C_(57)BL/6小鼠繁殖性能的观察与研究

C57BL/6纯系小鼠生殖能力较低,为提高受孕率,对其生殖性能进行了研究。结果表明:性周期动情期的鉴定是提高小鼠受孕率的关键;自然交配的受精卵质量比超数排卵的好,产仔成活率高,但超数排卵仍是一种良好的获得更多受精卵的辅助办法;光照、温度、噪音、湿度、营养等因素对小鼠性周期影响很大。     

热应激对 ICR 雌性小鼠超数排卵及卵泡发育的影响

摘要:目的 探讨短期热应激对小鼠超数排卵和卵泡发育的影响。 方法 取超数排卵处理后体质量近似的 7 ~ 8 周龄 ICR 雌性小鼠 20 只,随机分为对照组和热应激组,每组 10 只,饲养于屏障环境内。 热应激组小鼠放入 38 ℃ 的生化培养箱中,热应激处理 10 h,期间自由采食和饮水。 热应激结束后,将小鼠放回屏障设施内饲养,持续 6 d,6 d后,进行超数排卵处理并处死小鼠,获取小鼠输卵管内卵子以及卵巢。 结果 热应激组小鼠超排卵数高于对照组( P<0. 05) 。 对卵巢切片进行苏木素-伊红( HE)染色后,观察发现热应激组小鼠的总卵泡数和黄体数均明显高于对照组( P<0. 01) 。 热应激组小鼠的卵泡闭锁率高于对照组,但无明显差异( P> 0. 05) 。 结论 热应激严重影响小鼠的繁殖机能,尤其是卵泡的发育过程。     

小鼠胚胎移植实验方法

目的在小鼠胚胎移植实验中除了胚胎的质量外,希望从受体状况及胚胎移植的技术和方法上摸索出最佳胚胎移植的条件,提高胚胎移植率,为临床胚胎移植提供实验和理论数据。方法从超数排卵或自然发情怀孕3.5 d的母鼠子宫内收集胚胎,在显微镜下观察,以最快的速度将发育与胚龄一致并且形态完好的胚胎捡出,并移植到自然发情2.5 d的小鼠子宫内。结果超数排卵的胚胎质量比自然发情的胚胎质量差,在12个自然发情的受体中有3个怀孕并产下12只仔鼠。结论小鼠胚胎移植与供受体的准备、小鼠的超数排卵、胚胎品质有着密切的关系,胚胎移植的技术和方法对胚胎移植有着至关重要的关系。     

几种常用实验动物的超排比较

随着对动物胚胎研究的不断发展,哺乳动物的卵及早期胚胎获取,以及包括体外培养在内的各项实验技术也已日趋成熟和完善。目前,能够获得大量胚胎来源的方法仍为超数排卵,完善的超数排卵技术依然是胚胎移植成功的先决条件。本实验应用国产激素PMSG+HCG的组合对8只家兔、20只短尾仓鼠和25只昆明小鼠进行了超数排卵处理。以昆明小鼠为主,通过比较,系统研究了不同动物、激素剂量、发情周期以及动物本身体质、季节、人工饲养环境等因素对超排效果的影响。     

DAP 玻璃化冷冻液对小鼠2-细胞胚胎的冷冻保存

摘要: 目的探索和优化小鼠2-细胞胚胎冷冻效果,建立小鼠胚胎冷冻保存技术以及超低温保存模型动物胚胎实验室所需的相关技术。方法选择3 个品系( C57BL/6、ApoE － / －、NOS3 － / － ) SPF 级4 周龄雌性小鼠,运用超数排卵、体外受精、玻璃化冷冻法,以及二细胞期胚胎复苏、体外培养等技术方法,观察上述实验效果。结果C57BL/6、ApoE － / －、NOS3 － / － 3 个品系小鼠超数排卵平均值分别为42. 98 个/只、27. 93 个/只、23. 11 个/只,体外受精2-细胞期胚胎率分别为68. 79%、32. 70%、23. 08 %,胚胎冷冻复苏后胚胎回收率72. 77%、80. 87%、83. 33%,存活率分别为56. 92%、54. 84%、70%,存活胚胎体外培养发育到囊胚比率分别为72. 37%、60. 78%、25%。结论选择4 周龄小鼠,按预定相同的技术方法做超数排卵、体外受精、胚胎冻存、胚胎复苏,呈现出较好效果,C57BL/6 小鼠优于基因工程小鼠,基本建立起小鼠2-细胞胚胎冷冻保存技术。     

