野生通江百合高频率再生植株的研究

本文报道了用野生通江百合的种子萌发的无菌苗,切取叶片、叶柄、茎段基部小鳞茎为外植体进行组织培养研究.结果表明:种子在预处理去翅后,经75%(v/v)酒精浸泡杀菌30s,0.1%(v/v)氯化汞消毒5min,灭菌效果最好;愈伤组织诱导的最适培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA 1.0mg/L+蔗糖30g/L;培养基MS+6-BA2.5mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L诱导不定芽及增殖效果最好,平均繁殖倍数9.38,增殖率100.0%;培养基MS+IBA1.00mg/L+蔗糖30g/L最适合用于诱导通江百合不定芽生根,生根率可达93.3%;炼苗后移栽成活率95%以上.     

木门百合试管鳞茎培养体系的建立

以百合新品种木门(Conca D'or)的种球鳞片为外植体,进行百合试管鳞茎培养体系研究。结果表明:鳞片诱导的最适培养基为MS+0.5 mg·L~(-1)BA+0.1 mg·L~(-1)NAA+0.1 mg·L~(-1)2,4-D,其诱导率达到95%;膨大培养最适蔗糖浓度为50-70 g·L~(-1);采用分切膨大后的试管鳞茎的鳞片进行增殖培养,平均增殖倍数为7.2;移栽成活率达98%以上。     

百脉根植株高频再生体系的建立

以百脉根的下胚轴为外植体材料,探究不同激素种类和不同浓度对百脉根愈伤组织的诱导、分化增殖及生根的影响.结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基为:MS+2,4—D 2.0 mg/L+KT 2.0 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂;诱导愈伤组织分化最佳培养基为:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂;诱导不定芽生根的最佳生根培养基为:MS+NAA 0.01 mg/L+2%蔗糖+0.7%琼脂,生根率达100%;实验建立了一个高频的百脉根再生体系,为百脉根基因工程操作奠定了基础.     

欧洲矮化大花萱草组织培养的研究

以不同时期的花蕾为外植体,研究了影响丛生芽诱导、增殖、壮苗生根的主要因素.结果表明:处于原芽期的花蕾是诱导丛生芽的最佳时期;适合诱导丛芽的培养基是MS BA 0.1~2.0 mg/L 2.4-D 0.2~1.0 mg/L GA 0.5 mg/L LH 500 mg/L 3%蔗糖,适合丛生芽增殖成苗的培养基是MS 6-BA 1.0~1.5 mg/L 2.4-D 0.2~0.5 mg/L 3%蔗糖,适合壮苗生根的培养基是1/4MS IBA 0.1 mg/L 1%蔗糖.愈伤分化过程中的生理变化:可溶性糖与可溶性蛋白的含量有着相同的变化趋势,先增加再减少,然后再增加.叶绿素含量则呈上升趋势,这说明叶绿素的适量形成有利于分化.     

有斑百合叶片的组织培养

试验采用红色顶生花有斑百合为试材 ,取其叶片进行组织培养 .在MS +2 4 -D 1 0mg/L+6BA 0 5mg/L +蔗糖 30 g +琼脂粉 7g的培养基上进行培养 ,形成愈伤组织及鳞茎丛 .在MS +2 4 -D1 0mg/L +蔗糖 30 g +琼脂粉 7g的培养基上进行培养 ,仅形成了愈伤组织 .在MS +6BA 1 0mg/L +IAA 0 5mg/L +蔗糖 30g +琼脂粉 7g上进行培养 ,不经过愈伤组织 ,直接在外植体上形成了鳞茎丛 ,经过诱导生根 ,长成了幼苗 ,幼苗长至 5cm左右 ,栽到蛭石与沙土的混合基质中培养进一步长成了植株     

仙客来组织培养快繁技术研究

将仙客来的块茎、叶片、根尖、花梗外植体,在含有不同质量浓度植物激素的几种培养基中培养,根据培养结果,筛选出最佳诱导和增殖培养基的配方;同时,在经过消毒处理的不同成份的无土栽培基质中,进行试管苗的炼苗和壮苗培养,研究其健身栽培技术.结果表明,仙客来的离体繁植以其块茎为最佳,丛芽的增殖以MS+NAA0.1 mg/L+6-BA2.0mg/L+蔗糖30g/L为最佳,生根培养基以1/2MS+NAA0.3mg/L+蔗糖30g/L为最佳.泥炭∶蛭石∶珍珠岩(5∶3∶2)混合是仙客来试管苗最佳健身栽培基质,移栽成活率达98%.     

白三叶高频组织培养再生体系的研究

以白三叶的子叶节为外植体,对影响白三叶愈伤组织的诱导、丛生芽的分化及生根的激素种类和浓度进行了优化.结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基为:MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.4 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂,诱导率为62.67%;诱导从生芽分化的最佳培养基为:MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂,分化率为92.33%;诱导生根的最佳生根培养基为:MS+NAA 0.2 mg/L+1.5%蔗糖+0.8%琼脂,生根率达100%;建立了一个高频的白三叶再生体系,为白三叶基因工程奠定基础.     

