Suppressing progress of pancreatitis through selective inhibition of NF-κB activation by using NAC

OBJECTIVE: To explore the characteristics of NF-KappaB activation in the progress of pancreatitis, the relationship with expression of TNF-alpha in the inflammatory reaction, and prevent the exacerbation of pancreatitis by using NAC. METHOD: Forty-eight rats were divided into three groups: therapy (group C), pancreatitis (group B) and control (group A). NAC served as the inhibitor of NF-KappaB activation. In the time intervals of 1.5, 3.0, 6.0, 12.0 hour, NF-KappaB activation was detected with flow cytometry (FCM) and the expression of TNF-alpha mRNA and protein with in situ hybridization (ISH) and enzyme-linked immuno-sorbent assay (ELISA) respectively. Meanwhile, the level of lipase and amylase in the serum was assayed and the pathological change was evaluated. RESULT: NF-KappaB activation in the pancreatitis group was higher than that in the control group (P<0.01), peaked at 3 hours, and was depressed by the inhibitor of NF-KappaB, NAC. The expression of TNF-alpha as well as the level of lipase and amylase in the serum also rose synchronously with activation of NF-KappaB. In contrast to group A, it was significantly different (P<0.01) in group B. After using NAC in group C, all of these values were decreased and the inflammatory reaction in the pancreas abated evidently. The pathology changes of the pancreas were shown to be alleviated in group C. CONCLUSION: First, NF-KappaB activity is intensively initiated in the course of pancreatitis and shown to have closely relationship with the release of cytokines. Second, use of NAC markedly depressed NF-KappaB activation. TNF-alpha expression is down regulated by cytokines. It is suggested that NAC probably acts as a useful agent for treatment of pancreatitis by indirectly inhibiting activation of NF-KappaB.     

BALB/c与C57BL/6小鼠互为供受体心脏移植急性排斥模型的对比

目的建立并比较BALB/c与C57BL/6小鼠互为供受体心脏移植急性排斥模型。方法采用BALB/c与C57BL/6小鼠互为供受体建立心脏移植模型,术后评估免疫排斥情况、并发症、观察移植心脏存活时间并做病理检查。结果手术成功率为94.7%。A组(BALB/c→C57BL/6)与B组(C57BL/6→BALB/c)的生存时间无统计学差异。两组均可见典型急性排斥病理改变,两组间无明显统计学差异。两组移植心脏的心功能情况无明显差异。结论近交系BALB/c和C57BL/6基因小鼠遗传稳定,可以建立稳定的急性排斥反应模型。C57BL/6适合作为受体,移植时间明显缩短,造模成功率较高。     

芪丹颗粒剂对肺纤维化鼠I型前胶原和III型前胶原mRNA表达的影响

观察芪丹颗粒对博莱霉素致肺纤维化鼠的I型前胶原和III型前胶原mRNA表达的影响,探讨其作用机制。用160只SD大鼠按随机区组设计分为对照组(N)、模型组(M)、芪丹颗粒剂1组和2组(Q1、Q2)、氢化可的松1组和2组(H1、H2)共6组。对照组20只气管内灌注和灌胃均用生理盐水。余140只SD大鼠经气管内一次性灌注博莱霉素A5按BLM5mg·kg-1体重诱导大鼠肺间质纤维化,随机取40只为模型组。芪丹1组和氢可1组分别从造模后第2天灌注芪丹颗粒剂(3125mg/kg)和腹腔注射氢化可的松(25mg/kg),药物干预后第7、14、28天分别处死动物。芪丹2组和氢可2组分别从造模14天后灌注芪丹颗粒剂和腹腔注射氢化可的松(用量同前),2组动物第28、42天分别处死。用苏木素-伊红(HE)评价肺组织病理学变化和原位杂交方法检测各组大鼠肺I型和III型前胶原mRNA表达。肺组织病理HE染色显示芪丹组肺泡炎及肺纤维化程度均明显轻于模型组和氢可组(P<0.05)。在肺间质纤维化形成中,I型和III型前胶原mRNA表达呈动态变化,早期肺泡炎以III型前胶原mRNA大量增生为主,晚期纤维化期以I型前胶原mRNA增生为主。芪丹组III型前胶原mRNA的表达在第14天处于最高,至28天仍维持较高的水平,芪丹组III型前胶原mRNA的表达高于模型组和氢可组(P<0.05)。I型前胶原mRNA的表达在28天时芪丹1组和氢可1组及芪丹2组和氢可2组组间均有显著性差异,但在42天时,芪丹2组与氢化可的松2组其表达无显著差异(P<0.05)。大鼠肺纤维化的早期以III型前胶原mRNA的表达为主,晚期纤维化期以I型前胶原mRNA的大量表达为主。芪丹颗粒可减轻博莱要素诱导大鼠肺泡炎及肺纤维化的程度,其机制可能通过影响了I型和III型前胶原mRNA的代谢和表达,从而减慢肺间质纤维化的进程。芪丹颗粒对肺间质纤维化有治疗作用,且优于氢化可的松。     

