灵芝真菌发酵胞外多糖反馈抑制的初步研究

探讨了灵芝胞外多糖自身反馈抑制作用。在摇瓶中考察了灵芝真菌发酵菌丝体生长、胞外多糖(EPS)和胞内多糖(IPS)合成的动态过程。在培养168h时，生物量达到最大值3．18g／L(干重)，培养216h时，胞外多糖达到最高浓度1．24g／L，EPS和生物量的变化趋势大致呈正相关。在摇瓶培养基中添加同源胞外多糖，以浓度梯度实验法考察培养基中的同源胞外多糖浓度对灵芝真菌发酵胞外多糖产量的影响，结果表明：培养基中添加的同源胞外多糖浓度高于0．59g/L时，EPS的产生受到明显抑制，其趋势是随着培养基中同源灵芝胞外多糖浓度的增加，反馈抑制作用逐渐增强，当培养基中添加的同源胞外多糖浓度高于2．34g/L时，菌丝的生长和胞外多糖的产生完全受到抑制。     

镉离子对红树林底栖硅藻新月筒柱藻胞外多糖的影响

重金属镉在沉积物中普遍存在,易对底栖硅藻造成慢性毒害.研究了不同浓度的镉离子对红树林底栖硅藻新月筒柱藻的细胞生长、蛋白质含量及胞外多糖(extracellular polymeric substances,EPS)的影响.结果表明,与对照组相比,不同浓度的镉离子显著抑制了细胞的生长和蛋白质含量;0.001、0.01和0.1μg/mL实验组均显著抑制了EPS含量(p<0.05),浓度越高,抑制越强.但新月筒柱藻在不同生长阶段分泌附着胞外多糖(attached EPS,AEPS)和胶体胞外多糖(colloidal EPS,CEPS)不一样,在培养的前4d,CEPS含量高于AEPS含量10倍以上,4d后则AEPS含量高于CEPS.与0.001μg/mL的镉离子实验组相比,0.1μg/mL的镉离子促进CEPS的积累,而抑制AEPS的产生,特别是在生长前期.这说明细胞倾向于向培养基中分泌大量的CEPS,而不是在细胞周围形成大量的AEPS来缓解高浓度镉离子的胁迫.研究结果有助于了解镉离子在底栖硅藻集群的时空分布和沉积物的稳定性等方面的作用.     

铁棍山药多糖对PC12及Hepa1-6细胞在体外增殖的影响

采取闪式提取法从铁棍山药中提取山药多糖,利用胰蛋白酶去除多糖中的杂蛋白,冷冻干燥获得山药多糖制品.分别以10μg/mL、100μg/mL、500μg/mL、1 000μg/mL浓度添加于生长良好的PC12及Hepa1-6细胞中,再分别二次培养12h、24h、36h,研究山药多糖在体外对PC12及Hepa1-6两种细胞增殖的影响.结果显示:在培养24h后,当山药多糖浓度为10μg/mL、100μg/mL时,对PC12细胞增殖的影响没有差异性(P>0.05),但当浓度进一步提高到500μg/mL、1 000μg/mL时,则对PC12细胞的增殖体现出显著影响(P<0.05);对于Hepa1-6,在培养12h且山药多糖浓度在10μg/mL、500μg/mL时,对Hepa1-6细胞增殖的影响差异性显著(P<0.05),同时在100μg/mL浓度下,山药多糖对Hepa1-6细胞的增殖抑制更加明显(P<0.01).但当浓度达到1 000μg/mL时,对Hepa1-6细胞增殖呈现促进作用.在培养24h时,各浓度的山药多糖对Hepa1-6细胞增殖的影响均没有差异性(P>0.05).当培养36h后,在山药多糖浓度为10μg/mL、100μg/mL、500μg/mL下,统计显示对Hepa1-6细胞增殖的影响差异性显著(P<0.05).上述结果说明,山药多糖在一定的浓度范围内具有明显的抗肿瘤作用.     

不同中药提取液对灵芝摇瓶培养的影响

实验采用将9味中药的水提取液浓度0．125g/mL分别加入灵芝二级摇瓶发酵培养基中接种培养,观察中药对灵芝茵液体培养中生长量及产灵芝胞外多糖的影响,并初步研究了四味中药板蓝根、茵陈、垂盆草、茯苓不同浓度对灵芝液体培养的影响。结果显示：茵陈、垂盆草、火巷、桔梗、黄苓、板蓝根、连翘7味中药能抑制胞外多糖的分泌,茯苓可明显地促进灵芝的生长,增强胞外多糖的分泌。茯苓浓度在0．045g／mL-0．165g／mL能增加灵芝生物量,而在浓度0．045g/mL-0．085g/mL时能促进灵芝胞外多糖量,茵陈在浓度0．045g/mL-0．165g／mL范围内时对灵芝的生长具有促进作用,但对胞外多糖存在抑制作用,垂盆草、板蓝根对灵芝胞外多糖量和生物量有一定程度的抑制作用。     