食用百合组织培养及扩繁技术研究

以新鲜的兰州百合为材料,研究不同激素配比对诱导百合鳞片芽的产生及扩繁的影响,结果表明:培养基中NAA、IAA与6-BA同时使用,分化效果比单独使用NAA和IAA效果好,MS+IAA 0.05mg·L-1+6-BA0.1mg·L-1可作为鳞片多芽产生培养基,其诱导鳞片芽分化率最高,达100%,且芽长势良好.MS+NAA0.1mg·L-1+6-BA 0.25mg·L-1和MS+IAA0.25mg·L-1+6-BA 1.00mg·L-1作为芽继代扩繁的理想培养基,平均每个外植体增值率超过4.5.百合的组织培养的最适外植体是外层鳞片与鳞茎盘接连的下部鳞片.     

大理百合的离体快繁研究

以大理百合的鳞片为外植体进行离体培养,获得再生植株,并初步建立起快速繁殖体系．结果表明：大理百合鳞片适宜诱导芽和愈伤组织的培养基MS＋0．5mg／LBA＋0．1～0．5mg／LNAA＋3％蔗糖;增殖培养基为MS＋0．5mg／LBA＋0．05～0．1mg／LNAA＋4．5％蔗糖;生根结鳞茎培养基为1／4MS＋0．01mg／LNAA＋6％蔗糖＋10mg／LCCC．     

"马可"百合组培技术研究

以“马可”百合（Lilium bulbiferum cv．‘Marco Polo’）鳞片为起始外植体,MS为基本培养基,以不同激素成分及不同浓度水平来诱导“马可”百合产生小鳞茎。结果表明：“马可”百合的诱导可由外植体直接产生小鳞茎而分化成苗。诱导“马可”产生小鳞茎的最佳外植体为鳞茎内部的鳞片,将其作为不切开处理,并以鳞片远轴面紧贴培养基的方式进行接种,在MS＋6-BA（1．0mg／L）＋IBA（0．3mg／L）培养基上进行诱导培养,其平均分化系数达2．52。“马可”百合最佳扩繁增殖培养基为MS＋6-BA（0．3mg／L）＋IBA（0．3mg／L）,小鳞茎的增殖系数可达2．60。采用1／2MS＋6-BA（0．3mg／L）＋IBA（0．7mg／L）的培养基对“马可”进行生根培养,根条数可达8．0,生根率为100％。“马可”生根苗应用质量分数为50％多菌灵800倍液进行消毒处理,移植于河泥和珍珠岩的体积比为7．3的基质中,成活率可达98％。     

大岩桐叶柄诱导再生植株

用大岩桐叶柄作为外植体,分别对试管苗诱导、增殖和生根条件进行了初步研究。结果表明:适宜诱导培养基以MS+6-BA2 0mg·L-1+NAA0 2mg·L-1+3%蔗糖+0 7%琼脂最佳,35d其诱导率为1 324,增殖培养基以MS+6-BA2 0mg·L-1+NAA0 1mg·L-1+3%蔗糖+0 7%琼脂为最好,30d其增殖倍数可达5 3倍。生根培养基以1/2MS+NAA0 6mg·L-1+3%蔗糖+0 7%琼脂为最好,生根率可达89 7%。     

百合花发育相关基因LLGLO1的RNAi载体构建

百合花发育相关基因的研究是开展花卉分子育种的重要基础。以麝香百合(Lilium longi-florumThumb.)未开放的花蕾为材料提取总RNA。根据LLGLO1序列的同源比对选取特异区段,设计引物扩增区段cDNA并引入酶切位点。将PCR扩增片断连接到T载体上,经酶切及PCR验证后进行测序。测序结果表明:用于RNAi的cDNA片断与LLGLO1序列完全相同。通过中间载体pSK+intron引入一段内含子间隔区,RNA干扰片断经过多次的酶切和连接过程最终连入表达载体pCAMBIA1301中形成ihpRNA结构。PCR及双酶切鉴定结果显示,构建的RNA干扰载体的ihpRNA结构完整。     

食用百合卷丹离体培养再生体系的建立

选取食用百合卷丹的鳞片作为外植体,以MS为基本培养基,添加6-BA和NAA的不同植物激素组合,分组进行不定芽诱导、继代增殖和诱导生根培养。结果表明,鳞茎的中层鳞片具有较强的不定芽分化能力,6-BA 0.5mg/L＋NAA 0.1mg/L的激素组合适宜于鳞片的不定芽分化和继代增殖,而最利于诱导生根的激素组合为NAA 1.0mg/L＋6-BA 0.1mg/L。组培苗经过60天左右培养可在培养基中直接产生小鳞茎。     

