金属硫蛋白研究进展

介绍了金属硫蛋白的结构、理化性质和主要功能，金属硫蛋白转录与表达，并对国内外金属硫蛋白与锌、铅、镉、钙的代谢研究，金属硫蛋白与辐射关系，肿瘤的发生、治疗及预后的一些进展进行了介绍，说明了金属硫蛋白有着广阔的应用前景。     

金属硫蛋白的研究进展

 金属硫蛋白是一类广泛存在于生物体内的多功能诱导性蛋白.作者对近年来在金属硫蛋白的结构、分类、功能及测定方法等方面研究取得的进展做了简要的介绍,同时提出了一些金属硫蛋白研究中存在的问题,并对金属硫蛋白将来可能的应用前景进行了展望.     

通州区：聘请专家指导项目进展

近日，通州区科学技术委员会、区生产力促进中心聘请“生物提取猪肝金属硫蛋白技术”专利发明人亲临生物体取猪肝金属硫蛋白技术的产业化基地，进行技术指导。此次专家的到访为“生物体取猪肝金属硫蛋白技术的引进与产业化开发”项目提供了技术支持和具体实施方案。     

利用菲律宾花蛤的金属硫蛋白作为镉污染的检测指标

以菲律宾花蛤Ruditapes philippin Adams et Reave为实验动物,分别提取其外套膜和内脏团等组织的金属硫蛋白,经Sephadex G-75葡聚糖柱层析纯化后,用DV-600紫外可见分光光度计测定每个样品金属硫蛋白的吸收值,以研究菲律宾花蛤体内的金属硫蛋白浓度与镉污染之间的关系.结果表明:诱导实验能使检测菲律宾花蛤的内脏团和外套膜的金属硫蛋白含量均明显增加;金属硫蛋白的吸收值与菲律宾花蛤重量、壳长、壳宽均有较大的相关性.从这些关系中,认为利用金属硫蛋白作为菲律宾花蛤镉污染的检测指标是可行的.     

金属硫蛋白的研究进展

本对近年来金属硫蛋白的结构,特性和功能及其分子生物学的国内外研究进展作一综述,讨论了金属硫蛋白与医学的关系,提出了有待研究解决的问题,展望了其应用前景。     

家兔肝的金属硫蛋白的分离和纯化

往皮下注射氯化镉诱导家兔产生金属硫蛋白;取其肝制成匀浆,用无水乙醇和氯仿沉淀杂蛋白,再用三倍体积乙醇沉淀出金属硫蛋白粗品;通过Sephadex G-75柱层析和DEAE-Sephadex A-50离子交换层析,获金属硫蛋白-A和-B纯品。将所得的纯品用原子吸收光谱测定镉离子含量、用高效液相色谱测定纯度、用氨基酸组成分析仪分析氨基酸组成。     

水稻金属硫蛋白ricMT的一级结构特征分析

为了获得水稻金属硫蛋白 ric MT的一级结构特征 ,通过等电点和蛋白稳定性预测 ,初步判断 ric MT蛋白是一个不稳定的酸性蛋白 ;并用 ric MT氨基酸序列对 EMBL 蛋白数据库进行检索 ,得到 5 0余个同源性较高的来自动植物的 MT蛋白 ,用二重序列对排分析和氨基酸组成模式分析与已知的蛋白进行比较 ,将 ric MT归属于植物类金属硫蛋白类型。采用多重序列比较法总结出植物类金属硫蛋白的一级结构的三点特征 :相对分子量比动物 MT大 ,平均为 71个氨基酸残基 ;与哺乳动物 MT不同的独特氨基酸组成模式 ;一级结构典型的三段式分布 ,间隔区多数达 3 0～ 40个氨基酸残基     

元江普通野生稻金属硫蛋白基因的获得和序列分析

对SMARTTM技术构建的元江普通野生稻叶片cDNA文库进行随机测序,获得了元江普通野生稻的金属硫蛋白基因cDNA序列.该序列全长525 bp,开放阅读框长186 bp,编码62个氨基酸,10个半胱氨酸集中分布在肽链的N端和C端,该蛋白的分子量为6.42 kD,理论等电点为5.21.氨基酸序列(Blastp)同源性分析表明该基因属于金属硫蛋白家族.     

