重组腺病毒介导的基因转移系统的建立以及在离体及活体中表达

首先建立了重组腺病毒载体介导的基因转移系统：将质粒ｐＡｄＣＭＶｌａｃＺ用磷酸钙沉淀法转移至２９３腺病毒包装细胞中，经挑克隆、病毒扩增、纯化、浓度和滴度测定，制备了纯化的病毒颗粒ＡｄＣＭＶｌａｃＺ；以此感染离体细胞，ｌａｃＺ基因转移效率可达９０％￣９５％；小鼠被直接活体注射重组的腺病毒ＡｄＣＭＶｌａｃＺ，ｌａｃＺ基因能够在多种组织中表达。其次，运用重组腺病毒介导的基因转移系统，进行了人凝血因子ⅨｃＤ     

CVD 矩阵与 n-宽度的(p,q)问题

证明了ｄ２ｋ＝δ２ｋ＝ｄ２ｋ≥ｂ２ｋ，其中ｄ２ｋ、δ２ｋ、ｂ２ｋ分别表示Ａ（ＢＭｐ）在ｌＮｇ中的ｋｏｌｍｏｇｒｏｖ、线性、Ｂｅｒｎｓｔｅｉｎ型２ｋ－宽度，ｄ２ｋ表示ＡＴ（ＢｌＮｑ′）在ｌＭｐ′中Ｇｅｌ′ｆａｎｄ型２ｋ－宽度，这里Ａ（ＢＭｐ）＝｛Ａｘ：ｘ∈ＡｌＭｐ，‖ｘ‖ｐ≤１｝，其中Ａ是一个Ｎ×Ｍ的ＣＶＤ矩陈（Ｎ＞Ｍ＝ｒａｎｋＡ，Ｍ是奇数），１ｐ＋１ｐ′＝１，１ｑ＋１ｑ′＝１（１≤ｑ≤ｐ＜＋∞，ｐ≠１）．     

腺病毒同源重组子的鉴定

携带入ＩＦＮ－γｃＤＮＡ序列的Ｅ１区缺失的腺病毒载体ｐＡｄｌ２／ＲＳＶ－ＩＦＮ－ｂｐＡ与ｐＪＭ１７质粒，通过磷酸钙沉淀法共转染２９３细胞，经同源重组，共获得６个病毒噬斑。病毒噬斑感染２９３细胞，至出现完全细胞病变效应（ＣＰＥ）后，抽提细胞内的病毒ＤＮＡ，经ＸｈｏⅠ酶切后走凝胶电泳，出现重组腺病毒圾的３．５ｋｂ大小的ＤＮＡ条带，＾３２Ｐ标记的探针ｐＡｄｌ２／ＲＳＶ－ＩＦＮ－ｂｐＡ与ＸｈｏⅠ酶切过的病     

野生型p53基因重组体腺病毒介导的肿瘤抑制作用

采用同源重缚方法构建了野生型ｐ５３全长ｃＤＮＡ的重组体腺病毒，通过转导人卵巢癌细胞系ＳＫ－ＯＶ－３和黑色素瘤细胞系ＷＭ－９８３Ａ，证实腺病毒能介导ｐ５３基因进行有效转移，并能显著抑制这两种肿瘤细胞的生长和集落形成能力，生长抑制率分别这到９３％和８６％，对两种肿瘤细胞裸鼠皮下移植瘤的治疗实验表明，ｐ５３能明显抑制肿瘤的生长，流式细胞计数ＤＮＡ片段化及ＴＵＮＥＬ分析证实，Ｐ５３可诱导肿瘤细胞凋亡和Ｇ１     

CVD矩阵与l_p中的n－宽度

证明了ｄ２ｋ＝ｄ２ｋ＝δ２ｋ，其中ｄ２ｋ、ｄ２ｋ、δ２ｋ分别表示在中的Ｋｏｌｍｏｇｏｒｏｖ，Ｇｅｌ’ｆａｎｄ和线性型２ｋ－宽度，Ａ是一个Ｎ×Ｍ的ＣＶＤ矩阵（Ｎ＞Ｍ＝ｒａｎｋＡ，Ｍ是奇数），１＜ｐ＜∞．     

