冷冻保存2年的体外受精胚胎移植产犊报道

１４０枚利用完全体外化培养技术生产、经常规方法进行冷冻保存两年后的良种肉牛胚胎，通过非手术法移植到７０头本地母牛，每头受体牛移入２枚胚胎以繁殖纯种后代。结果受体母牛２个情期不返情率为５０％（３５／７０）；１２０ｄ后经直肠检查确诊怀孕率为２７．１％（１９／７０）；９头受体母牛足月产下犊牛１０头，产犊率为１２．９％（９／７０），双胎率为１１．１％（１／９）。受体母牛平均妊娠期为２８０．８天（２６６￣２     

115个周期体外受精-胚胎移植临床分析

目的：总结体外受精一胚胎移植（IVF-ET）的受精、卵裂及妊娠情况，探讨提高妊娠成功率的因素。方法：回顾性分析2003年3月-2005年11月间接受常规IVF-ET治疗的108N不孕患者115个周期临床资料。结果：115个周期共获卵996个，受精802个，受精率80．5％，卵裂率87．9％，临床妊娠36例，总妊娠率33．33％。结论：IVF-ET辅助生育过程中患者年龄、保持良好的心理状态、合理的应用超促排卵药物、准确判断取卵时间、严格控制实验室每件及严格掌握适应症是提高成功率的关键因素。     

体外受精-胚胎移植343个周期分析

目的：探讨本研究所从2009年1月～2009年12月,用体外受精-胚胎移（IVF-ET）治疗343个周期不孕症的临床应用效果。方法：回顾性分析2009年1月至2009年12月间采用常规体外受精-胚胎移植（IVF-ET）治疗343周期患者资料。结果：343个周期（其中移植周期324个）平均获卵10.96＋6.11个,受精率78.06%,卵裂率97.45%,平均移植胚胎数2.15＋0.55,临床妊娠115例,总妊娠率35.49%。结论：随着IVF-ET技术的提高,采用适宜的个体化超促排卵方案和培养条件的改善,是可以提高成功率。     

体外受精—胚胎移植在不孕症治疗中的应用

对60例不孕症患者采用GnRH-a/FSH/hCG超促排卵方案治疗,应用HTF培养基培养胚胎。采样60个取卵周期,58个周期进行胚胎移植。移植周期妊娠率达34.5%。从临床效果可见,体外受精-胚胎移植是解决输卵管因素不孕最直接的方法。     

体外受精——胚胎移植在不孕症治疗中的应用

对 6 0例不孕症患者采用GnRH -a FSH HCG超促排卵方案治疗 ,应用HTF培养基培养胚胎。采样 6 0个取卵周期 ,5 8个周期进行胚胎移植。移植周期妊娠率达34.5 %。从临床效果可见 ,体外受精—胚胎移植是解决输卵管因素不孕最直接的方法     

牛细胞核移植试验初报

体外成熟培养（ＩＶＭ）２３－２４ｈ的牛卵母细胞，去核后用８０Ｖ／ｍｍ，４０μｓ电激活２次（Ｉ组）或不激活（Ⅱ组），然后注入８－３２细胞期体外受精（ＩＶＦ）牛胚胎的卵裂球，再用８０－１００Ｖ／ｍｍ，４０μｓ电激两次诱导卵母细胞与卵裂球融合，两组的融合率（６２．８％与６５．１％）和卵裂率（５５．４％与５１．９％）无显著差异（Ｐ〉０．０５）。全部４１２枚重组卵电激后的融合率是６３．８％（２６３／４１２）     

体外受精——胚胎移植技术及其进展

自从世界上第1例“试管婴儿”诞生以来人类辅助生殖技术的主体体外受精-胚胎移植技术人类辅助生殖技术已经走过了30年的发展历程,现已成为治疗不孕不育症的理想治疗措施之一。体外受精-胚胎移植技术主要包括促排卵、卵泡检测与取卵、精子的优选与处理、体外受精、胚胎的体外培养及挑选、胚胎移植、移植后护理等。该文就体外受精-胚胎移植技术及其研究进展作一综述。     

