神经酰胺类物质的分离纯化及应用

神经酰胺是一类重要的生物活性物质,也是细胞内重要的脂质第二信使.系统分析了神经酰胺类物质的结构、分离纯化和测定的方法等,介绍了其在食品、医药、化妆品等方面的应用,针对化学合成的神经酰胺的局限性,提出了从植物中提取天然的神经酰胺及其发展前景.     

神经酰胺的研究进展及在护肤品中的应用

在人类皮肤中,神经酰胺作为皮肤角质层的重要组分之一,具有维持皮肤屏障、保湿、抗衰老、抗过敏等生理功能,在医学和化妆品领域中,吸引了大量的研究和关注.文章综述了神经酰胺这一成分的发展史、研究现状、在皮肤中的功能、影响皮肤中神经酰胺含量的因素,以及对应的神经酰胺缺失所需要的解决方案等.同时,对未来的发展提出一些展望.     

温和化学渗透剂对解脂假丝酵母神经酰胺含量的影响

为了分析温和化学渗透剂木瓜蛋白酶、甘氨酸对解脂假丝酵母33M Candida lipolytica中神经酰胺含量的影响,分别采用氯仿甲醇抽提法和乙醇抽提法提取神经酰胺,用固相萃取法（SPE）分离神经酰胺与其它膜中脂类,并用薄层色谱（TLC）方法和高效液相色谱-蒸发光散射器（HPLC-ELSD）对其进行定性和定量分析,结果表明：加温和化学渗透剂木瓜蛋白酶、甘氨酸能增加解脂假丝酵母中的神经酰胺含量,并以木瓜蛋白酶效果最好。     

神经酰胺的代谢及其在细胞凋亡中的作用

神经酰胺是鞘脂类,作为第二信使普遍存在于细胞膜和细胞质之间并传递信号,是进化上保守的信号系统。现在已有的研究数据表明,电离辐射、紫外线、氧化应激等细胞外应激因子均能迅速激活细胞膜上的酸性鞘磷脂酶,水解鞘磷脂产生神经酰胺,从而诱导细胞凋亡,而且神经酰胺代谢中的很多产物,如鞘氨醇-1-磷酸具有抗凋亡活性,能控制凋亡反应强度,有助于阐明细胞抗辐射的机制。     

南海小束格海绵Clathria fasciculate中的新神经酰胺

从中国南海小束格海绵Clathriafasciculate中分离得到一系列新神经酰胺化合物 ,它们的结构是通过FAB_MS ,IR ,NMR ,DQFCOSY ,HMQC ,HMBC ,GC ,GC_MS和化学转变等方法确定的。这些神经酰胺的长链碱部分具有独特的异丙或反异末端 ,脂肪酸部分则主要由 (4E)_2_羟基_4_二十二 ,二十三 ,二十四和二十五碳烯酸组成。     

小鼠皮肤机械屏障功能障碍模型的研究

目的以小鼠表皮神经酰胺含量、表皮厚度和组织病理变化为指标，对胶带法和丙酮乙醚法建立的皮肤机械屏障功能障碍模型进行评价。方法用胶带法和丙酮乙醚法分别破坏小鼠皮肤角质层，连续造模5d后观察皮肤神经酰胺含量、表皮厚度和组织病理的变化。结果模型组小鼠表皮神经酰胺含量和表皮厚度均低于空白组，并出现相应的组织病理学改变，以胶带造模组改变更明显。结论两种造模方法均能造成小鼠的皮肤机械屏障功能障碍，其中以胶带法所建立的皮肤机械屏障功能障碍模型更稳定，操作更方便。     

南中国海软珊瑚Lobophytum sp.中的一个新的神经酰胺

从采自南中国海域的豆荚软珊瑚中分离得到一个新的神经酰胺,通过波谱分析及化学转化等方法确定了它的化学结构.     

3-酮基嘌呤还原酶(TSC10)表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达

目的：Tsc10基因所编码的3-酮基嘌呤还原酶是酵母中神经酰胺合成的重要因子,本文研究从酵母中提取神经酰胺经济、便捷、高效的方法。方法：1.利用构建含有tsc10基因的毕赤酵母GS115表达载体pPIC3.5K-tsc10。2.电转化法将该表达质粒转化到GS115感受态细胞中。3.用G418筛选以及PCR鉴定。4.使用qRT-PCR和SDS-PAGE进行检测。结果：经过G418筛选以及PCR鉴定后确定获得了包含tsc10基因的毕赤酵母转化子,经过qRT-PCR和SDS-PAGE进行检测后发现tsc10基因在20个阳性菌株中均可以稳定、高效表达。结论：本方法成功构建了3-酮基嘌呤还原酶高表达的毕赤酵母菌株,并为后续获得高收率神经酰胺奠定了基础。     