参附注射液对大鼠心肌缺血再灌注细胞凋亡的影响

通过观察参附注射液对缺血再灌注心肌超微结构和细胞凋亡参数的影响 ,探讨参附注射液拮抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制 .使用结扎 /松解左冠状动脉前降支缺血 60min,再灌注 2 4 0min复制缺血再灌注动物模型 .Sprague_Dawley(SD)大鼠 40只随机分为 5组 :对照组(Ⅰ组 ,n =8) ,缺血再灌注组(Ⅱ组 ,1 /R组 ,n =8) ,参附组 (Ⅲ组 ,n=8) ,红参组 (Ⅳ组 ,n =8) ,附子组 (Ⅴ组 ,n =8) .Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ各治疗组在缺血前 1 0min经静脉分别注射参附注射液 (1 0mg/kg)、红参注射液 (9mg/kg)、附子注射液 (1mg/kg) ,Ⅰ组、Ⅱ组在缺血前 1 0min经静脉注射同等容积生理盐水 .测定心肌组织丙二醛 (MDA)和超氧化物歧化酶 (SOD)值 ;电镜观察心肌细胞超微结构变化 ;TUNEL法原位标记凋亡心肌细胞 ,免疫组化和图像分析技术检测心肌细胞内Bcl_2、Bax蛋白表达 .与Ⅱ组比较 ,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ各治疗组 ,心肌组织MDA明显降低 ,有极显著差异(P <0 .0 1 ) .III组与IV组、V组之间比较 ,MDA降低 ,有显著性差异 (P <0 .0 5) .SOD活性明显升高 ,有显著差异 (P <0 .0 5) .心肌超微结构病变明显改善、减轻 .心肌细胞凋亡指数和Bax蛋白含量显著减少(P <0 .0 1 ) ,Bcl_2蛋白含量显著增多 (P <0 .0 1 ) .参附注射液具有抗大鼠心肌缺血再灌注损伤作用 ,     

辛伐他汀对大鼠肝纤维化的影响及其作用机制

 观察辛伐他汀对大鼠肝纤维化的影响并探讨其机制。60只健康的睡眠剥夺（Sleep Deprivation,SD）大鼠随机分为对照组、模型组和药物组。模型组和药物组,大鼠皮下注射四氯化碳（CCl4）油溶液造模,药物组造模同时给予辛伐他汀灌胃（5mg·kg-1·d-1）至实验结束;对照组给予等量的橄榄油皮下注射。8周后处死所有动物,全自动生化分析仪检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天门冬氨酸转氨酶（AST）活性,苏木精-伊红染色观察肝组织病理学改变,免疫组织化学法检测各组肝组织中I、III型胶原及转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达情况。结果表明,与模型组相比,药物组大鼠肝脏炎症反应和纤维化较轻,I、III型胶原及TGF-β1的表达显著减少（P<0.05）,血清ALT、AST水平降低（P<0.05）。由此得出,辛伐他汀可以减轻肝纤维化程度,其机制可能与抑制TGF-β1和I、III型胶原表达有关。     

Therapeutic applications of bone marrow-derived stem cells in liver transplantation for end-stage liver diseases

