四种杀虫药物对盐生杜氏藻生长的致毒效应

研究4种杀虫药物对盐生杜氏藻生长的致毒效应,结果表明:虫敌、纤源净、马拉硫磷、虫水安均不同程度上抑制盐生杜氏藻的生长繁殖,超过一定浓度后引起藻体的负增长,同时采用回归方程求出了4种药物对盐生杜氏藻24、48、72、96 h的半效应浓度EC50.     

盐生杜氏藻的完整叶绿体分离

盐生杜氏藻(Dunaliella salina)是世界上最耐盐的一种单细胞真核绿藻,可在含0．1～5．0mol／L NaCl的培养液中正常生长．盐生杜氏藻细胞内的主要调渗物质是甘油,在甘油代谢途径中,3-磷酸甘油脱氢酶是一个关键酶．近年来的研究表明杜氏藻(Dunaliella tertiolecta)细胞质和叶绿体中都存在3-磷酸甘油脱氢酶的同工酶,且叶绿体上的同工酶与渗透调节作用直接相关,为了解D．satina中3-磷酸甘油脱氢酶同工酶的细胞定位和分布,我们通过冰浴超声波破碎和蔗糖密度梯度离心,获得盐生杜氏藻的完整叶绿体,用相差显微镜镜检、酶的活性分析等方法对其完整性作了初步分析。     

氮、磷、硫对盐生杜氏藻色素积累的影响

研究了盐生杜氏藻(Dunaliella salina)在不同浓度氮、磷、硫等营养条件下对细胞积累β-胡萝卜素和叶绿素的影响．发现盐生杜氏藻细胞经过10d生长,在营养缺乏条件下其β-胡萝卜素和叶绿素的比率达到最大,积累β-胡萝卜素的最适条件是无氮、无磷和无硫,但是不利于盐生杜氏藻的生长．讨论了此结果的机理和意义,为利用盐生杜氏藻大规模生产β-胡萝卜素提供了理论依据．     

盐生杜氏藻同步化及细胞周期的研究

盐生杜氏藻是一种海洋生活的单细胞藻类，细胞中具有细胞核，叶绿体等细胞器，细胞呈椭圆形，直径在15～20μm，人工配制的海水中培养。由于具有叶绿体，能进行光合作用，因此可以用光暗交替处理，诱导细胞同步法。Lor等人[1]报导用光暗交替诱导小眼虫得到较好的同步化结果，他指出对衣滴虫、小球藻。异变形藻等都可以用光暗交替法诱导同步化。盐生杜氏藻使用此法诱导同步化，并测定同步化后细胞周期，这方面还未见详细报道。本文就此作初步探讨。1材料与方法1.1盐生杜氏藻：来自山东海洋大学赠送，定名为Dunaliellabolt。a，采用人工配制…     

温度对杜氏藻生长和脂肪酸组成的影响

研究了不同温度对盐生杜氏藻(Dunaliella.salina)生长及脂肪酸组成的影响.结果表明:在20～32℃之间,提高培养温度和增加光照强度促进了盐生杜氏藻的生长;盐生杜氏藻的脂肪酸组分以C16和C18脂肪酸为主,随着培养温度的升高和光照强度的增加,藻株内饱和脂肪酸所占百分比例增加,多不饱和脂肪酸所占百分比例减小.     

杜氏藻中β—胡萝卜素的提取分离

从盐生杜氏藻中提取分离得β-胡萝卜素，探讨了不同提取条件对收率的影响．     

盐藻尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶(DsUGD)基因的功能预测

盐生杜氏藻（Dunaliella salina）具有极强的耐盐性，藻体含有大量的胡萝卜素、蛋白质以及多糖类化合物．目前，已有研究报道指出蓝藻多糖是其适应高盐、高碱等环境的重要因素；而盐藻多糖的作用尚未见相关研究．尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶（UDP-glucose dehydrogenase，UGD，EC1．1．1．22）是多糖合成中的一个关键酶，它催化产生的UDP-葡萄糖醛酸是多糖合成中的关键前体物质．在微生物中，该酶参与到荚膜多糖的合成，是其致病性原因所在；在高等植物中，UGD参与到半纤维素的合成，与植物细胞壁形成密切相关．盐生杜氏藻是一类低等光合植物，它没有细胞壁和荚膜，因此关于UGD在该物种中的作用有待进一步研究．     

盐生杜氏藻碱性蛋白的研究

以一种单细胞的盐生杜氏藻为实验材料，利用化学和机械的方法破碎细胞，然后梯度分离细胞核，用盐酸抽提细胞核蛋白质，并与小牛胸腺组蛋白相比较。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析测定所得的碱性蛋白发现盐生杜氏藻核中有三条碱性蛋白带，两条蛋白带与Ｈ３与Ｈ４相对应，另一条分子量很小。     

