多肽类生物活性物质的非核糖体合成机理

遗传信息能信使核糖核酸,转运核糖核酸和核糖体转变成蛋白质的过程是分子生物学的基石,但是,许多多肽生物活性物质是通过非核糖体途径合成的,只有非核糖体多肽合成酶系参与,非核糖体多肽合成酶系是一类多功能蛋白质复合体,能识别,激活,转运氨基酸的底物并按特定顺序合成多肽,非核糖体多肽合成酶系同时具有酶和模板功能,因此被称为蛋白质模反,由于底物大部分是稀有氨基酸,经由该途径合成的多肽类生物活性物持种类繁多,了解多肽非核糖体合成机理有助于寻找多肽类生物活性物质,有利于通过人工操作非核糖体合成酶系生产多肽类药物,近年来的研究已经使人们初步了解非核糖体合成的机理,本文将介绍了非核糖体合成酶系组成,结构和多肽非核糖体合成过程。     

纤维结合素多肽衍生物的化学合成及对骨髓瘤组织株K562的…

应用固相多肽合成技术，人工合成了一种衍生于纤维结合素的六肽ＧＲＧＤＳＳ。用高效液相层析进行纯度鉴定，并观察六肽对骨髓瘤细胞株Ｋ５６２的体外抑制作用，实验结果表明，六肽在７２ｈ内对骨髓瘤细胞的抑制率为３１％，多肽的结构对功能有一定的影响，根据竞争抑制原理，设计和合成多功能的多肽可为临床医学治疗肿瘤开辟一个新的途径。     

纤维结合素多肽衍生物的化学合成及对骨髓瘤细胞株K562的体外抑制作用

应用固相多肽合成技术，人工合成了一种衍生于纤维结合素的六肽ＧＲＧＤＳＳ。用高效液相层析进行纯度鉴定，并观察六肽对骨髓瘤细胞株Ｋ５６２的体外抑制作用。实验结果表明，六肽在７２ｈ内对骨髓瘤细胞的抑制率为３１％；多肽的结构对功能有一定的影响。根据竞争抑制原理，设计和合成多功能的多肽可为临床医学治疗肿瘤开辟一个新的途径。     

多肽C端衍生物的反向固相合成新方法

新设计了一种多肽C-端衍生物的合成方法。本方法结合了Fmoc-SPPS技术与TAEC技术的优点，室温反应，反应条件温和，易于监测，反应过程中所需采取的保护基最少，后处理简单高效，与正向固相合成互补，可高效地合成多种多肽以及多肽C-端衍生物。     

机械振荡对多态四膜虫胞口分化中多肽合成的影响

通过对~(35)S~-甲硫氨酸标记细胞的双向电泳表明,多态四膜虫Tetrahymena vorax小胞口细胞转化为大胞口细胞后,合成了大胞口特异类型的多肽。而且,机械振荡对于胞口类型分化的影响,也在于影响这些大胞口细胞形成所需的多肽。     

花生种子贮藏蛋白发育和萌发过程中17.5×103多肽的合成降解规律

目的 :分析花生球蛋白、伴花生球蛋白Ⅰ和伴花生球蛋白Ⅱ及其组成多肽的氨基酸组成 ,筛选高甲硫氨酸多肽并研究其在花生种子发育和萌发过程中的合成降解规律 方法 :花生球蛋白、伴花生球蛋白Ⅰ和Ⅱ经SephadexG - 10 0纯化后 ,再以制备电泳和电泳洗脱得到高纯度的 5种多肽 ;酸水解法测定了花生球蛋白、伴花生球蛋白Ⅰ和Ⅱ以及 5种多肽的氨基酸组成 ;WesternBlot分析了种子发育和萌发过程中 17 5× 10 3多肽的合成降解规律 结果 :花生球蛋白、伴花生球蛋白Ⅰ和Ⅱ以及 5种多肽均含有 17种氨基酸 (包括 8种必需氨基酸 ) ,其中天冬氨酸、谷氨酸和精氨酸含量为最高 ,约为总量的 4 5% ;而甲硫氨酸含量水平都极低 在这 5种多肽中 ,17 5× 10 3多肽的甲硫氨酸含量最高 17 5× 10 3多肽在花生种子发育早期开始合成 ,而在种子吸涨 60h时发生降解 结论 :17 5× 10 3多肽的甲硫氨酸含量最高 ,在花生种子发育和萌发过程中它的合成降解规律与花生球蛋白和伴花生球蛋白Ⅰ不同     