Today, liver transplantation (LT) is the only established treatment for end-stage liver diseases. The de- velopment of LT, including OLT, cadaveric LT, split LT, living donor LT (LDLT), brings hopes to patients with these diseases. However, increasing donor shortage, rejection and life-long immunosuppression with its side effects are the major limitations of this therapy strategy. Bone marrow-derived stem cells (BMDSCs) are capable of differentiating into hepatocyte-like cells and contribute to liver injury repair. The microenvironment of liver injury caused by rejection, ischemia/reperfusion, loss of liver mass, recurrence of HCV and "small-for-size syndrome" after LT can attract a variety of bone marrow-derived stem cell population to the peripheral circulation and then migration to the injury liver to promote the hepatic function restoration. Additionally, BMDSCs can also take part in the functional regeneration of living donor liver after LDLT. This participation in liver regeneration may be associated to the interac- tion between SDF-1and its receptor CXCR4, involving HGF, IL-8, MMP9, and VEGF/VEGFR-2. BMDSC with its bio-characteristics could maintain the allograft tolerance from different angles and in different ways. In conclusion, BMDSCs transplantation, as a new assistant therapeutic method for LT, will ex- pand the space of LT, and provide more survival opportunities for the patients suffering liver diseases in the future.     

原位辅助性部分肝移植

 自1989年原位辅助性部分肝移植成功应用于临床治疗急性肝功能衰竭以来,适应证逐渐扩大至肝功能衰竭、遗传代谢疾病、终末期肝硬化。随技术不断进步趋于成熟,并发症发生率显著降低,远期存活率明显上升,对部分疾病治疗效果达到甚至优于原位肝移植术,并衍生出多米诺原位辅助性部分肝移植等新术式,显著拓展了供体来源及受益人群,成为肝脏疾病重要的治疗手段。本文介绍原位辅助性部分肝移植术的发展历程及研究进展。     

妊娠期高血压对大鼠肝脏Ⅰ型脱碘酶及甲状腺激素的影响研究

目的探讨妊娠期高血压疾病对大鼠肝脏Ⅰ型脱碘酶以及甲状腺激素的影响。方法将20只孕鼠分为正常妊娠对照组(n=10)和妊娠高血压模型组(n=10)。于妊娠第13天,模型组大鼠皮下注射L-NAME至妊娠第21天,复制妊娠高血压疾病;对照组皮下注射等量生理盐水,起止时间同模型组一致。采集两组大鼠肝脏和血液,进行肝脏DIO-ⅠmRNA表达量和血液甲状腺激素水平检测。结果与对照组比较,模型组大鼠肝脏DIO-ⅠmRNA表达量显著下降(P <0. 05),血液中TT3、FT3浓度显著降低(P <0. 05)。结论妊娠期高血压疾病可降低孕鼠肝脏DIO-Ⅰ基因表达水平,进而导致血液TT3、FT3含量下降。     

维、汉族妇女宫颈病变进程与雌激素受体1（ESR1）蛋白表达缺失的关系

 以往的报道显示宫颈癌组织内的雌激素受体1（Estrogen Receptor 1,ESR1）基因启动子发生高度甲基化,并提示其基因表达水平可能下降或基因休眠。本研究从蛋白质水平观察ESR1表达缺失与宫颈病变进程的关系及其维、汉妇女族群差异。收集维吾尔族和汉族妇女宫颈炎、宫颈内上皮瘤样病变（Cervical Intraepithelial Neoplasia,CIN）I/II/III和宫颈鳞癌患者的福尔马林浸泡与石蜡包埋宫颈组织标本共180例,采用免疫组织化学方法鉴定ESR1蛋白表达水平。结果显示,ESR1蛋白在宫颈上皮和间质细胞均有表达,但是随着CIN和宫颈鳞癌的发病进程,其在上皮细胞内的表达逐渐发生缺失;ESR1蛋白表达缺失率在宫颈炎和CIN I组较低（22%）,CIN II/III组明显升高（64%）,宫颈鳞癌达到最高（76%）,各组之间差异显著（P＜0.01）,但是在个体年龄之间无统计学差异（P＞0.05）。维、汉妇女族群ESR1表达缺失率的变化趋势有共性,其族群差异也无统计学意义（P＞0.05）。由此表明,ESR1表达缺失可能是宫颈鳞癌的早期预警指标,这为揭示该基因高度甲基化相关的表观遗传学机制提供了重要依据。     