不同水质对杜氏盐藻生长和生理的影响

分析杜氏盐藻(Dunaliella salina)在不同水质中的生长状况,确定适合养殖杜氏盐藻的水源.根据GB17378.4—2007的方法检测天津中心渔港海水、天津北疆电厂冷却水、稀释10倍后的青海柴达木盆地察尔汗盐湖原卤水、老卤水及成矿卤水的水质后,将杜氏盐藻接种于其中,分析水质对盐藻各生理指标的影响.结果表明:除青海柴达木盆地察尔汗盐湖老卤水外,其余4种水样均可以用来培养盐藻.虽然不同水质对盐藻生长及生理的影响不同,但综合来看,利用稀释10倍后的成矿卤水培养的杜氏盐藻培养至第15天时,硝酸还原酶活性为(4.41±0.18)μg/(mg·h),显著高于用海水培养的杜氏盐藻.培养至21,d时,叶绿素质量浓度为(24.9±1.0)mg/L,藻细胞质量浓度为(409.5±21.1)mg/L,与用海水培养的杜氏盐藻间均无显著性差异.净光合速率为(128.6±3.0)μmol/(mg·h),呼吸速率为(28.2±0.9)μmol/(mg·h).证明在同样的培养条件下,利用稀释10倍后的成矿卤水培养的杜氏盐藻与用海水培养的杜氏盐藻积累同样多的干物质.     

不同氮源对盐生杜氏藻生长和β-胡萝卜素积累的影响

研究了 Ｎａ Ｎ Ｏ３、 Ｎ Ｈ４ Ｃｌ和脲 ３ 种不同氮源对盐生杜氏藻生长和 β胡萝卜素积累的影响．结果显示,在０．０５～０．５ ｇ／ Ｌ 浓度范围内,较高浓度 Ｎａ Ｎ Ｏ３ 对杜氏藻生长有利． Ｎ Ｈ４ Ｃｌ对杜氏藻的生长有毒害作用,０．２ ｇ／ Ｌ 的浓度即对杜氏藻生长有明显抑制作用,脲在０．１～１．８ ｇ／ Ｌ 的浓度范围内对杜氏藻的生长有促进作用．但当脲浓度达到 ３．０ ｇ／ Ｌ 时,生长速度又有所下降;杜氏藻细胞中β胡萝卜素积累量与培养基中 Ｎａ Ｎ Ｏ３ 浓度成反比．在室外强光照下,以 ０．１ ｇ／ Ｌ 低浓度脲和 Ｎａ Ｎ Ｏ３ 作为氮源,杜氏藻细胞均可积累较高的 β胡萝卜素含量．本文的实验结果提示,低浓度脲有利于杜氏藻细胞生长和 β胡萝卜素积累,可作为良好的氮源．     

龙虾Panulirus叶状幼体饵料的研究

先后采用扁藻Ｐｌａｔｙｍｏｎａｓｓｐ．、骨条藻Ｓｋｅｌｅｔｏｎｅｍａｓｐ．、金藻Ｄｉｃｒａｔｅｒｉａｓｐ．、丰年虫Ａｒｔｅｍｉａｓａｌｉｎａ幼体、藤壶Ｂａｌａｎｕｓｓｐ．幼体、轮虫Ｂｒａｃｈｉｏｎｕｓｓｐ．、蓝藻粉（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、丰年虾片、金Ｂ．Ｐ．、微粒子、黑粒子、贻贝Ｍｙｔｉｌｕｓｅｄｕｌｉｓ卵巢．组成１２个组合饲养中国龙虾Ｐａｎｕｌｉｒｕｓｓｔｉｍｐｓｏｎｉ、密毛龙虾Ｐ．ｐｅｎｉｃｉｌｌａｔｕｓ、黄斑龙虾Ｐ．ｐｏｌｙｐｈａｇｕｓ的叶状幼体。结果发现扁藻＋金藻＋丰年虫的体＋贻贝卵巢组合喂养效果好．蓝藻粉＋丰年虫幼体＋贻贝卵巢组合和丰年虫幼体＋贻贝卵巢组合喂养叶状幼体也可以，但效果比前面组合差。     

RIBONUCLEASE ACTIVITY OF DUNALIELLA SALINA （CHLOROPHYTA） UNDER HYPEROSMOTIC SHOCKS

ＲＩＢＯＮＵＣＬＥＡＳＥＡＣＴＩＶＩＴＹＯＦＤＵＮＡＬＩＥＬＬＡＳＡＬＩＮＡ（ＣＨＬＯＲＯＰＨＹＴＡ）ＵＮＤＥＲＨＹＰＥＲＯＳＭＯＴＩＣＳＨＯＣＫＳＬｕＳｈａｎ△ＺｈａｎｇＸｉａｏｎｉｎｇＸｉａＺｈｏｎｇｈａｏＬｉｕＺｈｉｌｉ（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｏ...     

