正交法优化草芍药中芍药总苷的提取工艺

以芍药总苷含量为考察指标,采用正交试验探讨了草芍药中芍药总苷的最佳提取工艺.结果表明：优化工艺为草芍药以14倍水煎煮2 h,煎煮2次,浸泡时间为6 h.     

白芍中芍药苷的提取工艺研究

采用渗漉法对白芍中芍药苷进行提取,以芍药苷为指标,用正交试验采用3因素3水平对工艺进行优化,得到的较佳工艺条件为浸渍24 h,用15倍体积70%的乙醇渗漉提取可以获得较高的芍药苷提取率。     

HPLC法测定金匮肾气丸中马钱苷、芍药苷的含量

建立一种方法用于同时测定金匮肾气丸中马钱苷、芍药苷的含量．应用高效液相色谱法测定,分离条件Symmetry C18柱（4．6min×250mm,5μm）,乙腈-1％冰醋酸溶液（14：86）为流动相,流速为1mL／min,柱温为30℃、马钱苷、芍药苷线性范围分别为0.16～1.6μg（r=0．9997）,0.18～1.8μg（r=0．9999）,平均加样回收率分别为99.13％（RSD=1．43％）,99.02％（RSD=2．17％）、方法简便,快速,可靠,为金匮肾气丸进一步研究奠定基础．     

HPLC测定大风丸中芍药苷的含量

目的——建立大风丸中芍药苷的含量测定方法。方法——采用高效液相色谱法测定,用C18柱（3．9×150mm,5μm）,以1％磷酸-乙腈（88：12）为流动相,检测波长231nm。结果——芍药苷的线性范围为0．094μg～0．94μg;r=0．9999,芍药苷平均回收率为99．73％,RSD=0．52％（n=5）。结论——所用方法测定样品灵敏度高,重复性好,能有效地控制大风丸的质量。     

柴胡桂枝固体制剂的黄芩苷、芍药苷的含量测定

在制备工艺已确定的基础上,为控制柴胡桂枝固体汤剂的内在质量,保证临床用药的安全有效性,对其进行了质量标准研究。采用高效液相色谱法建立了柴胡桂枝固体汤剂中黄芩苷和芍药苷的同时含量测定方法,可有效控制本品的质量。     

HPLC法测定A颗粒中芍药苷的含量

目的：建立A颗粒中芍药苷的含量测量方法。方法：采用HPLC法对A颗粒中的芍药苷进行了含量测定。结果：芍药苷在0.1490-1.2265mg/g范围内线性关系良好。R=0.9994平均回收率为100.9%。RSD值为1.24%（n=6）。含量限度为4.5 mg/g。结论：该法可用于A颗粒中芍药苷的含量测定。     

亳白芍与赤芍药材中芍药苷含量比较

目的:建立简单、快速、灵敏、准确的HPLC-DAD法测定亳白芍与赤芍药材中芍药苷的含量。方法:采用HPLC-DAD法,ZORBAX SB-C18(250 mm×4.6 mm I.D.,5μm)色谱柱;以乙腈为流动相A,0.10%磷酸水溶液为流动相B;等度洗脱;柱温25℃;检测波长为230 nm;流速为1.0 mL·min-1。分离度R大于1.5,理论塔板数N,按芍药苷计不低于4000。结果:亳白芍和赤芍药材中芍药苷的含量分别为24.43 mg·g-1、32.77 mg·g-1。结论:赤芍药材中芍药苷的含量显著高于亳白芍药材中芍药苷的含量。     

HPLC法测定胃舒康片中芍药苷的量

建立胃舒康片含中芍药苷量的测定方法.采用高效液相色谱法定量分析含芍药苷量,使用Alltima-C18(5μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱,流动相为甲醇-水-冰醋酸(25∶75∶0.2),流速为1mL/min;进样量为10μL,检测波长为230 nm.经过系统性研究,测得平均回收率为100.42%,RSD为1.05%(n=6).该方法操作简易,专属性及重现性好,可有效地控制胃舒康片的质量.     

