中国流行的马铃薯纺锤块茎类病毒（PSTVd）株系鉴定及其…

从河北、内蒙古、山西、黑龙江、福建等省区采集虎头、克疫、紫花白、同薯８号、克新１号、克新４号和克新６号、燕子以及米拉等不同栽培品种感染ＰＳＴＶｄ的马铃薯样品中，制备ＰＳＴＶｄ粗提取物，以加拿大ＰＳＴＶｄ强毒株系（Ｓ－ＰＳＴＶｄ）和强毒株素（Ｍ－ＰＳＴＶｄ）作对照，采用往返式聚丙烯酰胺凝胶电泳（Ｒ－ＰＡＧＥ）进行株系鉴定。结果表明，感染中国不同马铃薯品种ＰＳＴＶｄ的电泳迁移率均与加拿大Ｍ－ＰＳＴＶｄ     

黑龙江省马铃薯纺锤块茎病的研究

利用在试管中保存的马铃薯纺锤块茎类病毒(pstvd)的纯毒源,在防虫的网棚(网绷纱要求100目)中,利用金钢砂、喷粉器、棉球、研钵,将毒源中加入0.1m磷酸缓冲液后将其研碎,接种在克新二号、克新三号、克新四号的植株上。该实验进行两次接种,第一次接种10天后,进行第二次接种,根据植株的外观表现——健康株、健康株生长势低于前者、轻束顶症株、重束顶症株。来判定接种纺锤块茎症毒后植株的发病情况,根据小区测产对比总结出马铃薯纺锤块茎类病毒对马铃薯产量影响的程度。使克新12号品种的减产率从27.20%~61.80%;使克新14号品种的减产率从17.40%~57.40%。     

用长臂光敏生物素标记的cDNA探针核酸斑点杂交检测马铃薯纺锤块茎类病毒

用长臂光敏生物素标记含有马铃薯纺锤块茎类病毒（Ｐｏｔａｔｏｓｐｉｎｄｌｅｔｕｂｅｒｖｉｒｏｉｄ，ＰＳＴＶｄ）双拷贝ｃＤＮＡ的重组质粒ｐＳＴ－Ｂ１４，制备成光敏生物素标记ｃＤＮＡ探针，用核酸斑点杂交检测感染ＰＳＴＶｄ的马铃薯叶片和块茎提取物均出现较强的阳性杂交信号，而健康马铃薯为阴性．试验结果表明：光敏生物素标记ｃＤＮＡ探针检测感染ＰＳＴＶｄ的马铃薯叶片汁液最高稀释度为１１２８     

用非同位素标记的pAV 401探针进行分子杂交鉴定马铃薯纺锤块茎类病毒

用Eoehringer Mannheim Biochemica的pAV401探针,以分子杂交的方法鉴定了马铃薯和番茄中的马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTV)。试验表明当用探针浓度为200ng/ml, β-半乳糖苷酶为100 mU/ml,即酶结合物稀释至1:100时,可以测定出提纯PSTV—RNA最低浓度为390pg/斑点,感染PSTV的马铃薯和番茄叶片汁液最高稀释浓度为1:128。样品提取方法试验表明,以酚法教果为最佳。健康马铃薯汁液对提纯PSTV—RNA鉴定效果无明显影响。样品汁液在稀释前予先变性对提高杂交效果无明显作用。本文对Boehringer pAV401探针检测PSTV的灵敏度,所用探针浓度以及显色系统进行了讨论和评价。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳在蝶类分类中的应用探讨

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术,对不同蝶类的肌肉组织蛋白质进行分离与比较研究,通过相似性系数的分析,探讨了该方法在蝶类分类中应用的可行性.     

中国流行的马铃薯纺锤块茎类病毒（PSTVd）株系鉴定及其对产量的影响

从河北、内蒙古、山西、黑龙江、福建等省区采集虎头、克疫、紫花白、同薯８号、克新１号、克新４号和克新６号、燕子以及米拉等不同栽培品种感染ＰＳＴＶｄ的马铃薯样品中，制备ＰＳＴＶｄ粗提取物，以加拿大ＰＳＴＶｄ强毒株系（Ｓ－ＰＳＴＶｄ）和弱毒株系（Ｍ－ＰＳＴＶｄ）作对照，采用往返式聚丙烯酰胺凝胶电泳（Ｒ－ＰＡＧＥ）进行株系鉴定．结果表明，感染中国不同马铃薯品种ＰＳＴＶｄ的电泳迁移率均与加拿大Ｍ－ＰＳＴＶｄ的迁移率相同．初步表明侵染中国马铃薯的ＰＳＴＶｄ主要是Ｍ－ＰＳＴＶｄ．用ＰＳＴＶｄ虎头分离物，采用针刺块茎幼芽和叶片摩擦接种方法，分别接种到无ＰＳＴＶｄ的健康虎头和克皮上．检测结果表明，在初感染和续发感染植株中，ＰＳＴＶｄ浓度分布有共同的规律，从顶部叶片、中部叶片到基部叶片中ＰＳＴＶｄ浓度依次逐渐减少．ＰＳＴＶｄ接种明显抑制了植株生长，并造成较大的产量损失．由不同品种初感植株收获的块茎，均有很高的ＰＳＴＶｄ感染率．     

