HIV抗体蛋白印迹试验对无偿献血者的确认和不足

分析无偿献血者中HIV抗体初筛阳性与蛋白印迹试验(WB)确认结果的关系,评估WB确认方法在HIV抗体检测过程中的必要性和可行性,以及实验中存在的一些问题.对326 568份无偿献血者标本进行HIV抗体初、复检,初筛阳性的标本为全部样本,再用现在市场上较认可的ELISA试剂和WB试验同时进行检测,比较两种方法检测结果之间的关系.ELISA与WB结果一致性71.17%,阳性符合率为48.78%,阴性符合率为83.13%;以确认结果为金标准,得出ELISA检测HIV抗体试剂的敏感性为100%,特异性为84.15%.WB阳性组与阴性组比较,t=15.21,P＜0.00l,显示阳性和阴性组问S/CO值存在显著差异;WB阳性组与不确定组比较,t=13.07,P＜0.001,显示阳性和不确定组间S/CO值存在显著差异;不确定组与ELISA假阳性(WB确认阴性而ELISA阳性)比较,t=2.13,P＞0.05,无统计学差异,提示WB不确定结果可能是假阳性;20份确认阳性的标本的S/CO值全部大干5,确认阴性与不确定的91份标本中,S/CO低于1的占71份,在1～2.999之间19份;6个月后随访WB不确定的供血者,带型无变化,全部被诊断为阴性.较高的S/CO值(＞5)预示HIV抗体阳性的可能性大;而低于2.999时,预示阳性可能性小;WB方法确认HIV抗体阳性和阴性准确,不足之处为存在不确定结果,给工作带来许多不便.     

ELISA在梅毒检测中的价值

对ELISA在梅毒检测中的价值作了评价，比较了TRUST和ELISA两种方法用ELISA法检测TRUST阳性标本83份，TRUST阴性标本1536份，结果出现梅毒-ELISA和TRUST不一致结果13份，用TPPA进行确认．13份确认结果显示，梅毒-ELISA与TPPA的符合率为83．3％，TRUST与TPPA的符合率为8．3％．梅毒-ELISA的敏感性、特异性分别为100％、99．9％，TRUST的敏感性、特异性分别为89．9％、99．8％．梅毒-ELISA的敏感性、特异性都优于TRUST，与TPPA的符合率高，是用于梅毒检测和筛查的一种良好方法．     

不同检测方法对痰液标本中结核杆菌检测结果的影响

探究不同检测方法对痰液标本中结核杆菌检测结果的影响。选择庄浪县人民医院进行肺结核检查的患者235例作为本次研究对象,所有患者均进行X线检查和结核菌素联合检查,并结合临床特征进行确诊,以此作为诊断金标准,于入院后次日清晨采取患者痰液标本,均采用涂片检查法和PCR法进行结核杆菌检测。分析两种方法检测结果。结果:全部235例患者中,联合检查(金标准)结果显示阳性178例,阴性57例,涂片检查显示阳性126例,阴性109例,PCR检查显示阳性152例,阴性83例,阳性预测值均为100.00%(126/126)、(152/152),阴性预测值分别为52.29%(57/109)和68.67%(57/83),PCR检查阴性预测值明显高于涂片检查阴性预测值,差异具有统计学意义(P0.05);涂片检查和PCR检查灵敏度分别为70.79%(126/178)和85.39%(152/178),PCR检查灵敏度明显高于涂片检查灵敏度,差异具有统计学意义(P0.05);涂片检查、PCR检查特异性均为100.00%(57/57)。涂片检查和PCR检查均能较好地检查出痰液标本中结核杆菌,其中PCR检查阴性检出率更高,灵敏度强,操作简单,检测时间短,可作为临床检查首选。     

