Wnt信号通路在肝纤维化中的作用

肝纤维化是多种慢性肝病进展至肝硬化的中间过程，特征为以胶原蛋白为主的细胞外基质合成与降解失衡，是多条细胞信号转导通路和一系列细胞信号分子网络共同控制的结果。Wnt信号通路包括经典通路和非经典通路，参与调控细胞的分化，癌变，凋亡，机体免疫及应激等生理病理过程。最近有研究表明Wnt信号通路与肝星状细胞的活化及肝纤维化的发生相关。本文就Wnt通路的组成分子，信号转导路径，在肝纤维化发展中的作用做简要综述。     

胃癌芯片数据中异常转录因子推断与信号通路分析

用一种新的转录因子介导的信号通路分析方法分析肿瘤芯片数据,从中推断异常的转录因子和信号通路.先通过统计目标基因的表达推断转录因子的活性,然后将那些活性异常的转录因子映射到KEGG信号通路上.此方法整合了基因表达调控的实验数据和信号通路信息.利用此方法,对斯坦福芯片数据库中的162个人类胃癌数据进行分析,结果发现,大部分芯片中的TGF-beta,JAK-STAT,NF-kappaB和Notch信号通路被异常激活.进一步对这些通路进行研究,将有助于探究胃癌的发生、发展机理和进行合理的药物设计.     

胰腺癌发展中的关键信号通路及其作用

胰腺癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,起病隐匿、恶性程度高、预后差。胰腺癌发生受多种因素调节,发病机制不清,具有复杂分子发病机。而且,胰腺癌细胞内在的基因异常表达、表观遗传基因突变等因素对胰腺癌发生发展起重要作用。目前研究显示,胰腺癌发生过程与多种信号通路的交互作用密切相关,这些信号通路的研发都体现了临床分子靶向治疗的潜在前景。本文对近年研究的一些与胰腺癌发生相关的信号通路做了总结,这些通路主要包括Wnt信号通路、MAPK信号通路、PI3K/AKT/m TOR信号通路、Hedgehog信号通路等。主要瞄准这些通路在胰腺癌发生、发展过程中的作用,它们的变化特征以及异常变化所导致的结果等方面的最新研究进展,以期为胰腺癌的早诊早治、个体化诊疗等的基础、临床研究提供前言资料。     

Slit-Robo信号通路在心血管发育中的作用

近期研究表明, Slit-Robo信号通路对心血管系统的发育和再生发挥了重要功能. Slit3作为促血管新生因子, 能够与其受体Robo4结合, 通过RhoGTPase信号通路调控多个生理和病理过程中的血管新生. Slit3-Robo4信号通路的激活能够促进工程组织中血管网络的形成. 硫酸乙酰肝素通过Slit3-Robo4通路能够调节膈肌发育及其血管新生. Slit-Robo信号通路还参与调控心脏系统静脉回流和心包膜的发育. Slit3的缺失会导致小鼠发育过程中的肾脏缺失和输尿管发育不全. 因此, 进一步研究Slit3-Robo4信号通路对于阐释心血管系统发育和疾病的病因具有重要理论意义, 有望为心血管疾病的预防和治疗提供有力的药物作用靶点, 促进有效药物的开发.     

Wnt信号通路与干细胞定向分化

Wnt信号通路在胚胎发育过程中参与背腹轴的形成、细胞极性的建立以及决定细胞命运.利用干细胞定向分化模型可在体外培养条件下探索Wnt信号通路在哺乳动物早期胚胎发育过程中的分子机理,了解其信号网络对干细胞定向分化中各个事件的调控机制.本文通过综合近期Wnt信号通路的研究,阐述经典Wnt信号通路(Canonical Wnt signaling pathway)在干细胞定向分化中的作用.     

肝损伤修复信号通路及中药的肝损伤保护作用研究最新进展

肝损伤是各种生物、化学及物理因素引起的肝组织病理性损伤,肝损伤的修复是肝脏研究的重点,其机制涉及许多信号通路、细胞因子及转录因子。该文系统总结了近年来国内外关于肝损伤修复的信号通路最新研究进展,包括NF/κB通路、Hh通路、STAT3通路、JAK/STAT通路、PI3K/Akt通路、Nrf2/ARE通路及TGF-β/Smad通路等;同时,从中药活性成分、提取物或有效部位、中成药、复方汤剂等视角归纳了中药的肝损伤保护作用最新进展,以期为中药保肝药物研发及临床应用提供一定参考。     

