰岛素生物活力相同的分子。这一工作的过程简单表示如下(图1):     

豚鼠肝细胞膜胰岛素受体性质及其在人血清胰岛素测定中的应用

胰岛素(Ins)与其受体结合是行使生物功能的第一步,因此用Ins受体制剂测定人血清Ins的含量比放射免疫法(RIA)更真实,应用放射受体法(RRA)测定Ins含量与RIA对照还有助于发现Ins分子突变型糖尿病患者。     

去B链羧端五肽(B_(26)—B_(30))胰岛素晶体结构的重原子衍生物分析

R3胰岛素晶体结构的测定,推动了人们试图继续用X射线分析法去研究不同晶系胰岛素的结构、不同种属胰岛素的结构,以及经化学修饰的胰岛素结构。不久前,我国晶体学工作者也报道了用分子置换法测定去B链羧端五肽胰岛素(简称DPI)的初步结果。这些结果对了解胰岛素结构的可柔性提供了很多有趣的信息,对于在分子水平上深入探索这个激     

两个A链改变后保留高生物活力的胰岛素类似物的初步晶体学研究

用固相合成和基因定点突变方法,分别制备了保留高生物活力的「Ａ１３－１４ＧＡＢＡ〈Ａ２１Ａｌａ」猪胰岛素和「Ａ３Ｔｈｒ」人胰岛素,结果显示,非编码的γ－氨基丁酸能够取代胰岛素中位于Ａ１３－Ａ１４ 二肽Ｌｅｕ－Ｔｙｒ;高度保守 与受体珠Ａ３Ｖａｌ可以被亲水的Ｔｈｒ取代,报道上述２个胰钫 类的的单晶体培养的和Ｘ－射线衍射的初步晶何不这研究。     

去七肽(B24-30)胰岛素在含不同有机溶剂条件下的结晶

去七肽(B24-30)胰岛素(DHPI)是胰岛素B链C端经限制性酶解法切去相应肽段后没有活力但能结晶的胰岛素类似物。DHPI能结晶,因此用X-光衍射法研究DHPI的立体结构,对于了解胰岛素的结构和功能的关系有重要作用。前此报道DHPI的晶体是薄片状的,因此进一步寻找了其它的结晶。结果发现,去七肽胰岛素可以在含某些有机溶剂的0.05M柠檬酸溶液中结晶。结晶方法基本上用过饱和静止法。先配DHPI的贮存液,使含有0.05     

Ⅲ.胰岛素A链的合成及其与天然B链组合成结晶胰岛素

牛胰岛素A链是由廿一个氨基酸所组成的一条肽链。它共合四个半胱氨酸,其中二个与其它四个氨基酸通过硫硫键形成一个廿员环,另外两个与B链中的二个半胱氨酸通过两个硫硫键连结(图1)。一般胰岛素的种属差异性主要表现在A链中第8,9,10上的氨基酸有所不同,例如牛胰岛素A链第9位是丝氨酸,而在羊胰岛素则为甘氨酸。     

鸭胰岛素的晶体生长及其初步结晶学的研究

研究胰岛素结构与功能之间的关系,是一项有意义的课题,对不同种属胰岛素以及一系列不同活力的胰岛素类似物的研究,已成为解决结构与功能关系的重要途径之一。本文的研究是一系列不同种属胰岛素研究中的一部分。鸭胰岛素一级结构与鹅胰岛素相同,因此对它的研究有一定的代表性。     

洋地黄皂甙/氯化钠溶性阿片受体的特征及其与六种凝集素相互作用的研究

许多膜结合受体如胰岛素、β-肾上腺素以及M、N型乙酰胆碱受体都是糖蛋白,1982年,Simon实验室根据从大鼠、蟾蜍、小鸡、牛以及人脑细胞膜溶脱的阿片受体能滞留于麦胚凝集素-琼脂糖层析柱,并被N-乙酰葡萄糖胺专一洗脱的事实,提出阿片受体可能也是糖蛋白的观点,1984年国际麻醉品会议(INRC)上,Valette等报道人胎盘膜阿片受体具有