HPLC法测定胆立清胶囊中芍药苷的含量

报道了中药复方中白芍、赤芍和丹皮同时含有芍药苷时的处理方法，方法要靠，重现性良好，回收率符合要求。     

RP-HPLC法测定通天口服液中芍药苷的含量

目的 建立通天口服液中芍药苷的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法测定通天口服液中芍药苷含量。色谱柱：Kromasil C18柱（4.6 mm?50 mm,5 μm）;流动相：乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱;柱温30℃;检测波长230nm;进样量：10礚。结果 芍药苷在0.339礸/mL-3.782礸/mL范围内与峰面积呈良好线性关系,r=0.9999;芍药苷平均回收率为100.03%,RSD=1.79%（n=6）。结论 该定量方法简便可行、重复性好,可用于通天口服液的质量控制。     

Purification of Murine Monoclonal IgM Antibody

ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎＩｏｎｅｘｃｈａｎｇｅｉｓｔｈｅｍｏｓｔｆｒｅｑｕｅｎｔｌｙｕｓｅｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｔｅｃｈｎｉｑｕｅｆｏｒｔｈｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｃｈａｒｇｅｄｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ,ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙｗｈｅｒｅａｓｍａｌｌａｍｏｕｎｔｏｆｐｒｏｔｅｉｎｉｓｔｏｂｅｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍａｌａｒｇｅｖｏｌｕｍｅ[1 3] .Ｇｅｌｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｉｓａｔｅｃｈｎｉｑｕｅｔｈａｔｃａｎｎｏｔｏｎｌｙｓｅｐａｒａｔｅｐｒｏｔｅｉｎｓ ,…     

培养杂交瘤细胞制备单克隆抗体的工艺过程

研究了在生物反应器中培养RT-28杂交瘤细胞分泌抗A红细胞单抗的工艺过程,包括搅拌剪切、通气方式及溶氧水平、连续灌注稀释率等条件,对细胞生长及产物分泌、葡萄糖代谢及乳酸产生的影响,得出了合适的工艺条件为:温度37℃,溶解氧10～60%空气饱合度,搅拌转速30～60r/min,pH7.0～7.2。细胞密度达2.0×10~6cells/mL,单抗滴度述1:256。     

雌三醇单克隆抗体的制备与表征

活化雌三醇 (E3 )C3处的酚—OH ,与牛血清白蛋白 (BSA)偶联 ,制备得E3 的完全抗原。利用完全抗原免疫动物 ,采用单克隆抗体技术 ,经过细胞融合、克隆筛选、扩大培养、动物体内诱生等过程 ,最后获得了E3 的单克隆抗体。对纯化的单克隆抗体的性质进行表征 ,结果表明 :抗体的效价为 6 0× 10 -10 mol L ,抗体属于IgG1型 ,分子量为 16 80 0 0u ,单克隆抗体与固定化抗原亲和常数为4 7× 10 7L mol。     

雌三醇单克隆抗体的制备与表征

活化雌三醇(E3)C3处的酚-OH,与牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备得E3的完全抗原.利用完全抗原免疫动物,采用单克隆抗体技术,经过细胞融合、克隆筛选、扩大培养、动物体内诱生等过程,最后获得了E3的单克隆抗体.对纯化的单克隆抗体的性质进行表征,结果表明:抗体的效价为6.0×10-10mol/L,抗体属于IgG1型,分子量为168000u ,单克隆抗体与固定化抗原亲和常数为4.7×107L/mol.     

Smurf2单克隆抗体的制备与鉴定

Smad泛素调节因子家族的两个E3泛素连接酶成员Smurf1和Smurf2 (Smad ubiquitin regulatory factor 1 and 2)具有至少80％的同源性.为了更好地研究它们的功能,需要获得一个能区分Smurf1和Smurf2的单克隆抗体.选取Smurf2与Smurf1蛋白序列中仅有的非同源区域序列作为抗原免疫Bal b/C小鼠,成功制备若干株能稳定分泌抗Smurf2抗体的杂交瘤细胞株.对所获得的单克隆抗体的效价和特异性等进行一系列检测,结果表明该抗体能特异性地识别过表达及细胞内源Smurf2蛋白.此外该抗体能被应用于Western blot和免疫荧光实验,从而为深入研究Smurf2的细胞生物学功能提供了良好的实验基础.     

