碘量法测定葡萄糖含量的影响因素研究

碘量法是一般医疗单位用于测定葡萄糖注射液中葡萄糖含量的常规分析方法,也是大学分析化学实验经常开设的综合性实验.该方法准确度高,但是因为影响因素较多,因此对操作的要求较高,使得不同的人之间以及同一个人平行样品之间测定结果出现较大差异.系统研究了氢氧化钠用量及滴加速度、滴定震荡速度及淀粉加入时刻等影响因素对碘量法测定葡萄糖含量的影响,对成功完成该实验具有重要的参考价值.     

吡喃糖氧化酶电极对葡萄糖和木糖的响应特征

采用戊二醛交联方法,将葡萄糖氧化酶(GOD)和吡喃糖氧化酶分别固定在醋酸纤维素载体膜上,制备电流型电化学酶电极。在SBA双电极分析仪器上安装葡萄糖氧化酶电极和吡喃氧化糖氧化酶电极,分别对不同浓度的葡萄糖、木糖及葡萄糖木糖混合样品进行测试,以葡萄糖氧化酶电极为对照,研究吡喃糖氧化酶电极对葡萄糖、木糖的响应特征。结果表明,吡喃糖酶电极对葡萄糖和木糖都具有良好的响应特征。葡萄糖测定的精密度（RSD）为1.10%（n=10）,在10~1 000 mg/L范围内有良好的线性相关性（R=0.999 0）;木糖测定的RSD为0.80%（n=10）,在10~1 600 mg/L范围内有较好的线性相关性（R=0.999 8）;在葡萄糖木糖混合液测定时,吡喃糖氧化酶电极呈现明显的双底物催化特征,在一定的浓度范围内,对葡萄糖和木糖的响应具有线性相关性。     

碘量法测定葡萄糖口服液中葡萄糖的含量

建立葡萄糖口服液中葡萄糖含量的测定方法。采用碘量法测定葡萄糖含量并与旋光法进行分析比较。两种测定方法无显著性差异,能准确测出葡萄糖的含量。相对标准偏差为1.2%,操作简便易行,结果准确可靠,适合于质检部门和生产厂家对该葡萄糖含量的快速测定。     

不同程度溶血对ELISA两步法检测HBsAg的影响观察

使用ELISA两步法对系列阴性溶血标本、阳性和弱阳性溶血标本及相应正常血浆标本进行HBsAg检测,观察标本不同程度溶血对ELISA两步法检测HBsAg结果的影响。溶血易致弱阳性标本产生假阴性,当Hb≤5g/L时可用于HBsAg的检测,Hb>5g/L应重新留取标本。但为保证检测质量,确保血液安全,应尽量避免使用溶血标本进行HBsAg检测。     

影响旋光法测定2-酮基-D-葡萄糖酸含量的因素

用旋光法测定发酵液中2-酮基-D-葡萄糖酸含量。详细考察了2-酮基-D-葡萄糖酸浓度、试液酸碱性和测试温度对2-酮基-D-葡萄糖酸含量测定结果的影响。结果表明,测试液中2-酮基-D-葡萄糖酸的含量在2.5~5.00g/100 mL,pH在酸性范围内,测定结果较为准确。利用有机化学原理从理论上对相关现象进行了解释。     

苯酚-硫酸法测定可溶性膳食纤维——聚葡萄糖含量的研究

用苯酚-硫酸法测定水溶性膳食纤维——聚葡萄糖的含量,通过正交实验确定最佳显色和水解条件．实验结果表明该方法简便易行、结果稳定可靠,用于食品中水溶性膳食纤维聚葡萄糖含量的测定结果令人满意．     

微量元素离子对红细胞低渗诱导溶血的影响

研究了Cu（Ⅱ）、Zn（Ⅱ）、Co（Ⅱ）、Ni（Ⅱ）、Mg（Ⅱ）、Sr（Ⅱ）等微量元素离子对红细胞低渗诱导溶血的影响．结果表明：Cu（Ⅱ）、Co（Ⅱ）对红细胞溶血具有促进作用，Zn（Ⅱ）、Ni（Ⅱ）、Sr（Ⅱ）具有抑制作用，Mg（Ⅱ）不产生影响．     

