海洋病原细菌Enterobacter sp. EM28-2共存氯霉素乙酰化和磷酸化灭活机制

报道1例氯霉素耐药性病原菌中共存乙酰化和磷酸化灭活机制。海洋病原菌Enterobactersp.EM28-2(Cmr,M IC=128μg/mL)接种在含25μg/mL标准品D-(-)-氯霉素LB培养基中培养24h后,可同时生成乙酰化和磷酸化氯霉素。LC-MS分析检测出新生成3类指纹峰:①[M C2H2O-H]-(m/z 363.0,364.9),对应氯霉素C1位羟基的乙酰化产物;②[M PO3-H]-(m/z 398.9,400.9,402.9),对应氯霉素C3位羟基的磷酸化产物;③[M C4H4O2-H]-(m/z 408.7,410.7),对应氯霉素C1位和C3位羟基的乙酰化产物。     

双元载体提供组蛋白H3/H4拷贝1的elp3Δ菌株的构建

人Elongator是在转录中有功能的组蛋白乙酰转移酶(HAT)复合物,为研究其催化亚基Elp3功能,构建了酵母组蛋白H3/H4拷贝1的双元表达载体pRS316CFT,通过PCR介导的基因敲除,获酵母基因组H3/H4缺失由双元载体提供单拷贝H3/H4的elp3Δ菌株.敏感性实验表明该载体提供H3/H4可维持酵母正常生长.本工作为构建H3/H4乙酰化位点突变菌株,用功能互补在体内研究人Elp3 HAT活性功能奠定了基础.     

毛柄短肠蕨抗氧化及体外抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

用乙醇回流提取法获得毛柄短肠蕨(Allantodia dilatata)的提取物,通过紫外-可见分光光度法对提取物中多酚类化合物含量进行测定,实验结果显示提取物中多酚类化合物含量为16.88%;采用DPPH法和ABTS法对提取物进行抗氧化活性测定,2种方法测得其抗氧化活性的IC_(50)值分别为28.0μg/mL和30.0μg/mL,结果表明提取物具有显著的抗氧化活性;实验测得提取物在体外抑制α-葡萄糖苷酶活性的IC_(50)值为(40.8±5.4)μg/mL,表明毛柄短肠蕨具有良好的降糖活性.     

金银花枝叶抗猪蓝耳病毒有效活性部位化学成分的分离与鉴定

通过测定金银花枝叶提取物对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的Marc-145细胞的最小保护浓度和对病毒感染滴度的影响来评价其体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的活性.结果显示,金银花枝叶95%乙醇提取物经D101型大孔树脂吸附后,得到的60%乙醇/水洗脱部位对PRRSV感染细胞的最小保护浓度为6.25μg/mL,6.25μg/mL 60%乙醇/水洗脱部位使PRRSV病毒滴度从105.8 TCID50降低至100.3 TCID50左右,即60%乙醇/水洗脱部位具有良好的体外抗PRRSV活性.利用溶剂提取法、正相硅胶柱层析、Sephadex LH-20和RP-HPLC等色谱法,从该有效活性部位中分离得到了5个化合物,通过理化性质和1 H NMR、13 C NMR等光谱数据鉴定化合物分别为Dihydrodehydrodiconiferyl alcohol 4′-O-β-D-glucoside(1),Apigenin 5-O-β-D-glu-copyranoside(2),Secoxyloganin(3),Benzyl alcohol O-(6′-O-β-D-xylopyranosyl)-β-D-glucopyr-anoside(4)和Sweroside(5).     

砂仁提取物对蘑菇酪氨酸酶活力的抑制效应

酪氨酸酶(EC 1.14.18.1)是生物体合成色素的主要酶.以地道阳春砂仁(Amomum)果实为材料,经过超声提取、萃取、树脂AB-8分离纯化,得到对蘑菇酪氨酸酶活力有显著抑制作用的砂仁30％(体积分数)乙醇提取物.研究该提取物对蘑菇酪氨酸酶的效应,结果表明,砂仁果实乙醇提取物对蘑菇酪氨酸酶的单酚酶活力和二酚酶活力都有明显的抑制作用.对单酚酶的作用,当质量浓度达到10.5 μg/mL时,可使单酚酶的稳定态活性酶活力下降40％,迟滞时间延长了3.12倍;对二酚酶活力的抑制作用也呈现浓度依赖性关系,其半抑制率浓度(IC50)为64 μg/mL,抑制作用属于可逆效应,抑制类型为混合型,抑制常数KI和KIS分别为41.85和98.51 μg/mL.这些数据为新型的酪氨酸酶的开发和寻找新型的食品保鲜剂和杀虫剂提供基础.     