IGF-PI3K-Akt信号通路在生理性心肌肥大中的作用研究进展

心肌肥大是心肌细胞对多种刺激因素的复杂反应。心肌肥大可以分为三种:心肌的正常生长、运动诱导生理性心肌肥大和病理性心肌肥大。近年来,研究表明心肌的正常生长以及运动诱导的心肌生理性肥大,主要是通过IGF-PI3K-Akt信号通路进行信号转导。本文就IGF-PI3K-Akt信号转导通路的结构特点、调节过程作一综述。     

Wnt信号通路在卵泡发育中的调控研究

卵巢是维系女性生育的重要器官,主要功能是产生卵子,完成人类繁殖的任务.卵泡作为卵母细胞发生和发育的基本功能单位,控制着雌性哺乳动物所有的生殖活动.近几年的研究显示,Wnt信号通路在调节卵巢卵泡发育和类固醇生成等方面发挥重要作用,在卵巢早衰、卵巢癌等女性生殖疾病中起到重要调控作用.就Wnt信号通路对卵泡发育的影响及其作用...     

VMP1在TNF死亡信号通路中作用的初步研究

为了深入了解小鼠泡膜蛋白VMP1的生物学功能,我们采用免疫荧光染色、siRNA干扰技术、流式细胞术等方法对VMP1在TNF死亡信号通路中的作用进行研究.结果显示TNF的刺激可导致VMP1从L929细胞的细胞浆转移到细胞核,提示VMP1可能在TNF信号通路中起重要作用;用特异性的siRNA抑制L929细胞中VMP1的表达,细胞则表现出对TNF的明显抗性,证明VMP1参与了TNF诱导的细胞死亡信号通路.作者初步探索了VMP1与TNF死亡信号通路的关系,为进一步研究VMP1的生物学功能打下良好基础.     

共刺激分子B7和CD40对日本血吸虫感染小鼠Th1/Th2免疫偏移的调控作用

为观察干预B7/CD28和CD40/CD40L共刺激信号对Th1/Th2细胞因子表达水平和Th1/Th 2免疫偏移的调控作用, 分别取小鼠感染日本血吸虫后6、8、10和12周的脾淋巴细胞经抗CD8 0(B7-1)mAb、抗CD86(B7-2)mAb、抗CD40mAb和抗CD40LmAb处理后培养72h,用ELISA 双抗体夹心法测定培养上清中IFN-γ和IL-4的表达水平的动态变化并分析干预2种不同的共刺激信号对 Th1/Th2免疫偏移的影响.结果显示抗CD80mAb和抗CD86mAb均能显著抑制IL-4的表达水平, 尤其是抗CD86mAb对IL-4抑制作用尤为明显.抗CD40mAb和抗CD40LmAb也能影响Th2细胞因子的表达.其中以阻断CD40分子的作用更为显著.结果提示B7/CD28和CD40/CD40L共刺激信号可以调节Th1/Th2细胞因子的表达水平和调控Th1/Th2免疫偏移.干预B7/CD28和CD40/CD40L 介导的共刺激信号调控Th1/Th2免疫偏移有可能是一种控制血吸虫卵肉芽肿病变新型的免疫治疗途径.     

Enhancement of T cell immune response to lymphoma cells by CD28/CD80 alternative pathway

The aim of this study is to determine whether myeloma and lymphoma tumor cells can function as efficient antigen presenting cells (APC) to enhance the co-stimulation of T cells. The expression and function of T cell activation-related molecules, especially CD80, CD28, CD40 and CD40 ligand (CD40L), were studied on nine human myeloma cell lines (HMCL) and two B lymphoma cell lines. In the case of myeloma cell lines, the cells generally lacked CD80 antigen and expressed a heterogeneous CD40, and the expressions of CD40 and CD80 molecules could not be induced by either CD28 stimulation or CD40 ligation. Conversely, in the two B lymphoma cell lines, tumor cells expressed both CD80 and CD40 to some extent. CD28 stimulation could obviously increase the expression of CD80, CD40 and some adhesion molecules, and therefore generate a more efficient anti- tumor cell immunity. In conclusion, CD28 stimulation combined with CD40 antibody or soluble CD40 ligand may be a promising immunotherapeutic approach to B lymphoma.     