上皮内瘤样病变高危型人乳头状瘤病毒DNA检测研究

目的分析子宫颈癌前病变高危型人乳头状瘤病毒（HPV）DNA检查结果.方法应用第二代杂交捕获试验（HC-2）检测高危型HPVDNA联合细胞学检查,同时进行阴道镜检查,以宫颈活检组织病理为确诊.结果高危型HPVDAN检测CINⅡ、Ⅲ的敏感度92.43%,阳性预测值5.18%,阴性预测值99.87%.宫颈细胞学检查不典型鳞状上皮细胞（ASCUS）敏感度、阳性预测值及阴性预测值,分别为90.02%、11.59%、99.68%;低度鳞状上皮内病变（LSIL）敏感度、阳性预测值、阴性预测值分别是70.21%、11.16%和99.59%;高度鳞状上皮内病变（HSIL）敏感度、阳性预测值、阴性预测值分别为49.01%、31.82%和99.29%.高危型HPVDNA检测联合细胞学检查CINⅡ、Ⅲ的敏感度、阳性预测值、阴性预测值分别是98.89%、5.27%和100%.结论高危型HPVDNA检测在宫颈癌前病变中有很高的敏感度,高危型HPVDNA检测联合细胞学检查,具有较强的敏感度及阴性预测值.     

老年人群感染梅毒螺旋体血清学检测结果的研究

探讨老年人梅毒螺旋体3种血清学检测效果。选取2015年1月1日到2015年12月31日医院收治60岁以上住院患者行梅毒检测后的110例梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)阳性患者为研究对象,对患者进行甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)试验。比较3种检测方法的检测结果。110例TP-ELISA阳性患者经TRUST检测,57例为阳性,阳性率为51.8%。经TPPA检测,107例患者均为阳性,阳性率为97.3%。TPPA检测阳性率明显高于TRUST检测,x2=59.887,P0.05。TP-ELISA与TRUST联合筛查,减少部分患者的漏诊或误诊,TPPA作确证试验,结果更为可靠。联合应用TP-ELISA、TRUST、TPPA三种方法可以提高检测的特异性和灵敏度。     

ROC曲线评价酶免法检测消化病患者幽门螺杆菌

摘要 目的 探讨消化疾病患者粪便幽门螺杆菌特异性抗原（Hp Stool antigen ,HpSA）在诊断Hp感染中的临床意义。方法 随机收集353例北京军区总医院消化内科住院和门诊患者,其中男性206例,女性147例,年龄范围14 - 89岁,平均年龄49.0? 15.73岁。入组者均空腹6小时以上,留取新鲜粪便标本,应用酶免疫法（EIA）检测HpSA,同时以13C-尿素呼气试验（13C-UBT）作为金标准。应用SPSS15.0软件对数据进行统计学分析,并绘制受试者操作特征分析曲线（Receiver Operating Characteristic curve, ROC curve）,评价HpSA试验的诊断价值。 结果 X 2 检验表明EIA法检测Hp感染与13C-UBT比较差异无显著性（p >0.05）; EIA法检测HpSA敏感度94.35%,特异度98.30%,阳性预测值98.24%,阴性预测值94.54%,阳性似然比55.5,阴性似然比0.06,符合率96.32%,Youden指数0.93,Kappa值0.93;EIA法检测HpSA的ROC曲线下面积为0.944,与完全无诊断价值的机会线下面积0.50相比差异显著（p<0.001）。结论 HpSA是一种非侵入性诊断Hp感染的方法,准确性和可靠性均较高,值得推广应用。     

心肌肌钙蛋白I胶体金免疫层析快速检测法的建立

为建立一种快速、简单实用的检测心肌肌钙蛋白I的胶体金免疫层析法(GICA),用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,用鼠源抗cTnI单克隆抗体进行胶体金标记,采用胶体金免疫层析技术及双抗体夹心法原理检测心肌肌钙蛋白I,并对该方法进行敏感性、特异性和稳定性分析.结果:该方法能在10 min内完成检测;该试纸条仅与心肌肌钙蛋白I阳性样品发生特异性反应;检测心肌肌钙蛋白I的最低检出质量浓度为1.0 ng/mL;与化学发光免疫分析法(CLIA)对比检测63份临床标本,阳性符合率97.0%,阴性符合率100%,总符合率98%,试纸条性能稳定.     

