环境污染地区成年男性精子microRNA表达谱的建立

通过收集污染区男性精液标本30份和30份对照地区成年男性的精液标本,提取精子RNA,标记后与miRCU-RYTM LNA Array芯片杂交,分析环境污染与对照地区成年男性精子中miRNA的表达情况。结果表明环境污染与对照地区男性精子共182个miRNA存在表达差异,在环境污染地区73个miRNAs显著上调,109个m...     

解脲脲原体及沙眼衣原体对男性不育患者精液质量的影响

目的:研究解脲脲原体(UU)、沙眼衣原体(CT)感染对男性精液参数的影响,探讨男性感染UU、CT与不育的关系。方法:对2021年1月至2022年3月就诊的335名男性患者首段尿液标本进行UU与CT检测后分组,收集患者精液335例,比较各组精液参数之间的差异。结果:335例精液标本分为4组：UU感染组(98例,29.25%)、CT感染组(30例,8.96%)、UU合并CT感染组(25例,7.46%)、对照组(无感染组,182例,54.33%)。UU感染降低精子密度、精子总数、精子前向运动率、精子总活力(P<0.05);UU感染对精液体积、精液pH、精子正常形态率影响较小(P>0.05)。CT感染主要降低精子密度、精子总数、精子正常形态率(P<0.05)。与单一UU感染组及CT感染组对比,在UU合并CT感染组中,精子前向运动率、精子总活力、精子正常形态率下降的幅度更大,差异显著(P<0.05)。单一UU感染组、单一CT感染组及UU合并CT感染组的白细胞计数均显著高于对照组(P<0.05)。CT感染组中精子头部缺陷率、精子中段缺陷率、畸形精子指数(TZI)均高于...     

异氟醚体外对人活力低下精子运动的影响

观察异氟醚体外对人活力低下精子运动的影响.实验选取确诊为正常和活力低下的精液各10份,每份精液再均分为12份(每份100μL),随机分为3组,每组4份,分别移入12个培养皿中,每组一个培养皿不加任何药物作为对照,其余三个分别加入5、102、0 L异氟醚(培养皿内异氟醚气态浓度依次为0%、1.4%、2.8%、5.6%),立即将3组培养皿密封,25℃室温下分别静置0.5 h、1 h、2 h,采用计算机辅助精液分析系统检测精子的活动率和活力.结果发现:①1.4%~5.6%异氟醚作用活力低下精子0.5 h1、h,其活动率和活力均显著高于对照组,而2 h时无显著差别;1.4%~5.6%异氟醚作用正常精子0.5 h、1 h2、h,其活动率和活力均显著高于对照组;②异氟醚作用活力低下精子0.5 h和1 h时,5.6%异氟醚作用的精子活动率和活力均显著高于1.4%和2.8%异氟醚作用的精子,而在2 h时各浓度异氟醚作用的精子其活动率和活力之间无显著差别;异氟醚作用正常精子0.5 h、1 h和2 h时,5.6%异氟醚作用的精子其活动率和活力均显著高于1.4%和2.8%异氟醚作用的精子;③活力低下精子在各浓度异氟醚作用下,1 h和2 h时其精子的运动参数均比前一时间点显著下降,但正常精子的运动参数在各时间点之间无显著差异;④5.6%异氟醚作用活力低下精子0.5 h,提高精子活动率和活力的程度比正常精子活动率和活力的程度更为明显,且这种提高程度的差异有显著性.异氟醚不仅可以显著提高正常精子和活力低下精子的活动率和活力,而且提高活力低下精子活动率和活力的程度比正常组活动率和活力的程度更为明显.     

乌苏里貉在电刺激采精条件下的精液品质

在四年中,检测了53只次乌苏里貉在电刺激条件下的精液品质．结果表明,采精量平均为2．12±0．88 mL,每毫升精液中精子数平均为5．58±2．01千万个;精子活力平均9．3±0．1 级,pH值平均6．67±0．41,偏酸性;精子畸形率平均10．23±3．40％．精子在5℃冰箱内存活 24-28 h．     

解脲支原体感染与精液质量指标的相关性研究

对 4 1例正常男性和 81例精液质量较差男性患者的精液进行了解脲支原体培养研究 ,结果表明精液质量差的患者解脲支原体阳性率为 54.34% ,而正常男性的阳性率为 2 6 .83% ,二者差异显著 (α <0 .0 1) .同时 ,对 81例患者按少精及无精、成活率低下、活力低下、顶体完整率低以及血清抗精子抗体阳性 5项指标进行了分组 ,并计算了各组中解脲支原体阳性患者所占百分率 .结果表明 :以上各组的阳性率均高于正常组 ,生殖道解脲支原体感染影响了精子各项指标 ,降低精液整体质量 ;解脲支原体对精子活力影响最大 ,其次是精子数、成活率、顶体完整率、血清抗精子抗体 ;解脲支原体感染致使精子活力逐渐下降 ,最终导致精子死亡 ,从而降低精子成活率     

