壳聚糖固定化乙醇脱氢酶的酶学性质研究

以壳聚糖作载体,戊二醛作交联剂,并以游离的乙醇脱氢酶作为对照,对壳聚糖固定化乙醇脱氢酶的酶学性质进行研究.结果表明,当戊二醛浓度为0.6%(v/v),交联时间为6 h时,壳聚糖固定化乙醇脱氢酶对温度、碱性环境以及金属离子Cu~(2+)溶液的耐受性均明显增强,且操作稳定性明显提高.     

乳酸脱氢酶在CTAB-戊醇反胶束体系中的催化动力学研究

以十六烷基三甲基溴化铵（CATB）-异辛烷-戊醇反胶束体系对乳酸脱氢酶（LDH）了固定化,探讨了体系含水量W0（W0=n（水）/n（CTAB）、CTAB浓度、戊醇体积比对LDH固定化的影响及游离酶和固定酶的催化动力学性质.结果表明：LDH进入反胶束的最佳条件是：体系含水量为4.3,CTAB浓度为0.24 mol/L,戊醇体积比为25%.对游离酶和固定化酶的酶促反应的最适pH值均为8.8,最适反应温度分别为52℃和30℃,米氏常数Km分别为65mmol/L和48mmol/L.在25℃时,游离酶存放2 h后失活35%,而固定化酶仅失活16%,说明反胶束固定化LDH具有良好的活力稳定性.     

壳聚糖固定化α-乙酰乳酸脱羧酶的研究

采用壳聚糖作为载体，戊二醛作交联剂制备固定化α-乙酰乳酸脱羧酶（ALDC），优化了固定化条件。实验结果：活力1380U／g，蛋白载量98．30mg／g，比活力14．04U／mg，活性回收率37，l％，固定化α-乙酰乳酸脱羧酶最适温度30℃，最适pH5．5。     

固定化乳酸酶膜圈的研究

本文研究了固定化L-乳酸氧化酶膜圈的制作技术及其生化特性,并与美国YSI酶膜圈进行了比较,认为二者具有等值性,可与YSI-23L型乳酸分析仪配套使用。     

羊心肌乳酸脱氢酶的纯化及性质研究

建立了一种较为简单、高效的羊心肌乳酸脱氢酶的纯化工艺,经硫酸铵分级沉淀及DEAE-Sepharose离子交换层析纯化,可以得到纯度较高的乳酸脱氢酶,酶的比活力达106.67 U/mg,纯化倍数达54.7,酶活力总回收率为48.6%.酶学性质的研究表明:其最适反应温度为50℃,最适反应pH值为7.8,在25~45℃条件下能够保持较高的酶活力,60℃后酶活力下降较快.1.0 mmol/L的Mg2 、Fe2 、Ca2 ,0.5 mmol/L的Ca2 对酶活力有促进作用;1.0 mmol/L和0.5 mmol/L的Cu2 和Fe3 ,1.0mmol/L的Ni2 ,0.5 mmol/L的Mg2 和Fe2 对酶活力有抑制作用;Co2 的作用不太明显.     

磁场对固定化乳酸脱氢酶催化活性的影响

采用流通池光纤荧光光度法，对固定化乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）在静磁场作用下的催化活性进行了探讨。发现在０．０８４￣０．２３０Ｔ磁场下ＬＤＨ的催化活性明显降低，其降低值随磁场强度增强而增大，且与磁场作用的时间和ｐＨ值有关，而在２５￣４０℃范围内，温度则无显著影响。     

壳聚糖固定化果胶酶的制备及其酶学性质研究

以1％壳聚糖与5％戊二醛交联8h制得交联壳聚糖载体,1g载体固定10mg的果胶酶,载体先与酶液缓慢振荡混合30min后,在固定化体系（pH3．4,4℃）中固定反应12h,该条件下制得的固定化酶强度大韧性好。酶活力回收率高达56．31％;固定化酶的最适温度50℃,最适pH3．4,Km^app值为5．42mg·mL^-1,连续使用7次后,酶活力还保留70．45％以上,具有较好的操作稳定性。     

大孔径玻璃珠固定乳酸脱氢酶用于流动注射分析测定L-乳酸

本文用孔径为1200(?)的多孔玻璃珠作为载体,将乳酸脱氢酶固定于其上,装入柱内,联结于流动体系中。测定了固定化乳酸脱氢酶的表观米氏常数和人血清中的 L-乳酸.L-乳酸的线性范围在0.1——9mmol/L,回收率为96——103%,变异系数<0.7%,最低检出限为0.4nmol(信噪比为4),每小时可进样35次.酶的稳定性良好。     

固定化原生质体产谷氨酸脱氢酶的研究

本文介绍了用海藻酸钙凝胶固定化谷氨酸棒杆菌T_(6-13)原生质体生产谷氨酸脱氢酶GDH,Eel.4.1.4的研究。固定化原生质体培养72h后发酵液中GDH活力可达到1.64×~(-2)U/mL,为游离细胞内产酶的205%.固定化原生质体还可用溶菌酶处理固定化细胞而制得,与直接制得的固定化原生质体具有同样的产酶能力,且制备方便,可重复使用,具有良好的贮藏稳定性。     

