基于三维培养的细胞加热培养控制系统

针对目前热物理治疗的体外实验手段无法模拟动物体内的复杂环境而影响实验准确性的问题,设计并制作了一种可以基于三维培养下的细胞进行热物理实验的加热实验平台.该平台可以同时针对贴壁细胞及三维细胞进行细胞加热实验,且在加热过程中能够实时对细胞的生长状态进行观察.实验结果表明,该加热培养系统可以保持温度均匀、控制精确,同时适用于三维水凝胶进行细胞加热实验,是一种有效的三维细胞加热培养手段.     

渗透压对中华绒螯蟹生精细胞体外培养的影响

渗透压是影响体外培养细胞生长和存活的重要因子.通过6种渗透压梯度下体外培养的生精细胞的贴壁率、存活率及RNA/DNA值的测定和细胞生长状况实验,研究了渗透压对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)生精细胞体外培养的影响.实验结果初步确定了中华绒螯蟹生精细胞体外培养的适宜渗透压范围为900～1 000 mmol/L.     

基于电阻抗多模式检测芯片的体外热疗

热疗是继手术、化疗、放疗之后对癌症的一大治疗手段,但是目前其机理尚不明确,体外研究结论与临床应用尚有差距。为更好地研究在热应激/热疗过程中的细胞变化,该文构建了一套集成细胞电阻抗非标记动态检测、细胞形态动态记录、荧光标记检测功能并且能够自动测控温度的微全分析系统,对其控温性能进行了仿真与实测检验,对细胞培养及增殖过程进行了非标记连续监测,并利用此实验系统进行了癌细胞在2种热疗条件下的动态多模式检测。实验结果表明:HeLa细胞在41℃,2h热疗作用下,阻抗呈现"V"型变化,形态快速收缩后又迅速恢复贴壁,荧光标记检测显示细胞活力无明显改变;而在2次55℃,2min脉冲式热疗作用下,细胞阻抗呈现"L"型变化,细胞杀伤效果明显。该系统将传统标记技术与非标记检测技术结合,可用于细胞热应激/热疗的相关研究。     

白果提取物抗肿瘤作用的研究

为研究白果是否具有抗肿瘤作用,实验通过体外培养肝癌BEL7402细胞和胰腺癌PANC-1细胞,采用5-氟尿嘧啶(5-Fu)作为阳性对照药,评价白果提取物不同组分对肿瘤细胞生长的作用.在实验中,阳性对照药5-Fu具有较好的抗肿瘤作用,对肝癌BEL7402的IC50值为65.77μg/mL,对胰腺癌PANC-1细胞的IC50值为77.87μg/mL;白果提取物的正丁醇和水相组分能够抑制BEL7402细胞和PANC-1细胞生长,而多糖组分和乙酸乙酯组分有较弱的促进两种细胞生长作用.因此,银杏提取物水相和正丁醇组分对肝癌BEL7402细胞和胰腺癌PANC-1细胞具有抑制作用.     

绿茶提取物抑制肿瘤作用的实验观察

本文利用湖北英山绿茶提取物——茶结晶,对S—180实体瘤,EAC实体瘤以及体外培养的肿瘤细胞株Hela细胞,EAC细胞的影响进行了实验观察,结果表明,茶叶提取物对S一180;EAC肿瘤均有抑制作用,抑瘤率达43%(P<0.01).对体外培养的Hela细胞,EAC细胞的生长也具有抑制作用,当浓度为2mg/ml时,2—4小时内瘤细胞死亡率为100%.认为绿茶提取物抑制肿瘤的作用与增强机体免疫力,产生不利于肿瘤生长的内在环境有关.     