荆豆(Ulex europaeus L.)凝集素Ⅰ的研究

用硫酸铵分级沉淀,当饱和度达40％时,荆豆种子中的荆豆凝集素I就被沉淀出来,再经处理,获得冻干的无盐制剂.当凝集素浓度为7.8μg/mL时,就能凝集人O型血细胞,浓度分别为125μg/mL或500μg/mL时,对人B或A型血发生凝集反应.其凝集O型血的凝集作用可被Fuc所抑制.上述制剂可通过CM—纤维素柱和Sephadex G—200柱2次分子筛过滤而纯化,此纯化的凝集素在PAGE中显示一条蛋白带,浓度为1.25μg/mL时可使O型血和牛精细胞发生凝集反应;浓度为40μg/mL或500μg/mL时,可分别使B型和A型血发生凝集反应.     

Lachnum YM328多糖发酵条件优化及抗氧化性

文章在碳源、氮源、金属离子和发酵时间4个单因素试验的基础上,利用正交试验法对Lachnum YM328胞外多糖发酵条件进行了研究,得出最优发酵条件为:ρ(葡萄糖)=20 g/L,ρ(酵母膏)=5 g/L,ρ(硫酸锰)=0.075 g/L,25 ℃下培养10 d;该条件下YM328胞外多糖产量为1.895 mg/mL,相对于优化前提高了36.27%;通过测定其胞外多糖(EPS)对·OH、NO-2的清除作用来研究YM328胞外多糖的抗氧化性;结果表明,YM328胞外多糖对·OH、NO-2均具有明显的清除作用,抗氧化性随着多糖质量浓度的增加呈增强趋势.     

两种温度处理下铜绿微囊藻对Cr~(6+)的耐受与吸附特性研究

在20℃和30℃两个温度条件下研究了铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)对Cr~(6+)的耐受性和吸附率.结果表明:随着Cr~(6+)质量浓度的增加,24h后其对铜绿微囊藻的生长速率及叶绿素a的生物合成抑制作用增强,而胞外多糖的生物合成显著地增加.30℃时胞外多糖的生物合成量显著高于20℃胞外多糖含量(P0.05).Cr~(6+)质量浓度增加至0.6mg/L时,铜绿微囊藻对Cr~(6+)吸附率最大,20℃和30℃时分别达到84.7%和98.3%.Cr~(6+)质量浓度为9.0mg/L时,单位藻生物量对Cr~(6+)的吸附量达到最大,20℃和30℃时最大吸附量分别为39.3g/g、58.6g/g.     

复方黄柏颗粒对养殖场常见致病菌的体外抑菌实验

本研究的目的是为了探讨新型复方中兽药复方黄柏颗粒对养殖场中常见致病菌的体外抑菌效果,结果表明:复方黄柏颗粒对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、嗜水气单胞菌、甲型副伤寒沙门氏菌和多杀性巴氏杆菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为15.625 μg/mL、125μg/mL、125μg/mL、31.25μg/mL、62.5μg/mL,最小杀菌浓度(MBC)分别为＞1000μg/mL、250μg/mL、250μg/mL、250μg/mL、1000μg/mL,抑菌圈直径呈浓度依赖关系,与MIC结果基本吻合.复方黄柏颗粒具有明显的抑菌效果,同时也为其使用提供了理论依据.     

环境因子对微藻胞外多聚物主要组分的影响

胞外多聚物(extracellular polymeric substances,EPS)对于微藻细胞的生长和用途具有重要的影响.以1株葡萄藻、1株栅藻和2株小球藻为研究对象,考察氮源含量改变时微藻EPS中主要组分多糖和蛋白质的变化情况.选取长势最优的葡萄藻,研究pH值、温度和培养方式对EPS组分的影响.结果表明:缺氮的生长环境会引起EPS中蛋白质含量的减少,最多可减少56.0%;微藻EPS中最多的是胞外多糖,占总EPS组分的58.08%~80.78%,而胞外蛋白质含量则占5.73%~13.45%;相比葡萄藻和栅藻,小球藻胞外存在更多的多糖和蛋白质.对于葡萄藻,pH值为11时EPS中多糖和蛋白质含量(按每克细胞计)与pH值为7时相比分别增加0.135和0.018g;降低温度使EPS多糖含量从0.014g急剧增加到0.600g;异养培养时EPS中多糖含量更高而自养培养时蛋白质含量更高.     

