猪心细胞色素C对固氮酶的作用

在我们早期的工作中,发现棕色固氮菌无细胞抽提物经过柱分离,得到单独没有固氮活性的钼铁蛋白部分,如果加入适当量的猪心细胞色素C时,就能表现出还原分子氮和乙炔的活性。后来的工作表明,当镏铁蛋白组分纯度提高以后,细胞色素C的作用不但没有提高,反而下降了。因此,我们对细胞色素C的作用做了进一步的分析研究。     

固氮酶钼铁蛋白活性辅基模拟物与缺辅基钼铁蛋白组合

随着固氮酶钼铁蛋白及其活性辅基(FeMo-CO)的研究逐渐深入,活性辅基结构的设计及模拟物的合成研究引起了国内外化学家的重视。活性辅基模拟物与缺辅基钼铁蛋白的生物组合规律研究对模拟物的定向合成、酶的半合成及固氮酶的催化机理等研究都有着重要意义。这方面研究已有一些报导,但系统研究不多。     

AOT／异辛烷萃取猪心细胞色素C的方法研究初探

用５０ｍｍｏｌ／ＬＡＯＴ反胶团系统在添加０．１ｍｏｌ／ＬＫＣｌ，ｐＨ７．５条件下萃取了猪心糜粗提液（Ⅰ）、ｐＨ７．５沉淀杂质蛋白后的提取液的滤液（Ⅱ）、硫酸铵（５００ｇ／Ｌ）盐析除杂蛋白的清液透析液（Ⅲ）、硫酸矮（５０ｇ／Ｌ）除杂蛋白的滤液并透析除盐的溶液（Ⅳ）、细胞色素Ｃ的三氯乙酸的沉淀物的饱和硫酸铵溶液透析除盐细胞色素Ｃ溶液（Ⅴ）中的细胞色素Ｃ。用１ｍｏｌ／ＬＫＣｌ、ｐＨ１３．０的水溶液对萃取有机相中的细胞色素Ｃ进行反萃取获得细胞色素Ｃ溶液。结果显示，ＡＯＴ反胶团系统能够将细胞色素Ｃ从猪心提取液中萃取到有机相中，并经调节离子强度和ｐＨ值又能将细胞色素Ｃ从有机相中反萃取到水溶液中。其萃取效率（％）分别为８６．９、７８．１、６３．１、４３．１和６。     

不同浓度AOT对猪心提取液中细胞色素C的萃取研究

用浓度（ｍｍｏｌ／Ｌ）１０、２５、５０、１００、１５０的ＡＯＴ（气溶胶ＯＴ）组成的反胶团对猪心肉糜提取液中的细胞色素Ｃ进行了萃取。结果为１０ｍｍｏｌ／Ｌ组几乎没有萃取效果，在２５～１５０ｍｍｏｌ／Ｌ浓度下的反胶团均有明显的萃取效果，萃取率（反萃取水相中的含量与原液中的含量的比值）还原型细胞色素Ｃ为２５％～３２％，氧化型细胞色素Ｃ为２８％～４２％．     

阳离子对猪心细胞色素C的反胶团萃取的影响

在猪心提取液中添加阳离子的情况下，观察了ＡＯＴ／异辛烷反胶团对蛋白质和细胞色素Ｃ的萃取效果。结果表明：萃取分相以添加Ｍｇ（２＋）最好，其次分别为Ｎａ＋．Ｋ＋、Ｃａ（２＋）。在添加Ｍｇ（２＋）、Ｎａ＋，Ｃａ（２＋），Ｋ＋离子后，对蛋白质的萃取率分别为：５０．４％、３１．５％、２９．２％、２７．８％。在添加Ｍｇ（２＋），Ｎａ＋Ｋ＋离子时，对细胞色素的萃取率（以反萃取率表示）分别为４０．６％、３７．４％、＋３０．４％。     

镁离子浓度对猪心细胞色素C的反胶团萃取的影响

用ＡＯＴ／异辛烷反胶团系统萃取了添加不同浓度镁离子的猪心提取液中的细胞包素Ｃ．其结果为：添加０．０２５ｍｏｌ／ＬＭｇ２＋的萃取率Ｅ．Ｒ，（ＥｘｔｒａｃｔＲａｔｉｏ）为９６．５％（氧化型和还原型平均值）．添加０．３ｍｏｌ／ＬＭｇ２＋的萃取率为２８．３％。萃取后水相的吸收光谱中，还原型细胞色素Ｃ在５２０ｎｍ、５５０ｎｍ的吸收峰值消失。１２０ｎｍ的吸收峰值显著降低。萃取有机相的吸收光谱中，还原型细胞包素Ｃ在４２０ｎｍ、５２０ｎｍ和５５０ｎｍ处的特征吸收峰值显著。经反萃取后水相的吸收光谱与提取液以及萃取有机相的吸收光谱相同。说明添ＷＭｇ２＋后，经ＡＯＴ／异辛烷萃取和反萃取过程能将细胞包素Ｃ从猪心提取液中萃取分离出来。     

固氮酶铁钼辅因子模型化合物合成的研究——Ⅰ、光谱法研究合成方法的设计方案

本文讨论了以K_2MoS_4,FeCl_2,KOR(R=-CH_2CH_2OH或-CH_3)为基本原料,合成固氮酶铁钼辅因子(FeMo-co)模型物合成方案的设计依据。系统地考察这种体系的电子吸收光谱和激光拉曼光谱特征及其随时间的变化。实验结果支持了所提出合成方案的设计依据。     

细胞色素C的快速测定研究

用756分光光度计扫描测定细胞色素C，发现在315nm、415nm、520nm和550nm波长处有特征吸收峰；以细胞色素C的不同浓度分别对该四种波长下的光密度值回归，方程均为^↑y=a bx,a、b值各不相同；线性相关系数分别为r315=0.9915、r415=0.9835、r550=0.9977；从扫描波谱图形和线性相关系数比较，均以415nm波长效果最好，该法操作简便、快速、用药量小。     

细胞色素C的分子静电势研究

本文利用自制的计算机程序,计算了金枪鱼亚铁细胞色素C的分子静电势,并据此讨论了细胞色素C的结构和性能,得出了一些有意义的结果.     

