运动对骨骼肌α-actin基因表达影响的研究综述

依据骨骼肌肌动蛋白在机体运动能力上的重要作用和地位,从分子水平,主要论述了运动对骨骼肌肌动蛋白(α-actin)及其基因表达的影响和运动后恢复过程中骨骼肌α-actin及其基因表达的变化,以期为这方面的更深入研究作一参考.     

La3+通过重组细胞骨架影响大鼠成骨细胞增殖、分化

研究了稀土离子La3 对体外培养的成骨细胞增殖、分化及细胞骨架的影响,并初步探讨了相关机理.用细胞计数法检测了成骨细胞的增殖.用RT-PCR技术测定了碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)、骨桥蛋白(OPN),骨涎蛋白(BSP)以及cbfa-1 mRNA水平.采用激光扫描共聚焦显微镜观察了细胞中F肌动蛋白(F-actin)的变化.结果显示:La3 在48h促进了成骨细胞增殖;在4 d促进了早期分化指标ALP,BSP和cbfa-1 mRNA的表达;在21d促进了晚期分化指标OC和OPN mRNA的表达.与此同时,La3 使成骨细胞骨架发生重组.另外,Western Blot分析证实La3 作用于成骨细胞短时间即可激活粘着斑激酶(FAK)酪氨酸磷酸化.结果提示,La3 通过提高FAK酪氨酸的磷酸化水平,改变细胞骨架的分布和聚合,从而促进成骨细胞的增殖和分化.     

运动对骨骼肌α-actin基因表达影响的研究综述

依据骨骼肌肌动蛋白在机体运动能力上的重要作用和地位,从分子水平,主要论述了运动对骨骼肌肌动蛋白(-αactin)及其基因表达的影响和运动后恢复过程中骨骼肌α-actin及其基因表达的变化,以期为这方面的更深入研究作一参考。     

肌动蛋白的聚合动力学研究进展

肌动蛋白的聚合和解聚动力学过程与其功能的行使有密不可分的关系:肌动蛋白如要在细胞内行使其功能就一定涉及到其聚合动力学过程.肌动蛋白的聚合过程可分为4个步骤:肌动蛋白单体的活化;肌动蛋白单体聚合成核;肌动蛋白纤维生长的过程;聚合达到动态平衡,肌动蛋白纤维不再生长.一些影响肌动蛋白聚合过程的因素,比如,核酸和肌动蛋白相关蛋白也在文中做了讨论.其目的在于更深入地了解生物大分子如何组装成更复杂的体系以及这些体系在细胞中怎么行使功能.     

饲料添加剂硒和谷胱甘肽对微囊藻毒素胁迫下罗非鱼肝脏去毒相关基因诱导表达的影响

为从分子水平探讨饲料添加剂硒(Se)和谷胱甘肽(GSH)对淡水养殖鱼类肝脏微囊藻毒素胁迫下去毒分子机理的影响,实验杂交罗非鱼一组喂食含0.15 mg/kg Se的富硒酵母粉饲料,一组喂食含普通酵母粉的饲料,喂食一个月以上;实验尼罗罗非鱼一组喂食含1 g/kg GSH的饲料,一组喂食普通饲料,两组均饱食10 d.所有实验组再均分两组,一组腹腔注射磷酸缓冲液(PBS),一组按体质量注射腹腔注射50μg/kg微囊藻毒素-LR(MC-LR),24 h后分离肝脏组织.以β-肌动蛋白作为外参照,采用半定量RT-PCR方法研究Se和GSH分别对罗非鱼肝脏去毒相关基因转录水平的诱导改变.结果表明,未喂食Se的实验组,杂交罗非鱼肝脏alpho-可溶性谷胱甘肽S-转移酶(sGSTA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)基因mRNA表达水平在腹腔注射50μg/kg MC-LR 24 h后,均较PBS组有诱导趋势;Se+MC-LR组sGSTA和GPX基因mRNA表达水平,均较Se+PBS组略低,可能与添加剂的低剂量添加相关.喂食GSH的实验组,尼罗罗非鱼腹腔注射MC-LR组,肝脏sGSTA基因mRNA表达水平较PBS组有诱导趋势;Se+MC-LR组GPX基因mRNA表达水平,较Se+PBS组有升高趋势,而sGSTA和rho-可溶性谷胱甘肽S-转移酶(sGSTR)基因mRNA表达水平则轻微降低.本实验首次从基因表达水平比较研究了Se和GSH对罗非鱼微囊藻毒素压力情况下,肝脏去毒酶基因表达的影响变化,为Se和GSH饲料添加剂在鱼类饲料中的合理添加提供分子水平的理论依据.     