藏红花花瓣粗多糖的体外抗氧化活性研究

采用水提醇沉法提取藏红花花瓣中的多糖,得率为3.75%.联合蒽酮-硫酸法和DNS法测得多糖纯度为68.34%.对粗多糖的体外抗氧化活性进行测定,结果表明,粗多糖具有一定的抗氧化活性,抗氧化能力指数(ORAC)值为0.572μmol TE/mg;其对ABTS+、DPPH和羟自由基具有一定的清除能力,半数清除浓度EC50分别为76.26μg/mL、165.5μg/mL和880.4μg/mL.     

多氯联苯对蛋白核小球藻和斜生栅藻生长影响的研究

PCB1 2 54 对蛋白核小球藻Cholrellapyrenoidosa和斜生栅藻为Scenedesmusobliguus 2种藻类的生长有比较明显的影响 ,在低质量浓度时 (<0 4ng mL)有轻微的刺激作用 ,高质量浓度 (>2 0ng mL)时表现明显的抑制作用。 2种藻类的生长 96h有效半抑制质量浓度 (EC50 )分别为 7 73和 2 1 6 2ng mL。在PCB1 2 54 作用下 ,蛋白核小球藻和斜生栅藻的两种抗氧化关键酶 :超氧化物歧化酶 (SOD)与过氧化物酶 (POD) ,均有较明显的变化 ,在低质量浓度作用下 ,2种酶活性都略有升高 ;高质量浓度时明显受抑制 ,活性逐渐下降。其中SOD对PCB1 2 54 作用更为敏感。不同藻类对PCB1 2 54 作用响应不一样 ,其中斜生栅藻表现出对PCB1 2 54 更好的耐受性     

川蔓藻水浸提液的克藻效应与机理

采用普通小球藻在不同浓度的川蔓藻水浸提液中纯培养的方法，研究了川蔓藻对普通小球藻的克藻效应与机理、结果显示，川蔓藻的水浸提液对普通小球藻的抑制作用显著并具有浓度效应、96h的抑制率与浸提液浓度的对数线性相关．半抑制浓度（IC50）为6．332g（dw）／L．川蔓藻的水浸提液使藻细胞内丙二醛的含量急剧增高，并显鲁改变了藻细胞外可溶性蛋白和多糖的比值、透射电镜观察显示，川蔓藻的水浸提液主要损伤藻细胞的膜系统,川蔓藻水浸提液对普通小球藻的抑制机理为：损坏藻细胞的膜系统和改变胞外聚合物的含量，从而增加小球藻表面的疏水性，最终藻细胞絮凝沉降死亡.     

重组金针菇免疫调节蛋白的纯化及生物活性研究

目的研究重组的金针菇免疫调节蛋白(re FIP-fve)对小鼠脾淋巴细胞的增殖作用、诱导小鼠脾淋巴细胞对白细胞介素-2(IL-2)的促分泌作用及对血细胞的凝集作用.方法采用离子交换色谱法,利用SP Sepharose XL色谱柱纯化重组的免疫调节蛋白;将纯化后的蛋白作用于小鼠脾淋巴细胞和血细胞,用MTT法检测蛋白对脾细胞增殖和血细胞凝集的影响;用ELISA法检测蛋白对淋巴细胞分泌细胞因子的作用.结果经过SP Sepharose XL色谱柱纯化后可获得纯度为86%的重组蛋白;纯化蛋白浓度在80μg/m L时最大限度促进细胞增殖;蛋白浓度在2μg/m L时开始出现凝血;ELISA检测结果显示:重组的金针菇免疫调节蛋白能明显增强小鼠脾淋巴细胞分泌白细胞介素2(IL-2)的水平.结论经过SP Sepharose XL色谱柱纯化后可获得纯度较高的蛋白;纯化后的蛋白与小鼠脾淋巴细胞共同培养,不仅可以促进脾细胞的增殖,而且能增强小鼠脾淋巴细胞分泌白细胞介素2的水平;蛋白与血细胞共同培养能够促进血细胞的凝集.     

