铁棍山药多糖对PC12及Hepa1-6细胞在体外增殖的影响

采取闪式提取法从铁棍山药中提取山药多糖,利用胰蛋白酶去除多糖中的杂蛋白,冷冻干燥获得山药多糖制品.分别以10μg/mL、100μg/mL、500μg/mL、1 000μg/mL浓度添加于生长良好的PC12及Hepa1-6细胞中,再分别二次培养12h、24h、36h,研究山药多糖在体外对PC12及Hepa1-6两种细胞增殖的影响.结果显示:在培养24h后,当山药多糖浓度为10μg/mL、100μg/mL时,对PC12细胞增殖的影响没有差异性(P>0.05),但当浓度进一步提高到500μg/mL、1 000μg/mL时,则对PC12细胞的增殖体现出显著影响(P<0.05);对于Hepa1-6,在培养12h且山药多糖浓度在10μg/mL、500μg/mL时,对Hepa1-6细胞增殖的影响差异性显著(P<0.05),同时在100μg/mL浓度下,山药多糖对Hepa1-6细胞的增殖抑制更加明显(P<0.01).但当浓度达到1 000μg/mL时,对Hepa1-6细胞增殖呈现促进作用.在培养24h时,各浓度的山药多糖对Hepa1-6细胞增殖的影响均没有差异性(P>0.05).当培养36h后,在山药多糖浓度为10μg/mL、100μg/mL、500μg/mL下,统计显示对Hepa1-6细胞增殖的影响差异性显著(P<0.05).上述结果说明,山药多糖在一定的浓度范围内具有明显的抗肿瘤作用.     

琐琐葡萄多糖对PC12细胞损伤的神经保护作用

 体外培养PC12细胞,采用20μmol/L β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)作用24h诱导细胞损伤,建立阿尔茨海默病(AD)细胞模型,研究琐琐葡萄多糖(VTP)对PC12细胞损伤的神经保护作用。设立对照组、模型组和VTP保护组(20,40,80μg/mL),CCK-8法检测各组细胞的存活率,乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞膜通透性及完整性,化学比色法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果显示,20,40,80μg/mL VTP可提高PC12细胞存活率,减少LDH渗漏,增加SOD活力,减少MDA含量,降低细胞凋亡率,与模型组比较有显著差异(P<0.01)。由此推论,VTP对Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡和氧化损伤具有明显的保护作用。     

对大鼠PC12细胞用于定量测定神经生长因子活性两种方案的评价

建株的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤ＰＣ１２细胞，在神经生长因子ＮＧＦ的作用下，会长出神经突起。这一现象被用于神经生长因子的活性测定。但就定量测定而言、目前已 方法，方案，包括判定阳性细胞的标准，均有一定差异，而我国也尚未建立起对这一重要的 活性的标准测定法。     

大蒜多糖B对免疫抑制小鼠免疫活性的调节

目的:研究大蒜多糖B(GP-B)对免疫抑制小鼠体内免疫活性的调节作用.方法:用氢化可的松(HC)皮下注射制造免疫功能抑制的动物模型,以左旋咪唑作为阳性药物对照.给模型小鼠分别灌胃生理盐水、多糖溶液,连续12 d,灌胃多糖溶液质量分数分别为1 600、800和400 mg/kg.通过流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群CD_3~+、CD_4~+、CD_8~+的百分比,计算胸腺指数和脾脏指数,检测脾细胞增殖情况及腹腔巨噬细胞吞噬功能等实验对大蒜多糖B的免疫学活性进行研究.结果:以大蒜多糖B质量分数为800 ms/kg灌胃的小鼠CD_3~+CD_4~+T细胞百分率以及CD_4~+/CD_8~+比值明显增高(P<0.05),同时免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性显著增强(P<0.05).但该浓度的GP-B降低了CD_3~+CD_8~+细胞百分比(P<0.05),且对脾T淋巴细胞转化率无促进作用.结论:大蒜多糖B对免疫抑制小鼠的T淋巴细胞亚群及巨噬细胞的吞噬功能具有正向调节作用.     