硫对Ⅰ型玉米金属硫蛋白(Zea mays Metallothionein1)结合金属的影响研究

金属硫蛋白是一类富含半胱氨酸的低分子量重金属结合蛋白。文章使用紫外吸收光谱技术分析了S~(2-)存在条件下对Ⅰ型玉米金属硫蛋白(ZmMT1)结合Zn~(2+)/Cd~(2+)等金属离子的影响。结果表明ZmMT1对Zn~(2+)和Cd~(2+)的结合能力在S~(2-)存在时明显增强;同时适当增大S~(2-)浓度可以增强ZmMT1结合Cd~(2+)的能力。此外,通过改变组分添加顺序研究发现Cd~(2+)滴定之前,ZmMT1先与S~(2-)温育才可以使S~(2-)成功地掺入到金属巯基螯合簇中,同时最大程度增强ZmMT1的Cd~(2+)结合能力。研究结果显示,通过额外引入硫离子来增加金属硫蛋白的重金属清除特性可能是植物的经济且非常有效的解毒策略。     

酵母细胞表达金属硫蛋白对铅离子的吸附研究

根据人肝金属硫蛋白的基因序列,结合酿酒酵母菌密码子使用规律,改造并合成了可在酵母细胞内高效表达的金属硫蛋白基因,并将该基因转入酵母细胞内进行了表达.以野生型菌株为对照,初步测定了酿酒酵母INVSC1-mt菌株对pb2+的吸附作用.研究结果表明,金属硫蛋白基因的表达有助于提高酿酒酵母细胞对pb2的吸附作用,其最大吸附量比野生型菌株提高了11％.同时,酿酒酵母INVSC1-mt菌株吸附pb2+的速度较快,在30 min时,其吸附率就达到了96.03％,吸附量为5.76 mg/g湿重细胞.而野生型菌株至120 min时,其吸附率才达到90.44％.     

四膜虫金属硫蛋白MTT2在大肠杆菌中的表达与纯化

金属硫蛋白是一种在多种生物中存在的多功能蛋白,纤毛虫金属硫蛋白在结构和功能上具有物种特殊性。从四膜虫Tetrahymena elliotti中鉴定到一种新的金属硫蛋白基因Te-MTT2,该基因全长273bp,无内含子,编码90个氨基酸。为了分析Te-MTT2的功能,分别构建了重组质粒pGST-Te-MTT2和pSUMO-Te-MTT2并转化大肠杆菌BL21.0.05mmol/L IPTG诱导大肠杆菌BL21/pGST-Te-MTT2和BL21/pSUMO-Te-MTT2表达融合蛋白GST-Te-MTT2和SUMO-Te-MTT2.GST-Te-MTT2的表达量占到总蛋白的16.7%,其中29.9%可溶;SUMOTe-MTT2的表达量占到总蛋白的14.2%,其中76.2%可溶。SUMO-Te-MTT2经Ni柱亲和纯化获得电泳纯的蛋白。85℃,15min温浴后,SUMO-Te-MTT2蛋白在10mmol/L PBS溶液中稳定存在。结果表明SUMO表达系统提高了Te-MTT2的可溶性表达,Te-MTT2的表达纯化为进一步分析其生物学功能奠定了基础。     

金属硫蛋白的生理作用及在医学上的应用

本文简述了金属硫蛋白参与生物体内重金属离子代谢,消除重金属毒性,清除自由基和调节动物某些生理过程的作用以及在癌症治疗,抗肿瘤,抗辐射等方面的应用。     

金属硫蛋白(MT)的分离纯化与检测技术

综述了近年来在金属硫蛋白研究中应用的分离纯化和检测方法，对各种方法的适用性等特点作了评述。     

金属硫蛋白的性质,结构和生物学功能

金属硫蛋白是一类富含巯基与金属的低分子蛋白质，化学结构特殊，可被重金属，激素，不良刺激等诱导生成，该蛋白具有解除重金属的毒害，参与微量元素代谢，消除自由基，调节生长发育等功能。     