雌性Wistar大鼠、NIH小鼠性周期血清激素含量分析

目的通过测定Wistar大鼠和NIH小鼠性周期各期及超排后血清生殖激素雌二醇(E2)、促黄体生成激素(LH)和促卵泡生成激素(FSH)的含量,比较不同性周期实验动物的血清性激素水平,研究动物血清性激素随性周期变化的规律。方法用阴道涂片法判定动物的性周期阶段并进行分组,用放射免疫分析法测定各组动物血清E2、LH和FSH的含量,进行统计学处理和分析。结果Wistar大鼠和NIH小鼠E2各时期间无显著差异;LH以超排组最高,与其他各组比较有极显著差异(P<0.01);FSH在动情后期最高,与各组比较有极显著差异(P<0.01)。结论雌性大、小鼠的血清生殖激素在性周期的不同阶段其含量呈规律性变化,超排后动物血清LH的分泌增加,以促进卵子的排出和黄体的形成。     

"蚯蚓活性蛋白"对BALB/c小鼠生殖生理功能的影响

将蚯蚓活性蛋白作为饲料添加剂加入纯系小鼠特定饲料，饲喂BALB／C小鼠六个月。加入蚯蚓活性蛋白的饲料，提高了仔鼠体重增长率及母鼠受孕率，可缩短了母鼠离乳后再孕的时间间隔，并且还提高了母鼠的抗疲劳能力。     

超数排卵与采卵对供体牛产奶量及繁殖性能影响的实验研究

目前,超数排卵和胚胎移植技术是良种奶牛快速扩繁的最佳手段和途径,但有人担心超数排卵、采卵等不良刺激会对供体牛的产奶量和繁殖性能产生不良影响.2003-2004年对90头供体牛超数排卵和采卵后的繁殖情况和产奶量进行了记录,并与未经超排的成乳牛和育成牛进行比较,发现超数排卵与采卵对供体牛的产奶量和繁殖性能均无显著影响.     

重组人促性腺激素对小鼠排卵影响的机理

探讨不同剂量和组合的重组人促性腺激素对小鼠卵泡发育和排卵的影响及其与小鼠血清中雌、雄激素水平变化的相互关系.实验采用DNA重组技术合成的重组人促性腺激素对性成熟前雌性昆明白小鼠(22～24日龄)以不同剂量和组合进行超数排卵处理,结果表明,一定剂量和组合的重组促性腺激素的处理对小鼠卵泡的发育和血清中雌、雄激素水平产生较大影响,卵泡的正常发育及最终的排卵要求一定的重组人卵泡刺激素(r-hFSH)、重组人促黄体生成素(r-hLH)、重组人绒毛膜促性腺激素(r-hCG)的配比组合和相应的剂量范围.重组促性腺激素处理后小鼠卵泡的发育和排卵与雌、雄激素生成的量有关.     

Smad2基因敲除小鼠冷冻胚胎库的建立

目的 建立Smad2基因敲除小鼠胚胎库。方法 利用OPS法对Smad2基因敲除小鼠胚胎进行玻璃化冷冻保存,并比较不同杂交组合小鼠的超数排卵数、解冻胚胎的复苏率及发育率。结果 两组不同杂交组合（Smad2^＋/－♂×Smad2^＋/－♀和Smad2^＋／－×Smad2^＋／－♀）小鼠平均超排卵数分别为14．13枚和24．60枚;复苏率分别为90．16％和91．67％;囊胚发育率分别为73．08％和77．05％。这些结果表明Smad2基因敲除杂合子母鼠的超排数量明显低于野生型母鼠的超排数量,而二者胚胎解冻后的复苏率和囊胚发育率没有显著差异。因此我们主要通过对野生型小鼠超数排卵,然后与Smad2基因敲除杂合子雄鼠交配的方法获取胚胎,进行玻璃化冷冻保存,现已冻存胚胎1256枚。结论 成功建立了Smad2基因敲除小鼠胚胎库。     