固相多肽合成综述

多肽是非常重要的生物活性物质,其化学合成有着很重要的意义。近年来,由于固相多肽合成省时、省力、省料、便于计算机控制等优点尤为突出,得到大力发展。本文综述了固相合成的基本原理、实验过程,对其现状进行分析并展望了今后的发展趋势。     

穿膜肽TAT-PTD的固相合成及其与DNA相互作用的研究

通过N-芴甲氧羰基(N-fluorenylmethoxycarbonyl,Fmoc)作为α-氨基的保护基,以逐个延伸的固相合成法合成TAT-PTD多肽,运用高效液相色谱和质谱鉴定合成多肽的纯度和相对分子质量。通过紫外吸收光谱和琼脂糖凝胶电泳阻滞实验研究合成的TAT-PTD多肽与质粒DNA相互作用,实验表明TAT-PTD多肽与质粒DNA可以通过静电作用相互吸引、靠近并结合,于是为下一步小单孢菌基因工程的细胞转导提供了依据。     

新N3S型配位结构的小肽分子合成及其合成方法研究

通过5步反应设计合成了5个新N3S型配位原子的小肽或类肽化合物.探讨了多肽的合成方法,改进了巯基的保护策略,提出了新颖的活泼酯与氨基酸的反应条件,与文献值相比反应收率提高了35%. 5种多肽配体的结构经过IR,1HNMR,13CNMR,MS或元素分析的确证.     

抗人Cx31第234位磷酸丝氨酸抗体的制备

利用磷酸化多肽合成技术合成Cx31羧基端磷酸多肽片段（CSPSSSApSRAST），经HPLC纯化、质谱证实后偶联到匙孔槭血蓝蛋白，免疫新西兰雄兔后采血检测、并经过特异性纯化、经Western blotting检测，证实得到的抗体为抗间隙连接蛋白31第234位丝氨酸的特异抗体．     

细胞粘附肽Arg-Gly-Asp的合成与生物活性检测

采用固相多肽合成法合成Ag-G ly-Asp(RGD)三肽,以天门冬氨酸计RGD三肽收率为75%,采用MTT法进行合成肽RGD抑制人纤维肉瘤细胞HT1080转移机理方面的研究,证实了人工合成的RGD肽能抑制人纤维肉瘤细胞HT1080与纤维连接蛋白(FN)的粘附。     

细胞粘附肽Arg-Gly-Asp的合成与生物活性检测

采用固相多肽合成法合成Ag-Gly-Asp(RGD)三肽,以天门冬氨酸计RGD三肽收率为75%,采用MTT法进行合成肽RGD抑制人纤维肉瘤细胞HT1080转移机理方面的研究,证实了人工合成的RGD肽能抑制人纤维肉瘤细胞HT1080与纤维连接蛋白(FN)的粘附.     

抗人Connexin31单克隆抗体的获得与应用

间隙连接蛋白31(Connexin31,Cx31)是间隙连接蛋白(Connexin)家族的一员,目前对于Cx31的功能及其调节方式知之甚少。本实验利用多肽合成的方法合成Cx31羧基端一个多肽片段(250-266AA),经HPLC纯化后偶联到匙孔槭血蓝蛋白,免疫Balb/c小鼠、采血检测产生阳性抗体、脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合、筛选阳性克隆建株、分泌的抗体经Westernblotting、细胞免疫荧光染色证实得到的抗体为抗间隙连接蛋白31的特异抗体。     

花生种子贮藏蛋白发育和萌发过程中17.5＊1 …

目的：分析花生球蛋白、伴花生球蛋白Ⅰ和伴花生球蛋白Ⅱ及其组成多肽的氨基酸组成,筛选高甲硫氨酸多肽并研究其在花生种子发育和萌发过程中的合成降解规律。方法：花生球蛋白、伴花生球蛋白Ⅰ和Ⅱ经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００纯化后,再以制备电泳和电泳洗脱得到高纯度的５种多肽;酸水解法测定了花生球蛋白、伴花生球蛋白Ⅰ和Ⅱ以及５种多肽的氨基酸组成;ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ分析了种子发育和萌发过程中１７．５＊１０＾３多     