脊髓灰质炎病毒I型单克隆抗体的制备

目的: 为建立脊灰病毒Sabin株I型特异的单克隆抗体．方法:以Vero细胞增殖病毒并用蔗糖密度梯度离心法纯化后,用病毒免疫SPF级Balb/c小鼠．取小鼠免疫脾淋巴细胞与SP2/0-Ag14骨髓瘤细胞进行细胞融合,通过间接 ELISA 法筛选抗体阳性的杂交瘤细胞,并用有限稀释法克隆化．用细胞培养法制备脊灰病毒单抗,并以中和试验测定单抗效价．结果:获得了8株分泌抗脊灰病毒Sabin株I型单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中1株G8G7能够稳定分泌抗体．间接ELISA 法测得单抗的效价为1∶8,中和试验测得中和抗体的效价为1∶58．结论:G8G7分泌的抗体为抗脊灰病毒Sabin株I型特异的单克隆抗体.     

单克隆抗体靶向治疗大肠癌的研究进展

大肠癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一.已证实,大肠癌肿瘤细胞生长与血管内皮生长因子（VEGF）和表皮生长因子受体（EGFR）的过度表达均有密切的关系,作为VEGF和EGFR单克隆抗体,贝伐单抗、西妥昔单抗、帕尼单抗通过阻断VEGF和EGFR的活性,发挥抗肿瘤的作用,为治疗大肠癌开辟了一条新途径.现就近年来单克隆抗体针对大肠癌的治疗作用的研究进展进行综述.     

沙丁胺醇单克隆抗体的研制及初步应用

用沙丁胺醇和牛血清白蛋白的人工偶联物SAL-BSA免疫BALB/c小鼠,应用细胞融合技术建立3株分泌抗沙丁胺醇抗体的杂交瘤细胞株,并对抗体进行鉴定.结果表明,3株单克隆抗体对沙丁胺醇的半抑制率分别为1.41、5.53、9.62 ng/m L;单克隆抗体2F7与盐酸克伦特罗、马布特罗、特布他林的交叉率分别为217%、128%、70.5%,与莱克多巴胺、西马特罗、肾上腺素和去甲肾上腺素无交叉反应;3株单克隆抗体均为小鼠Ig G1亚类.用单克隆抗体2F7建立的胶体金免疫层析检测试纸条,对沙丁胺醇标准品的最低检出值达到3 ng/m L.制备的抗沙丁胺醇单克隆抗体有可能应用于沙丁胺醇残留快速检测试剂的研制.     

重组人源抗血管内皮生长因子单克隆抗体的制备及鉴定

通过优化密码子获得带有信号肽的人源抗血管内皮生长因子（VEGF）抗体的重链和轻链DNA序列, 分别构建表达载体pcDNA VEGFH和pcDNA VEGFV, 将表达载体共转染HEK 293细胞后, 与C6胶质瘤细胞共培养, 并将所得蛋白进行分离纯化. 实验结果表明: pcDNA VEGFH和pcDNA VEGFV共转染HEK 293F细胞, 可显著抑制C6细胞增殖（P<0.01）; 转染24~144 h后的细胞培养上清液中均有蛋白表达; 所得纯化蛋白和标准品一致; 纯化所得抗体蛋白能明显抑制C6细胞增殖（P<005~001）, 与标准品抑制效果相似.     

重组人源抗血管内皮生长因子单克隆抗体的制备及鉴定

通过优化密码子获得带有信号肽的人源抗血管内皮生长因子（VEGF）抗体的重链和轻链DNA序列, 分别构建表达载体pcDNA VEGFH和pcDNA VEGFV, 将表达载体共转染HEK 293细胞后, 与C6胶质瘤细胞共培养, 并将所得蛋白进行分离纯化. 实验结果表明: pcDNA VEGFH和pcDNA VEGFV共转染HEK 293F细胞, 可显著抑制C6细胞增殖（P<0.01）; 转染24~144 h后的细胞培养上清液中均有蛋白表达; 所得纯化蛋白和标准品一致; 纯化所得抗体蛋白能明显抑制C6细胞增殖（P<005~001）, 与标准品抑制效果相似.