龙胆毛状根的诱导培养

发根农杆菌（Ａ．ｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）Ｒ１５００感染龙胆茎段、叶片外植体，１５ｄ后可诱导出毛状根。茎段诱导率高于叶片，可达４２．３％。毛状根的诱导与温度和光照有关。转化根具有抗卡那霉素的特征，在不含激素的ＭＳ培养基上培养，筛选出了生长正常的毛状根系。     

地黄毛状根的培养研究

发根农杆菌是一种革兰氏阴性菌,能侵染大多数的双子叶植物,诱发被感染植物的受伤部位长出毛状根.本实验用发根农杆菌感染地黄外植体诱导其产生毛状根,并加以培养,为今后选择合适的培养方式,大规模培养毛状根来生产地黄的次生物质奠定基础.     

盾叶薯蓣毛状根的诱导与薯蓣皂甙元的生产

报道盾叶薯蓣形成毛状根诱导的方法及不同毛状根系间生长速率与薯蓣皂甙元含量的差异．结果表明,盾叶薯蓣的幼叶和茎段难被R1601、A4和LBA9402等发根农杆菌菌株诱导出毛状根,但愈伤组织则比较容易;34%的被R1601菌株感染、并在添加200μmol／L乙酰丁香酮的共培养基上培养3d的愈伤可以在30d内形成毛状根;不同的毛状根系在生长速率与薯蓣皂甙元含量方面存在显著差异．     

芸芥发状根的诱导及其植株再生体系的建立

通过发根农杆菌R1000介导的遗传转化建立了芸芥发状根的诱导、培养及植株再生体系.研究了影响发状根诱导及生长的各种因素,通过PCR对所得发状根进行了分子水平的鉴定.结果表明:发根农杆菌R1000的rol B基因已被成功地转入并整合到该发根培养物的基因组中.     

Ri质粒转化牛膝及其发状根的培养

用发根农杆菌的Ｒｉ质粒转化药用植物牛膝，诱导出了抗卡那霉素的发状根。将诱导的发状根进行固体平板培养和液体悬浮培养。在附加Ｋｍ３０ｍｇ／Ｌ的ＭＳｏ和１／２ＭＳｏ培养基上，发状根生长良好，而未经转化的对照组则死亡，表现出生激素自主性。在附中外源激素ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ时，能促进发状根的成活，侧根的形成以及提高增殖倍数。表明适量的外源激素能促进发状根的生长。     

根癌病土壤杆菌诱导转化毛状根能力的评价

以鸟头(Aconitum carmichaeli)、Bidens sulphureus和洋金花Datura metal)三个植物种为材料(用A.rhizogenes的九个菌株和A tumefaciens的一个突变系为感染源.诱导出转化毛状根.根据所诱导出的转化毛状根数量来评价各菌株诱导产生转化毛状根的能力.结果表明同一菌株对不同植物和同一植物接受不同菌株的感染力有明显差异.A. rhizogenes ATCC15834、ATCC 25818、A 42017和A.tumefaciens、TMR 338诱导产生转化毛状根的能力最强,A.rhizogenes R1000、TR 105次之.ATCC 11325、ATCC 13332、ATCC 13333和Melon;2—1较差 作者认为,目前仍可依照Dawso (1942)、在烟草Nicotiana tabacum离体根培养 得出的结论 按生长率、干重和分枝数作为建立转化毛状根无性系的初选形态学标准.     

银杏毛状根的诱导和培养

利用３个发根农杆菌菌株：Ｒ１５８３４,Ｒ１０００和Ａ４分别对银杏幼叶、幼芽和幼茎外植体进行成功的转化：除Ａ４外,均诱导获得了毛状根。通过对毛状根中冠瘿碱的检测,农杆菌Ｒｉ质粒的Ｔ－ＤＮＡ部分已整合到银杏细胞的基因组中。     