细胞色素C在汞表面生长性质的AFM研究——吸附自组装机理

利用原子力显微镜对细胞色素C在汞表面生长过程进行研究,发现细胞色素C在汞表面首先形成的是高度稍大于1nm的吸附单分子层,随着生长时间的增加,吸附在汞表面的细胞色素C分子和溶液中的分子问相互作用,自组装形成生长活性点,生长速度明显加快,生长时间达到8min时,细胞色素C能形成底部直径达527nm,高度达138nm,分布密度约为1．2～2．3个/μm^2的细胞色素C分子集聚体．生长机理是吸附自组装机理．细胞色素C的浓度较大地影响其在Hg表面的自组装平衡,随着浓度的减少,细胞色素C所能形成的最大分子集聚体的高度和数目都随之减少。浓度与平均表现高度是非线性的关系．     

新生兒色素斑的研究——Ⅰ.形態部分

一、引言:色素斑常見於骶和臀部,但偶然也有在背部和胸腹部,上下肢和頭頸部的,多數嬰兒祇有一塊,也有些多至十餘塊的。它的大小,有時小如菉豆,有時大如圓盤,形狀多為圓形,椭圓形,也有些是雜形和不規則形的。斑的邊緣多數清楚,也有很少數是??色澤由淡灰色到暗青色或暗黑色@種斑據Grimm,Schohl与Bahrawy等研究,在胚胎四個或五個月時,斑的色素細胞就開始出     

细胞色素P450与农药相互作用及其机理研究

综述了细胞色素P450的种类和功能多样性,介绍了细胞色素P450参与除草剂代谢及其作用机理．同时,简述了细胞色素P450 14DM与杀菌剂特异性作用的机制．报道了我们从抗除草剂的瑞士黑麦草中克隆CYP8181同源基因及其功能的研究,以及柑橘绿霉菌细胞色素P450 14DM基因的克隆表达．为深入研究杀菌剂作用细胞色素P450 14DM的机理从而设计以P450 14DM为特异性靶标的新型农药、以及进一步研究细胞色素P450酶系与除草剂代谢的关系打下了良好的基础．     

血吸虫细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因的克隆与近缘种属关系分析

从生物化学的角度比较血吸虫不同虫株的遗传进化差异.以日本血吸虫湖北株成虫基因组总DNA为模板,设计特异性引物扩增获取血吸虫线粒体细胞色素C氧化酶基因片段,转化大肠杆菌DH5a,筛选阳性克隆,测序,对克隆得到的coI基因作进化分析.结果表明:无论是在核苷酸序列还是在氨基酸序列上,日本血吸虫湖北株与其近地域株(云南、江苏、湖南)均具有较高的同源性,col摹因的相似性分别为98%、98%和97%,但与不同种属血吸虫(曼氏、湄公、埃及、马来)的一致性则较低,分别为76%、84%、76%、85%,由此证实日本血吸虫湖北株与其它近地域株具有较近的亲缘关系.     

日本血吸虫线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（COⅠ）基因的克隆与初步分析

目的:了解日本血吸虫湖北株细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(mt coⅠ)基因的生物学特性.方法:以日本血吸虫湖北株成虫基因组总DNA为模板,设计特异性引物应用降落PCR扩增、纯化基因片段后连接、转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆、测序并与NCBI数据库中的核酸序列进行同源性比对分析,利用蛋白质分析软件分析该序列编码蛋白的相关生物学特性.结果:克隆序列的结果表明coⅠ基因全长1 581 bp,编码526个氨基酸;编码蛋白的等电点为6.28,相对分子量为59 KDα,具有一个细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ的核心保守结构域.结论:日本血吸虫湖北株coⅠ基因与其他地理株具有较高的同源性.     

K_2PtCl_4与细胞色素C修饰体系研究

马心细胞色素C(以下简写为Cyt·C)与K_2PtCl_4的反应混合物在Sephadex G-75上分出4个组分,对应于Cyt·C寡聚体、三聚体、二聚体及单体,此结果与SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(以下简写为SDS-PAGE)测定的各组分的分子量相一致,这揭示了K_2PtCl_4与Cyt·C存在多位点修饰,而非如Kostic报道的Met-65为其唯一修饰位点,此结论通过分析K_2PtCl_4与His-33羧甲基化的Cyt·C修饰反应产物所证实,同时也和同样条件下游离His,Met与K_2PtCl_4的配位作用相吻合,对Cyt·C二聚体衍生物的还原电位、紫外-可见光谱以及二阶导数傅利叶变换红外光谱研究表明,血红素周围的电子环境仍然保持完整,但其二级结构有较大的扰动.     

组合函数的相等实现——Ⅰ.卡诺图法

本文给出求解组合函数相等实现的一种卡诺图分解简化法,该方法能准确快速地得到函数的最小化或接近最小化的相等实现。