多杀性巴氏杆菌幽灵的研究

采用基因工程方法,将PhiX174噬菌体裂解基因E和温敏控制表达系统与质粒pPBA1100基因杂交,构建了重组子pPBA1100-E.将重组子转化到多杀性巴氏杆菌中,通过温度诱导使裂解基因表达.用限制性内切酶检验重组子.扫描电镜观察多杀性巴氏杆菌细菌幽灵和菌落形成单位评价遗传灭活率.结果表明:重组质粒经限制性内切酶酶切鉴定,琼脂糖电泳呈现三条谱带,相对分子质量与理论值一致.扫描电镜观察显示,重组子在多杀性巴氏杆菌中成功表达,获得了细菌幽灵.菌落形成单位检验结果显示,多杀性巴氏杆菌遗传灭活率达到99%.     

多杀性巴氏杆菌抗原的研究进展

多杀性巴氏杆菌在自然界分布广泛,是畜、禽、野生动物及人类的一种共惠性病原．可以在同种和不同种的动物间传染,可以引起多种畜禽巴氏杆菌病,主要就多杀性巴氏杆菌的抗原成分进行概述．     

多杀性巴氏杆菌外膜蛋白单克隆抗体对兔及鼠巴氏杆菌病的保护

用兔子分离的多杀性巴氏杆菌(P.multocida)免疫小鼠得脾细胞,与骨髓瘤细胞融合后制备针对37.5KDa外膜蛋白的单克隆抗体(MAbs)。用酶联免疫吸附试验(ELISA),全细胞放射免疫沉淀试验(WCRIP),免疫印迹分析筛选所需MAbs。WC-RIP和免疫印迹试验表明,用完整多杀性巴氏杆菌吸附及洗脱的MAb1608,其识别的抗原暴露于细胞表面,抗体易于接近,其分子量为37.5KDa,蛋白酶K处理多杀性巴氏杆菌外膜,MAb1608的活性完全消除,说明此MAb结合于某一蛋白抗原决定簇。在免疫印迹试验中MAbl6108与提纯的脂多糖(LPS)无反应。被动转移研究表明与对照组比,鼻内接种MAb1608并同时鼻内攻毒的9只家兔其死亡率、肺炎严重程度、非呼吸道脏器和鼻腔中多杀性巴氏杆菌数量都明显要低。肺中多杀巴菌数量减少84.750倍。被动转移试验也表明MAb1608保护鼠免受具有该MAb识别抗原决定簇的同源或异源多杀巴菌株的攻击。但是,当用缺乏MAb1608识别抗原决定簇的多杀巴菌株攻击鼠时,MAb1608不提供保护作用。本研究表明37.5KDa外膜蛋白是保护性MAb的作用靶。     

雏鸭鸭疫巴氏杆菌和多杀性巴氏杆菌混合感染的诊治

对成都市郊某肉种鸭场爆发的雏鸭疾病，通过流行病学调查、临床症状、病理变化观察、病原分离鉴定、确诊为鸭疫巴氏杆菌和多杀性巴氏杆菌混合感染．在药敏试验的基础上，对１７００多只病鸭用两菌高度敏感的抗菌药物进行治疗，疗效显著，治愈率达９８％．     

禽病消对禽多杀性巴氏杆菌的体外抑菌试验

本试验应用体外抑菌试验的试管法对复方敌菌净、喹乙醇单方和两药复方(禽病消)对禽多杀性巴氏杆菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)进行了测定.单方时复方敌菌净和喹乙醇的MIC分别为48μg/ml和6μg/ml,MBC分别为120μg/ml和15μg/ml,复方制剂(禽病消)中的复方敌菌净和喹乙醇的MIC分别为3.84μg/ml和0.84μg/ml,MBC分别为24μg/ml和3μg/ml,FIC指数为0.16,禽病消对禽多杀性巴氏杆菌的抗菌作用较复方敌菌净、喹乙醇两药单独应用时增强了12.5—32倍,结果说明:复方敌菌冷与喹乙醇联合应用具有明显的协同作用,禽病消组方合理,是防治禽巴氏杆菌病的有效复方新制剂.     