Cinobufacini-induced HeLa cell apoptosis enhanced by curcumin

When used in combination with certain chemotherapies, curcumin has been shown to increase apoptosis in several cancer cell lines. Here, we report the combined effects of curcumin and cinobufacini on human cervical carcinoma cells. The aim of this study was to examine whether curcumin could enhance apoptosis induced by cinobufacini. 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-y1)-2,5- diphenytetrazolium bromide (MTT) assays revealed that the growth and proliferation of HeLa cells could be inhibited by 75% after a combined treatment of 25 μg/mL cinobufacini and 8 μg/mL curcumin. The combined treatment is 3 times more effective than treatment with 25 μg/mL cinobufacini alone. Annexin V-FITC/PI staining, morphological changes and immunofluorescence verified a significant enhancement in cinobufacini-induced apoptosis when cells were also exposed to curcumin. The data showed that the proportion of early apoptotic cells significantly increased from 15.43% in cells treated only with 25 μg/mL cinobufacini to 49.2% in cells treated with 25 μg/mL cinobufacini and 8 μg/mL curcumin. Moreover, compared with treatment of only 25 μg/mL cinobufacini, ROS production increased 1.7-fold, the intracellular free Ca 2+ concentration increased 1.5-fold, and the mitochon- drial membrane potential decreased by 20% in the combined treatment. Simultaneously, the atomic force microscopy (AFM) re- sults suggest that cells treated with a combination of cinobufacini and curcumin varied significantly in shape and ultrastructure. Collapsed cells with leaking cytoplasm, blebbing pores and emerging apoptotic bodies were prevalent. The nanoparticle size increased from 70 nm when the cells were treated with 25 μg/mL cinobufacini to 190 nm when the cells were treated with 25 μg/mL cinobufacini and 8 μg/mL curcumin. The size increase resulted in the cell membrane becoming considerably rough. These results can improve our understanding of combination treatments. Specifically, the combination of cinobufacini and curcumin may potentially find use as a novel cervical carcinoma treatment. Additionally, AFM is a powerful tool that can be used to explore cellular morphologies and ultrastructures.     

金针菇液体深层发酵多糖的提取与测定

金针菇液体深层发酵醪中,母液和菌丝体内分别含有胞外多糖、胞内多糖,在母液中加入一定体积９５ ％ 乙醇,得到胞外粗多糖;菌丝体烘干后,粉碎过筛,水浴提取胞内粗多糖。采用蒽酮比色法测定粗多糖中纯多糖的含量。     

Pb2 胁迫对蛋白核小球藻叶绿素荧光强度及亚显微结构的影响

实验研究了蛋白核小球藻叶绿素荧光强度及亚显微结构受不同浓度Pb2+的影响。实验结果表明:随暴露时间的进行0、1 mg/L Pb(NO3)2处理组蛋白核小球藻的叶绿素荧光强度是逐渐升高的;而5、10、50、80 mg/L处理组的藻叶绿素荧光强度逐渐降低;且Pb2+浓度越大其荧光强度的下降趋势越明显。经Pb2+处理的蛋白核小球藻细胞易破裂且多变形,细胞壁和原生质体结合疏松,细胞超微结构中的细胞器如叶绿体、线粒体、蛋白核、淀粉与液泡等受到了Pb2+毒性影响,导致其细胞内的各个系统受到明显影响,进而影响到藻细胞的荧光特性。     

光密度法测定蛋白核小球藻生物量

目的修正传统光密度测定微藻生物量的方法。方法通过扫描并比较蛋白核小球藻藻液和总色素提取物在200～800nm范围内的吸光值,确定最佳波长以修正传统光密度法测定波长,绘制标准曲线来间接测定蛋白核小球藻的生物量。比较修正前后光密度法测定蛋白核小球藻生物量的精确性。结果 517nm下对应的吸光值与蛋白核小球藻的生物量有显著的线性关系。采用修正后光密度法测定干重量具有良好的线性关系:Y=0.257 8X-0.005 1(R2=0.995 6),相比传统光密度法具有更好的相关性;采用修正后光密度法测定细胞密度具有良好的线性关系:D=2 320.4X+0.030 6(R2=0.999 3),相比传统光密度法具有更好的相关性;修正后光密度法与干重法实时测定的蛋白核小球藻生物量结果基本一致,而传统光密度法与干重法具有一定的偏差。结论采用517nm修正传统光密度法测定波长,有效消除了色素干扰带来的误差,可以作为蛋白核小球藻生物量测定的特征波长。     

高温热浪下北京城市水体典型蓝绿藻生长规律研究

以北京城市水体为媒介,在高温热浪条件下,研究温度和碱度两个变化因子对铜绿微囊藻和蛋白核小球藻生长规律的影响.结果表明:铜绿微囊藻对温度和碱度变化的适应能力较强,其最适温度为35℃,且添加10mmol/L的碱度条件下生长较好;蛋白核小球藻对高温的耐受能力不如铜绿微囊藻,其最适温度为30℃,且低温时低碱度水平促进生长,随着温度的升高,需要同时提高水体的碱度才能保证蛋白核小球藻的旺盛繁殖,否则就会产生一定程度的抑制作用.     

行业废水对蛋白核小球藻的综合毒性效应

以蛋白核小球藻（ChloreUapyrenoidosa）为实验生物,对油漆企业、皮革加工企业和电子元器件与半导体加工企业废水进行毒性综合评价,以蛋白核小球藻的细胞密度、比生长率和相对抑制率为指标,对应分析了不同行业、不同浓度的废水对蛋白核小球藻生长影响。