钙调素拮抗剂TFP对Hela细胞微丝及波形纤维蛋白分布的影响

利用钙调素拮抗剂三氟拉嗪（ＴＦＰ）及微管的不同聚合状态对Ｈｅｌａ细胞微丝及波形纤维蛋白分布的影响进行了研究。Ｈｅｌａ细胞微丝明显解聚，而波形纤维蛋白则密集分布在细胞核一侧。细胞经ＴＦＰ处理２ｄ后，可见微丝分布的恢复，而波形纤维蛋白分布则变得分散，并向质膜延伸。但对ＴＦＰ处理２ｄ后的细胞用低温（２～４℃）处理，使微管解聚，或以紫杉酚（ｔａｘｏｌ）处理２４ｈ，使微管高度聚集以破坏其微管网络系统时，微丝则随之发生明显的解聚现象，而波形纤维蛋白又恢复为密集分布于细胞核一侧的状态。若在低温处理前加ｔａｘｏｌ预处理１．５ｈ，以稳定微管时，此时在细胞周边仍可见微丝存在，波形纤维蛋白仍保持其分散分布状态。结果表明经ＴＦＰ处理的Ｈｅｌａ细胞微丝及波形纤维蛋白分布的变化可能与微管分布的改变具有一定的联系。     

热疗后Hela细胞微丝和形态改变关系的研究

目的:用Hela细胞作模型,研究热疗后肿瘤细胞的微丝变化与其形态学上改变的关系。方法:用不同温度(37℃、40℃、43℃和45℃)经不同时间(1h和2h)水浴处理培养的Hela细胞后,倒置显微镜下观察其形态变化,并用考马斯亮蓝R250显示其微丝。结果:37℃和40℃处理后Hela细胞形态和微丝分布均正常;43℃、2h处理后开始有一定程度的形态改变,微丝分布较散乱,变短;45℃处理后有明显形态变化,微丝大多完全解聚成球状,分布极为紊乱。结论:高温引起的Hela细胞微丝的解聚可导致细胞的形态改变,两者之间有着极为密切的联系。     

细胞转化过程中微丝解聚的研究

ＮＩＨ３Ｔ３细胞以劳氏肉瘤病毒（ＲＳＶ）经温度敏感突变株转染形成的细胞株ｔｓＬＡ９０，细胞在允许温度（４０℃）时为正常表型，在允许温度（３３℃）下为转化表型。４０℃时，微丝分布发达，从４０℃移至３３℃１ｈ，微丝完全解聚，同时，其外基质成分纤粘蛋白（ＦＮ）亦相伴解聚。若在４０℃以外源性ＦＮ或对蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）具有抑制作用的三氟拉嗪进行预处理后，再转入３３℃时便能抑制微丝的解聚。结果提示，除ＲＳＶ     

芒果多酚对宫颈癌Hela细胞的抑制作用及机制

用芒果多酚处理人宫颈癌细胞(Hela)后,采用MTT法检测细胞的存活率;Hoechst 33258荧光染色和流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期分布,同时用Western blot检测p53,p21,c-myc,cyclin D1蛋白质水平变化.结果显示：0.025,0.05, 0.1,0.2,0.4 mg/mL的芒果多酚溶液能明显抑制Hela细胞的增殖,并呈剂量和时间依赖性;荧光染色后,大多数细胞内可以看见浓密的荧光颗粒,并出现核收缩;流式细胞术分析发现,与未处理组比较,芒果多酚作用后的G1期Hela细胞数显著增多,G2期细胞数逐渐减少;凋亡率明显高于对照组;Western blot检测显示芒果多酚上调p53,p21蛋白水平,下调c-myc,cyclin D1蛋白水平. 以上结果表明芒果多酚能明显抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,诱导其凋亡.     