基因工程小鼠制备和保种、育种技术研究

摘要: 本文从小鼠的超数排卵、采集胚胎、原核受精卵显微注射、胚胎移植、基因型鉴定等多个环节,详细阐述制备基因工程小鼠的技术操作要领; 通过实施辅助生殖技术IVF( 体外受精) 、精子和胚胎的冷冻、复苏技术实现了基因工程小鼠的保种和育种,涉及相关技术的要点改进和操作体会,成功建成了基因工程小鼠的制备和保种、育种平台,提供了良好的技术服务。     

昆明小鼠胚胎移植技术的研究

目的研究不同时期胚胎对胚胎移植成功率的影响,以提高胚胎移植率。方法采用经超数排卵的KM雌鼠与正常615雄鼠交配,取受精卵,分别将1-细胞胚、2-细胞胚和桑椹胚、囊胚分别移入发情的假孕KM雌鼠的输卵管和子宫中,妊娠产仔。结果移入1-细胞胚、2-细胞胚、桑椹胚和囊胚的假孕母鼠妊娠率分别为36.36%、42.86%、10%、27.27%,产仔率分别为46.58%、38.46%、58.33%、60%。结论2-细胞胚的移植可提高小鼠的胚胎移植成功率,子宫移植可提高小鼠的产仔率。     

小鼠转基因及传代研究

综述了湖北省农科院生物技术研究所近年来有关转基因小鼠的主要研究进展。应用原核注射技术 ,将POMT PGH、hDAF、pBHSA、pSHSA、PT HBV 1 3、Bcl xL、hCD5 9、hCD5 9+hMCP等 8种外源基因 ,注入并移植 4 874枚小鼠的受精卵 ,得到 5 5 6只小鼠 ;经PCR和Southern杂交检测 ,确认原代转基因小鼠 10 8只。基因整合率平均 19.4 % ,转基因效率平均 2 .2 %。应用混合注射的方法得到了转双基因小鼠 ,双基因共整合率 2 2 .2 %。表达外源蛋白的转基因小鼠在 5 0 %～ 10 0 %之间。研究了小鼠的超数排卵和影响转基因效率的几个因素。通过转Bcl xL小鼠与非转基因小鼠连续五个世代的传代交配和检测 ,研究了转基因小鼠外源基因的遗传规律 ,表明四只原代小鼠中 ,只有一只能稳定地将外源基因传递给后代。并非所有的转基因小鼠都具有遗传的稳定性 ,欲建立小鼠的转基因品系 ,尚需对原代转基因小鼠进行筛选。     

小鼠早期胚胎不同移植方法的建立

目的建立小鼠胚胎移植技术,探索小鼠胚胎输卵管伞部移植、输卵管剪口移植和子宫移植技术要点,为进一步将该项技术应用到生物净化等领域提供参考数据。方法对4周龄C57BL/6雌性小鼠采用腹腔注射7.5 IUPMSG(孕马血清促性腺激素),48 h后腹腔注射7.5 IU HCG(人绒毛膜促性腺激素)进行超数排卵处理,并与C57BL/6雄鼠合笼,分别在见栓0.5 d、1.5 d和3.5 d取出相应胚胎,对所得胚胎进行筛选,将质量较好的胚胎选出,并将相应胚胎阶段(单细胞、2细胞、囊胚)移入同期发情并经KM结扎雄鼠交配刺激后见栓的KM假孕小鼠输卵管或子宫内,待妊娠生产后得到移植小鼠。结果对88只4周龄雌性C57BL/6小鼠进行超数排卵处理,见栓62只,共取得单细胞胚胎510枚、2细胞期胚胎400枚、囊胚35枚,采用输卵管伞部移植、输卵管剪口和子宫移植,共移植假孕母鼠43只,妊娠生产39只,产仔361只。结论输卵管伞部移植与输卵管剪口移植比较无显著差异,输卵管伞部移植对动物伤害较小,但对术者要求较高;输卵管剪口移植操作较快捷,但对动物损伤较大;子宫移植的妊娠效果最好,处于这一阶段的胚胎极易着床。     