9-氨基-1,2,3,4-四氢吖啶衍生物的合成

为了降低第一个用于治疗老年痴呆症药物他克林的毒副作用,提高其药理活性,对其侧链氨基进行了改性研究.分别对他克林进行了乙酰化、丁酰化及氯乙酰化反应,制备了相应的衍生物.鉴于哌嗪基团的亲水性,将其引入吖啶分子中,合成出化合物9-(2-哌嗪乙酰氨基)-1,2,3,4-四氢吖啶.所有化合物的结构均经元素分析、红外光谱、核磁共振氢谱和质谱表证.     

阿司匹林乙酰化修饰HDAC1抑制人结肠癌细胞HCT116增殖

大量研究表明阿司匹林具有重要的抗肿瘤作用。阿司匹林的乙酰基可以乙酰化大量蛋白质，从而影响体内的乙酰化水平，但其乙酰化作用在抗肿瘤上的具体机制还不清楚。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)已用于肿瘤治疗或处于临床研究，通过抑制组蛋白去乙酰化酶(Histone Deacetylases, HDACs)的去乙酰化酶活发挥抗癌作用。组蛋白去乙酰化酶1(Histone Deacetylase1, HDAC1)是Zn²⁺依赖的Ⅰ类HDAC家族成员，在多种癌症中表达上调，是组蛋白去乙酰化酶抑制剂(Histone Deacetylase Inhibitors, HDACi)发挥抗癌作用最关键的靶点之一。在抗肿瘤的过程中，阿司匹林是否乙酰化调控HDAC1尚未见报道。在本文中，我们发现阿司匹林可以乙酰化HDAC1并抑制其去乙酰化酶活，赖氨酸(K)200位点是阿司匹林乙酰化HDAC1的关键位点。有趣的是，HDAC1可以对自身去乙酰化，但不能发生在K200上。沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1),而不是HDAC1,可以对HDAC1的K200位点去乙酰化。进一步细胞学实验发现，在敲除H...     

马齿苋Portulaca oleracea的化学成分

从马齿苋（Portulaca oleracea）乙酸乙酯提取物中分离得到4个化合物,经MS和NMR等波谱技术分析,并结合文献对照,确定其结构分别为谷甾4-烯-3-醇(1),谷甾-5-烯-3-醇(2),friedelan-4α-methyl-3β-OH (3)和β-胡萝卜甙(4),其中化合物1,2,4为首次从该类植物中分...     

以线虫为模型考察中国芦荟提取物的降脂作用

将鲜芦荟去皮研磨、 过滤, 先用磷酸盐缓冲液(PBS)进行提取、 稀释, 再配制含不同质量浓度D-葡萄糖的线虫生长培养基(NGM)喂食培养线虫. 以线虫寿命及运动能力等生理指标确定脂肪堆积模型的最佳糖诱导质量浓度; 通过油红O染色法及Image J软件分析评估芦荟提取物的降脂作用. 实验结果表明： 100 mL NGM中含    2 g D-葡萄糖为最佳糖诱导质量浓度, 可用于构建线虫脂肪堆积模型的脂肪评价; 芦荟提取物对线虫脂肪堆积模型有良好的降脂作用.     

壳聚糖脱乙酰度的计算

提出应由壳聚糖中氨基质量分数或自由氨基质量分数来计算壳聚糖脱乙酰度。y表示壳聚糖脱乙酰度,x表示氨基质量分数或自由氨基质量分数,理论计算公式分别为:y=203.195x/(16.02262+0.42037x)、y=20.2021x/(16.02262+0.041794x),用计算机拟合,得到以上两式的拟合方程式:y=0.01553+12.64534x-0.31447x²+0.00546x³、y=0.01553+1.25722x-0.00311x²+5.36265×10^-6x³,两方程相关系数R均为1,标准偏差均为0.00663。由拟合方程计算出壳聚糖脱乙酰度,能准确地反映出壳聚糖的实际脱乙酰化程度。