用PCR法检测人巨细胞病毒DNA

用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）法检测患者尿液中人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ．结果表明，自行设计合成的引物位于ＨＣＭＶ基因组早期蛋白基因区，经ＰＣＲ仪扩增一段长４３０ｂｐ的特异序列片段，对正常人基因组ＤＮＡ或其它疱疹病毒ＤＮＡ无交叉反应．此法可检测出少至１０－１６ｇ（０．１ｆｇ）的病毒ＤＮＡ．通过对３５份尿液标本的检测，比较ＰＣＲ法和组织培养法的检测结果完全一致     

应用PCR技术检测单纯疱疹病毒

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，检测２０５例样本，其中单纯疱疹病毒阳性６５例，阳性率３１．７％．ＰＣＲ技术具有高度的敏感性和特异性，为疱疹病毒感染的临床早期准确诊断、判定药物疗效和流行病学研究等提供了有效的手段     

小儿支原体肺炎应用聚合酶链反应快速诊断及临床分析

本文采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测１０４例临床诊断为支气管肺炎的患儿咽拭子标本，结果有３４例阳性，占３２．７％，其中最小患儿４７天，３岁以内的婴幼儿感染率较高，联合应用大环内酯类与先锋霉素类抗生素疗效好，提出咽拭子ＰＣＲ方法检测支原体是临床上一项快速、具有高度特异性方法，对提高临床诊治水平很有帮助     

用聚合酶链反应检测HBVDNA敏感性的探讨

本实验用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对５６例受检者进行乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ检测，并将结果与血清标志物检测结果比较，结果表明，在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃＡｇ同时阳性的受检者中，１００％可检测出ＨＢＶＤＮＡ。在血清标志物全阴性受检者中，也有４５％可测出ＨＢＶＤＮＡ。结合其他血清标志物的检测结果，说明用ＰＣＲ技术检测ＨＢＶＤＮＡ是敏感的，在临床应用上也是可行的。     

PCR检测结核杆菌343例

ＰＣＲ检测结核杆菌３４３例．阳性６９例，阳性率２０．１１％．ＰＣＲ技术具有高度的敏感性和特异性．能检测结核杆菌培养阴性及涂片阴性的结核病患者．对ｘ线检查阴性患者也有一定的阳性率．     

PCR和原杂交技术检测鼻咽癌石蜡组织中HHV-6DNA

为了解人疱疹病毒６型（ＨＨＶ－６）与鼻咽癌（ＮＰＣ）的可能关系，检测了ＮＰＣ发生不同阶段的石蜡组织中ＨＨＶ－６ＤＮＡ的存在情况。方法：采用ＰＣＲ、斑点杂交和原位杂交技术，共检测了４２例鼻咽癌石蜡组织、２１例鼻咽癌前病变石蜡组织和２７例正常鼻咽石蜡组织ＨＨＶ－６ＤＮＡ的存在情况。结果：通过ＰＣＲ扩增，在４２例ＮＰＣ组织中检出１３例存在ＨＨＶ－６ＤＮＡ，占３１％；２１例鼻咽癌前病变组织中１例阳性（４７％），而２７例正常鼻咽组织中无一例阳性。斑点杂交的结果表明ＰＣＲ扩增是ＨＨＶ－６特异的。原位杂交发现，在１３例ＰＣＲＨＨＶ－６阳性的ＮＰＣ组织中１１例ＨＨＶ－６ＤＮＡ阳性。ＨＨＶ－６ＤＮＡ主要分布于癌巢的肿瘤细胞核内，少数亦可见于癌旁的异型细胞，但在淋巴细胞及正常上皮细胞内未发现阳性信号。结论：本实验用分子生物学技术首次证明，在中国ＮＰＣ患者的鼻咽石蜡组织中存在ＨＨＶ－６。ＨＨＶ－６与ＮＰ相关，并有可能在ＮＰＣ的癌变过程中起一定的作用     

性病淋球菌PCR基因扩增检测方法及应用

本文介绍性病淋球菌ＰＣＲ基因检测方法的研究过程．笔者设计一对对淋球菌隐蔽性质粒ｃｐｐＢ基因有专一性的引物，应用该引物进行ＰＣＲ体外基因扩增．对淋病患者的泌尿生殖道标本可检出３８０ｂＰ特异片段应用该试剂盒检测１２５例性混乱患者与细菌培养法比较，前者检出率２５．６％（３２／１２５），后者仅６．４％（８／１２５）．     