CD40L对B淋巴细胞表面分子及分泌IL-12的影响

在体外使用CD40L作用于B淋巴细胞使之活化,通过测定B淋巴细胞表面分子及分泌细胞因子的变化,探讨B淋巴细胞作为抗原递呈细胞在抗肿瘤免疫中的优势,为B淋巴细胞特异性活化细胞毒T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)进而发挥其肿瘤细胞杀伤效应奠定基础.取7名健康成人外周静脉血,经淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞(PBMC),分为对照组和实验组,实验组培养液中加入加入CD40L和IL-4,共培养21 d.观察B淋巴细胞生长状况,并在第7 d、第14 d和第21 d,用流式细胞仪(FCAS)测定其表面分子CD80、CD86和CD19,在第21 d,使用酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养液中的IL-12水平.结果显示,在CD40L的作用下,B淋巴细胞呈克隆样增殖,并高表达表面分子CD80/CD86和CD19,和对照组相比,B淋巴细胞分泌IL-12水平升高(P＜0.05).上述实验结果说明通过CD40L的刺激,B淋巴细胞得到了活化,提示通过该途径活化的B淋巴细胞具备了作为抗原递呈细胞而发挥其抗肿瘤免疫治疗的能力.     

可溶性CD40配体与冠脉病变的相关性研究

目的：通过分析可溶性细胞表面分化抗原40配体（sCD40L）水平与冠脉病变的关系，探讨其在冠心病发病中的意义。方法：经冠脉造影确诊的冠心病患者，对冠脉病变程度进行分型，ELISA法检测血浆中sCD40L含量，分析sCD40L水平与冠脉病变程度的相关性。结果：CHD组与对照组相比，sCD40L明显增加，且随冠脉病变累计支数越多、病变越严重，sCD40L水平增高越明显。单因素相关分析显示sCD40L水平与病变支数、病变类型呈正相关关系。结论：sCD40L对ACS不稳定斑块有促进作用，通过检测其表达水平，可能对预测动脉粥样硬化的启动和进展、斑块的易损性等提供新的资料，最终可能指导治疗，     

异亮氨酸拉链结构对可溶性CD40L生物学活性的影响

CD40配基(CD40L)为TNF超家族中的一员，瞬时表达于激活的CD4^ 的T淋巴细胞上．自然状态下膜上三聚体的CD40L通过和CD40受体(CD40R)结合，在免疫监视和肿瘤免疫中发挥作用．以PCR方法从peDNA3-CD40L质粒上扩增得到编码CD40L基因的胞外部分sCD40L，并将该片段插入大肠杆菌表达质粒pET30a上，构建得到大肠杆菌表达质粒pET30a-sCD40L；同时，在sCD40L的N端融合了异亮氨酸拉链(Isoleucine Zipper，IZ)结构，构建得到表达质粒pET30a-IZ-sCD40L．表达质粒在大肠杆菌中表达，得到可溶性的重组人CD40L和IZ-CD40L．SDS-PAGE分析结果表明重组人rhsCD40L和IZ-rhsCD40L在相应分子质量位置都有明显的条带产生，并得到Western blotting的确认．非SDS-PAGE电泳结果显示，异亮氨酸拉链结构有利于rhsCD40L蛋白形成聚合体结构．B细胞增殖实验和人骨髓瘤细胞株XG2凋亡实验结果都表明，异亮氨酸拉链结构提高了rhsCD40L的生物学活性．     

TAT-NEP1-40融合蛋白的表达、纯化及蛋白转导功能的鉴定

为大量获得高纯度具有蛋白转导功能并可以穿过血脑屏障的融合蛋白TAT—NEP1-40,将构建好的表达载体pTAT—NEP1—40转化大肠杆菌BL21（DE3）进行表达后。将融合蛋白进行纯化和复性,鉴定蛋白转导功能。带有重组质粒pTAT—NEP40的大肠杆菌经IPTG诱导后,主要以包涵体形式表达,融合蛋白的分子量大小为14kD,其表达量占菌体总蛋白量的31．59％,纯化后目的蛋白纯度达95．6％,通过免疫组化染色显示融合蛋白可以穿过血脑屏障进入脑组织。上述结果表明利用pTAT—NEP1-40重组质粒,可以成功地表达TAT—NEP1—40;纯化后该蛋白具有穿过血脑屏障的功能,为NEP1-40功能的进一步研究提供了基础。     

Interpretation and preliminary simulation of the 40 ka periodicity of the Quaternary glaciation