维生素B_(12)对牛冷冻精液精子质量的影响

牛精液冷冻前于精液稀释液中添加ＶＢ１２为试验组，不添加ＶＢ１２的为对照组。冷冻结果表明：试验组冻精解冻后精子活力、顶体完整率分别比对照组提高１６．１１％（Ｐ＜０．０１），１５．９％（Ｐ＜０．０１）；精子畸形率与ＧＯＴ活性均明显下降；精子存活时间延长。说明ＶＢ１２在牛精液冷冻中对牛精子形态结构具有保护作用。     

芯片和荧光定量PCR分析与精子生成有关的microRNAs

提取性未成熟和性成熟小鼠睾丸组织总RNA,分离纯化并标记miRNA,利用miRNA芯片筛选出在两种组织中差别表达miRNA,并用荧光定量PCR进一步验证,利用计算机软件预测可能与精子发育有关的基因. 通过miRNA芯片发现19个miRNA在两种组织中有明显变化,选取其中14个通过荧光定量PCR进一步验证,通过软件预测了一批与精子发育直接相关的基因,将对这些基因进一步分析.     

计算机分析和人工方法检查精液结果比较研究

目的比较计算机辅助精子分析与人工常规方法检查精液的结果,评价计算机辅助精子分析系统的临床应用价值。方法分别采用计算机辅助精子分析系统及人工常规方法对257例精液样本进行检测,并对两组结果进行比较;采用计算机辅助精子分析对同一精液样本重复检测8次。结果两种方法检测257例精液样本的密度、活动率及活力A B的结果经统计学分析P>0.05,无显著性差异。同一样本用计算机辅助精子分析法连续检测8次,其精子密度、活动率和活力A B的变异系数分别为7.54%、2.66%和4.79%,有较好的重复性。结论计算机辅助精子分析可替代人工常规方法在临床推广应用。     

矮脚黄羽肉鸡的精液冷冻研究

对矮脚黄羽肉鸡,运用采集精液进行研究,其方法为人工徒手按摩其背、以尾部可以采得精液．对其品质进行测试表明:采精量平均0．512±0．316 mL(变动范围0．3-0．8 mL);精液似浓稠的牛乳状,每毫升精液中精子数17-19亿个,活力9级以上,pH值6．5,微腥．采出的鲜精,用2号 (3％柠檬酸三钠-卵黄稀释液)、3号(11％蔗糖-卵黄稀释液)、5号(11％蔗糖-0．1％柠檬酸三钠-卵黄稀释液)稀释液稀释,精子活力都8-9级,以5号液最好．即11％蔗糖-0．1％柠檬酸三钠溶液 100 mL中,加6 mL甘油,加16 mL鲜卵黄．与原精液做1:1稀释后用水浴套或毛巾包裹,直接放入5℃冰箱中平衡1 h后装入0．25 mL塑料细管,吊入液氮(-196℃)中冻存．在50℃温水中解冻后,精子活力在9级以上．其冻精稀释液以5号最佳．精子活力达6-7级．8号液(5％葡萄糖溶液 77 mL中加入甘油6 mL,鲜卵黄17 mL),3号液(11％柠檬酸三钠溶液100 mL中加6 mL甘油,16 mL鲜卵黄)也较好,冻精复苏后,活力达5-6级．     

棉酚——值得开发的避孕药

棉酚具有抗生育作用。这是我国科学家首次发现的。上世纪70年代山东中草药避孕研究协作组对山东产棉区的集中不育现象进行了调查和体检。证实棉籽食品对男性生育影响较大．男性棉籽食用者．精液中无精子的占80．5％．精子数及精子活力低于正常者占16．5％．精液正常者仅占3％。     

MicroRNA expression profiles classify human cancers

Recent work has revealed the existence of a class of small non-coding RNA species, known as microRNAs (miRNAs), which have critical functions across various biological processes. Here we use a new, bead-based flow cytometric miRNA expression profiling method to present a systematic expression analysis of 217 mammalian miRNAs from 334 samples, including multiple human cancers. The miRNA profiles are surprisingly informative, reflecting the developmental lineage and differentiation state of the tumours. We observe a general downregulation of miRNAs in tumours compared with normal tissues. Furthermore, we were able to successfully classify poorly differentiated tumours using miRNA expression profiles, whereas messenger RNA profiles were highly inaccurate when applied to the same samples. These findings highlight the potential of miRNA profiling in cancer diagnosis.     