磁流体靶向热疗对小鼠胰腺癌的作用

 为探讨磁流体靶向热疗对小鼠胰腺癌的体外和动物治疗作用,利用前期建株的小鼠胰腺腺泡细胞癌株(MPC-83)分别进行体外热疗和动物实验.对MPC-83 进行水浴热疗,分别调热疗温度为37、42、46、50℃,作用30 min,显微镜观察细胞形态变化,流式细胞仪检测凋亡和坏死细胞百分比.选择4 周龄雌性昆明种小鼠,建立MPC-83 胰腺癌皮下肿瘤模型,观察磁流体热疗(46℃和50℃)对荷瘤小鼠的作用及其病理学变化.流式细胞仪检测46℃和50℃热疗细胞凋亡和坏死百分比分别为46.13%、89.33%,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05).热疗后第14 天,46℃和50℃热疗组肿瘤生长率分别为-0.64±0.73和-0.72±0.79,与3 个对照组比较,肿瘤生长受到明显抑制(P<0.05).病理学检查示磁流体对照组,在注射磁流体24 h 可见散在的磁性纳米微粒在一定范围内分布于肿瘤细胞之间,部分肿瘤细胞和吞噬细胞吞噬了磁性纳米微粒.热疗14 d 肿瘤完全消失的小鼠皮下组织未见肿瘤细胞,可见皮下残存磁性纳米微粒,被吞噬细胞吞噬.各对照组小鼠瘤体生长旺盛,细胞核浓染分裂,可见病理性核分裂像.磁流体靶向热疗可以达到杀伤胰腺癌细胞的理想温度,能有效抑制MPC-83 胰腺癌生长,延长小鼠生存期.     

小鼠胚肝基质细胞在体外培养中的动态演化

胚肝基质细胞是研究胚肝造血调控的重要工具，本实验对小鼠胚肝基质细胞在体外培养过程中的生长、细胞类型组成及其组成比例的演变过程进行了观察．实验显示小鼠原代培养初期基质细胞是由平滑肌样上皮细胞、巨噬细胞以及成纤维样细胞、树突状细胞、内皮细胞构成的，经过多次传代后，巨噬细胞等类型的细胞逐渐丢失，平滑肌样上皮细胞和成纤维样细胞成为主体，表明体外培养的小鼠胚肝基质细胞在4代以内都能较真实的反映体内造血微环境的构成，适用于胚肝造血研究．此为进一步研究胚肝基质细胞在胚胎期造血过程中的作用奠定了工作基础．     

3D培养技术在细胞培养中的应用

细胞培养是研究体内细胞在体外生物学行为的重要的研究手段。传统的细胞培养是在培养皿或培养瓶的二维平面上进行的,这与细胞在体内所处的三维生长环境有着很大的区别。三维(3D)培养则是一种可以使细胞在体外条件下在进行三维生长的培养方法,可以更好地模拟细胞在体内的生长状况及环境。在三维培养条件下细胞的许多生物学行为与传统的二维培养有着很大的不同,其应用领域也有更广泛的扩张,具有重要的研究意义。本文将对三维细胞培养的发展、特点及应用进行简要的综述。     

白花蛇舌草体外对人肝癌多药耐药细胞Bel-7402抗肿瘤活性的研究

目的探讨白花蛇舌草在体外对肝癌多药耐药细胞Bell-7402生长活性的抑制作用.方法 MTT法检测白花蛇舌草提取物对Bel-7402生长的抑制作用,有无逆转Bel-7402的多药耐药性;用淋巴细胞转化实验检测白花蛇舌草提取物能刺激T淋巴细胞增殖,并筛选出药物的安全剂量范围;集落形成实验观察体外抗癌药物的敏感性.结果白花蛇舌草提取物对肝癌多药耐药细胞Bel-7402的生长具有明显的抑制作用,且这种作用是剂量依赖关系.结论白花蛇舌草提取物在体外对人肝癌多药耐药细胞Be1-7402有抑制作用.     

神经毒素MPP+诱发PC12细胞凋亡的实验研究

采用细胞体外培养、噻唑蓝(MTT)比色法、荧光染色技术、透射电镜、流式细胞技术结合的方法,研究了神经毒素MPP 对PC12细胞增殖和凋亡的影响,为进一步研究药物的神经保护作用提供实验模型.结果表明,MPP 对PC12细胞的诱导凋亡作用呈时间和剂量相关性.0.20mM的MPP 作用于PC12细胞48h后,细胞的存活率降低为60%,细胞核发生凝集和断裂,超微结构发生了一系列的变化,呈现出明显的凋亡特征.流式细胞技术的Annexin v-FTTC和PI双染法显示,活细胞占20.2%,晚期凋亡/坏死细胞占51%,早期凋亡细胞占6.75%.提示,MPP 能够诱导PC12细胞凋亡,是研究神经保护作用药物很好的体外实验模型.     