不同检验方法对细菌性阴道炎的诊断价值分析

分析不同检验方法对细菌性阴道炎的诊断价值。将2015年2月~2016年10月期间医院收治的拟诊为细菌性阴道炎的患者63例作为研究对象,所有患者均采用p H值检测法、BV快速检测法进行诊断。以涂片镜检确诊结果作为金标准,比较p H值检测法和BV快速检测法两种方法诊断正确率、诊断阳性预测值和阴性预测值,以及两种方法敏感度和特异性。63例患者中涂片镜检结果显示阳性53例,阴性10例,BV快速检测显示阳性52例,阴性11例,p H值检测显示阳性43例,阴性20例。BV快速检测法阳性预测值、阴性预测值、敏感度、特异性等各项结果均明显高于p H值检测法,差异具有统计学意义(P0.05)。BV快速检测法明显优于p H值检测法,能快速、准确对细菌性阴道炎进行诊断,值得临床应用。     

化学发光免疫分析法在梅毒螺旋体抗体检测中的应用探究

探究化学发光免疫分析法（CLIA）在梅毒螺旋体抗体（TP-Ab）检测中的应用效果。选择2019年2月—2021年5月来医院进行TP-Ab检测的258例患者，采集其血清标本，均采用CLIA、酶联法（ELISA）、甲苯胺红不加热血清反应素试验（TRUST）对血清TP-Ab进行检测。以明胶颗粒凝集试验（TPPA）为金标准，对三种检测方法的检验效能予以比较。CLIA对TP-Ab检测的灵敏度、特异度、准确度分别为100.00%、99.43%、99.61%,ELISA分别为93.98%、98.29%、96.90%,TRUST分别为83.13%、86.86%、85.66%。CLIA、ELISA检测的灵敏度、特异度、准确度均明显较TRUST高（P均<0.05）,CLIA灵敏度、准确度明显较ELISA高（P均<0.05）;CLIA、ELISA和TPPA检测结果的一致性良好（Kappa=0.991、0.928）,TRUST和TPPA检测结果的一致性中等（Kappa=0.681）。和ELISA、TRUST相比，CLIA检测TP-Ab的效能更高，且由于具有自动化、检测速度快等特点，故在TP-Ab检...     

门诊血液透析患者丙型肝炎病毒抗体假阳性情况调查与分析

目的:调查门诊血液透析患者丙型肝炎病毒抗体假阳性的发生率和发生原因,以便正确处理抗体检测报告和医患沟通困扰。方法:对中国人民解放军南部战区总医院2019年12月至2022年12月279名门诊血液透析患者的丙型肝炎病毒抗体和丙型肝炎病毒RNA检测结果进行整群抽样、横断面调查和回顾性研究。结果:调查发现共有81人丙型肝炎病毒抗体假阳性,占29.03%;其中S/CO值介于1.0～5.0的占98.77%,介于5.0～10.0的占比为1.23%。全部病例经HCV-RNA复核3次,均为阴性。检验科与输血医学科采取不同的检测方法与报告程序,结果有显著性差异(P<0.01)。结论:丙型肝炎病毒抗体S/CO值处于灰区范围时多为假阳性,且与抗体检测策略和报告程序有关。     

化学发光微粒子免疫检测法和实时荧光RT-PCR法检测甲型肝炎病毒的比较分析

目的:比较化学发光微粒子免疫检测法(CMIA)和实时荧光RT-PCR法对218份人血清中甲型肝炎病毒的检测结果.方法:选取2016年8月~2016年11月辽宁省丹东市传染病医院住院患者的血清样本218份,采用CMIA法和实时荧光RT-PCR法检测甲型肝炎病毒,同时对采用实时荧光RT-PCR法的ISO/TS15216-2、FDA-BAM、GB/T 22287-2008三个标准检测甲型肝炎病毒的引物和探针组合进行了比较分析.结果:化学发光微粒子免疫检测法的阳性检出例数为3例,其S/CO值分别为2.22、4.15、1.31.ISO/TS 15216-2、FDA-BAM、GB/T 22287-2008三种实时荧光RT-PCR法的阳性检出例数分别为7例、5例和4例.而CM IA法和实时荧光RT-PCR法有2个阳性样本的检测结果一致,测序的BLAST比对结果表明CM IA法1个阳性样本为假阳性结果,5个CMIA法阴性样本为假阴性结果.结论:ISO方法的实时荧光RT-PCR法用于人血清中甲型肝炎病毒的检测,准确度及灵敏度最佳.     