通用引物PCR方法检测生殖道HPV

目的：通用引物ＰＣＲ技术检测生殖道人乳头瘤病毒。方法：根据国外献报道的基因序列选出一对寡核苷酸引物，其扩增片断为４５０ｂｐ。结果：在４５０ｂｐ处出现ＤＮＡ扩增带为阳性，用于临床标本的检测，其阳性率为３０％（２９／９６）。结论：通用引物ＰＣＲ技术检测生殖道ＨＰＶ－ＤＮＡ快速，敏感，可靠。     

中国人P型铜转运ATP酶基因突变的初步研究

应用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）及测序等方法分析了１４１便ＷＤ患者ＡＴＰ７Ｂ基因第７、９及１４外显子的部分ＤＮＡ序列改变，通过对患者ＤＮＡＴ下沉人ＤＮＡＲＰＣＲ－ＳＳＣＰ电泳带迁移作对比分析，发现在１４１例患者中第７、９及１４外显子ＰＣＲ扩增产物迁移异常才分别为４例、６例和４０例，依据ＤＮＡ物单链构聚与分子电泳迁移的关系，提示该组病人中ＡＴＰ７Ｂ基因第７、９和１４外显子的突变率     

多聚酶链反应技术在淋病检测上的应用

本文应用多聚酶链反应（ＰｏｌｇｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）技术对直接涂片镜检淋球菌阴性患者１００例进行淋球菌ｃｐｐＢ基因片段测定。其中ＰＣＲ阳性者高达５４例，占５４％，该组病人中有２０例尖锐湿疣患者，其中ＰＣＲ阳性者１３例，占６５％。以上结果提示：ＰＣＲ技术可明显提高淋病患者的检出率。     

老年糖尿病合并肺结核22例分析

目的了解老年糖尿病合并肺结核的临床特点;方法对我院于1998～2006年诊断明确的老年糖尿病合并肺结核22例进行分析;结果使用胰岛素和血糖控制良好者结核病灶吸收好转,痰抗酸杆菌阳性者转阴,空洞缩小或闭合3/4以上。血糖控制不良者结核病灶无明显好转甚至恶化。结论糖尿病是结核病病发生和恶化的危险因素之一。良好的血糖控制是防止结核病难于控制甚至恶化的关键。应早期利用胰岛素正规治疗以有效控制血糖,减少其他降糖药物的使用,合理膳食,早期、联合、足量、规律使用抗结核药物,可提高两病的疗效。     

抗结核药物治疗对肝功能的影响

目的观察抗结核药物对乙型肝炎病毒表面标志物(HBVM)阳性的肺结核患者肝功能的影响.方法回顾分析2001年1月到2002年12月间采用异烟肼(H)、利福平(R)、吡嗪酰胺(Z)三联再加上链霉素(S)或乙胺丁醇(E)方案治疗的乙肝病毒表面标志物阳性患者肝功能的情况,以同期采用同样化疗方案治疗的乙肝病毒表面标志物(HBVM)5项阴性结核病患者为对照.结果 HBVM阳性组肝损率(35.61%)高于乙肝阴性组(17.02%),两组经统计学处理差异显著(P<0.01).结论抗结核药物对HBVM阳性患者肝功能损害大.     

综合医院肺结核病诊断要素探讨

目的 :总结综合医院肺结核诊断的经验 ,探索在诸多临床和实验室诊断因素中哪些是重要因素。方法 :收集本院1999年临床疑诊为肺结核患者 30例 ,其中确诊为肺结核 16例 ,非肺结核 14例 ;记录每例患者的 15个病史特征因素和 14个实验室特征因素以及最终诊断。将以上资料作对数优势线性回归分析、单因素 χ2 分析和诊断筛查试验分析。结果 :多因素分析中发现 X线胸片上野淡薄云雾影最重要 ,痰菌涂片次之 ,发热第三 ;单因素分析中发现 X线和痰菌涂片仍有意义 ,而发热却没有临床意义 ;诊断筛查试验分析也说明 X线胸片的正确率最高 ,痰菌涂片次之 ,发热的正确率最低 ;在涂阳结核和涂阴结核之间 ,以上三因素无明显差别。结论 :在综合医院的肺结核诊断工作中 X线胸片的表现是重点 ,其次是痰菌涂片 ,而痰菌涂片的临床表现的特异性最差 ;在综合医院仍然需要开展结核杆菌的培养工作 ;在未来的工作中应建立适应我国国情的肺结核诊断评分系统 ,使肺结核的诊断由经验走向循证     