复方葛根汤诱导结肠癌HCT116细胞铁死亡分子机制研究

为探究复方葛根汤对结肠癌HCT116细胞增长作用及其分子机制,通过MTT法检测、克隆形成、形态学分析探讨复方葛根汤对HCT116细胞增长作用,以活性氧试剂盒检测、荧光显微成像及蛋白免疫印迹法探究其分子机制。研究结果显示,与溶媒对照组相比,复方葛根汤能显著抑制HCT116细胞增长能力,并呈浓度和时间依赖性,机制上能显著增加细胞内活性氧,显著上调铁死亡相关蛋白PTGS2、ACSL4蛋白的表达,及明显下调铁死亡相关蛋白GPX4表达,表明复方葛根汤可能通过诱导铁死亡机制抑制HCT116细胞增长。     

癌生长是寄主中的过寄生现象

报道了人乳腺癌细胞MCF7和正常细胞MCF10,MRC5混合培养实验,分析了实验结果．结果表明：在营养物充足条件下癌细胞和正常细胞系寄生共存关系,而在饥饿条件下癌细胞和正常细胞是过寄生-捕食者和食饵的关系．讨论了此结果的生物医学含义．     

小鼠乳腺癌发生过程的红外热图特征及其早期诊断学意义

通过对移植乳腺癌肿瘤小鼠的培养,全面模拟人体生长肿瘤时的生理特征,并借助远红外成像系统,对肿瘤生长初期及中期进行逐天监控,得到一个全面的乳腺癌生长记录。同时对乳腺癌细胞的生长机制进行理论刻画。实验发现,小鼠注射乳腺癌细胞初期,从体表并不易观测到肿瘤的生成,但借助远红外成像设备,可以明显地探测到肿瘤的存在,且能以一种灵敏的方式表征出肿瘤在小鼠体内的发展情况,说明远红外成像方法在早期诊断乳腺癌上具有可行性。进一步的理论模拟及试验结果表明,小鼠肿瘤细胞在其体内呈指数生长趋势。     

注射麻醉剂抑制小鼠EMT6乳腺肿瘤的生长

通过注射常规麻醉剂,可以降低患肿瘤生物个体新陈代谢强度,继而抑制其肿瘤生长及降低疼痛;观察了麻醉剂对移植性小鼠乳腺癌(EMT6)生长的抑制作用。通过对移植乳腺癌肿瘤小鼠的培养及给药实验,全面模拟人体生长肿瘤时的生理特征。在小鼠完成移植肿瘤细胞1周后,开始注射麻醉剂,同时对肿瘤生长及小鼠生理状况进行逐天监控;给药2周后处死小鼠并检测。实验发现,注射麻醉剂组小鼠肿瘤生长速度慢于实验对照组,肿瘤抑制率最高达18.5%。结果表明,注射麻醉剂可以延缓肿瘤生长,在乳腺癌治疗上具有可行性。     

视黄酸对胃癌细胞恶性表型的影响

研究ｔ－ＲＡ对胃癌细胞的作用和探讨其作用机理．结果表明：１）ｔ－ＲＡ能够有效地抑制胃癌细胞的生长．２）ｔ－ＲＡ能够降低胃癌细胞在软琼脂中形成集落的能力．３）ｔ－ＲＡ能够降低胃癌细胞的粘附能力．４）ｔ－ＲＡ能够抑制胃癌细胞在裸鼠中形成肿瘤的能力．４）扫描电镜观察显示,经ｔ－ＲＡ处理后,胃癌细胞表面的微绒毛消失．以上结果表明,ｔ－ＲＡ对胃癌细胞的恶性表型有显著的抑制作用．ｔ－ＲＡ可能作为治疗胃癌的有效药物．     