牛胚胎移植在山西的研究与应用

选择60头本地黄牛进行同期发情和胚胎移植研究，结果表明：CID—B和ODB处理组的同期发情率显著高于PMSG和PG的处理组（p〈0．01），60头受体牛中，黄体合格进行胚胎移植的共23头，移植率30．4％，产犊率26．1％，其中A，B级胚胎在移植受体中差异不显著（p〉0．05）。     

牛体外受精胚胎在成份确定培养液内的发育

将牛体外受精胚胎培养于化学成份确定的 SOF+PVA的培养系统内 ,观察了不同PVA浓度对胚胎体外发育的影响 .结果在 1 mg/ml、3mg/ml和 5mg/ml的 PVA浓度条件下 ,囊胚的发育率分别为 2 7.5% a、1 9.1 % a和 4 .3% b( a>b,P<0 .0 1 ) .将体外受精胚胎分别培养于 M1 99+输卵管上皮细胞、SOF+BSA和 SOF+PVA的三种培养系统内 ,囊胚的发育率分别为 2 0 .4 %、2 9.0 %和 2 7.5% ,结果表明本研究确立的化学成份确定的体外培养系统可以用于牛体外受精胚胎的发育培养 .     

牛胚胎移植信息管理系统(ETMIS)的建立

介绍了牛胚胎移植信息管理系统（ETMIS）的研制概况,包括其开发环境,数据库结构设计和各主要模块的功能,特点及具体设计方法。本系统具有界面友好,信息量大,易于维护的功能扩展等优点。     

胚胎的培养液平均拥有量和单独或群体培养对牛体外受精胚胎发育的影响

采用化学成分明确的培养系统,研究了胚胎的培养液平均拥有量以及单独或群体培养对牛IVF卵体外发育的影响.将牛体外受精(IVF)卵分别以每100、50和20μl培养液小滴内10枚卵子的形式进行发育培养,三个处理组的囊胚发育率分别为:6.0%、9.4%和14.3%,三者间无显著差异.在此基础上,选择培养效果较好的每枚胚胎2μl的培养液量,分别在20、10、4、2μl小滴内培养10、5、2、1枚胚胎,四个组的囊胚发育率分别为:10.0%、16.4%、10.0%、4.0%,5枚胚胎/10μl小滴处理组的囊胚率显著高于1枚胚胎/2μl处理组(p<0.05).研究结果表明:不同培养液拥有量以及单独或群体培养都可支持部分胚胎发育至囊胚阶段,降低培养液体积和群体培养更有助于牛IVF卵的体外发育.     

牛体外受精胚胎成份明确培养系统的建立

以 SOF为基本培养液 ,分别添加血清、PVA以及同时添加 PVA、肌醇和柠檬酸钠 ,进行牛体外受精卵的发育培养 ,三个处理组的囊胚发育率分别为 :3 2 .6%、1 1 .9%和 1 5 .9% ,血清处理组极显著高于两个 PVA处理组 (p<0 .0 1 ) .在此基础上 ,将受精处理后的卵子去掉卵丘细胞后 ,培养于 SOF PVA 肌醇 柠檬酸钠培养液内 ,以未去掉卵丘细胞的卵子为对照 ,两个处理组的囊胚发育率分别为 1 0 .8%和 2 1 .1 % .二者间没有显著差异 .结果表明没有血清和卵丘细胞的成份明确的培养系统能够支持牛体外受精卵发育至囊胚阶段 .     

The Effects of Different Culture Systems on the Quality of Bovine In Vitro Fertilized Embryos