真菌多糖的抗氧化活性研究

机体在生命活动的氧化代谢过程中不断产生各种活性氧自由基(ROS),ROS容易损伤机体内的组织,从而引发各种各样的疾病。大量的研究表明,大部分从自然界物质中分离获得的多糖类化合物具有抑制脂质过氧化和清除自由基等抗氧化作用。通过本次实验,研究了黑木耳、香菇多糖的抗氧化活性。结果表明:黑木耳多糖、香菇多糖都具有一定的体外抗氧化能力,其中香菇多糖具有较强的清除羟基自由基(·OH)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)的作用;并且黑木耳、香菇多糖也具有一定的体内抗氧化活性,均能不同程度的提高血清和肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)活力以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,可以减少肝脏和血清中丙二醛(MDA)含量,增强心脏过氧化物酶(POD)活力以及减少全脑单胺氧化酶(MAO)活力。     

大蒜提取物中总酚含量及其抗氧化活性研究

分别以水、体积分数为50%的乙醇、加酶水和加酶的体积分数为50%的乙醇为溶剂,采用超声波提取大蒜,用Folin-Ciocalteu法测定提取物中总酚含量,研究提取物对DPPH.、.OH和O2的清除能力.实验结果表明:提取剂水、体积分数为50%的乙醇、加酶水和加酶的体积分数为50%的乙醇的超声波在100 g大蒜的提取物中总酚含量依次为112.7、102.4、171.1和130.8 mg.4种提取物对DPPH.、.OH和O2均具有较强的清除能力,表明其均具有较强的抗氧化活性.大蒜提取物抗氧化活性与其总酚含量呈明显的量效关系.     

Rho激酶抑制剂诱导PC12和PC12Adh细胞突起生长的差异比较

 PC12细胞是研究神经分化最常用的细胞之一.在rho激酶(ROCK)抑制剂的作用下,PC12细胞能够长出神经样突起.最近,美国菌种保存中心(ATCC)同时提供PC12细胞和PC12 Adh细胞.研究的主要目的是观察ROCK抑制剂诱导这2种细胞长突起是否存在差异.PC12细胞和PC12Adh细胞按照ATCC方法进行培养,用神经生长因子(NGF,1000ng/mL)或ROCK抑制剂(33μmol/L Y27632,33μmol/L法舒地尔)处理细胞1~4d.结果发现NGF能够诱导这2种细胞生长突起,而ROCK抑制剂只诱导PC12Adh细胞长突起,对PC12细胞不明显.因此,ROCK抑制剂诱导这2种细胞突起生长存在明显差异,PC12Adh细胞更适合用于ROCK抑制剂的神经诱导分化实验.     

紫球藻多糖的降解及其体外抗氧化活性

采用过氧化氢辅助超声波降解法制备低相对分子质量紫球藻(Porphyridium cruentum)多糖,测定降解后寡糖对3种自由基的清除能力,考察相对分子质量对多糖抗氧化活性的影响。结果显示:多糖的降解率随过氧化氢的体积分数(φH2O2)、超声时间和反应温度的增加而增加;相对分子质量随三者的增加而降低,当φH2O2、超声时间和反应温度分别为8%、6 h和70℃时趋于稳定,分别获得了平均分子量为203.6、606.6和730.2 ku的寡糖。抗氧化实验表明:相对分子质量小的多糖对自由基有明显的清除作用,相对分子质量对其抗氧化活性有显著影响,相对分子质量为203.6 ku的寡糖活性最好。     