农药胁迫对杨树多酚氧化酶的影响

确定了杨树多酚氧化酶(PPO)测定的最佳条件为pH=4.0,温度5～30℃,时间1 min。利用试验得到的反应最适条件进一步研究了戊唑醇、多菌灵、甲胺基阿维菌素苯甲酸盐(甲维盐)和阿维菌素4种农药对杨树PPO活性的影响。结果表明:不同的药剂对杨树PPO的影响不同,200和400 mg/L戊唑醇可诱导杨树PPO活性升高;100、200和400 mg/L多菌灵对杨树PPO活性升高具有明显的诱导作用;400 mg/L甲维盐对杨树PPO活性升高具有诱导作用;400和800 mg/L阿维菌素能够诱导杨树PPO活性升高。     

聚葡萄糖中还原糖含量测定方法研究

聚葡萄糖是一种水溶性的膳食纤维,聚葡萄糖中还原糖含量对产品质量有很大影响.采用直接滴定法及高锰酸钾滴定法,对聚葡萄糖样品中还原糖的含量进行测定,通过对比实验发现直接滴定法比高锰酸钾滴定法具有操作简便、快速、检出限低等优势,因此直接滴定法更适于快速测定聚葡萄糖中还原糖的含量.     

酶法测定1-磷酸葡萄糖的含量

建立反应液中1-磷酸葡萄糖（G-1-P）的测定方法.分别在样品中加入PGluM（EC5.4.2.2）、G6P-DH（ECl.1.1.49）和氧化型辅酶Ⅱ（β-NADP）,通过测定还原型辅酶Ⅱ（β-NADPH）吸光值的变化（△A）来确定样品中G-1-P的含量.G-1-P在0～400 mg/L范围内与△A呈线性关系,r2=0.999 8,其平均回收率为100.88%（RSD=0.52%）.该法快速、灵敏、准确.     

纤维素固定化葡萄糖氧化酶的研究

用高碘酸钠（NaIO4)溶液将棉纤维素氧化成氧化纤维素,并将其作为载体使葡萄糖氧化酶能够固定化。考察了溶液的pH值、氧化时间、温度和氧化剂浓度等氧化条件对氧化纤维素醛基含量的影响,优化了氧化条件,研究了固定化葡萄糖氧化酶的活性,借助傅里叶红外光谱和酸－碱滴定法等手段,探讨了葡萄糖氧化酶的固定化机理。研究结果表明,纤维素固定化葡萄糖氧化酶具有较高的生物活性。     

葡萄糖生物传感器在有机介质中的特性研究

研究了β－环糊精与二茂铁主客体葡萄糖生物传感器在正丙醇、乙醇、乙腈三种有机溶液中的循环伏安响应特性,发现该传感器在有机溶液中的响应电流较缓冲溶液中增加;且有机溶液的浓度对传感器响应产生的影响,其最适百分比浓度分别为：正丙醇４０％,乙醇４５％,乙腈４０％;并探讨有机溶液对葡萄糖生物传感器产生影响的机理。     

葡萄糖氧化酶的膜透析发酵工艺研究

用膜透析法可减缓发酵过程中代谢物对葡萄糖氧化酶生物合成的阻遏作用。初步研究结果表明，带膜透析的发酵其产酶速率比对照（不带透析的发酵）高一倍，总产量提高３０－５０％。膜发酵过程中ＰＨ、ＮＨ２－Ｎ的变化较对照平缓。对透析条件也作了初步摸索。     

葡萄糖氧化酶膜过滤发酵工艺的研究

在葡萄糖氧化酶发酵过程中，配以外置式的膜过滤系统进行膜过滤发酵、可减缓发酵过程中产物及分解代谢物对酶合成的阻遏和抑制作用，使酶产率增加。实验结果表明；膜过滤发本酵的产物速度高达４．１４０×１６．６７μｍｏｌ／ｓ．ｈ，比人批发酵高３倍以上，且能在较长时间内维持较高的酶产率。     