盖诺化疗时所致静脉炎的预防性护理

盖诺(长春瑞宾,NVB)是目前治疗小细胞肺癌、乳腺癌较有效的抗肿瘤药物,在静脉注射后89%的病人可发生静脉炎[1],静脉反应严重者穿刺上肢疼痛持续时间长达半年之久。为预防静脉炎的发生,减轻病人痛苦,提高病人生活质量,我院自2003年2月至2005年2月对100例采用外周静脉注射NVB的患者,经选择合适的血管、输液路径以及积极的防治措施,取得满意疗效,报告如下。1资料方法1.1一般资料100例使用NVB的病人,男53例,女47例,年龄(30—74)岁,其中肺癌64例,乳腺癌36例。100例患者共用NVB235次。所有病例均为联合化疗,多为2—3种化疗药物联合用药,除NV…     

土家药山姜水提物的安全性初步评价

本研究的目的是评价山姜根茎水提物的急性和亚急性毒性及其安全性.以ICR小鼠为试验对象,将急性毒性试验分为山姜水提物组和对照组,实验组以最大耐受量单次给药5 g/kg;亚急性毒性试验分为山姜水提物低剂量组（1.3 g/kg）、高剂量组（2.6 g/kg）和对照组,实验组每天灌胃1次,连续15 d.给药后观察小鼠的行为特征,体重变化,并记录脏器系数,检测小鼠血样中尿素氮、肌酐含量及谷丙转氨酶、谷草转氨酶活力,对小鼠的肝组织进行H&E染色.结果表明：在急性毒性试验中,山姜水提物组与对照组结果差异无统计学意义;在亚急性毒性试验中,山姜水提物高剂量组肌酐含量低于对照组（P<0.05）,山姜水提物高剂量组的肝脏器系数高于对照组（P<0.05）,但其余各器官脏器系数,尿素氮、肌酐含量,谷丙转氨酶、谷草转氨酶活力和对照组相比,差异均无统计学意义,小鼠肝组织病理结果显示无异常.实验结果提示山姜水提物未引起明显急性毒性和亚急性毒性反应.性     

二种中药复方对慢性心理应激大鼠行为及下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的：观察半夏厚朴汤、桂枝甘草龙骨牡蛎汤对慢性心理应激大鼠行为及下丘脑一垂体一肾上腺轴的影响。方法：将SD大鼠分为5组：正常组、模型Ⅰ组（慢性心理应激模型,不灌服生理盐水）、模型Ⅱ组（慢性心理应激模型,灌服生理盐水）、半夏厚朴汤组（灌服半夏厚朴汤水煎浓缩液）、桂枝甘草龙骨牡蛎汤组（灌服桂枝甘草龙骨牡蛎汤水煎浓缩液）,连续灌服19d测试各组大鼠行为、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）及血清皮质酮（CORT）。结果：半夏厚朴汤组大鼠第11、19d爬格次数增加,第11d挣扎次数增加,CRH、ACTH降低;桂枝甘草龙骨牡蛎汤组大鼠第19d爬格次数增加,第19d静止时间缩短,CRH、ACTH降低。结论：半夏厚朴汤、桂枝甘草龙骨牡蛎汤可作用于下丘脑-垂体-肾上腺轴的不同环节,一定程度上影响慢性应激大鼠的行为方式,调节慢性应激大鼠的内分泌功能。     

Growth potential of human hepatocarcinoma cells in the liver of neonatal immunocompetent mice and its relation to immunological tolerance