烟草表皮细胞薄层培养中第一次无丝分裂时的核及核外微丝骨…

通过Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８和ＴＲＩＴＣ－Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ对烟草茎表皮薄层２细胞的非固定染色观察，发现细胞无丝分裂过程中核及其外围微丝鞘发生了很大变化，染色质在分裂时形成卷曲拉裂状，此时核外微丝鞘完全消失，直至染色质分开后，两组以持同伸张状态回缩时，微丝才重新聚合排列，并最后形成两个子核的微丝鞘。     

包含微丝的细胞流固耦合模型及其力学响应

为研究微丝对细胞变形的影响,利用Abaqus建立包含微丝结构的细胞流固耦合模型:其中细胞膜、细胞核和微丝为固体,细胞质为液体。考虑对称性,以细胞模型的一半建立有限元计算模型,采用显式求解器进行模拟计算。仿真结果显示,在细胞压缩变形的情况下,细胞整体刚度随着压缩位移增加而增加,即表示在压缩相同的位移,所需要施加在细胞的荷载更大;对比无微丝的细胞,微丝的存在使细胞刚度大大增加,细胞抵抗外界荷载的能力得到增强;同时微丝排列方向会对细胞的抵抗能力造成一定的影响。     

活体烟草BY-2悬浮细胞微丝骨架的标记

微丝骨架是细胞骨架的重要成员,在细胞的多项生理活动中发挥着重要作用.本论文利用荧光标记鬼笔环肽技术和GFP融合蛋白技术,对活体烟草BY-2悬浮细胞中微丝骨架的标记方法进行了探索,结果表明,10nmol/L的Alexa488-Phalloidin为细胞微丝骨架标记的最佳浓度,利用PCR等技术构建pPZP-NtFABD2-GFP植物表达载体后,转化烟草BY-2悬浮细胞,激光共聚焦扫描显微镜观察发现,NtFABD2-GFP融合蛋白能够清晰地显示活体烟草悬浮细胞内的微丝骨架.这些结果为进一步深入研究微丝骨架在活体植物细胞中的功能奠定了基础.     

Hela细胞中突变PSF蛋白对细胞增殖迁移及可变剪接的影响

PSF作为真核细胞中的抑癌蛋白,在Hela细胞发生基因突变导致其蛋白功能改变.为了阐明突变体PSF蛋白在肿瘤细胞的作用,本文分别采用siRNA干扰、细胞生长曲线、细胞划痕等实验检测muPSF对Hela细胞增殖及迁移的影响,半定量PCR实验分析PSF调控的下游靶基因的可变剪切情况.研究结果显示,当通过siRNA干扰muPSF的表达后Hela细胞的增殖迁移能力下降,高表达突变体PSF可增强Hela细胞的增殖与迁移,半定量PCR实验分析PSF下游调控基因显示muPSF可以改变增殖和迁移相关基因的可变剪接形式.因此,我们的实验证明,Hela细胞中muPSF通过调控下游靶基因的可变剪切影响Hela细胞的增殖和迁移能力.     

烟草表皮细胞薄层培养中第一次无丝分裂时的核及核外微丝骨架变化的观察

通过Hoechst33258和TRITC－Phalloidin对烟草茎表皮薄层培养细胞的非固定染色观察，发现细胞无丝分裂过程中核及其外围微丝鞘发生了很大变化．染色质在分裂时形成卷曲拉裂状，此时核外微丝鞘完全消失．直至染色质分开后，两组染色质由伸张状态回缩时，微丝鞘才重新聚合排列，并最后形成两个子核的微丝鞘．     

Ce4＋对玉米根尖细胞微核及有丝分裂的影响

用不同梯度质量浓度的硫酸高铈对玉米根尖细胞进行染毒处理，结果表明，当Ce4 质量浓度≥10mg／L时，玉米根尖细胞的微核率上升显，当Ce4 质量浓度达到1000mg／L时，玉米根尖细胞的有丝分裂指数具有显性下降．提示一定质量浓度的铈化合物对玉米根尖细胞具有一定的遗传毒性和细胞毒性．     

除草剂“草甘膦”对蟾蜍外周血红细胞微核及核异常的影响

本文研究了低毒除草剂“草甘膦”对蟾蜍外周血红细胞微核及核异常的影响，分别统计了微核细胞率；微核率；异常率和核异常率，研究结果表明，用草甘膦处理3天和5天后，不同浓度的药物对蟾蜍的红细胞微核率和核异常率均有一定程度的影响；但用不同黉度药物处理后红细胞的微核率和核异常率虽有差异，却没有出现显著的剂量效应。     

除草剂"草甘膦"对鲫鱼外周血红细胞微核及核异常的影响

利用“草甘膦”染毒鲫鱼,以外周血红细胞的微核率和核异常率为指标,研究了“草甘膦”对鲫鱼的毒性。结果显示：“草甘膦”对鲫鱼具有一定的毒性;但不具有剂量效应;与染毒时间的长短也无明显相关性。