含有甘氨酸和L-脯氨酸多肽的转角结构研究

肽链转角结构的形成与其结构中分子内氢键的存在有着直接关系,可通过检测肽链中分子内氢键的存在情况对肽链转角结构进行研究。为了深入研究具有转角结构的肽类化合物,以甘氨酸、L-脯氨酸为原料,叔丁氧羰基和苯胺为封端基团,在HBTU,HATU缩合剂的作用下制备了2种三肽和3种四肽。通过1 H NMR,IR及MS对合成产物进行结构表征,用核磁共振等梯度变温氢谱实验对合成的多肽分子内氢键进行检测,用~1H-~1H NOE对形成的分子内氢键的羰基位置进行推测。实验表明:在合成的5种多肽中,有3种多肽形成了分子内氢键,2种未形成。在形成分子内氢键的多肽中都有-Gly-L-Pro-Gly-片段,而只有-L-Pro-Gly-或-Gly-L-Pro-片段的多肽未形成分子内氢键;形成分子内氢键的羰基位置为与苯胺氮氢相连的羰基,形成分子内氢键的氮氢位置为与叔丁氧羰基相连的氮氢。     

燕麦多肽数据库及降血糖活性的虚拟筛选

为了深入研究燕麦多肽中可能发挥降血糖功能的活性多肽分子，本文首先从文献中调研了从燕麦中提取鉴定得到的多肽，构建了对应的燕麦多肽数据库，并基于DPP4蛋白对多肽数据库进行了虚拟筛选.随后，针对筛选获得的6个多肽分别进行了100 ns的分子动力学模拟.从模拟之后稳定结合的构象分析了不同多肽分子与DPP4的相互作用信息，并分别计算了不同多肽分子与DPP4的结合自由能.结果表明，从燕麦多肽数据库中筛选得到的多肽可以与DPP4蛋白稳定结合，其中2个多肽分子与DPP4的亲和力相对较强.本文得到的多肽分子可以作为后续DPP4抑制剂设计和改造的先导分子，燕麦多肽数据库也可用于研究燕麦的其他生物学功能.     

间质胶原酶活性中心肽段的制备与表征

利用Fmoc固相合成法合成了一种基质金属蛋白酶—间质胶原酶（MMP-1）活性中心的肽片段,通过RP-HPLC对粗肽进行纯化得到了高纯度的多肽,经电喷雾质谱、^1HNMR进行了表征.实验结果表明,Fmoc法合成粗肽的产率为76.0%,纯度为86.5%,经RP-HPLC纯化后纯度达到99.1%.     

低聚糖和多肽联合补充对大鼠糖原代谢的影响

研究了联合补充低聚糖和多肽对中等强度长时间运动后大鼠肌糖原及肝糖原代谢的影响.结果表明:运动前补充低聚糖和多肽能显著节约体内肌糖原的使用;运动后慢肌糖原合成过程中存在先快后慢的恢复规律;运动前及运动后即刻结合补充低聚糖和多肽能显著促进运动后肝糖原的恢复;在运动后慢肌糖原恢复过程中,肝糖原先于肌糖原恢复.     

遗传密码的由来

从生物学角度阐明遗传密码的由来,首先是用酶促(成)合成PolyU作模板,合成了多肽多聚苯丙氨酸,打开遗传密码的突破口.相继用顺序随机的共聚物作模板,又测出很多密码子.通过三联体结合测定法,发现了核糖体结合技术,解决了密码子该苷酸顺序问题.总之,用外源RNA作多肽链合成的模板,为遗传密码的阐明,提供了一个强有力的手段,并导致著名的遗传密码表的确定.     

天然多肽分离方法及其应用前景

综述了近几年来多肽物质主要分离方法,主要包括高效液相色谱法、电泳等方法,并概述了多肽在多肽药物、多肽食品、及多肽护肤品方面的应用。