甲状腺机能亢进症性周期性麻痹临床分析

对甲状腺机能亢进症性周期性麻痹的诱因、临床表现、实验室检查、诊断、治疗及转归等作一扼要综述.     

海带和裙带菜对鼠乳腺发育调控的研究

利用组织学技术研究海带（Laminaria japonica Aresch）和裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.）在昆明系小鼠乳腺发育过程中的作用时发现，海带和裙带可明显提高鼠的受孕率，是对照组的2．5倍；刺激和加速乳腺上皮繁殖产生许多新的腺泡，这些腺泡的细胞在短时间内不断分裂，体积不断增大，细胞变为柱状或锥形，泡腔内储量有大量的乳汁。这种调节作用使乳腺快速进入授乳期。     

激素剂量、小鼠品系及周龄对超数排卵的影响

目的采用孕马血清促性腺激素（PMSG）和人促绒毛膜性腺激素（hCG）对不同品系和周龄小鼠进行超数排卵处理,比较激素（PMSG/hCG）注射剂量、小鼠品系和周龄对超排效果的影响,以便获得比较优良的超排方法。结果 1）激素剂量为PMSG（10 IU/只）＋hCG（10 IU/只）的超排效果优于PMSG（5 IU/只）＋hCG（5 IU/只）,但无显著差异（P〉0.05）;2）相同剂量时I,CR小鼠和C57BL/6J小鼠的超排效果显著优于BALB/c小鼠和FVB小鼠（P〈0.05）;3）5周龄与8周龄的小鼠比较,8周龄超排效果较好,但差异不显著（P〉0.05）。结论采用10 IUPMSG＋10 IU hCG的组合对8周龄的ICR、C57BL/6J进行超排处理效果相对较好。     

亮菌多糖对S180荷瘤小鼠免疫功能的研究

通过对荷瘤小鼠腹腔注射亮菌多糖后,观察其对荷瘤小鼠淋巴细胞增殖反应、NK细胞活性及对IL-1、IL-2、TNF-α、IFN-γ诱生的影响.研究结果表明：亮菌多糖能够显著提高荷瘤小鼠NK细胞杀伤活性、对ConA刺激的小鼠淋巴细胞有明显的促进作用,提高荷瘤小鼠脾细胞产生IL-2的能力;促进荷瘤小鼠机体细胞分泌TNF-α;明显提高荷瘤小鼠血清中IFN-γ的含量.提示亮菌多糖可通过调节机体免疫功能而间接起到抗肿瘤的作用.     

CXA-1重组近交系小鼠全价颗粒饲料研究初报

根据国家标准和有关文献,作者设计了饲喂CXA－1系小鼠的颗粒饲料（蚌医新配方）,颗粒料直径12mm,饲料中粗蛋白质、脂肪、粗纤维、钙、磷含量分别为20.5％、9.2％、5％、1.35％、0.83％。其它营养成份含量均在标准范围内。饲喂结果表明,其受孕率、窝产仔数、离乳存活率等标准超过（蚌医旧配方）。经7年育种饲喂,能满足培育新品系小鼠饲养繁殖的需要,已基本得到全价营养的要求。     

一类高阶脉冲时滞微分方程的周期解

利用拓扑度理论对一类高阶非线性脉冲泛函微分方程进行了探讨.研究表明在适当的线性周期脉冲扰动下,该脉冲时滞方程保持了原非脉冲时滞方程的周期性,也推广了相关结论.