胶体金免疫层析技术同步检测甲、戊型肝炎病毒lgM抗体的研究

目的建立胶体金免疫层析(GICA)同步检测血清中的甲、戊型肝炎病毒的IgM抗体的方法.方法采用胶体金标记鼠抗人IgM单克隆抗体,制成免疫层析测试条.血清中甲、戊型肝炎的特异性抗体与测试条上金标抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动与膜上固相包被的抗原(HAag,HEAg)、抗体(羊抗鼠IgM)结合形成肉眼可见的红色线条.结果自制的GICA测试条与EIA对比检测血清标本188份,各单项指标抗-HAVIgM,抗-HEVIgM两法总符合率依次为97.9%,98.4%,检测灵敏度可达2μg/L.结论用于同步检测血清中的甲、戊型肝炎病毒特异性抗体的GICA测试条的制备条件已基本建立,其检测结果特异性强、灵敏度高、操作方法简便快捷且无需特殊仪器设备.     

用RT-PCR方法检测血液及尿液中肾综合征出血热病毒

目的应用逆转录聚合酶链反应方法(RT-PCR)对临床诊断或拟诊为肾综合征出血热(HFRS)的患者的血液及尿液标本进行检测.方法对临床拟诊断或拟诊HFRS患者198名(Ⅰ型为147例,Ⅱ型为51例)的血清、尿液标本进行RT-PCR方法抗体检测,并设置对照血清.结果紫外灯下,165例在237 bp处出现橙黄色带,阳性率为83.3%,对尿液进行检测,其结果均为阳性.标准病毒株、阳性对照血清为阳性.阴性对照、健康人血清、尿液标本均为阴性;免疫荧光抗体检测,血清抗体阳性173例,阳性率为87.2%.尿液阳性仅为116例,阳性率为58.4%.结论用RT-PCR方法检测HFRSV具有灵敏度高、特异性好、快速等优点,方法简便,适于临床应用.     

响应面法优化水葫芦生物炭吸附尼泊金乙酯工艺研究

以水葫芦为原材料,柠檬酸改性制备生物炭对尼泊金乙酯(EP)的吸附。通过Box-Behnken Design实验,使用吸附剂添加量、pH值、EP初始浓度和反应时间这四个变量对尼泊金乙酯去除率的影响进行模拟优化。实验结果表明：水葫芦生物炭（WB）与柠檬酸改性水葫芦生物炭（CA-WB）在各单因素实验中对EP溶液去除影响的大小顺序为：吸附剂添加量＞EP浓度＞pH＞反应时间。WB吸附EP的最佳反应条件为：pH为1.12、反应时间为3.28 h、EP初始浓度为18.4 g/L和WB添加量为3.86 g/L,此时WB对EP的去除率为81.04％,实际条件下验证EP去除率为85.12%,与预测值误差为4.79%;CA-WB吸附EP的最佳反应条件为：pH为2.8、反应时间为3.23 h、EP初始浓度为14.7 mg/L和CA-WB添加量为3.73 g/L,此时CA-WB对EP的去除率为96.00％,实际条件下验证EP去除率为93.24%,与预测值误差为2.96%。     

重组SARS冠状病毒S蛋白的原核表达研究

目的克隆表达SARS冠状病毒的主要结构蛋白(S蛋白)。方法合成SARS冠状病毒S蛋白特异性基因片断并克隆入pET32a原核表达载体,转化BL21菌,经IPTG诱导高效表达得到重组S蛋白,并通过W estern印迹对重组蛋白质进行鉴定。结果重组蛋白质经镍柱亲和层析得到了部分纯化,免疫动物后得到SARS病毒的多克隆抗体。结论经E lisa检测,表达的重组S蛋白基本具备检测病人血清中抗SARS病毒IgG和IgM的能力,可进一步用于S蛋白功能研究与SARS诊断试剂盒的研制。     

