SRAP分子标记分析芫花遗传多样性

采用SRAP分子标记对芫花的遗传多样性进行了分析.结果每对引物组合产生8～20条比较清晰的扩增带.10对引物组合共产生473条扩增带.平均每对引物组合产生47.3条.10对引物组合共产生多态性带92条,每对引物组合产生7～14条,平均为9.2条.每对引物组合产生的多态性带的比例为10.9%～29.1%,平均为19.44%.结果表明,SRAP标记多态性还是较高的,可以用于分析芫花的遗传多样性.     

对虾白斑综合症病毒P9蛋白转录水平的微阵列分析及其免疫荧光标记

从构建的对虾白斑综合症病毒cDNA文库中,我们筛选到一个拷贝数最高,编码82个氨基酸的基因(命名为p9,wsv230).该基因被克隆到pGEX-2T载体中进行GST融合蛋白的原核表达,纯化的融合蛋白GST-P9用于制备特异的多克隆抗体.利用微阵列技术和免疫荧光标记技术,对该蛋白的转录水平及其在感染细胞内的分布进行了初步研究,表明该基因为高丰度表达,推测是对虾白斑综合症病毒的一个重要基因.     

对虾病毒性白斑病的流行病学

在福州地区分离到一种高致病性的白斑病病毒,该病毒致病性强,可感染不同品种、不同生长期和不同形体大小的个体．引发的病害潜育期短、病程短、死亡率高．病害覆盖面积广,发病时间大多集中在6月和9月,其中以6月中下旬最为集中．以长毛对虾为对象测定温度与侵染性关系,结果表明,高温可促进发病,低温可延缓发病并延长病程;在长毛对虾生长的适温范围(8～32℃)内,病毒均可侵染并造成寄主发病．病毒的感染途径主要是经口感染,通过摄食饵料和携带病原的病弱个体等方式传播,正常情况下,不会经水传播．     

斑节对虾白斑综合症的防治

报道海南省临高县文科虾场、广西北海横路山虾场、北海市海水养殖综合实验场斑节对虾白斑综合症的防治实验。认为放苗前用二氧化氯消灭病毒,用漂白粉消灭病毒和细菌,用孔雀石绿杀死真菌和原生动物,用石灰中和酸性,用尿素和过磷酸钙培养浮游植物。养殖期用光合细菌净化水质,用水质稳定剂净化底质,合理投饵,科学管理,保持养殖水体生态平衡,恶化病原体繁衍条件,优化斑节对虾生存环境,可以成功地预防斑节对虾白斑综合症,对早期轻病者有一定的治疗作用。     

DNA分子标记研究进展

探究与了解遗传变异有助于我们从分子基础上理解各种生命现象。由于并非所有的物种都进行过基因组测序,因此,分子标记技术以及它们与表型的关系可以作为有用的标签帮助我们研究遗传变异。基于DNA的分子标记如：RFLP（restriction fragment length polymorphism）,RAPD（random ampli？ed polymorphic DNA）,SSR．（simple sequence repeats）and AFLP（ampli-？ed fragment length polymorphism）等应用于生态学、分类学、进化方面、系统发生以及遗传学方面的研究。最近几年,出现了一批新的分子标记技术,这些新的分子标记技术最初源自几种基本的分子标记技术的结合。斯的分子标记技术联合了基本分子标记技术的优点,提高了灵敏度以及检测基因的不连续性和特异性。新的分子标记技术利用了一组新的DNA元件如：反转录转座予、线粒体微卫星序列、叶绿体微卫星序列等,通过增加基因组的覆盖率而检测遗传的多样性。RAPD和AFLP同样应用在以cDNA为模板来研究基因的表达。这篇综述主要介绍了近二十年来各种分子技术以及其原理。     

白斑综合症病毒对对虾Caspase基因的调控

研究病毒感染对白斑综合症病毒基因的录调控的影响,将Caspase调控区的DNA进行生物素标记,然后与链霉亲和素修饰的琼脂糖结合.通过下拉发现,Caspase基因的启动子序列与white spot syndromic virus(WSSV)病毒的两个蛋白Vp38和Vp41B有相互作用.通过荧光素酶报告基因发现,Vp38和Vp41B对Caspase启动子活性分别有抑制和激活作用.采用RNAi技术下调两个WSSV蛋白的表达后,研究发现:Vp38和Vp41B分别对对虾血细胞的凋亡水平有促进和抑制的调控作用.     