生物传感器用于葡萄酒中葡萄糖含量测定的研究

将葡萄糖氧化酶(GOD)固定再生丝素蛋白在中,制得葡萄糖氧化酶传感器。该传感器在pH=7.0的磷酸缓冲溶液中,葡萄糖浓度在1.0×10-4 —2.5×10-3mol/L范围内呈良好线性关系。检测限5.0×10-5 mol/L,响应时间1分钟。该传感器用于葡萄酒中葡萄糖含量的测定,与酶-比色法测得结果一致。     

发酵代谢物对葡萄糖氧化酶生物合成的影响

用膜透析技术和静息细胞系统，对影响葡萄糖氧化酶（ＧＯＤ）发酵的控制因素进行了研究。静息细胞系统显示：鸟氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸和胱氨酸等氨基酸对ＧＯＤ的合成有促进作用；葡萄糖酸和丙酮酸对ＧＯＤ的合成有阻遏作用，１．５ｍｍｏｌ／Ｌ的丙酮酸使酶活降低４６．２４％；２０ｍｍｏｌ／Ｌ的葡萄糖酸使酶活降低２１％左右，但葡萄糖酸浓度增大，有被菌体作为碳源利用的可能。利用膜透析技术可除去部分发酵过程中产生的葡萄糖酸和丙酮酸等阻遏物，减少它们对ＧＯＤ合成的分解代谢物的阻遏作用，与分批发酵相比．提高酶活４０％左右。     

固相化葡萄糖氧化酶柱的研制

本文报导将葡萄糖氧化酶固定在改性硅胶上的最适宜条件及用此固相化酶测定葡萄糖的条件。同时拟定了模拟酶代替辣根过氧化物酶进行催化显色的反应条件。用所建立的分光光度法在固相化酶柱上测定了血清中葡萄糖的含量。与试剂盒测定结果对照，相关性较好，回收率为９５％－１０３％。酶柱历时两年多，重复测试５００次仍未失活。     

葡萄糖氧化酶发酵动力学的研究

利用恒化器研究了葡萄糖氧化酶（ＧＯＤ）发酵动力学，建立了较为合理的恒化培养系统。对采集的数据用计算机进行回归，求得最大比生长速率μｍａｘ＝０．２２５ｈ－１、饱和常数Ｋｓ＝８．９１ｇ／Ｌ、基质得率系数ＹＧｍａｘ＝０．４９ｇ／ｇ以及维持系数ｍ＝０．０２ｇ／ｇ·ｈ。并研究了ｐＨ、ＤＯ、ＮＨ２－Ｎ、葡萄糖酸、细胞产率，酶比活及体积产酶速率等参数随比生长速率变化的规律。在Ｄ＝０．１３１ｈ－１下体积产酶速率（ＤＥ）达最大值，为３．４６×１６．６７μｍｏｌ／ｓ·Ｌ·ｈ，是分批发酵最大体积产酶速率（１．５３×１６．６７μｍｏｌ／ｓ·Ｌ·ｈ）的２．２６倍。     

聚乙烯醇静电纺丝法固定葡萄糖氧化酶

利用静电纺丝纳米纤维具有高比表面积和多孔疏松结构的优势固定葡萄糖氧化酶，以提高酶电极的性能．通过聚乙烯醇（PVA）和葡萄糖氧化酶（GOD）共同静电纺丝的方法在金电极表面获得了固定化酶膜，用于构筑安培型葡萄糖生物传感器，膜的红外光谱、紫外-可见光谱和扫描电镜的分析均表明酶成功固定在静电纺丝形成的纳米纤维膜中．循环伏安测试表明固定化酶在静电纺丝纳米纤维中保持了活性，采用PVA静电纺丝法固定COD比利用浇铸膜法所得到的酶修饰电极对葡萄糖有更好的电流响应特性，通过在静电纺丝溶液中加入纳米金进一步提高了酶电极的电化学响应特性．