新型单羰基姜黄素类似物的合成及抗肿瘤活性研究

采用氮烷基化、羟基保护、醛酮缩合三步反应合成了8个新型单羰基姜黄素类似物,结构经质谱、核磁共振氢谱和核磁共振碳谱等手段进行确认。并采用MTT染色法体外检测所合成的8个单羰基姜黄素类似物对人肺癌细胞H1299,结肠癌细胞HT-29,人体胰腺癌细胞BxPC-3和人前列腺癌细胞PC-3的抗癌活性。半数抑制浓度IC50值结果显示:所合成的8个姜黄素类似物对四种细胞均有较强的抑制作用,其中化合物A6在四种细胞中的半数抑制浓度IC50均在0.65 μM以下,抗癌活性比姜黄素提高了40倍以上。     

Autocrine growth factors and cancer

The ability of cancer cells to produce and to respond to their own growth factors (autocrine secretion) has become a central concept linking oncogene and growth factor research. Oncogenes confer growth factor autonomy on cells not only by coding directly for autocrine peptide growth factors or their receptors, but also by amplifying the mitogenic signals generated by a growth factor at its receptor. Antagonists of positive autocrine growth factors can inhibit growth of cancer cells in experimental animals. Recently identified negative autocrine growth factors might themselves control aberrant cell growth.     

细菌内毒素诱导人肝癌细胞凋亡的实验研究

目的:探讨细菌内毒素对人肝癌细胞株7721的影响程度.方法:用含有细菌内毒素1000 EU/mL、500EU/mL、100 EU/mL、50 EU/mL、0EU/mL的DMEM细胞培养液来培养7721细胞,通过细胞计数来绘制细胞生长曲线,台盼蓝排除法测定细胞活率、用DNA梯形条带法及TUNEL原位法检测细胞凋亡情况.结果:细菌内毒素对肝癌细胞7721生长有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性.此种抑制是通过诱导细胞凋亡达到的,肿瘤坏死因子检测结果没有发现规律性.结论:内毒素在体外可以诱导肺腺癌细胞的凋亡,且存在明显的剂量关系,并且此凋亡不是依赖TNF-α途径发生的,为临床上诱导肿瘤细胞凋亡,从而为预防和治疗肿瘤提供了理论依据.     

A human colon cancer cell capable of initiating tumour growth in immunodeficient mice

Colon cancer is one of the best-understood neoplasms from a genetic perspective, yet it remains the second most common cause of cancer-related death, indicating that some of its cancer cells are not eradicated by current therapies. What has yet to be established is whether every colon cancer cell possesses the potential to initiate and sustain tumour growth, or whether the tumour is hierarchically organized so that only a subset of cells--cancer stem cells--possess such potential. Here we use renal capsule transplantation in immunodeficient NOD/SCID mice to identify a human colon cancer-initiating cell (CC-IC). Purification experiments established that all CC-ICs were CD133+; the CD133- cells that comprised the majority of the tumour were unable to initiate tumour growth. We calculated by limiting dilution analysis that there was one CC-IC in 5.7 x 10(4) unfractionated tumour cells, whereas there was one CC-IC in 262 CD133+ cells, representing >200-fold enrichment. CC-ICs within the CD133+ population were able to maintain themselves as well as differentiate and re-establish tumour heterogeneity upon serial transplantation. The identification of colon cancer stem cells that are distinct from the bulk tumour cells provides strong support for the hierarchical organization of human colon cancer, and their existence suggests that for therapeutic strategies to be effective, they must target the cancer stem cells.     

Inducing apoptosis of cancer cell and inhibiting mice’s malignant tumour growth by magnetic fields

It was found that the growth of malignant tumour in mice was inhibited and the ability of immune cell’s dissolving cancer cells was enhanced by ultralow frequency (ULF) pulsed gradient magnetic field. The DNA contents of nuclei decreased which indicated that magnetic field can block DNA replication and mitosis of cancer cells. It was observed that magnetic field inhibited the cancer cell’s metabolism, lowered its malignancy, and restrained its rapid and heteromorphic growth. The morphology properties of Programmed Cell Death (PCD) of the cancer cells of the treated group by magnetic field was observed for the first time. The heterochromatin condensed and coagulated together along the nuclear membrane; the endoplasmic reticulums expanded and fused with the cellular membrane; many apoptotic bodies which were packed by the cellular membrane appeared and were devoured by the lymphocytes and plasma. Foundation item: Supported by the National Natural Science Foundation of China Biography: ZHANG Hu-sheng(1938-), male, Professor