丹参毛状根诱导条件的优化

以发根农杆菌C58C1,A4,R1601为试验菌株,叶片、叶柄、茎段为外植体,研究了菌液浓度、共培养时间和乙酰丁香酮（AS）等因素对丹参毛状根转化频率的影响,并用PCR对诱导出的毛状根进行了阳性鉴定．试验结果表明：菌株和外植体类型对丹参毛状根诱导率存在着显著的差异;最佳共培养时间为3—4d,乙酰丁香酮（AS）浓度为400μmol／L有利于促进毛状根的产生．为进一步利用基因工程技术进行中药丹参的品质改良奠定了基础．     

大苞栝楼发根在光辐射发根反应器中的培养

利用农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)R1601诱导药用植物大苞栝楼(Trichosanthes bracteata Voigt)外植体无菌苗发根,建立毛状根生物反应器培养系统．分析了光照强度、溶氧饱和强度及碳源等外界影响因子对反应器中发根生长的作用．结果表明：在光照强度为25W／m^2、溶氧饱和强度为80％时,发根的比生长速率与生物量维持在较高的水平;蔗糖对发根生长的促进作用明显优于葡萄糖：在30～40g／L的糖含量范围内,于MS培养基中采用两级添加方式添加蔗糖,发根生物量(9．5g／L)比采用单级添加方式的(7．2g／L)高出20％以上．     

怀牛膝愈伤组织诱导及分化的研究

对怀牛膝叶片和茎段愈伤组织的诱导及分化进行了研究.结果表明:KT 0.5 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L对叶片愈伤组织的诱导效果最好,KT 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L对茎段愈伤组织的诱导效果最好,出愈率均达100%;KT 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L有利于叶片形成的愈伤组织分化为根,6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L则有利于茎段形成的愈伤组织分化为芽.     

长春花转化毛状根诱导及培养条件的优化

用A4和R10002种发根农杆菌菌株分别感染长春花的愈伤组织、真叶叶片、叶柄及根，诱导出毛状根。研究了不同外植体、不同菌株以及外植体预培养时间、与发根农杆菌共培养时间、乙酰丁香酮（As)等条件对转化频率的影响，其结果为：A4转化频率高于R1000，真叶叶片转化频率最高，最佳预培养时间为2-3d；最佳共培养时间2－3d；以100mg/mL的As同时加入共培养基中转化频率高达86．25％。不同种类的培养基以及碳源、氮源对毛状根生长也有较大的影响。     

吲哚丁酸对怀牛膝幼苗生长及谷胱甘肽抗氧化酶系统的影响

对怀牛膝幼苗施加不同浓度的吲哚丁酸(IBA),研究IBA对其幼苗生长及谷胱甘肽抗氧化酶系统的影响.结果显示:1.0mg/L IBA能同时显著提高怀牛膝叶片中谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)的活性及蛋白质含量(P<0.05),并能促进其幼苗株高、根长和根干重的增加.结论:1.0mg/L IBA促进了牛膝幼苗的生长,提高了叶片中谷胱甘肽抗氧化酶系统的活性及蛋白质含量,有效的增强了植株的抗逆性.     

应用毛状根转化技术获得植物次生代谢产物的研究 Ⅰ.萝芙木毛状根的诱导与培养

将萝芙木(Rauvolfia verticillata)的无菌苗被含有Ri-质粒的发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)感染后,诱导出毛状根(hairy root)。将毛状根分离,除菌后,在不含激素的MS琼脂培养基上培养。为进一步研究萝芙木毛状根的遗传表达以及次生代谢产物的定性定量分析奠定了基础。     

发根农杆菌A4对骆驼刺的遗传转化

用野生型发根农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）Ａ４菌株感染骆驼刺（Ａｌｈａｇｉ ｐｓｅｕｄｏａｌｈａｇｉ）无菌苗的子叶和下胚轴,１５ｄ左右在感染部位诱导出发根。将发根切段放在附加２．０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ和０．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织,在３．０ｍｇ／Ｌ６ＢＡ的ＭＳ培养基上进一步分化形成完整植株,冠瘿碱检测结果表明,不仅在初生发根中,在次生发根、来源于发率的愈