大肠杆菌硫氧还蛋白thioredoxin基因的克隆及表达

以大肠杆菌XL1blue为模板，通过PCR技术扩增大肠杆菌硫氧还蛋白基因，并将目的基因分别连接到克隆载体pUC18和表达载体pTrcHisC上，构建重组质粒．重组质粒pTrcHisC-TRX在大肠杆菌中高效表达，最后利用固定化金属螫合亲和层析技术(IMAC)获得较纯的目的蛋白，为进一步研究硫氧还蛋白的功能及其应用提供了条件．     

金属硫蛋白清除羟自由基功能的研究

引言金属硫蛋白（Ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ,简称ＭＴ）是一类低分子量、富含半胱氨酸的金属结合蛋白。１９５７年Ｍａｒｇｏｓｈｅｓｅｔａｌ首次从马肾中分离出该蛋白,现发现ＭＴ几乎存在于所有生物体中。哺乳类动物的ＭＴ通常是一条６１个氨基酸的肽链,其中含有...     

金属硫蛋白结合铅离子的竞争反应和置换反应研究

从锌诱导的家兔肝脏中分离纯化得到两种亚型的金属硫蛋白(MTs)：Zn₇MT-Ⅰ和Zn₇MT-Ⅱ,在酸性条件下脱金属得脱金属硫蛋白(apoMTs)。从镉诱导的家兔肝脏中分离纯化得：Zn₂Cd₅MT-Ⅰ和Zn₂Cd₅MT-Ⅱ。采用圆二色性(CD)光谱法和紫外(UV)吸收光谱法研究金属硫蛋白结合铅离子的竞争反应和置换反应。竞争反应显示：Pb²⁺和Zn²⁺竞争结合apoMT-Ⅰ形成的是金属混配的金属硫蛋白;而apoMT-Ⅱ的金属结合位点则完全被Pb²⁺所占据,表明apoMT-Ⅱ对Pb²⁺更为敏感。置换反应显示：Pb²⁺既不能置换出Zn₇MT-Ⅰ中的Zn²⁺,也不能置换出Zn₇MT-Ⅱ中的Zn²⁺;但Pb²⁺能完全置换出Zn₂Cd₅MTs中的Zn²⁺,且其置换行为也存在着亚型上的差异。提示Zn₂Cd₅MT-Ⅱ可能有效地解铅中毒。     

酵母双杂交系统检测金属硫蛋白(MT)间的相互作用

金属硫蛋白-3(MT-3),又称神经生长抑制因子,为金属硫蛋白家族中惟一具有生物活性的成员。为了验证其在细胞内是否形成二聚或多聚体,构建酵母双杂交系统用于检测。结果表明：MT-3与MT-3之间在酵母细胞内能发生相互作用,进一步用酵母双杂交实验还表明MT-3与MT-1间也存在弱相互作用。由此提示,在机体细胞中,MT-3可以以同源或异源二聚体的形式存在。     

金藻富含半胱氨酸蛋白质CRP1的重组表达和功能分析

金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是动物、植物和微生物中广泛存在的一种小分子蛋白,富含半胱氨酸,具有维持细胞代谢中金属离子稳态和应激条件下重金属离子解毒的功能。文章从金藻Poterioochromonas malhamensis中鉴定了一种新的PmCRP1基因。该基因全长396bp,无内含子,编码131个氨基酸,富含26个半胱氨酸。PmCRP1蛋白的半胱氨酸残基主要排列形式有CCC,CXCC,XCCX,CXC,XXCXX(C是Cys;X是Cys以外的任何氨基酸残基)。这种保守的半胱氨酸排列形式,与金属硫蛋白类似。实时荧光定量分析表明Cd2+,Cu2+,Zn2+,Pb2+,Hg2+离子未能诱导PmCRP1基因表达上调。构建重组质粒pSUMO-PmCRP1并转化大肠杆菌BL21,获得PmCRP1的重组表达。大肠杆菌BL21/pSUMO-PmCRP1对Cd2+,Cu2+,Zn2+耐受性提高。表明PmCRP1具有螯合重金属离子能力,可能是一种新的金属硫蛋白,可用于环境中重金属离子的生物去除。     

蛋白质工程的研究

对近期蛋白质工程的进行了综合报道,涉及到胰蛋白酶,金属硫蛋白,胰岛素,悄激酶原,组织型纤溶酶原激活剂,ＲＧＤ肽蛋白质或多肽的结构与功能研究以分子改造。