对虾白斑病毒多抗原决定簇重组蛋白的抗原性分析

为研究重组多表位蛋白制备疫苗的方法的可行性,研究通过利用目前有研究证实与对虾白斑综合征病毒(WSSV)感染与致病力相关的重要决定因子囊膜蛋白VP28、VP19和被膜蛋白VP26,从这三种蛋白基因中筛选表位基因,将这些筛选到的抗原表位通过最优化的方式组合以及密码子优化,组成新的表位基因序列,命名为Y1798G,长度为509 bp。将该基因克隆到p ET-32a原核表达载体,生产抗原表位蛋白。将纯化的抗原蛋白注射到小白鼠体内,获得抗体;并通过蛋白免疫印迹(western blot)实验验证获得的抗体能否识别结合WSSV。结果表明所构建的抗原表位重组蛋白对WSSV具有特异抗原性,可见此种制备对虾白斑病毒疫苗的策略具有可行性。     

几种理化因子对急性感染WSSV凡纳滨对虾的影响

根据正交试验表L16(45),对海水盐度、NH4+-N质量浓度、NO2--N质量浓度、pH及感染WSSV的量各4个水平进行研究,发现这些因素对凡纳滨对虾存活时间的影响大小顺序为:pHWSSVNO2--NNH4+-N盐度。其中,pH、WSSV、NO2--N、NH4+-N与凡纳滨对虾的平均存活时间的相关性达到极显著水平(P0.01),而盐度与凡纳滨对虾的平均存活时间的相关性没有达到显著水平(P0.05)。     

淡水池养南美白对虾白斑综合症病毒的分离及其回攻试验

从苏州市某淡水养殖池塘中采得南美白对虾（Penaeus vannamei）病虾,从病体中分离出一种杆状病毒,纯化的病毒粒子经电镜观察发现其大小（50nm×375nm）、形态特征（杆状）与对虾白斑综合症病毒（White Spot Syndrome Virus,简称WSSV）极其相似,克氏原螯虾（Procambarus clarki）回归试验及病毒分离、观察实验,初步表明采集的病料为对虾白斑综合症病虾．     

蓖麻种质遗传多样性的SRAP分析

蓖麻(Ricinus communis L.)是一种重要的工业油源作物,具有多种经济价值.为了解蓖麻的遗传多样性,本研究对50份蓖麻种质的遗传多样性进行SRAP分析.结果表明50份种质之间多态性低,其多态条带比率、平均基因多样性和每对引物的多态性带,分别为29.97％、0.0904和5.41,遗传相似系数介于0.6469至0.9739之间,香农指数为0.1379;华北种质群比其它种质群的遗传变异相对丰富,而华南种质群的各种质则紧密地聚在一起.采用不加权算术平均组对法(UPGMA)将50份种质分为三大类群,与二维主成分分析(PCA)的结果相一致,一些来自相同地区的种质紧密聚在一起,表现出一定的地域性;7个种质群分别聚为两大类群.     

Analysis of tandem repeats in the genome of Chinese shrimp Fenneropenaeus chinensis

Through random sequencing, we found a total of 884000 base-pairs （bp） of random genomic sequences in the genome of Chinese shrimp （Fenneropenaeus chinensis）.Using bio-soft Tandem Repeat Finder （TRF） software, 2159 tandem repeats were found, in which there were 1714 microsatellites and 445 minisatellites, accounting for 79.4% and 20.6% of repeat sequences, respectively. The cumulative length of repeat sequences was found to be 116685 bp, accounting for 13.2% of the total DNA sequence; the cumulative length of microsatellites occupied 9.78% of the total DNA sequence, and that of minisatellites occupied 3.42%. In decreasing order, the 20 most abundant repeat sequence classes were as follows： AT （557）, AC （471）, AG （274）, AAT（92）, A （56）, AAG （28）, ATC （27）, ATAG （27）, AGG （18）, ACT（15）, C （11）, AAC （11）, ACAT （11）, CAGA （10）, AGAA （9）,AGGG （7）, CAAA （7）, CGCA （6）, ATAA （6）, AGAGAA （6）.Dinucleotide repeats, not only in the aspect of the number,but also in cumulative length, were the preponderant repeat type. There were few classes and low copy numbers of repeat units of the pentanucleotide repeat type, which included only three classes： AGAGA, GAGGC and AAAGA. The classes and copy numbers of heptanucleotide, eleven-nucleotide and thirteen-nucleotide primer-number-composed repeats were distinctly less than that of repeat types beside them.     