大豆降解组文库microRNAs的启动子分析

研究目的：创新要点：通过分析miRNA的核心启动子和顺式作用元件为进一步解析大豆（Glycinemax）miRNAs表达调控及其功能研究提供重要信息。利用生物信息学方法全面解析了大豆降解组文库miRNA的启动子特征,并依据顺式作用元件及靶基因构建了miRNA的表达与生长素响应因子、赤霉素响应因子之问存在潜在的负反馈调控网络。研究方法：本研究利用TSSP程序和PlantCARE数据库预测了来自大豆降解组文库的440个miRNA的核心启动子以及369个miRNAs的顺式作用元件,并依据顺式作用元件及靶基因构建miRNA调控网络。重要结论：83．86％的miRNA在其上游序列中含有启动子,8．64％的miRNA在其下游序列中含有启动子,21．59％的miRNA包含增强子。核心启动子的TATA盒与转录起始位点（TSSs）的分布相似（见图2）。此外,对转录起始位点5’端的顺式作用元件预测为miRNAs的可能功能和表达的时空性提供了线索。miRNAs的顺式作用元件和靶基因的分析显示,部分miRNA的表达与生长素响应因子、赤霉素响应因子之间存在潜在的负反馈调控（见图3）。     

Correlation of microRNAs responding to high dose γ-irradiation with predicted target mRNAs in HeLa cells using microarray analyses

An increasing data indicates that altered microRNAs （miRNAs） participate in the radiation-induced DNA damage response. However, a correlation of mRNA and miRNA profiles across the entire genome and in response to irradiation has not been thor- oughly assessed. We analyzed miRNA microarray data collected from HeLa cells after ionizing radiation （IR）, quantified the ex- pression profiles of mRNAs and performed comparative analysis of the data sets using target prediction algorithms, Gene Ontol- ogy （GO） analysis, pathway analysis, and gene network construction. The results showed that the altered miRNAs were involved in regulation of various cellular functions, miRNA-gene network analyses revealed that miR- 186, miR- 106b, miR- 15 a/b, CCND 1 and CDK6 played vital role in the cellular radiation response. Using qRT-PCR, we confirmed that twenty-two miRNAs showed differential expression in HeLa cells treated with IR and some of these miRNAs affected cell cycle progression. This study demonstrated that miRNAs influence gene expression in the entire genome during the cellular radiation response and suggested vital pathways for further research.     

血清miR-25、miR-223和miR-373作为食管鳞癌生物标志物的评价

为了探讨血清miRNA作为诊断标志物的可行性,利用茎环引物进行qRT-PCR,检测了miR-25、miR-223和miR-373在正常人血清、食管鳞癌患者术前和术后第7 d血清、癌组织和癌旁组织的相对表达量.实验结果表明:术前食管鳞癌病人的3种血清miRNA相对表达量高于正常人和手术后第7 d病人,AUC分别为0.794、0.839和0.873,癌组织的这3种miRNA相对表达量高于癌旁组织.这3种miRNA在食管癌患者癌组织的高表达导致血清的这3种miRNA含量增高,因此这3种血清miRNA可以作为候选诊断标志物.     

应用生物信息学寻找大鼠中新的microRNA分子及其实验验证

大鼠已公布的microRNA(miRNA) 数量明显少于小鼠及人miRNA的数量.本文采用同源搜索的计算方法预测大鼠新的miRNA.从miRBase数据库中下载已知动物的pre- miRNAs, 在UCSC数据库中对大鼠的全基因组序列进行了Blat分析,并根据miRNAs的筛选标准,获得45条新的大鼠miRNAs;随后随机选取其中的9条新miRNAs进行RT- PCR实验验证,发现大部分miRNAs在脑、心、肺、肾、肌肉、脾、睾丸和肝8种组织中均有表达.在此基础上,对预测的新miRNAs进行了miRNA成簇分析和miRNA基因家族分析.     

基于MiRfilter系统的毛果杨miRNA预测

从参数训练、参数范围训练、候选成熟体打分等方面改进miRNA预测系统MiRfilter,使其适应拥有更长前体的植物miRNA的预测.预测毛果杨基因组上的miRNA,并对系统进行精度检验.利用MiRfilter系统共预测出3 860条候选miRNA;在110个正样本中,正确识别91条前体和80条成熟体,前体预测精度为82.73%,成熟体预测精度为72.73%;在毛果杨第4号染色体（LG_Ⅳ）上得到的1 968个负样本中,有12个数据可认为是miRNA,假阳性率为0.61%.     

美洲鲎miRNA的生物信息学挖掘与分析

利用miRBase数据库中已有动物的小RNA（miRNA）,通过生物信息学方法对美洲鲎(Limulus polyphemus)表达序列标签（Expressed Sequences Tag,EST）和cDNA进行序列比对,挖掘美洲鲎miRNA,得到了 72个miRNA前体(pre-miRNA)、49个可编码成熟miRNA,隶属于40个miRNA家族。miRNA家族归类结果表明,无论在低等脊椎动物还是高等动物中,miRNA家族的存在都是相当保守的。以miR-10基因前体为例,分析其序列与其他物种同源序列的差异,显示miRNA序列的高度保守性。miR-10前体序列分析系统进化发现,物种聚类与传统分类亲缘关系一致。