兔、禽多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗的研制

该项目特点为制苗菌株经多年筛选,毒力强,免疫原性好.用其免疫兔、鸡,可抗不同血清型强毒的攻击,对兔、禽均有较好的免疫保护力.又由于是灭活疫苗,故安全性好,还适宜于在疫区用于紧急预防接种,且在免疫的同时也不影响使用抗生素.     

牦牛多杀性巴氏杆菌地方血清型灭活疫苗免疫效果评价

为评价牦牛多杀性巴氏杆菌地方血清型灭活疫苗对青海省牦牛群的免疫效果,本研究进行了地方血清型野生株P0910与疫苗株C45-2两种灭活疫苗的免疫效果对比试验.通过复苏疫苗株C45-2和地方血清型野生株P0910,用甲醛灭活后将菌液分别按5∶1的比例加入灭菌的Al(OH)3胶进行两种多杀性巴氏杆菌灭活疫苗的制备,并对疫苗进...     

新疆牦牛多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及药物敏感实验

为确诊新疆某牦牛场的某疾病的发病病源,控制病情蔓延,对该病病原进行分离培养、小白鼠致病性试验、生化鉴定、PCR鉴定。结果表明:得到6株多杀性巴氏杆菌;这6株分离菌均对庆大霉素、四环素、链霉素、磺胺、土霉素等药物敏感;根据多杀性巴氏杆菌KMT-1基因扩增了1条457bp的特异性条带,对其进行测序分析,结果表明其与GenBank提交的12条多杀性巴氏杆菌KMT-1基因序列同源性达97%～99%。     

猪多杀性巴氏杆菌(PM)PCR诊断技术的建立

参照文献报道的猪多杀性巴氏杆菌（PM）基因组的部分序列,设计合成引物,建立了PM的PCR诊断技术,并对各反应条件进行优化.本实验建立的PM的PCR扩增片段大小为457 bp.以建立的PCR方法对临床送检的可疑病猪的肺部病料进行了特异性检测和敏感性试验及生化鉴定.结果表明PCR检测阳性结果与猪多杀性巴氏杆菌的形态染色、培养特性和生化鉴定结果一致,该PCR方法在临床诊断中具有应用价值.     

兔感染多杀性巴氏杆菌引起急性脑膜脑脊髓炎一例

<正> 多杀性巴氏杆菌是实验兔的常见病原菌。它可使患兔发生鼻炎、肺炎、中耳炎、结膜炎、子宫蓄脓、睾丸炎、脓肿和全身性败血症。本文报导一例巴氏杆菌病的一种异常表现。病例报告病史:一只四月龄新西兰白色母兔突然发生双侧眼球震颤,后肢麻痹和斜颈。该兔是作为SPF(无多杀巴氏杆菌)兔从一家商贩处购入,并在兔笼内饲养了六周。在此期间,该兔处于控制的条件下,喂以颗粒饲料随意饮水,未做过实验。施以安死术后进行尸体剖检。病理学检查:主要肉眼变化是端脑,视     

海狸鼠多杀性巴氏杆菌和鼠伤寒沙门氏菌混合感染的诊断报告

某海狸鼠原种场自1993年4月起陆续有海狸鼠发病,病鼠以幼鼠最多.主要临床表现为腹泻、体温升高,死前鼻流脓性分泌物或口鼻出血.病理学检查见死鼠多呈败血症,部分死鼠具卡他一出血性肠炎病变.经微生物学检查,确诊为多杀性巴氏杆菌和鼠伤寒沙门氏菌混合感染.     