百合远缘杂交及其杂种鉴别研究

百合种间远缘杂交的不亲和性和杂交后代鉴别,影响着百合杂交育种效率。以东方百合杂交品种‘康斯坦萨’(Lilium var.‘Constanta’)为母本,我国的特有野生百合岷江百合(Lilium re-gale Wilson)为父本,采用直接授粉法、切柱法、切柱加柱头液法3种方法在温室栽培条件下进行授粉实验;子房发育至20 d以后,采集不同处理的子房经过表面灭菌处理,横切为0.3 cm的子房薄片,接种于MS+6-BA(0.01 mg/L)+NAA(0.1 mg/L)的培养基上进行胚拯救培养;用SRAP分子标记对拯救获得的再生植株进行杂种鉴定。结果表明:3种不同授粉方法中,采用直接授粉法子房生长情况最好,切柱加柱头液法次之,切柱法最差。通过胚拯救培养获得一批杂种后代株系。分子检测结果显示,后代中7个株系均具有典型的父本及母本条带。因此可以认为,‘康斯坦萨’和岷江百合远缘杂交的障碍为受精后障碍,通过子房切片胚拯救培养获得的7个株系均为杂种。     

铁皮石斛原胚体液体悬浮培养条件

以铁皮石斛种子诱导的原胚体为材料,对液体悬浮培养条件下影响铁皮石斛原胚体增殖和多糖成份累积的因素进行了研究．结果表明,铁皮石斛原胚体在1／2MS＋1．0mg／LNAA,每20mL接种2g,蔗糖浓度3％或含10％香蕉提取物上清液的液体培养基中增殖最佳,可溶性多糖成分累积相对较高．     

古巴芦荟的组织培养

试验结果表明：古巴芦荟（ＡｌｏｅｖｅｒａＬ．）对蔗糖浓度适应范围较大（２％～５％），其中以３％的浓度最适宜．在侧芽诱导中以ＭＳ基本培养基较合适．激素对侧芽的诱导作用符合细胞分裂素／生长素的器官发生调节模式，其中以ＭＳ＋ＢＡ３—５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ对芽的诱导最有效，而ＫＣ＋ＩＢＡ２—３ｍｇ／Ｌ对根的诱导最佳，生根率达１００％．在生根培养阶段加入１－３ｍｇ／Ｌ的活性碳是必要的．试管苗移栽的最佳基质是河沙，成活率达９０．２％．     

麝香百合、仙客来、瓜叶菊花芽分化的调控

复合生长调节剂处理对麝香百合等花芽的分化有明显的作用。其中A1,A2可促进麝香百合花工芽的分化,A2效果较A1好,经A2处理后,百合开花率达100%,同时使植株的开花数增加了1倍,花径增长1倍;B1,B2明显促进仙客来花芽分化,B2效果较B1好,经B2处理后,处理仙客来较对照植株的花蕾数增加41%;C1,C2明显促进瓜叶菊花芽分化,其中C1处理的瓜 叶菊较对照植株的花蕾数增加52%。     

宜兴百合的组织培养和快速繁殖

以组织培养获得的宜兴百合小鳞茎为试验材料，研究了不同基本培养基、NAA与6-BA的配比、矮壮素（CCC）、2，4-D、活性炭、蔗糖及悬浮培养方法对小鳞茎增殖和膨大的影响．结果表明，最佳诱导培养基为MS培养基，有利于提高分化率的最佳配方为：MS＋0．15mg／LNAA＋2．0mg／L6-BA，小鳞茎膨大增重的最佳培养基为：MS＋0．15mg／LNAA＋2．0mg／L6-BA＋0.1mg／L CCC＋6—8％蔗糖，培养方式为液体振荡培养优于固体培养．     

食用药百合组织培养及其多倍体诱导研究

对食用药百合进行了组织培养和多倍体诱导研究。以百合的鳞片和正在生长的茎尖作为外植体,采用MS培养基作为基本培养基,设置不同浓度激素研究组织培养快繁的最佳方法;在离体培养条件下,初步比较了不同浓度的秋水仙素处理百合的诱变效果。结果表明：在温度25±2℃,光照15h/d,光照强度2000lx,培养基中加蔗糖30g/L、琼脂8g/L、pH5.8培养条件下,鳞片诱导的最适培养基为MS＋6-BA1.5mg/L＋NAA0.2mg/L,茎尖不定芽诱导的最适培养基为MS＋6-BA1.5mg/L＋NAA0.1mg/L,生根的最适培养基为1/2MS＋KT0.1mg/L＋NAA0.2mg/L;0.05%的秋水仙素处理12h诱变效果最佳,诱变率高达40%。     

水杨酸在观赏百合试管培养中对鳞茎形成的影响

本文探讨了水杨酸在观赏百合试管培养中对鳞茎形成的影响,研究结果表明：当SA在0.05-1.0mg/L的浓度范围内,能显著提高试管鳞茎的数量.在培养基中加入SA,对百合鳞茎的膨大无明显作用,但具有调节试管鳞茎同期发育的作用.