一种检测环氧合酶的新方法——半定量RT-PCR法

作者研究的目的是建立一种较为灵敏、简便的方法检测环氧合酶COX 2 .先设计了一对针对COX 2的特异性引物 ,建立了以半定量逆转录 聚合酶链反应 (Semi QuantitativeReverseTranscrip tionPCR ,SQRT PCR)方法检测COX 2的mRNA ,用该方法检测 7种结肠癌细胞和非甾体类抗炎药吲哚美辛 ,作用于其中一种细胞后的COX 2mRNA .实验结果显示 ,半定量RT PCR法可以灵敏、快速地反映COX 2mRNA表达水平的变化 ,为寻找新的COX 2选择性抑制剂和分析NSAIDs抗炎作用机理提供了一种新的方法 .     

肌动蛋白在子代杆状病毒胞内运输过程中的作用

重组病毒AcMNPV-GFP-actin(ph-)能在晚期和极晚期成功表达外源肌动蛋白,其生长特性与野生型AcMNPV没有明显的差别.在重组病毒同步感染的Sf9细胞中,肌动蛋白从细胞质转运到细胞核内,然后又向细胞质转运并且发生聚合;到感染极晚期从细胞核全部转运到细胞质,此时受染细胞核中进行正常的病毒粒子的组装.用CD处理重组病毒感染的细胞并不能阻止肌动蛋白在细胞内转运的变化规律,只是推迟了变化出现的时间,并使肌动蛋白发生聚合.     

天然药物川芎嗪对脂质过氧化内皮细胞的保护作用研究

研究天然药物川芎嗪对内皮细胞氧化损伤时细胞存活率以及MCP-1、ICAM-1mRNA表达水平的影响,探讨其抗动脉粥样硬化的可能机制。用血管内皮细胞与不同浓度川芎嗪孵育,给予氧化低密度脂蛋白损伤,通过MTr和RT—PCR技术,检测内皮细胞存活率和MCP-1、ICAM-1mRNA表达水平的变化。结果显示内皮细胞与川芎嗪预孵育后,其细胞存活率明显增加,MCP-1和ICAM-1mRNA的表达水平明显下调。说明氧化低密度脂蛋白可诱导内皮细胞存活率下降,MCP-1和ICAM-1mRNA表达水平增加,川芎嗪可以减轻其过量表达,保护内皮细胞。     

La^3＋通过重组细胞骨架影响大鼠成骨细胞增殖、分化

研究了稀土离子La^3＋对体外培养的成骨细胞增殖、分化及细胞骨架的影响,并初步探讨了相关机理．用细胞计数法检测了成骨细胞的增殖．用RT-PCR技术测定了碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（OC）、骨桥蛋白（OPN）,骨涎蛋白（BSP）以及cbfa-1mRNA水平．采用激光扫描共聚焦显微镜观察了细胞中F肌动蛋白（F-actin）的变化．结果显示：La^3＋在48h促进了成骨细胞增殖;在4d促进了早期分化指标ALP,BSP和拍肠-1mRNA的表达;在21d促进了晚期分化指标OC和OPNmRNA的表达．与此同时,La^3＋使成骨细胞骨架发生重组．另外,Western Blot分析证实La^3＋作用于成骨细胞短时间即可激活粘着斑激酶（FAK）酪氨酸磷酸化．结果提示,La^3＋通过提高FAK酪氨酸的磷酸化水平,改变细胞骨架的分布和聚合,从而促进成骨细胞的增殖和分化．     

bHGA对体外培养成骨细胞活性的影响

为探讨12b-羟基-去-D-杰氏山竹子素A(bHGA)的体外潜在成骨活性,用bHGA处理MC3T3-E1成骨细胞,研究了其对细胞碱性磷酸酶活性、矿化、骨相关基因表达及早期成骨分化相关基因表达水平的影响.结果表明:bHGA处理细胞后,对Runx2 mRNA表达无显著影响,而对Osx mRNA的表达具有一定抑制作用.bHGA能同时促进骨钙蛋白基因OCN和Ⅰ型胶原Col 1 mRNA的表达,但抑制碱性磷酸酶mRNA的表达,其对骨桥蛋白基因OPN mRNA的表达没有显著影响.说明bHGA不利于骨早期分化,但它通过促进骨钙蛋白和I型胶原mRNA的表达而促进骨成熟.     