3-酮基嘌呤还原酶(TSC10)基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达

TSC10基因所编码的3-酮基嘌呤还原酶是酵母中神经酰胺合成的重要因子。设计了一种从酵母中提取神经酰胺经济、便捷、高效的方法:(1)利用构建含有TSC10基因的毕赤酵母GS115表达载体p PIC3.5K-TSC10;(2)电转化法将该表达质粒转化到GS115感受态细胞中;(3)用G418筛选以及PCR鉴定;(4)使用qRT-PCR和SDS-PAGE进行检测。结果经过G418筛选以及PCR鉴定后确定获得了包含TSC10基因的毕赤酵母转化子,经过qRT-PCR和SDS-PAGE进行检测后发现TSC10基因在20个阳性菌株中均可以稳定、高效表达。成功构建了3-酮基嘌呤还原酶高表达的毕赤酵母菌株,并为后续获得高收率神经酰胺奠定了基础。     

血清神经酰胺评分联合GRACE评分对ACS的诊断价值

目的 探讨血清神经酰胺风险评分、GRACE评分联合使用基于Lasso回归对急性冠脉综合征(acute coronary syndrome, ACS)诊断效能进行比较并构建无创风险预测模型。方法 选取2021年10月至2022年2月期间安徽理工大学第一附属医院(淮南市第一人民医院)心内科住院ACS患者120例,依据最终冠脉血管造影结果分为阳性组和阴性组。采用高效液相色谱串联质谱技术对血清中4种神经酰胺Cer(d18∶1/16∶0)、Cer(d18∶1/18∶0)、Cer(d18∶1/24∶0)、Cer(d18∶1/24∶1)进行定量分析,划定风险等级。采用单因素分析对影响冠心病的潜在因素进行初步筛选,设定P<0.1进入后续的Lasso回归分析。使用筛选后指标建立对冠心病的预测模型方程,最后采用多元Logistic回归分析分别计算并比较Lasso评分、GRACE评分、神经酰胺酶评分的AUC值,并以此评估3个评分对冠心病的预测效能。结果 单因素分析结果提示年龄、白蛋白_b-cox、GRACE评分、载脂蛋白A、肌酸激酶、神经酰胺评分Cer(d18∶1/16∶0)、Ce...     

海绵Phyllospongia sp.中分离的神经酰胺Phylloqmide A／

从中国南海海锦Ｐｈｙｌｌｏｓｐｏｎｇｉａ ｓｐ．中分离得到了一个神经酰胺类化合物Ｐｈｙｌｌｏａｍｉｄｅ Ａ，它的结构通过波谱方法和化学方法确定。     

Ceramide from the Marine Sponge Phyllospongia sp

从中国南海海绵Ｐｈｙｌｏｓｐｏｎｇｉａｓｐ．中分离得到了一个神经酰胺类化合物Ｐｈｙｌ－ｌｏａｍｉｄｅＡ，它的结构通过波谱方法和化学方法确定．     

拟南芥（Arabidopsis thaliana）miR396分子对类神经酰胺酶基因表达的负调控

以拟南芥（Arabidopsis thaliana）miR396小分子为研究对象,分别克隆到了miR396小分子的两个前体（MIR396n,MJR3966）,得到转基因植株后,通过Microarray分析、Northern杂交以及遗传学分析的方法探讨了miR396与拟南芥类神经酰胺酶基因的关系。对miR396高表达转基因植株进行Microarray分析的结果表明,拟南芥类神经酰胺酶基因（Atceramidase-likel,Atceramidase-like2）在miR396高表达转基因植株中的表达与空载体转基因植株相比下降2倍以上,而4-alpha-乳糖基神经酰胺半乳糖转移酶则增加2倍以上。Northern杂交结果进一步验证了Microarray分析的结果,即在miR396高表达转基因植株中,拟南芥类神经酰胺酶基因的成员Atceramidase-likel和Atceramidase-like2表达水平均显著降低（分别减少6．8倍和2倍以上）,而Atceramidase-like3的表达水平在35S：MIR396a转基因植株叶中有所下降,在35S：MIR396b转基因植株叶中变化不明显。相反地,在35S：MIR396a和35S：MIR396b转基因植株叶中,miR396表达水平分别比空载体转基因植株增加2倍以上。上述研究结果说明拟南芥miR396能有效地负调控Ceramidase-likel和Ceramidase-like2等基因的表达水平。     

海洋真菌Aspergillus flavipes中新神经胺成分

从黄海葵Anthopleura xanthogtammica(Berkly)中分离出海洋附生真菌Aspergillus flavipes,经实验室培养和化学分离纯化,分离得到四种新颖结构的神经酰胺同系物(1-4),它们的化学结构经波谱解析(1R、UV、2D NMR、MS等)和化学降解得以确定.     