To determine the pathological behavior of human hepatocarcinoma cells in the liver microenvironment of neonatal non-immunode-ficient mice, three human hepatocarcinoma cell lines (Bel7402, HepG2, and SK-Hep-1), traced by DiI, were transplanted into the intrahepatic or subcutaneous tissue of neonatal and adult Kunming mice. Histopathological observations showed that cells in the adult liver induced a severe immune response as early as the second day after the implantation, while the subcutaneous neoplasm underwent extensive necrosis by the end of the study. Only the cells injected into the neonatal liver underwent a delayed immunologic rejection in the organ microenvironment. These cells retained recognizable tumor features over the first seven days, and displayed an intrahepatic invasive pattern. The expression of tumor markers including alpha-fetoprotein and survivin was maintained. The quantitative ELISA for the expression patterns of IL-2 and IL-10 also confirmed that the intrahepatic immunity was non-susceptive during this period. The high serum alpha-fetoprotein level was inversely correlated with the change in immune response. Our study provided a bio-system for the research of immune responses to xenografts in the liver.     

补铬对经产母猪繁殖性能的影响

试验选用哺乳期经产（4胎）大白母猪28头，随机分成4组（n=7），整个试验期为本次哺乳期第14天至下次仔猪出生．按照母猪的生理阶段饲喂阶段饲喂添加1．65mg／kg吡啶羧酸铬（CrP）的日粮：Ⅰ组（对照组）：全期饲喂基础日粮；Ⅱ组（全期组）：全期饲喂添加1.65mg／kg CrP的日粮；Ⅲ组（前期组）：配种前饲喂添加1．65mg／KgCrP的日粮，配种后饲喂基础日粮；Ⅳ组（后期组）：妊娠期前8周饲喂基础日粮，从第9周直到仔猪出生，饲喂添加1．65mg／kgCrP的日粮．结果表明，给母猪饲喂添加1．65mg／kgCrP日粮，可以显著缩短断奶后返情间隔（p〈0．05），提高窝产仔数（p〈0．05）和增加仔猪初生窝重（p〈0．05）；并使断奶母猪返情前的血糖（p〈0．05）和血清总脂降低（p〈0．05），血清促黄体素（LH）升高（P〈0．05），但对仔猪初生平均个体重无影响（p〉0．05）．因此，饲喂添加CrP日粮对提高经产母猪繁殖性能具有明显的正效应．     

高氏一号干粉培养基的性能测试

将配制的高氏一号干粉培养基与新鲜的高氏一号培养基进行理化特性、灵敏度、保存性能测试和对放线菌接种后培养观察其生长情况。结果表明,高氏一号干粉培养基虽然灵敏度上有所不足,与新鲜高氏一号培养基相差5～10倍,但对于放线菌接种培养完全能满足实验用放线菌的培养分离。高氏一号干粉培养基对放线菌生物制品的生产及检验具有方便、稳定的特点,也具有推广应用的可行性。     

Gene for chronic proximal spinal muscular atrophies maps to chromosome 5q

Proximal spinal muscular atrophies represent the second most common fatal, autosomal recessive disorder after cystic fibrosis. The childhood form is classically subdivided into three groups: acute Werdnig-Hoffmann (type I), intermediate Werdnig-Hoffmann disease (type II) and Kugelberg-Welander disease (type III). These different clinical forms have previously been attributed to either genetic heterogeneity or variable expression of different mutations at the same locus. Research has been hindered because the underlying biochemical defect is unknown, and there are insufficient large pedigrees with the most common and severe form (type I) available for study. Therefore, we have undertaken a genetic linkage analysis of the chronic forms of the disease (types II and III) as an initial step towards the ultimate goal of characterizing the gene(s) responsible for all three types. We report here the assignment of the locus for the chronic forms to the long arm of chromosome 5 (5q12-q14), with the anonymous DNA marker D5S39, in 24 multiplex families of distinct ethnic origin. Furthermore, no evidence for genetic heterogeneity was found for types II and III in our study, suggesting that these two forms are allelic disorders.     