中国明对虾卵黄蛋白原基因启动子克隆与分析

为了探明中国明对虾卵黄蛋白原基因启动子表达调控机制,利用DNA步移法克隆了中国明对虾卵黄蛋白原基因启动子及其上游调控序列,总长1 100bp.分析表明,在基因转录起始位点上游-30～-24bp处有1个TATA box,未发现有CAAT box和GC box.同时,在上游调控区还存在有多个可能影响启动子转录活性的顺式作用元件,如NF-κB,YY1和SP1等转录因子结合位点.这些结果为深入研究中国明对虾卵黄蛋白积累及卵子发生过程奠定了基础.     

"天下第一泉"考

"天下第一泉"随着历史的沿革,名称有所不同,在用名称时,要注意不应错位,否则就不符合逻辑了."泠"与"泉"的概念是不一样的,称名"中泠泉" 历史上是从明代才开始的,普遍流传的文天祥<饮中泠泉>诗,题目实际为清人所加,是不可靠的.现查证誉为"天下第一泉"的,全国仅有三处,各有所长,确实无愧于天下.文中还阐明了"天下第一泉"泉水干枯的原因以及复苏的可能性与艰巨性.     

Discovery of immune related factors in Fenneropenaeus chinensis by annotation of ESTs

A total of 10446 expressed sequence tags (ESTs) are obtained by a large-scale sequencing of a cDNA library from cephalothorax of adult Fenneropenaeus chinensis.An EST analysis platform was built up based on local computers and bioinformatic techniques were used to annotate these ESTs in order to promptly find possible functional genes, especially for immune related factors.About 4% of the ESTs show similarity to the coding sequences of such factors, including lectin, serine protease, serpin, lysozyme, etc.These ESTs provide a partial profile of the immune system in F.chinensis and useful information for further study on these genes.     

常德阳光鑫都11号高层商住楼结构设计

结合1栋带结构转换层的高层商住楼的建筑结构设计,详细介绍了其结构布置、抗震加强措施、基础设计以及相应的计算分析结果。并给出了基础施工建议．强调了抗震概念设计的重要性,并建议用概念设计的理念去指导建筑方案设计.     

白斑综合征病毒(WSSV)和血卵涡鞕虫多重PCR检测方法的建立

根据对虾白斑综合征病毒(WSSV)和血卵涡鞕虫在GenBank中已发表的基因序列分别设计2对引物,建立了一种同时检测WSSV和血卵涡鞕虫的多重PCR方法,即通过一次PCR反应,同时扩增WSSV和血卵涡鞕虫2种病原的核酸。应用该方法分别对已知WSSV和血卵涡鞕虫阳性的样品进行PCR扩增,分别扩增出了2条特异性带———467 bp(WSSV)和168 bp(血卵涡鞕虫),与实验设计相符,且与常规PCR检测结果一致。特异性实验结果也表明,该方法对WSSV和血卵涡鞕虫的检测均具很好的特异性,而对三疣梭子蟹其它常见病原、梭子蟹DNA样本的PCR扩增结果均为阴性。10份临床样品检测结果表明该检测结果与常规PCR检测结果符合率达到100%,说明所建立的多重PCR方法可以用于三疣梭子蟹2种病原的快速检测和鉴别诊断,对养殖三疣梭子蟹的疾病及时防控具有重要意义。     

王屋山道教"第一洞天"的生态伦理思想初探

河洛地区的王屋山,是中国道教的"天下第一洞天".道教崇尚自然、顺应自然,主张返璞归真,"天人合一"的生态伦理思想在这里得到了完美的体现,形成人神共处的世俗仙境、神仙朝会之"总仙宫"和"第一洞天"的神仙洞府等三重神仙境界,完成了王屋山由自然环境到仙道化合的道境--得道升仙--洞天福地的仙境的逐次演化,成为道教追求"天人合一"和得道升仙的理想"第一洞天".     

中国明对虾ALFFc基因的原核表达与抗血清制备

利用聚合酶链式反应(PCR)技术和基因重组技术克隆了中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)抗脂多糖因子(ALFFc)基因的成熟肽编码序列并构建了pET-DsbA-ALFFc原核表达载体,转化E.coli BL21(DE3)后,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)筛选法获得了1株高表达量重组菌,并通过实验确定其最佳诱导条件为:菌液初始OD6000.7,IPTG终浓度0.8 mmol/L,培养温度37℃,诱导时间3 h.重组蛋白经纯化后免疫新西兰大白兔制备了抗血清,为进一步研究ALFFc的功能奠定了基础.