腺相关病毒介导带基因座控制区核心序列的β—珠蛋白基因在红？…

为提高人β－珠蛋白基因在基因转移中的稳定性与在红系细胞中的表达水平，构建了带单个和多个基因座控制区核心序列的人β－珠蛋白基因相关病毒（ａｄｅｎｏ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｖｉｒｕｓ，ＡＡＶ）载体ＡＶ５３ＨＳ２△β２Ｎｅｏ和ＡＶ５３ＨＳ４３２△β２Ｎｅｏ。利用ＡＡＶ载体介导的基因转移将两种重组体导入红系细胞（ＭＥＬ），分析了它们在ＭＥＬ细胞中的整合与表达。结果表明，ＡＡＶ载体介导带多个基因座控制区核心序     

带HSV－tk基因的重组腺病毒杀伤离体肺癌细胞的研究

带有单纯疱疹病毒脱氧胸苷激酶基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的腺病毒结合ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ（ＧＣＶ）对分裂细胞有很强的杀伤作用．在感染复数（Ｍ．Ｏ．Ｉ,ＭｕｌｔｉＰｌｉｃｉｔｙｏｆＩｎｆｅｃｔｉｏｎ）达到１０００时对人体肺腺癌细胞Ａ５４９的杀伤几乎达到１００％．四种人体肺癌细胞株（Ａ５４９,ＬＡＸ,ＳＰＣ,ＳＫＹ）对带ＨＳＶ－ｔｋ的腺病毒（ＡＤＶ／ＲＳＶ－ｔｋ）的杀伤作用表现出不同的敏感性．另Ａｃｙｃｌｏｖｉｒ（ＡＣＶ）和ＧＣＶ对感染了重组腺病毒ＡＤＶ／ＲＳＶ－ｔｋ的细胞都有一定杀伤作用,但杀伤效果有很大差别;就Ａ５４９而言,ＧＣＶ的杀伤作用比ＡＣＶ高７～８倍．此外ＡＤＶ／ＲＳＶ－ｔｋ结合ＧＣＶ杀伤肿瘤细胞时有“旁观者效应”,即感染了ＡＤＶ／ＲＳＶ－ｔｋ的细胞与未感染细胞混合后,后者也明显地遭到杀伤．     

用PCR扩增和克隆鸡贫血病毒衣壳蛋白VP2基因

接种鸡贫血病毒（ＣＡＶ）Ｃｕｘ－１毒株于ＭＤＣＣ－ＲＰ１细胞中,并用经狄高辛标记的ＣＡＶ衣壳蛋白ＶＰ１基因克隆ＤＮＡ作为探针在斑点杂交中检测和比较了各代细胞中ＣＡＶ ＤＮＡ水平。通过聚合酶链式反应（ＰＣＲ）,从ＣＡＶ ＤＮＡ水平较高的ＭＤＣＣ－ＲＰ１细胞基因组ＤＮＡ中扩增出ＣＡＶ衣壳蛋白ＶＰ２基因片段约６５０ｂｐ的编码序列,将该ＰＣＲ扩增的产物于ＥｃｏＲＩ和ＫｐｎＩ位点克隆到ｐＵＣ１９质粒载体中,     

人肝癌裸鼠移植癌株HHC_4、HHC_（15）分子病理学研究

厦门市同安地区已成为中国第二肝癌死亡率高发区。我们对从该地区建立的人肝癌裸鼠移植瘤株，（ＨＨＣ＿４、ＨＨＣ＿（１５））细胞ＤＮＡ进行分子生物学研究。应用ＰＣＲ方法，我们证明了ＨＨＣ＿４、ＨＨＣ＿（１５）癌细胞ＤＮＡ都有ＨＢＶＤＮＡ整合。通过ＤＮＡ测序，我们证明了ＨＨＣ＿４ＤＮＡ有ｐ５３基因第２５０密码子的突变；ＨＨＣ＿（１５）有ｐ５３基因第２４９密码子的突变。这为本地区肝癌死亡率与高ＨＢＶ高感率和／或黄曲霉素Ｂ＿１在食品中高污染率的关系提供有力的分子病理学证据。     