犬腺病毒2型抗原的制备及间接ELISA的建立

用MDCK细胞增殖犬腺病毒2型弱毒疫苗株,病毒培养上清液经差速离心和酒石酸钾密度梯度离心浓缩、纯化后作为诊断抗原,建立了犬腺病毒2型抗体检测的间接ELISA。确定最佳抗原包被量为0.168μg/孔,待检血清最佳稀释倍数为1:100,作用时间为60 min,羊抗犬酶标抗体稀释倍数为1:2000,作用时间为60 min,底物作用时间为37℃,10 min。判定标准为S/P值≥0.351者判为阳性,S/P值≤0.318者判为阴性。该抗原不与犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬波特氏杆菌等3种犬常见传染病的阳性血清反应,具有良好的特异性;批内、批间重复试验,变异系数小于15%,显示具有较好的重复性;检测血清样品56份,与病毒中和试验结果比对的符合率为93.75%。本研究结果为实现犬腺病毒感染监测,进行犬腺病毒流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法。     

血清结核分枝杆菌IgG抗体检测在肺结核诊断中的作用分析

探究血清结核分枝杆菌IgG抗体检测在肺结核诊断中的作用。选取2017年3月—2019年10月甘肃省高台县人民医院收治的肺结核患者137例作为肺结核组,另选取103例其他肺部疾病患者作为对照组,分析血清结核分枝杆菌IgG抗体检测在肺结核诊断中的价值。肺结核组结核杆菌抗原检测阳性率74.45%高于对照组32.04%,差异有统计学意义（P<0.05）;肺结核组中IgG+38kD+LAM联合检测阳性率最高为62.75%,高于对照组的21.21%(P<0.05);血清结核抗体IgG+38kD+LAM联合检测对肺结核的诊断灵敏度为73.56%(64/87),特异度为73.33%(11/15),阳性预测值为94.11%(64/68),阴性预测值为32.35%(11/34)。血清结核分枝杆菌IgG抗体检测可用于肺结核辅助诊断,联合38kD+LAM可显著提高肺结核诊断阳性率。     

抗Sa抗体和RF对RA诊断的比较研究

目的：比较抗Sa抗体和FR对RA诊断的效果。方法：用Wextenn－blot方法检测抗Sa抗体,用胶乳凝集法检测RF。结果：抗Sa抗体对RA诊断的敏感度为42．7％,特异度为100％,阳性确诊率为100％,阴性确诊率为71．1％。RF对RA的诊断敏感度为72O％,特异度为79．2％,阳性确诊率为71．2％,阴性确诊率为80.0％。结论：两种方法比较表明,抗Sa抗体诊断RA的特异性和阳性确诊率均优于RF.     

ST段改变在冠心病诊断中临床意义的评价

目的：评估心电图ST段改变在冠心病诊断中的意义。方法：以冠状动脉造影为金标准,与心电图ST段改变作比较,计算心电图的灵敏度和特异度等指标。结果：灵敏度53.85%;特异度84.21%;符合率61.97%;阳性预测值90.32%;阴性预测值40.00%。结论：心电图ST段改变在冠心病诊断中灵敏度太低,特异度尚可。     

重组人心肌肌钙蛋白Ⅰ基因工程菌的构建与表达

人心肌肌钙蛋白Ⅰ(hcTnI)是临床检测心肌损伤及预后提供诊断的生物学指标,由于来源有限,采用基因重组技术,以期获得高表达量的人心肌肌钙蛋白Ⅰ.人工合成hcTnI基因,将其插入pET-11a载体中,通过酶切鉴定正确后转入表达宿主菌BL21(DE3)中,诱导表达目的蛋白.采用蛋白免疫印迹反应(Western Blot,WB)鉴定表达目的蛋白的免疫特异性.经SDS-PAGE证实重组蛋白的相对分子质量约为2.6×104,凝胶密度扫描软件检测到目的蛋白占总蛋白比例为30.1%,WB实验验证诱导后目的蛋白特异性良好.成功构建了重组hcTnI基因在大肠杆菌表达的工程菌株,并获得表达,为制备高特异性的抗体及临床检测应用和测定标准化奠定了基础.