茵陈蒿汤对肝纤维化大鼠Caspase-12通路以及TIMP-1、Smad2的影响

目的探究茵陈蒿汤对肝纤维化（LF）大鼠Caspase-12通路以及TIMP-1、Smad2的影响。方法雄性SD大鼠45只,随机分为3组,即对照组,模型组和茵陈蒿汤组。使用腹腔注射CCl 4 建立LF模型,茵陈蒿汤组在建模时使用茵陈蒿汤灌胃,持续8周。比较8周后各组大鼠的一般情况,分别使用HE染色和Masson染色观察肝组织形态和纤维化情况。分别使用Western blot和RT-qPCR检测蛋白和mRNA的水平。结果模型组大鼠出现明显的肝损伤和纤维化,茵陈蒿汤组大鼠肝损伤情况和纤维化情况显著减轻。血生化结果显示,模型组ALT和AST水平显著高于对照组（P <0. 05）,菌陈蒿汤干预后ALT和AST水平显著低于模型组,差异具有统计学意义（P <0. 05）。建模后8周模型组大鼠肝组织中GRP78、eIF2α和Caspase-12显著升高（P <0. 01）,茵陈蒿汤组的GRP78、eIF2α和Caspase-12显著低于模型组（P <0. 01）。模型组的Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、TIMP-1、Smad2 mRNA和蛋白水平显著高于对照组（P <0. 01）,茵陈蒿汤组Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、TIMP-1、Smad2 mRNA和蛋白水平显著低于模型组（P <0. 01）。结论茵陈蒿汤可显著缓解大鼠肝组织的纤维化,这可能由于茵陈蒿汤具有抑制Caspase-12通路以及Smad2基因的表达发挥抗纤维化和抗凋亡的作用有关。     

五味保肝丸对酒精性肝损伤小鼠的保护作用及机制研究

为探讨五味保肝丸对酒精性肝损伤小鼠的保护作用及其作用机制,将健康雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、五味保肝丸低、中、高剂量组,每组10只进行实验。五味保肝丸组分别给予不同剂量五味保肝丸混悬液,正常对照组和模型组灌胃给予20 g/L羧甲基纤维素钠溶液,灌胃给药2 h后,除空白对照组外,给予56%白酒灌胃12 mL/kg,连续10 d,建立小鼠酒精性肝损伤模型。检测ALT、AST活性,肝微粒体CYP450含量以及CYP2E1蛋白的表达。研究结果表明：与模型组相比,五味保肝丸各剂量组可抑制急性酒精性肝损伤小鼠血清中ALT、AST含量的增加,增加CYP450含量,抑制CYP2E1蛋白的活化表达,其中,五味保肝丸中、高剂量组具有显著性差异（P<0.05）。五味保肝丸对小鼠酒精性肝损伤具有一定的保护作用,可能是通过保护细胞色素P450酶活性、抑制CYP2E1异常活化,发挥保肝降酶的作用。     

小鼠腹腔注射卡介苗加脂多糖建立急性免疫性肝损伤的实验研究

目的比较卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)小鼠腹腔注射和尾静脉注射建立急性免疫性肝损伤模型的优劣。方法用不同剂量BCG和LPS腹腔注射诱导昆明小鼠建立急性免疫性肝损伤模型,与BCG 0.5 mg/只和LPS 7.5μg/只联合尾静脉注射诱导昆明小鼠建立急性免疫性肝损伤模型比较;以小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平变化及肝脏病理学检查指标作为肝损伤判断标准。结果BCG+LPS小鼠腹腔注射所造急性免疫性肝损伤模型,ALT和AST随注射剂量增加均逐步增高;第6组(BCG 0.5 mg/只+LPS7.5μg/只)和第13组(BCG1 mg/只+LPS15μg/只)相对较高。与空白组比较,ALT升高约3倍,AST升高1~3倍;肝组织病理损伤则随着BCG和LPS剂量增加逐渐升高。第5组大部分小鼠出现Ⅰ级或Ⅰ级以上肝细胞损害;第13组大部分小鼠出现Ⅱ级或Ⅱ级以上肝细胞损害。但与尾静脉注射造模相比,小鼠腹腔注射造模肝细胞损伤的特异性实验室指标ALT和AST表达不高,肝组织病理损伤较轻。结论"BCG+LPS"小鼠尾静脉注射建立急性免疫性肝损伤模型优于腹腔注射建立免疫性肝损伤模型。