研究探讨了不同体外培养条件下牛体外受精胚胎的发育速度及囊胚细胞数，从而了解不同体外培养系统对牛体外受精胚胎质量的影响．实验一中将体外受精卵分别在ＳＯＦ＋牛输卵管上皮细胞（ＢＯＥＣ）和ＴＣＭ１９９＋ＢＯＥＣ两种培养系统内培养，在这两种培养条件下囊胚发育率分别为２２．２％和２１．２％，囊胚细胞数分别为１１３．３±５．０和９７．９±８．３，受精后第６～９ｄ的囊胚出现率分别为４０．１％ａ、３７．０％、１９．２％ｂ、２．７％和１３．５％ｃ、３２．７％、３６．５％ｄ、１７．３％（ａ＞ｃ，Ｐ＜０．０１，ｄ＞ｂ，Ｐ＜０．０５），表明牛体外受精卵在ＳＯＦ＋ＢＯＥＣ中的发育速度快于在ＴＣＭ１９９＋ＢＯＥＣ中．实验二中将体外受精卵分别培养于ＳＯＦ＋ＢＯＥＣ、ＳＯＦ＋牛卵丘细胞、ＳＯＦ＋ＢＳＡ三种培养系统中，结果囊胚发育率分别为３５．５％ｅ、２９．４％和２２．４％ｆ（ｅ＞ｆ，Ｐ＜０．０１），囊胚细胞数分别为１１７．３±８．０ｇ、９４．２±９．３和９０．２±９．４ｈ（ｇ＞ｈ，Ｐ＜０．０５）．实验三观察了体外受精胚胎在ＳＯＦ＋ＢＯＥＣ培养条件下发育速度与囊胚细胞数的关系，结果第６～９ｄ的囊胚细胞数分别为１１０．８±１０．２ｉ、１２８．     

牛体外受精胚胎与输卵管上皮细胞和卵丘细胞的共同培养

采用四种方法以对牛体外精胚进行培养，以便了解牛输卵上皮细胞和卵丘细胞对牛体外受精胚发育的影响。其中方法１是输卵管上皮细胞培养法，２是卵丘细胞培养法，３是输卵管上皮细胞＋卵丘细胞培养法，４是输卵管上皮＋ＥＧＦ培养法，实验１采用方法１、２和３进行培养，结果采用方法３的囊胚发育率为１９．２％，显著低于采用方法１的整胚发育率。实验２采用方法１、２和４进行培养，结果采用方法１和４的囊胚发育分别为１９．４％和     

小鼠胚胎移植技术优化及对巨细胞病毒净化研究

目的 建立小鼠巨细胞病毒净化方法,以获得无MCMV感染的小鼠。方法 利用胚胎移植技术,通过使用不同激素、不同发情周期注射激素、受体鼠品系、不同的移植方法、不同时期胚胎移植,以及移植胚胎数量等对比试验,优化了净化条件。利用优化的胚胎移植净化方法,对供体鼠进行了净化。结果 SIGMA生产的激素,在10 IU剂量下超排得到的可用胚胎数量约为17枚/只;在小鼠发情间期超排得到的可用胚胎最多,超排的可用胚胎数约为23枚/只;选取C57雄性小鼠与ICR雌性小鼠交配的子一代作为受体鼠,产仔率达44.5%;输卵管移植较子宫移植效果好,产仔率为40.64%;移植2细胞胚胎的妊娠率为80%,明显优于单细胞和8细胞;受体鼠移植24枚胚胎时,产仔率达到了43.75%。利用优化的小鼠巨细胞病毒胚胎移植净化方法,净化得到了无MCMV感染的小鼠。结论 建立了小鼠巨细胞病毒净化方法,为获得无MCMV感染的小鼠种群提供了可靠的保障。     

不同体外培养系统对牛体外受精胚胎冷冻解冻后孵化能力的影响

采用ＳＯＦ和ＴＣＭ１９９与输卵管上皮细胞共同培养系统对牛体外受精卵进行培养,观察了在这两种培养条件下得到的囊胚经冷冻—解冻后的孵化能力．在ＳＯＦ＋输卵管上皮细胞的培养条件下,囊胚的发育率为２１．３％,囊胚经冷冻—解冻后的孵化率为３７．５％;在ＴＣＭ１９９＋输卵管上皮细胞的培养条件下,囊胚的发育率为２６．０％,囊胚经冷冻—解冻后的孵化率为４７．７％．研究结果表明这两种体外培养系统的培养效果无显著差异（Ｐ＞０．０５）．     

胚胎移植技术的研究进展及前景展望

哺乳动物胚胎移植技术主要包括超数排卵、胚胎回收、胚胎冷冻和解冻及胚胎的移植等技术环节.胚胎移植技术是目前生殖生物学和畜牧繁殖学领域应用较为广泛的一项技术,从它诞生至今,已体现出了其巨大的研究和应用价值.就该技术的相关内容和研究进展作了系统综述,并对其发展前景作了预测.