聚丙烯酰胺凝胶电泳检测大豆SRAP标记

以大豆为试验材料,提取了大豆的基因组DNA,对大豆进行SRAP-PCR扩增,并对产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,最后硝酸银染色。建立了一种行之有效、简便快捷的应用于大豆SRAP标记的PAGE银染检测方法。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳检测水稻SSR标记

以水稻为试验材料,提取水稻基因组DNA,选择多态性SSR标记,并将标记产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,最后硝酸银染色,试图建立了一种行之有效、简便、快捷的应用于水稻SSR标记的PAGE银染检测方法。     

梭鱼血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳的研究

采用盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对梭鱼血清蛋白进行了分析。以5。7％浓度凝胶盘状电泳分离梭鱼血清蛋白得15—19带,其中雌鱼为17—19带,雄鱼为15—17带。血清蛋白图谱明显的区带有脂蛋白、球蛋白、运铁蛋白、白蛋白及前蛋白等组份。幼鱼的血清蛋白已出现某些差异。     

高灵敏度银染色聚丙烯酰胺凝胶电泳的研究

本文研究了高灵敏度的聚丙烯酰胺凝胶电泳的银染色法。全部以国产试剂完成染色和固定过程,降低了银试剂的消耗,进一步缩短了时间,其灵敏度比考马斯亮兰法高约100倍。     

大豆聚丙烯酰胺凝胶电泳制胶浓度选择

本文提出在聚丙烯酰胺凝胶电泳中,对未知样品宜先在C％=4.8％,T％=2～5％或C％=2.6％ T％=5～10％的系列浓度分离胶及C％=20％,T％=3.2％的浓缩胶中作圆盘电泳,选择该样品的最适分离胶浓度。然后再按此浓度作垂直平板电泳,并作加样量梯度实验,找出加样最适量,以达到样品在聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳中的最佳分辨率。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳——曙红Y染色法

十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳已广泛用于分子生物学和医学临床等领域,但该技术的染色方法多沿用考马斯亮蓝和银染色,这两种方法均有其局限性,如蛋白凝胶染色前须经酸或醛固定,不易洗脱且操作繁琐,脱色耗时等。而曙红Y染色具有检测灵敏度高,操作简便,染色时间短,可对各种蛋白质染色,染色后的蛋白质可直接进行电泳转移印迹,也可将凝胶中蛋白质电泳转移后染色。染色后的蛋白质仍具有抗原性。此外,还具有试剂便宜,使用安全,便于推广应用等优点。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳快速显色方法的研究

通过对聚丙烯酰胺凝胶电泳的固定方法、时间、染色液种类、染色方法及蛋白灵敏度的研究,确定了以10%三氯乙酸为固定液,室温固定10min的固定方法;染色液为：考马斯亮蓝G-250、95%乙醇和10%磷酸,染色时间为15min;蛋白质灵敏度与考马斯亮蓝R-250相当,达到0.1μg。     

淀粉聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定耐热糖化酶组分

采用微波诱变筛选出一突变株,该突变株粗酶液的最适作用温度比出发株的高20℃;建立了一种Starch-PAGE检测粗酶液中具有糖化酶活性组分的方法,测定出突变株含有4个糖化酶组分;并建立了SDS-Starch-PAGE检测耐热糖化酶组分的方法,鉴定出突变株含有3个耐热糖化酶组分.     

十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳的实验教学改进

在本科生物化学实验教学中,为减少有机溶剂的使用,同时缩短实验时间,作者对SDS-PAGE的脱色过程进行改进,使用0.5mol/L NaC l代替含挥发性有机溶剂做脱色液,取得了良好的实验效果。     

DNA变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的实验教学改进

DNA变性聚丙烯酰胺凝胶电泳在现代生物技术中的地位十分重要,但在实验中,聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作难度比较大,影响因素比较多,耗时比较长。为了使DNA变性聚丙烯酰胺凝胶电泳适合于实验教学,对聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术相关操作流程进行了研究和探索,对实验进行了改进和优化。改进和优化后的实验操作简易、详细,试剂配方更合理,成功率得到提高,学生能在4学时内完成,为进行实验教学提供了基本条件。