长纹海鞘(Ascidia longistriara)的化学成分研究

从长纹海鞘（Ａｓｃｉｄｉａｌｏｎｇｉｓｔｒｉａｒａ）的氯仿提取物中分离得到２个化合物，经ＩＲ，ＭＳ和ＮＭＲ等波谱方法鉴定，这２个化合物为胆甾７烯３β醇和神经酰胺十八碳酰基鞘氨醇     

河蟹肝胰腺中4种脂类对细胞生长和亚细胞结构的影响

目的:研究河蟹肝胰腺中C-8神经酰胺-1-磷酸、N-十二烷醇-L-高丝氨酸内酯、磷酰胆碱和棕榈酰肉碱对细胞生长和亚细胞结构的影响.方法:利用细胞计数试剂盒和乳酸脱氢酶试验,检测不同质量浓度的4种脂类对斑马鱼胚胎成纤维细胞所表现的细胞增殖和细胞代谢的影响,并通过溶酶体和线粒体染色分析4种脂类对细胞溶酶体和线粒体形态结构的影响.结果:N-十二烷醇-L-高丝氨酸内酯表现为促进细胞增殖,并保持线粒体和溶酶体形态结构的完整;C-8神经酰胺-1-磷酸、磷酰胆碱、棕榈酰肉碱表现为抑制细胞增殖,并引起线粒体和溶酶体的结构发生不同程度的改变.结论:河蟹肝胰腺中的4种脂类物质不仅是食物的营养成分,还具有明显生物活性,能影响细胞代谢和亚细胞结构的完整性.     

海星活性成分研究进展

海星中含有蛋白和多肽、糖苷类、甾醇、生物碱、神经酰胺等生物活性物质。在海星中已分离纯化出的物质具有多种生理活性。在这些提取物中,蛋白具有免疫活性,促细胞生长活性;甾类糖苷有细胞毒性、溶血、抗病毒、抗炎症、鱼毒素等活性;生物碱类有细胞毒性、抗病毒、抗真菌活性;神经节苷酯类有抗肿瘤活性。     

南海红树内生真菌1947号代谢产物研究(Ⅱ)

首次研究了分离自香港红树Kandelia candel嫩叶的一株红树内生真菌（菌株编号1947）的代谢产物,从菌丝体共分离纯化得到3个化合物,经波谱解析或与标准样品对照分别鉴定其结构为1个神经酰胺——（5E）-N-十六碳酰基-2-氨基-1,3-二羟基-5-十八碳烯（A）和2个甾醇类化合物——过氧化麦角甾醇（B）和麦角甾醇（C）.     

中国软珊瑚化学成分的研究(二十)——软珊瑚中的神经酸胺

从中国南海采集的幼纯短指软珊瑚、螺旋短指软珊瑚中首次分离到一个新的神经酰胺Sinumeramide(1),利用波谱方法推导其结构;同时还通过臭氧化反应以及氘硼化反应在双键上引入氘原子后的质谱分析确定其双键的位置;应用核磁共振谱及构象分析确定1的赤型构型。此外,从短指软珊瑚(未定种)中首次分离得N-乙酰二氢鞘氨醇。     

凝胶剂对三元油脂凝胶结构及其荷载量的影响

以玉米油为基料油,通过添加3种不同的凝胶剂(谷甾醇+卵磷脂,神经酰胺和乙基纤维素),制备了荷载姜黄素的三元油脂凝胶体系,并探讨了不同凝胶剂对三元油脂凝胶的流变行为、固体脂肪含量等宏观性质及其微观形貌、晶型结构等微观性质以及荷载量的影响.实验结果表明,谷甾醇+卵磷脂与神经酰胺形成的三元凝胶结构相似,都形成纤维状的结晶结构;前者的结构更为紧密,荷载量[(3.14±0.10)mg/g]和包埋率[(62.78±2.01)%]较高;乙基纤维素形成的凝胶结构与前两种有很大不同,其结晶结构为颗粒状,晶体较小,结构较为松散,但是由于其较高的制备温度,它的荷载水平最佳,荷载量和包埋率分别为(4.810±0.174)mg/g和(96.19±3.48)%.这说明油脂凝胶剂的种类对三元油脂凝胶的性能、微观结构和荷载量都有显著影响.