利福喷叮治疗肺结核合并乙肝28例的临床分析

目的 :探讨利福喷叮治疗肺结核合并乙肝的临床表现。方法 :对 2 8例肺结核合并乙肝病毒携带者用含利福喷叮方案治疗的结果及肝毒副作用进行分析 ,并以利福平为对照。结果 :治疗组和对照组二个月痰菌转阴率分别为 78.5 %和 85 .1% ,X线表现病灶总吸收率分别为 89.3%和 72 .1% ,治疗组肝损害发生率小于利福平组。结论 :利福喷叮是一种新的、有效的、安全的抗结核药物 ,疗效与利福平相当 ,对乙肝病毒携带者肝损害比利福平小 ,值得临床推广作用。     

r结核分枝杆菌PhoP／PhoR基因重组穿梭表达质粒的构建及鉴定

为构建结核杆菌PhoPR双组分系统PhoP、PhoR基因的重组穿梭质粒pMV361-PhoP、pMV361-PhoR并对其进行鉴定。采用结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株基因组DNA为模版,利用PCR技术分别扩增PhoP、PhoR基因编码序列,先克隆于T—Vector pMD19（Simple）,再亚克隆至大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体pMV361,并转化E.coli DH5α感受态细胞,提取所得的阳性克隆子获得重组表达质粒pMV361-PhoP、pMV361-PhoR,通过PCR及双酶切鉴定。结果显示,结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株基因组DNA中扩增出的PhoP、PhoR基因与GenBank公布的序列一致,经过PCR及双酶切鉴定,表明PhoP、PhoR基因均成功插入了pMV361穿梭载体。由此可知,成功构建了重组穿梭质粒pMV361-PhoP、pMV361-PhoR,为进一步研究PhoPR双组分系统奠定了基础。     

结核分枝杆菌抗酸染色装置的研制

为了改进结核杆菌传统抗酸染色方法的缺点,该文研制一种用于结核杆菌抗酸染色的装置,对该装置的设计、制备、功能及应用方法进行详细的介绍,具有稳定,易控制,操作简便等优点。     

结核分枝杆菌特异性抗原的N末端氨基酸序列分析

把ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ分析抗原抗体反应的高度特异性与ＰＶＤＦ膜作为载体进行蛋白质氨基酸序列分析的高度敏感性相结合对结核分枝菌的特异性抗原表位刊物筛选和分析鉴定,获得了一个分子质量为３１ｋｕ,Ｎ末端为ＡｌａＧｌｕＶａｌＡｓｐＬｅｕＶａｌＰｈｅＡｌａＶａｌＳｅｒＴｒｐＰｒｏＶａｌＧｌｙ的结核分枝杆菌抗原。     

经纤维支气管镜诊断支气管内膜结核47例分析

报道经纤维支气管镜检查并最后确诊的４７例支气管内膜结核患，其纤维支气管镜下形态表现多样性，以粘膜粗糙、充血最常见（占５５．３％），局部瘢痕狭窄（占２３．４％），部分（尤其是老年人）可表现为腔内肿物（占２３．４％）易误诊为支气管肺癌。通过纤支镜检查、配合粘膜活检病理、刷检涂片找抗酸杆菌、检测结核菌ＤＮＡ，以及术后３天内留痰涂片查抗酸杆菌等检测手段可大大提高结核病的诊断率。重复纤支镜检查对结核与肿瘤     

印迹膜测序法分析结核分枝杆菌抗原蛋白

把WesternBlot技术分析抗原抗体反应的高度特异性与用PVDF膜作载体进行蛋白质氨基酸序列分析的高度敏感性相结合对结核分枝杆菌 (Mycobacteriumtuberculosis,TB)的特异性、保护性抗原进行筛选和分析鉴定 ,获得了分子量为 31KDa、30KDa的抗原 这两种抗原与抗结核分枝杆菌的单克隆抗体和结核病人血清均发生阳性反应 ,而与正常小鼠血清和健康人血清呈阴性反应 用印迹膜测序法测出 31KDa抗原蛋白的N 末端序列为AlaGluValAspTrpLeuValPheAlaValSerTrpProValGly ,30KDa蛋白序列为PheSerArgProGlyLeuProValGluTry 印迹膜测序为分子生物学研究提供了一种有效的新途径     

吸毒者肺结核12例临床分析

对 12例吸毒者肺结核的临床特点及治疗效果作回顾性分析 .结果表明 :12例均符合吗啡类药物依赖诊断标准 .经抗痨治疗后 ,9例痰菌阳性只有 1例阴转 ,10例空洞未闭合 ;12例中只有 2例规则服药 ,其中治愈 1例 .吸毒者易患肺结核 ,且治愈率低 .