杏鲍菇粗多糖的抗氧化活性研究

对杏鲍菇子实体、菌丝体和发酵液粗多糖清除DPPH自由基、羟自由基的能力、铁离子螯合能力以及还原力进行了比较分析,结果表明:菌丝体、发酵液粗多糖清除DPPH自由基能力较强,清除率EC50值分别为4.15和4.81mg/mL;子实体、菌丝体和发酵液粗多糖清除羟自由基、螯合铁离子的能力较强,羟自由基清除率EC50值分别为1.27、1.31和3.54mg/mL,铁离子螯合能力EC50值分别为3.01、1.53和4.17mg/mL;在一定浓度范围内,多糖浓度增加其清除DPPH自由基、羟自由基的能力以及铁离子螯合能力亦增强,并呈现良好的量效关系.实验浓度范围内,3种粗多糖的还原力均较弱.     

酒精对PC12细胞凋亡及中性神经鞘磷脂酶表达及活性的影响

采用不同浓度酒精处理PC12细胞,观察酒精诱导细胞凋亡作用及凋亡过程中中性神经鞘磷脂酶(neutral sphingomyelinase,N-S Mase)活性及mRNA表达量的改变.结果显示,当酒精浓度达50 mmol/L以上时,作用24 h后,去血清培养的PC12细胞表现出较强的细胞增殖抑制作用(P0.05)并呈浓度依赖性.Hoechst 33258荧光染色结果显示处理组凋亡细胞增多,表现染色质凝集、细胞核变小、核碎裂成碎片等典型细胞凋亡特征性变化.琼脂糖凝胶电泳显示酒精处理组有不同程度的DNA断裂,呈凋亡细胞典型的梯状DNA.RT-PCR结果显示,不同浓度酒精作用PC12细胞2 h后N-S Mase表达升高.荧光分光光度法检测N-SMase的活性,显示酒精作用PC12细胞2h后酶活性升高,与去血清对照组相比差异显著(P0.05).上述结果表明,酒精可导致PC12细胞凋亡并伴有N-SMase mRNA表达量增高,酶活性增强,说明酒精诱导PC12细胞凋亡与鞘磷脂循环有关.     

大蒜多糖的分离纯化及抗氧化性的研究

采用热水浸提法从大蒜中提取大蒜粗多糖（GA），用DEAE一纤维素柱层析对GA进行纯化，得到中性多糖（GB）和酸性多糖（GC）。进一步对3种大蒜多糖的抗氧化性进行测定，结果显示：GB具有较好的清除羟基自由基和还原能力，GC具有较好的清除超氧阴离子自由基和配位能力，而GA的抗氧化能力则介于GB和GC之间。     

菟丝子提取物对PC12细胞中GAP-43表达影响

以常用的PC12细胞株为实验模型,分析了菟丝子提取物作用后PC12细胞突触延伸情况;同时结合免疫细胞化学和Western blot方法考察了其对神经细胞突触可塑性信号分子GAP-43表达的影响．研究结果表明,以黄酮甙为主要成分的菟丝子提取物不仅能诱导PC12细胞分化、突触延伸,而且还能促进GAP-43的表达．     

Effect of nerve regeneration factor on differentiation of PC12 cells and its signaling pathway

The effects of nerve regeneration factor (NRF) on neuronal differentiation of PC12 cells and its signaling pathway are investigated by morphological observation and immunofluorescent cytochemical method, and the activity of ERK1/2 in NRF-treated PC12 cells in absence of serum is also studied by immuno-coprecipitation and Western blot analysis. The MEK1/2-specific inhibitor U0126, the broad-spectrum protein kinase C (PKC) inhibitor G?6983 and tyrosine protein kinase (TPK) inhibitor genistein were used to determine the roles of the activation of ERK1/2 by NRF and the involvement of certain kinds of PKC or TPK receptor in this activation process. The results show that U0126 and G?6983 inhibit the activation of ERK1/2 by NRF to different extents, while genistein has no effect on it, demonstrating that NRF remarkably induces neuronal differentiation of PC12 cells through activating ERK1/2 in a dose-dependent and time-dependent manner.     