Electron cryo-microscopy shows how strong binding of myosin to actin releases nucleotide

Muscle contraction involves the cyclic interaction of the myosin cross-bridges with the actin filament, which is coupled to steps in the hydrolysis of ATP. While bound to actin each cross-bridge undergoes a conformational change, often referred to as the "power stroke", which moves the actin filament past the myosin filaments; this is associated with the release of the products of ATP hydrolysis and a stronger binding of myosin to actin. The association of a new ATP molecule weakens the binding again, and the attached cross-bridge rapidly dissociates from actin. The nucleotide is then hydrolysed, the conformational change reverses, and the myosin cross-bridge reattaches to actin. X-ray crystallography has determined the structural basis of the power stroke, but it is still not clear why the binding of actin weakens that of the nucleotide and vice versa. Here we describe, by fitting atomic models of actin and the myosin cross-bridge into high-resolution electron cryo-microscopy three-dimensional reconstructions, the molecular basis of this linkage. The closing of the actin-binding cleft when actin binds is structurally coupled to the opening of the nucleotide-binding pocket.     

多重PCR技术分析日本对虾Marsupenaeus japonicus精巢和卵巢差异表达基因

通过多重PCR方法,对采用SSH(抑制消减杂交)技术制备日本对虾卵巢特异探针并筛选卵巢cDNA全长文库所获得的8个阳性克隆进行分析,研究这些新克隆的基因在精巢和卵巢的差异表达情况。这8个基因可分为二类,一类为卵巢特异表达的基因,一类为卵巢的表达量高于精巢的差异表达基因。     

钙离子拮抗剂治疗高血压病患者过程中细胞内外钙调素水平的变化

从分子水平研究钙离子拮抗剂治疗高血压病的机制。用反转录聚合酶链反应法测定淋巴细胞内钙调素（ＣａＭ）基因的ｍＲＮＡ转录水平以及用ＲＩＡ法测定细胞外（即血清）ＣａＭ浓度,借以观察在用钙离子拮抗剂治疗高血压的过程中,细胞内外ＣａＭ水平的改变。发现随着正规服用钙拮抗剂治疗时间的延长,高血压患者淋巴细胞内ＣａＭ基因ｍＲＮＡ的转录水平亦受到抑制。服用钙拮抗剂时间长于３个月者,ｍＲＮＡ的转录水平显著降低（Ｐ＜０．０１）,而治疗时间在１个月之内者,ＣａＭ基因的转录水平无明显变化（Ｐ＞０．０５）。对于细胞外ＣａＭ的水平,在服用钙拮抗剂治疗时间＜１个月者,血清ＣａＭ浓度下降,而长期服用钙拮抗剂的患者则相对增高,但均无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。在用钙拮抗剂治疗高血压的过程中,细胞内和细胞外ＣａＭ的水平均发生变化。用钙离子拮抗剂治疗高血压病长于３个月者,细胞内ＣａＭ基因的ｍＲＮＡ转录水平明显受到抑制,而细胞外ＣａＭ浓度则无论服用钙离子拮抗剂时间长短,变化均不显著     

糖尿病病人微量血糖监测记录表的应用

目的探讨一种实用的、简明的、规范的的微量血糖监测记录表在临床上使用效果。方法我科室自行设计一种微量血糖监测记录表格应用于住院糖尿病病人,观察其实用性和有效性。结果该表较全面详细地反映了住院病人血糖变化。结论该表格简单、直观,极大地方便了医生临床工作,提高了住院糖尿病病人血糖监测管理质量,是一种有效的血糖记录方法。     