甲型肝炎病毒(H2株)在三种细胞中的感染性滴度比较

本文用恒河猴胚肾传代细胞（ＭＥＫ）、人胚肺成纤维二倍体细胞（ＫＭＢ１７和２ＢＳ）对ＨＡＶ－Ｈ２株感染性滴度进行了初步研究,结果显示Ｈ２株在ＭＥＫ上感染性滴度（ＣＣＩＤ５０／ｍＬ）最高,ＣＣＩＤ５０／ｍＬ比ＫＭＢ１７,２ＢＳ平均ＣＣＩＤ５０／ｍＬ高１．２８ｌｏｇ和１．５９ｌｏｇ．经统计学分析,Ｐ＜０．０５,有显著性差异,证实ＭＥＫ对Ｈ２株最敏感．ＭＥＫ可能是测定ＨＡＶ感染性滴度和繁殖ＨＡＶ较理想的细胞     

两种4-N,N-二甲氨基偶氮苯-4~′-磺酸酯衍生物的合成及其在极化聚合物薄膜中d_(33)的测定

报道了两种４－Ｎ，Ｎ－二甲氨基偶氮苯－４′－磺酸酯衍生物的合成，获得了其主客及侧链极化聚合物薄膜的ｄ３３值（４ｐｍ／Ｖ，９ｐｍ／Ｖ）；它们分别高于目前研究较多的ＤＲ－１／ＰＭＭＡ（主客，２．５ｐｍ／Ｖ）、ＣＥＭ－ＭＭＡ（侧链，５．６３ｐｍ／Ｖ）的对应值，并探讨了其影响因素     

维生素E及其与维生素C,维生素B2联用对小鼠抗 …

研究了维生素Ｅ（ＶＥ）及其与维生素Ｃ（ＶＣ）,维生素Ｂ２（ＶＢ２）联用对小鼠机体抗氧化机能的影响。结果表明,对小鼠单独饲喂ＶＣ或ＶＥ,ＶＣ,ＶＢ２联合饲喂,均能显著提高小鼠心、肝组织超氧化歧化酶（ＳＯＤ）的活性作用;单独饲喂ＶＥ,ＶＣ或ＶＥ,ＶＣ,ＶＢ２联合饲喂,其肝脏丙二醛（ＭＤＡ）含量均低于对照组,差异非常显著,肝脏ＳＯＤ／ＭＤＡ和ＧＳＨ－Ｐｘ／ＭＤＡ比值升高;单独饲喂ＶＣ组ＧＳＨ－Ｐｘ／ＭＤ     

铜氧化物的晶体结构参量与超导电性

以ｄＡ（ＣｕＯ２面上Ｃｕ（Ｐ）和项角氧Ｏ（Ａ）键长）对Ｖｄ［沿Ｃｕ（Ｐ）－Ｏ（Ａ）键和沿Ｃｕ（Ｐ）－Ｏ（Ｐ）键方向一个空穴的平均Ｍａｄｅｌｕｎｇ位势差］做图，发现所有铜氧化物超导体的转变温度和结构参量存在一确定的变化规律，不同超导系统被明显地分离开来，Ｔｃ既随ｄＡ也随Ｖｄ的增大而增大．本文从晶体结构的角度分析了产生该现象的原因．     

反义p21Cip1抑制RA诱导人白血病细胞HL—60的分化

全反式维甲酸（ＲＡ）可诱导缺乏内源ｐ５３基因的人白血病细胞ＨＬ－６０的粒细胞分化,在此过程早期,人ｐ２１周期蛋白依赖激酶抑制因子（Ｃｉｐ１）的表达即有所增加,并且不依赖ｐ５３。将反应ｐ２１ＣｉＰ１重组质粒转染进ＨＬ－６０细胞,建立锌调表达反义ｐ２１Ｃｉｐ１的细胞系ＨＬＡＣ,再用ＲＡ诱导,发现反义ｐ２１Ｃｉｐ１可部分抑制ＨＬ－６０细胞的分化,而此时ＣＤＫ４和ｃｙｃｌｉｎＤ３的表达在ＨＬＡＣ中明显增加     