中国两性生殖卤虫种群PO同工酶基因的表达特征

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法对中国两性生殖卤虫 14个品系和伊朗的 1个两性生殖品系的过氧化物酶 ( PO)同工酶基因的表达特征进行了研究 .实验结果表明 :( 1)中国卤虫种群 Artemia sinica各品系和伊朗的 A.urmiana各自有其独特的 PO同工酶基因型 ;( 2 )在两性生殖卤虫各品系 PO同工酶基因表达过程中多数品系 PO-1、PO-3座位均未发现 aa基因型 ;PO-2座位测定不到 aa基因型 ;( 3 )存在品系内和品系间的多态现象 .     

长毛对虾育苗中饵料问题的探讨

1999年5～8月,在浙江省海洋水产研究所试验场,用金藻、蛋黄、冰冻轮虫、酵母、虾片、日本产对虾配合饲料、卤虫无节幼体等饵料进行分组投喂培育长毛对虾幼体,结果表明:金藻、冰冻轮虫、卤虫无节幼体作为各期幼体培育时的饵料,具有较好的饲效.     

中国两性生殖卤虫11个品系卤虫卵孵化特性的评价

对中国两性生殖卤虫１１个卤虫品系的卤虫卵的孵化特性进行了研究和评价。实验结果显示：１．各品系的孵化率的排序为ＭＤ〉ＣＤ〉ＧＮ〉ＹＣ〉ＳＱ〉ＣＨ〉ＮＨ〉ＢＨ〉ＨＪＱ〉ＳＢ〉ＢＮ,孵化率达７０％以上的品系占全部品系的３６．４％,超过６０％的孵化率的品系占全部品系的６３．６％;２．各品系的孵化效率的排序为ＭＤ〉ＧＮ〉ＣＤ〉ＹＣ〉ＳＯ〉ＣＨ〉ＢＹ〉ＨＪＱ〉ＮＨ〉ＳＢ〉ＮＨ,其中ＭＤ,ＧＮ,ＣＤ的卵径较小。     

中国卤虫早期胚胎发育相关基因的研究——Orthodenticle基因克隆中简并引物的设计和优化

通过使用blastx、Blockmaker、CODEHOP和Primer Premier 5.0等在线网络工具和生物软件,针对中国卤虫Orthodenticle基因高度保守区域设计了简并引物.用所设计的简并引物克隆了中国卤虫Orthodenticle基因片段.在GenBank中以blastx方法进行比对,发现此段基因片段与美国卤虫Orthodenticle基因有高度的相似性.通过实验进一步证明,此种设计简并引物的方法可信性强,特异性高,能够快速得到满意的实验结果.     

龙虾叶状幼体聚缩虫病防治的研究

对防治龙虾叶状幼体聚缩虫病采用多种药物、多种措施进行对比试验，表明投金藻、扁藻、光合细菌和丰年虫幼体，优化培育水体生态环境，改善叶状幼体营养，提高叶状幼体自洁力，加速叶状幼体发育变态，适当调高盐度以恶化聚缩虫诉生存环境，及时清除丰年虫卵壳等污物，能有效地防治龙虾叶状幼体聚缩虫病。     

毛蚶正丁醇相抗卤虫化学成分分析

应用抗卤虫（Artemia salina）生物活性筛选模型,分析南海毛蚶（Scapharca subcrenata）乙醇浸膏和正丁醇相的生物活性成分.从毛蚶（S.subcrenata）正丁醇萃取相中共分得4个化合物,包括3个甾体类化合物5-烯-胆甾醇（1）,胆甾醇（2）,3-酮-20-烯孕甾烷（3）和1个吲哚类化合物3-carboxy-indole （4）,化合物（1）～（3）在50μg/mL时对卤虫的致死率分别为65.0％,60.0％和58.3％.     

利用ITS序列对两个盐藻株的分子鉴定

对实验室长期保存的两个盐藻株(Dunaliella salina)核糖体rDNA的ITS(internal transcribed space)序列(ITS1 5.8S rDNA ITS2)用PCR技术扩增并克隆,经序列测定后,与从GenBank中获得的相关序列一起构建系统发育树.结果显示:其中一个(Dunaliella salinaSHU 01)与Dunaliella viridisCONC 002的距离最近,另一个(Dunaliella salinaSHU02)与Dunaliella salinaUTEX 1644的距离最近.因此分别命名为Dunaliella viridisSHU与Dunaliella salinaSHU.     

冠瘤海鞘克生活性筛选及低极性组分GC-MS分析

为研究冠瘤海鞘（Styela canopus Savigny）的抗卤虫活性部位及有效成分,采用卤虫致死活性筛选模型,对冠瘤海鞘的提取物及甾体粗晶进行了生物活性测定,并采用GC-MS技术对石油醚相进行了成分分析.结果表明：乙醇提取物和各有机相均有明显克生活性,冠瘤海鞘甾体粗晶的克生活性是石油醚相的3.2倍;从冠瘤海鞘石油醚相中鉴定出12个化合物,主要为脂肪类和甾醇类化合物,而且冠瘤海鞘抗卤虫活性成分主要在乙酸乙酯相和石油醚相中,石油醚相中的甾醇类化合物是冠瘤海鞘的克生活性物质之一.