塔里木盆地巴楚地区石炭系层序地层学特征

对岩芯进行观察与描述,对测井曲线与岩性的岩-电关系进行对比,对地震反射特征进行研究,并采用层序地层学对连井剖面进行对比。研究结果表明:研究区石炭纪地层内反映海平面变化的地层旋回性十分清楚;按层序划分的基本原则,在石炭纪地层中可识别出6个层序边界,相应地划分出5个层序,其中至少有2个Ⅰ型层序;在Ⅰ型层序内部,低位体系域发育较差,主要为侵蚀沟谷充填体系及山前的扇体系;海侵体系域以碳酸盐岩沉积为主;而高位体系域则表现为西南以碳酸盐岩为主,向东北则逐渐过渡为广泛的碎屑潮坪或沼泽;自生屑灰岩段沉积时开始,巴楚地区西南缘构造沉降速率明显加快,沉积厚度加大,碳酸盐岩的含量也相应增加。     

基于LEGOS HYDROWEB的青藏高原湖泊群水位和面积动态变化分析

湖泊面积和水位的变化客观地反映了区域水资源的时空变化过程。利用LEGOS HYDROWEB提供的湖泊信息数据,对青藏高原1993~2014年21年间63个典型湖泊的水位变化,以及其中59个湖泊的面积变化趋势进行分析。根据变化趋势将湖泊分为增长型、稳定型和衰退型;并在这三种类型的湖泊中分别选取两个典型湖泊进行回归分析。结果表明:63个湖泊中水位增长型湖泊42个,稳定型湖泊12个,衰退型9个;59个湖泊中面积增长型湖泊32个,稳定型19个,衰退型8个。对于增长型湖泊而言,水位和面积增长最大是Ziling湖,分别增长了10.90 m和361.72 km~2;衰退型湖泊中水位和面积衰退趋势最大的是Yamzho-yumco湖,分别减少了2.29 m和28.65 km2。高原内陆水体的水位和面积的动态变化对研究气候演变和地表水资源的影响具有重要意义。     

铜离子抑制作用下的硝化菌群amoA mRNA动态特征

研究考察了不同质量浓度Cu2+离子(10,20,50mg.L-1)对活性污泥硝化菌群活性的抑制作用,采用RNA反转录结合Real-Time PCR(实时聚合酶链式反应)定量测定技术,分析了受到金属离子抑制后,硝化菌群在短期内(10h)氨单加氧酶编码信息核糖核酸(ammonia mono-oxygenase encoding messenger ribonucleic acid,amoAmRNA)的受抑变化特征,结果表明Cu2+可以显著抑制活性污泥硝化菌群的amoAmRNA水平,且抑制程度随金属离子浓度的升高而增强.amoA mRNA显著抑制出现的时间要先于硝化速率抑制.抑制作用在从amoA mRNA传导至代谢活性存在一定的滞后时间,根据实验结果推断amoA mRNA合成受抑可能是Cu2+生物硝化抑制的分子途径之一.     

Intensification of the 5.9-nm actin layer line in contracting muscle

According to the cross-bridge model of muscle contraction, an interaction of myosin heads with interdigitating actin filaments produces tension. Although X-ray equatorial diffraction patterns of active (contracting) muscle show that the heads are in the vicinity of the actin filaments, structural proof of actual attachment of heads to actin during contraction has been elusive. We show here that during contraction of frog skeletal muscle, the 5.9-nm layer line arising from the genetic helix of actin is intensified by as much as 56% of the change which occurs when muscle enters rigor, using a two-dimensional X-ray detector. This provides strong structural evidence that myosin heads do in fact attach during contraction.     

考虑土结构性影响的改进EVP压缩模型

针对原有弹粘塑性(EVP)压缩模型的局限性,建立了一种考虑土结构性影响的改进EVP压缩模型,且在建模时考虑了天然沉积结构性土半对数压缩曲线的非线性特征以及蠕变随应力水平和时间的变化性状.引用了Ariake黏土在轴向应变为常速率以及不同阶段改变速率时的一维压缩试验结果,将其与改进EVP模型的计算结果进行对比分析.结果表明,该模型能够较好地描述天然沉积土的应力-应变关系对速率的依赖性,且计算结果与试验结果基本吻合.与原有的EVP模型相比,改进的EVP压缩模型采用了双对数坐标,能够反映天然沉积结构性土半对数压缩曲线典型的倒S特征.模型中引入了与应力水平和时间相关的蠕变参数,反映出天然沉积结构性土的蠕变速率随应力水平和时间的发展呈非线性递减的蠕变变形规律.