酒精对PC12细胞凋亡的诱导作用

采用不同浓度酒精处理PC12细胞,观察酒精诱导细胞凋亡作用及其与线粒体凋亡途径的关系.结果显示,采用50、100、200、400和800mmol/L浓度的酒精处理去血清培养的PC12细胞24h后,细胞存活率分别是单纯去血清培养细胞存活率的85.66%、74.28%、62.47%、54.14%和50.35%,呈浓度依赖性,与对照组比较差异显著(P0.05).Hoechst 33342/PI染色法观察到典型凋亡现象,如核型固缩、染色质凝集等.DNA琼脂糖凝胶电泳可见100~400mmol/L浓度酒精处理组呈现凋亡细胞典型梯状DNA.酒精能使PC12细胞线粒体膜电位下降并呈浓度依赖性.酒精致PC12细胞凋亡过程中,凋亡关键蛋白Caspase-3、Caspase-9表达量升高.上述结果表明,酒精能够诱导PC12细胞凋亡,诱导作用随浓度升高而增强且酒精诱导PC12细胞凋亡与线粒体凋亡途径有关.     

蝙蝠葛碱提多糖对Hela细胞增殖的影响

利用蝙蝠葛根提取多糖成分,并应用噻唑蓝还原法(MTT)检测了蝙蝠葛多糖对Hela细胞增殖的抑制作用及细胞毒性作用.结果表明:蝙蝠葛碱提多糖在质量浓度较低时,对Hela细胞的增殖有促进作用,此作用在质量浓度为0.25 mg/mL时达到最大,此时Hela细胞增殖率为149％.随着浓度的进一步加大,Hela细胞的生长逐渐受到...     

调节细胞自噬对鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的影响

以鱼藤酮处理的PC12细胞为帕金森病体外模型,分别使用雷帕霉素作为自噬途径的促进剂,巴佛洛霉素A1和3-甲基腺嘌呤作为抑制剂,检测调节细胞自噬对细胞凋亡的影响,发现巴佛洛霉素A1极大提高了细胞凋亡率,3-甲基腺嘌呤则可以减轻鱼藤酮诱导的细胞凋亡,而雷帕霉素虽然促进受损细胞凋亡,但降低了受损细胞早期的死亡率.构建pEGFP-LC3 稳定转染的PC12细胞,流式细胞检测结果显示,抑制或促进细胞自噬,细胞内自噬相关蛋白LC3均有明显增加.     

芦荟多糖对荷瘤小鼠肿瘤细胞钠泵的影响

报道了库拉索芦荟多糖、木立多糖对S1 80 小鼠肿瘤细胞膜Na+ ,K+ -ATPase的活性影响。结果表明 ,二者均能明显抑制荷瘤小鼠肿瘤细胞膜上Na+ ,K+ -ATPase的活性。芦荟多糖的这一作用改变了荷瘤小鼠细胞膜的物质、能量平衡 ,进而降低了肿瘤细胞的恶性程度。     

真菌多糖激发子对辛格粒毛盘菌抗氧化多酚积累的影响

文章研究了辛格粒毛盘菌胞外多酚的抗氧化活性,并以啤酒酵母多糖作为真菌激发子,研究其对辛格粒毛盘菌胞外多酚积累的影响。研究结果表明,多酚的抗氧化活性随啤酒酵母多糖质量浓度的增大而增强,当质量浓度为2.5g/L时,多酚的还原能力较强,且对O_2~-·和DPPH·的清除作用分别达到54.50%、70.48%;在粒毛盘菌发酵液中添加啤酒酵母多糖激发子,可以增强菌丝体中苯丙氨酸解氨酶和一氧化氮合酶的活性,同时提高胞外多酚的产量,其中添加80mg/L激发子组的胞外多酚产量最大,为83.30mg/L,比空白对照组提高了28.0%。因此啤酒酵母多糖激发子可提高辛格粒毛盘菌抗氧化多酚的积累。