More and more proxy records approved that the periodicity of the glacial cycles is about 40 ka before MPT (middle Pleistocene transition) as early as late Tertiary from 3.0 Ma to 0.9 Ma,whereas it changes to about 100 ka after MPT. Summer insolation at high latitude in Northern Hemisphere,usually consid-ered as the main external force for the ice age,is dominated by the 23 ka precession period,which does not match the period of the glacial cycles. In this paper,we define an energy index C and its threshold Ct that indicate the net energy supply and the overall response of the climate system. The difference between these two parameters determines whether the ice sheet melts or not,and accordingly the start and termination of the interglacial stages,as well as the periodicity of glacial oscillations. Based on the energy threshold hypothesis,the preliminary simulation experiments are made to test the period of the glacial cycles and driven factors from a conceptual model. The results indicate that energy index C and threshold Ct can interpret not only the 40 ka periodicity before MPT,but also the quasi-100 ka perio-dicity after MPT to some extent,and the 40 ka is the basic period of the glacial cycles,which discloses the inherent continuity of climatic change before and after MPT.     

维药异常黑胆质成熟剂对人肝癌HepG2细胞生物行为和Rho/ROCK信号通路的影响

 为探讨维药异常黑胆质成熟剂(ASM)对人肝癌细胞(HepG2)增殖、侵袭转移的影响及Rho/ROCK 信号传导通路相关蛋白表达影响,采用四甲基偶氮唑蓝(MMT)法检测不同浓度ASM(10、20、25、50 mg/mL)和10 μmol/L Y-27632 作用24、48、72 h后,对HepG2 细胞增殖的影响;采用扫描电镜技术和细胞侵袭实验测定ASM 不同剂量组和10 μmol/L Y-27632 作用24 h 癌细胞侵袭运动能力,Western Blot 检测ASM 不同剂量组和10 μmol/L Y-27632 作用24 h 癌细胞RhoA、ROCK1、ROCK2 的表达。结果显示,ASM 对肝癌细胞增殖有明显抑制作用,且表现为有明显的剂量效应关系:在10、20 mg/mL ASM 剂量组,ASM 药物作用24、48、72 h 后,HepG2 细胞增殖抑制作用随时间的延长而抑制增加,而25、50 mg/mL 剂量组,ASM 抑制细胞增殖作用不明显;ASM 抑制瘤细胞侵袭运动能力,扫描电镜结果显示ASM 抑制肿瘤细胞伪足的生长,ASM 中高剂量组ROCK1、ROCK2 的表达明显降低,RhoA 表达无明显变化。由此推论,ASM 对人肝癌细胞生长增殖和侵袭运动能力有抑制作用,其机制可能与ROCK酶表达降低有关。     

Interfamily pregnancy and expression of CD57, CD68 in deciduas between golden hamster and mouse

Pregnancy between different species is one of the key steps to interspecific somatic cell cloning. Although interspecific clone embryos have been constructed, they could not develop to birth after being transferred to recipi-ents. In order to clarify the mechanism of this phenomenon, interfamily pregnancy between golden hamste (Mesocricetus auratus) and mouse (Mus musculus) was studied. Co-culture results indicated that the adhesion ratios of golden hamster blastocysts on mouse uterine epithelia monolayer 12, 24, 48 and 72 h after co-culture were all significantly lower than those of mouse blastocysts. The outgrowth ratios of golden hamster blastocysts on mouse uterine epithelia monolayer 48, 72 h after co-culture were both significantly lower than those of mouse blastocysts (P < 0.01). Golden hamster抯 blastula could be implanted and develop to D 11 of pregnancy after being transferred to mouse uterus (the 7th day after embryo transfer). Compared to the transfer of mouse embryo to mouse uterus, the successful ratio of interfamily embryo transfer was lower and the bulk of fetus was smaller than that of intraspecific fetus. Compared to intraspecific preg-nancy of mouse, the remote decidual tissue of interfamily pregnancy on D8 is looser. At the same time, expressions of CD57 and CD 68 in remote deciduas were both higher than those in the secondary deciduas in both intraspecific and interfamily pregnancy. However, expressions of the two molecules in interfamily pregnancy were lower than those in intraspecific pregnancy. These results showed that interfam-ily pregnancy could be established between golden hamster and mouse. But the development of fetus in interfamily pregnancy was slower than that in intraspecific pregnancy. The expression difference of CD57 and CD68 indicates the difference of immunoreaction between interfamily and in-traspecific pregnancy, which may be one of the reasons lead-ing to interfamily pregnancy termination.     

Separation and analysis of the soluble trimer of Aβ1-40 and its effects on the rise in intracellular calcium

Alzheimer’s disease (AD) is one of the progressive neurodegenerative diseases associated with protein conformational transition, generally known as protein conformational disorders[1]. The general characteriza- tions of AD are the intracellular fibrillar…