红细胞生成素(EPO)在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中稳定表达

将ＥＰＯｃＤＮＡ分别插入真核表达质粒载体ｐＳＶ２ｄｈｆｒ和ｐｃＤＮＡ３的适当位点,用电脉冲法导入ＣＨＯ细胞,用ＥＬＩＳＡ法检测ＥＰＯ的表达量,用ＴＦ１细胞检测ＥＰＯ表达产物的生物活性．结果表明,用ｐＳＶ２ｄｈｆｒ作为载体,在抗ＭＴＸ阳性细胞克隆中,获得了表达ＥＰＯ（２５８ｎｇ／ｍＬ培养液）的ＣＨＯ细胞株,并且表达产物具有生物活性．进一步的传代和冻存试验表明,所得细胞株表达ＥＰＯ的水平不受传代和冻存的影响     

小鼠金属硫蛋白基因—I在CHO细胞中稳定表达及其在医疗…

将小鼠的ＭＴ－Ｉ基因插入ｐＳＶ２－ｄｈｆｒ质粒的ＥｃｏＲＩ位点，构建了具有ＳＶ４０和ＭＴ双启动子并正向插入ＭＴ－Ｉ基因的表达载体。用改良的磷酸钙／ＤＮＡ沉淀法将表达载体导入ＣＨＯ－ｄｈｆｒ＾－细胞内，用不含次黄嘌呤（Ｈ）和胸腺嘧啶（Ｔ）的选择培养基筛选出稳定表达ＭＴ阳性克隆Ｄ－２２，经检测１０＾６细胞的ＭＴ表达量约为１．８μｇ，Ｄ－２２细胞对Ｃｄ＾２＋浓度抗性较之ＣＨＯ－ｄｈｆｒ＾－细胞高１４倍。     

关于在d维超晶格上D矢量模型临界温度的解析研究

关于在ｄ维超晶格上Ｄ矢量模型临界温度的解析研究＠苟兴华关于在ｄ维超晶格上Ｄ矢量模型临界温度的解析研究宋永焱木苟兴华（物理系）ＡＮＡＮＡＬＹＴＩＣＡＬＳＴＵＤＹＯＮＣＲＩＴＩＣＡＬＴＥＭＰＥＲＡＴＵＲＥＯＦＤ┐ＶＥＣＴＯＲＭＯＤＥＬＯＮＴＨＥｄ┐ＤＩＭＥＮＳ...     

关于EC－半群的分类

证明了ＥＣ－半群在同构意义上有下列几类：（ａ）Ｍ（４，１），Ｃ２，Ｃ４，Ｃｐ；（ｂ）３或４阶半群；（ｃ）零半群，左零半群，右零半群；（ｄ）Ｃ２×Ｃ２，Ｆ４；（ｅ）（Ｌ，Ｒ）；（ｆ）（Ｓ，Ａ）；（ｇ）（Ｌ，Ｒ，Ａ，ψ）．其中，每一类ＥＣ－半群的结构都得以刻划．     

眼镜蛇膜毒素与单克隆抗体偶联物对鼻咽癌细胞的？…

应用柱层析和凝胶过滤的方法，从中华眼镜蛇的粗毒中分离纯化出一个不含磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）的膜毒素（Ｍｅｍｂｒａｎｅ ｔｏｘｉｎ，ＭＴ）组分。ＭＴ经电泳鉴定为单一成分。将ＭＴ与鼠抗人鼻咽癌细胞（ＣＮＥ２）的单克隆抗体（ＢＡＣ５）偶联制备成免疫毒素（ＢＡＣ５－ＭＴ），经间接免疫荧光检测，证实免疫毒素仍保留了很好的生物活性。体外抗癌实验证明，在无Ｃａ＾２＋培养其中，游离的ＭＴ对ＣＮＥ２和Ｓ１８０细胞均有     

人rabl3基因克隆和表达

以人的胚胎ｃＤＮＡ为模板，用ＰＣＲ方法筛选获得ｒａｂ１３基因，并克隆到真核表达载体ｐｃＤＮＡ３和原核表达载体ｐＧＥＸ、ｐＥＴ－１５ｂ和ｐＭＡＬ－ｃ２中，把ｒａｂ１３基因转染入牛肾上腺毛细血管内皮细胞（ＢＣＥ细胞）中，免疫荧光染色显示Ｒａｂ１３定位于ＢＣＥ细胞胞质内膜性细胞器上，在为ｒａｂ１３基因对膜通道调节功能的进一步研究打下了基础。