用β-环糊精衍生物构筑乳酸脱氢酶

用β-环糊精和马来酸酐合成双（6-氧-丁烯二酸单酯）-β-环糊精（简称为化合物1），以化合物1与Fe^3 形成的配合物模拟乳酸脱氢酶催化乳酸的脱氢，用过氧化氢作为质子受体，生成的丙酮酸用2，4-二硝基苯肼检测，结果表明：化合物1与Fe^3 形成的配合物可以催化乳酸的脱氢反应。     

乳酸脱氢酶的稳定剂研究

研究了13种试剂(试剂组合)对乳酸脱氢酶冻干及存放稳定性的影响。发现稳定剂的结构规律是多羟基和多羧基化合物的合理组合。     

异硫氰酸酯法固定化醇脱氢酶乳酸脱氢酶和辅酶Ⅰ

本文探索了一条较为简便、实用的制备异硫氰酸酯活性载体的新方法,研究了用异硫氰酸酯共价法固定化醇脱氨酶、乳酸脱氢酶和辅酶Ⅰ的条件,并对三者进行了共固定化。按本实验方法得到的固定化醇脱氢酶和乳酸脱氢酶的活力回收可达8.9%和11.9%,得到的固定化三元全酶系统的辅酶再生能力为相应游离酶系统的4倍。     

反胶束固定化醇脱氢酶的制备

报道了用反胶束体系固定化醇脱氢酶(ADH)的研究.在此体系中,以十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)作为表面活性剂,辛烷和己醇作为溶剂及助溶剂.考察了ADH固定化的影响因素,确立了最佳固定化条件:含水量w0即cH2O/cCTAB为13,酶液pH值为7.8,CATB浓度为0.35 mol/L,己醇浓度为13%.     

薄层色谱扫描法测定鹿龟酒中栀子甙的含量

用薄层扫描法测定鹿龟酒中栀子甙的含量，加样回收率为９８．５４％，ＲＳＤ＝２．３％（ｎ＝６）．     

Inactivation of Lactate Dehydrogenase from Pig Heart by o—Phthalaldehyde

IntroductionLactate dehydrogenase( EC1 .1 .1 .2 7,LDH) playsa vital role in the energy flow of higher organisms.It is a tetrameric enzyme that catalyzes thereversible dehydrogenation of lactate,converting itto pyruvate.The enzyme exists in five isozymicforms which are not usually found all together inone tissue or organ.At least three different typesof LDH subunits( M,H and X) are known invertebrates,butthe X subunits are usually presentin only one or at mosta few tissues[1,2 ] .　Variou…     

植物乳杆菌产乳酸脱氢酶的发酵条件优化及酶的纯化

对植物乳杆菌突变株RS2 2的发酵条件做了优化, 在25 L发酵罐上进行放大实验, 使菌株RS2 2的乳酸脱氢酶（Lactate Dehydrogenase）产酶水平有了较大提高, 细胞抽提液比酶活达到24.6U/mg．利用DEAE离子交换、 疏水层析对酶的纯化进行 了研究, 最终酶的纯化倍数为49.1, 比活力达1　208.6 U/mg,初步确定了LDH的纯化路线.     

Inactivation and Conformational Changes of Lactate Dehydrogenase M4 during Unfolding in Urea Solutions

ＩｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎａｎｄＣｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌＣｈａｎｇｅｓｏｆＬａｃｔａｔｅＤｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅＭ４ｄｕｒｉｎｇＵｎｆｏｌｄｉｎｇｉｎＵｒｅａＳｏｌｕｔｉｏｎｓＧｕｏＹｕｙｕａｎ（郭宇远），ＺｈｏｕＨａｉｍｅｎｇ（周海梦）＊Ｄｅｐ...     

中菊头蝠和折翼蝠组织乳酸脱氢酶同工酶的研究

以聚丙烯酰胺凝胶电泳法,测定了中菊头蝠（Ｒｈｉｎｏｌｏｐｈｕｓａｆｆｉｎｉｓ）和折翼蝠（Ｍｉｎｉｏｐｔｅｒｕｓｓｃｈｒｅｉｂｅｒｓｉ）的心脏、肝、胃、肾脏、骨骼肌和脑等６种组织乳酸脱氢酶（ｌａｃｔａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ,ＬＤＨ）同工酶．结果显示：①ＬＤＨ同工酶在不同动物的不同组织中表达各异;②出现了骨骼肌中Ｂ亚基含量显著高于Ａ亚基的异常现象,可能与翼手类飞行时需大量能量来源的生理特性有关     

壳聚糖固定化风味蛋白酶的制备及其酶学特性

研究了球形交联壳聚糖固定化风味蛋白酶的制备工艺及其酶学特性.以壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂,采用共价交联法制备固定化风味蛋白酶的较适条件为ω(壳聚糖)=2.5％、ω(NaOH) =3％、ω(戊二醛)=0.5％,交联时间6h,载体中∞(酶)=40 mg/g,于35℃、pH值5.5条件下固定化反应10h.固定化后,风味蛋白酶较适反应温度从50℃提高至70℃,较适pH值从7.0提高至8.0,且可在更宽温度与pH值范围内保持较高的酶活力.固定化风味蛋白酶具有良好的储存稳定性和操作稳定性,可反复多次使用,适宜于在工业生产中推广应用.