禽多杀性巴氏杆菌X-73株ompH基因的克隆和表达

以禽多杀性巴氏杆菌国际标准株X-73基因组DNA为模板,采用PCR扩增得到编码信号肽除外的成熟外膜蛋白H的ompH基因,将ompH基因克隆至pMAL-p2X表达载体中,构建重组表达质粒pMAL-p2X-ompH,转化大肠杆菌BL21,用SDS-PAGE电泳检测IPTG诱导后的表达蛋白.DNA测序结果表明ompH基因片段大小为1 002 bp,与已报道的ompH基因的核苷酸序列完全相同、而SDS-PAGE结果显示表达分子质量约为78 ku,与预期的融合蛋白MBP-OmpH分子质量相符,表明成功构建出原核表达质粒并实现了目的蛋白表达,为进一步开展禽多杀性巴氏杆菌保护抗原的研究奠定基础.     

一株鹅源多杀性巴氏杆菌TSP-1的分离鉴定与药敏试验

为了确定引起雏鹅急性死亡的病原菌,从送检的病死雏鹅的肝脏、心血、肺脏病料组织中分离到1株病原菌,并命名为TSP-1。通过培养特性、形态学观察、生化试验、16S rRNA基因序列分析等鉴定方法,分离菌株TSP-1鉴定为多杀性巴氏杆菌。动物试验表明,分离菌株TSP-1具有很强的致病性。药敏试验结果表明:分离菌株TSP-1对头孢克肟、氟苯尼考、阿奇霉素、阿米卡星等4种药物高度敏感;对头孢曲松、庆大霉素、恩诺沙星、强力霉素等4种药物中度敏感;对氨苄西林、阿莫西林、四环素等6种药物耐药。     

家兔D型巴氏杆菌病的实验病理学研究

由慢性肺脓肿的兔病例中分离的Ｄ型多杀性巴氏杆菌进行了人工感染２０～４Ｏ日龄、６０～９０日龄家兔的实验，结果表明，两组家兔经胸腔、鼻腔感染造成的病变与自然病例相似，即纤维素性化脓性胸膜肺炎；经皮下感染引起弥漫性蜂窝织炎；经静脉、肌肉感染可产生败血症。Ｄ型多杀性巴氏杆菌引起的病变和Ａ型所引起的病变相似。     

兔源多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌多重PCR检测方法的建立

目的 建立兔源多杀性巴氏杆菌(Pm)、金黄色葡萄球菌(Sa)和肺炎克雷伯菌(Kp)的多重PCR方法。方法 本研究参考Pm kmt1基因、Sa nuc基因和Kp kh1基因的保守区域,设计3对特异性引物,以温度梯度PCR法确定最适退火温度(Tm),采用控制单一变量法优化引物浓度,构建kmt1、nuc和kh1基因的重组质粒标准品pMD-Pm、pMD-Sa和pMD-Kp,确定最小检测量;以兔源支气管败血波氏杆菌和产气荚膜梭菌等9种病原体核酸样本确定多重PCR法的特异性;通过批间和批内实验验证其重复性;经检测疑似感染的临床样本与已报道的检测方法进行比较,评估其临床应用效果。结果 最适退火温度为54.5℃;扩增kmt1和nuc基因的引物最适浓度均为1μL(10μmol/L),扩增kh1基因的引物最适浓度为0.5μL(10μmol/L);pMD-Pm最低检测限为20.6 copies/μL,pMD-Sa最低检测限为18.2 copies/μL,pMD-Kp最低检测限为23.2 copies/μL,表明其灵敏性高;该方法仅对Pm、Sa和Kp有特异性扩增条带,对其他病原体均无扩增条带,表明特异性较强;...     

神奇杀星对致病性大肠杆菌的药敏研究

采用不同抗菌素与神奇杀星对比。对致病性大肠杆菌C83902（O8：K87，K888ac）和44499[O139：K82（B）；H1]进行药教试验，并查明神奇杀星的最低押菌浓度和最低杀菌浓度。为在临床上正确应用神奇杀星等抗菌药物提供科学的理论依据．     

巴氏杆菌对烟草根结线虫的生物防治

巴氏杆菌(Pacteuria penetrans)是根结线虫天敌中的优势种群,该菌能有效控制烟草根结线虫危害,提高烟叶质量和品质.本文阐述烟区巴氏杆菌的生物学、生态学及分布特征,提出了利用巴氏杆菌进行综合防治的关键技术,从而达到减少、控制根结线虫危害的目的.