Ruminobacter amylophilus 70细胞膜淀粉酶的纯化和分析

一种Ruminobacter amylophilus 70细胞膜联的新支连淀粉酶被4％ Triton X-100提取．其新支连淀粉酶活性存在于70％的硫酸铵沉淀组分中．通过等电聚焦纯化，根据SDS凝胶电泳测定，其新支连淀粉酶的分子量是91．2kDa，其等电点是5．8-5.9.根据另一种淀粉酶活性凝胶电泳的方法测定，其新支连淀粉酶的分子量大约是92．6kDa．在R.amylophilus 70细胞中存在着两种类型的淀粉酶(可溶性淀粉酶和膜联淀粉酶，比如新支连淀粉酶)共同承担分解淀粉的作用．     

嗜淀粉瘤胃杆菌细胞膜联新支链淀粉酶的鉴定

位于厌氧菌嗜淀粉瘤胃杆菌细胞膜上的一种膜联淀粉酶不能被高盐溶液提取，但能够被4％Triton X-100溶液提取，当其酶保存在4％Triton溶液中，其酶活性比保存在0．01％Triton溶液中稳定．当用支链为底物时，其酶催化的最终产物是藩糖，所以此种膜联淀粉酶应该是新支链淀粉酶。     

木瓜蛋白酶的纯化和性质

探讨木瓜蛋白酶的理化性质，对番木瓜未成熟果实乳汁进行真空干燥、（NH4）2SO4沉淀和SP-Sephadex50柱层析，分别得到木瓜蛋白酶的粗酶、清酶和纯化酶，可用于不同的工业用途。同时，对纯化的木瓜蛋白酶进行了分子量、等电点、巯基数目、圆二色性、反应动力学以及N-末端和C-末端氨基酸序列等性质的研究，为该酶的进一步开发提供科学依据。     

大豆β—淀粉酶的纯化和性质研究

主要介绍大豆β－淀粉酶的分离纯化。首先通过酸抽得到粗提物，再经过乙醇沉淀，百里香草酚吸附和超滤技术进行纯化。纯化的酶用聚丙烯酰凝胶电泳检测为三条带。回收率为３５．８％；酶的比活为３４１ｕ／ｍｇ蛋白，分子量为５．３万，等电点为５．２；最适ｐＨ５－６，最适温度４０－５０℃。     

产冷活性淀粉酶嗜冷菌的分离和纯化

文章主要对产冷活性淀粉酶的冷适应微生物进行分离和纯化。通过对菌株的分离和提取基因组DNA进行PCR扩增得到其16S rRNA基因后连接于T-载体再转入大肠杆菌JM109中，筛选阳性克隆转化子进行培养，最后提取质粒进行琼脂糖凝胶电泳检测。     

大豆β－淀粉酶的纯化和性质研究

主要介绍大豆β－淀粉酶的分离纯化。首先通过酸抽提得到粗提物，再经过乙醇沉淀，百里香草酚吸附和超滤技术进行纯化，纯化的酶用聚丙烯酰凝胶电泳检测为三条带。回收率为３５．８％；酶的比活为３４１ｕ／ｍｇ蛋白。分子量为５．３万，等电点为５．２；最适ｐＨ５－６，最适温度４０—５０℃．     

黑曲霉葡萄糖淀粉酶cDNA的克隆和序列分析及其在大肠杆菌中的表达(英文)

以poly(A)~ mRNA为模板,噬菌体λgt 10 DNA为载体构建了黑曲霉3758的cDNA的文库。用编码黑曲霉葡萄糖淀粉酶329—418位氨基酸的DNA顺序(456bp)作探针从该文库中筛选葡萄糖淀粉酶cDNA。采用原位噬菌斑杂交法获得11个阳性噬菌斑,从其中6个噬菌体中提取DNA进行限制酶切分析和印迹法转移杂交试验,发现这些阳性噬菌体DNA含有不同大小的插入片段,它们都能与DNA探针杂交,表明已克隆了葡萄糖淀粉酶的cDNA。采用单酶切及交叉双酶切法制定了2.1kbcDNA的物理图并对2.1kb片段作了全序列分析。序列分析结果显示,克隆的2.1kb片段含5＇端非编码区,编码葡萄糖淀粉酶的结构基因及3＇端非编码区。克隆的cDNA片段转移至表达载体λgt11,感染大肠杆菌后,产生的噬菌斑转移硝酸纤维素滤膜后与~(125)I标记的抗葡萄糖淀粉酶抗体进行免疫反应,结果证明含2.1kbcDNA的λgt11表现葡萄糖淀粉酶阳性.2.1kb片段也曾转至质粒pPL2,转化大肠杆菌JF1125。细胞裂解物在SDS-PAGE电泳中可看到新的蛋白带。这些结果表明,克隆的黑曲霉葡萄糖淀粉酶cDNA可以在大肠杆菌中表达。     

黑曲霉胞外葡萄糖淀粉酶的纯化及特性

黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ７２８）的粗酶液，经硫酸铵沉淀，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５柱凝胶过滤脱盐，ＤＥＡＥ－Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ离子交换柱层析和ＳｅｐｈａｃｒｙＳ－１００凝胶层析纯化，经ＰＡＧＥ鉴定为一条带ＳＤＳ凝胶电泳测定分子量为７００００．金属离子Ｆｅ３＋对该酶有一定的抑制作用，该酶的等电点为３．７，最适ｐＨ为４，最适温度为６０℃．Ｅ２８０１％为１５．７２，Ｋｍ值为０．１１２×１０－３ｍ．     

黑曲霉(UV—11)葡葡糖淀粉酶的分离纯化和酶的多型性性质的初步研究

以黑曲霉UV—11的工业酶制剂为材料,分离纯化葡萄糖淀粉酶。蒸馏水抽提,硫酸铵盐析,凝胶过滤脱盐和DEAE一纤维素DE_(52)柱层析,得到4个部分(峰Ⅰ—Ⅳ),4个部份提纯0.92—1.84倍,酶活收率为26.6％。黑曲霉UV—11葡萄糖淀粉酶具有多型性,经聚丙烯酰胺凝胶水平板电泳共分出5条区带。粗酶和纯化的酶经电泳染色结果表明黑曲霉UV—11葡萄糖淀粉酶为一种糖蛋白。     

猪凝血酶的分离纯化与鉴定

本文报导以猪血为材料，制备凝血酶，血浆在低离子强度下经等电沉淀得优球蛋白，从该沉淀中采用稀盐溶液提取，氢氧化镁吸附和二氧化碳解吸等步骤获得凝血酶原粗品。后者经脑提取液激活，再经乙醇分级、ＤＥＡＥ－纤维素与磷酸纤维素离子交换层析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤，得凝血酶制品，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，制品呈单一条带，分子量约为３９ｋＤ，比活达１６１０ＮＩＨＵ／ｍｇ蛋白，以活化的粗品活性为１００％，活性回收率为４８％，纯化倍数约为１０。     

植物激活蛋白的分离、纯化及等电点的的测定

文章主要介绍首次从真菌中提取的植物激活蛋白是一种高效、多功能、广谱性、能诱导植物对病虫害产生免疫抗性的新型植物诱导物质，通过分离纯化该蛋白，可以为下一步的活性检测，序列测定及基因克隆打下良好的基础。     

乙醇酸氧化酶分子结构的研究和存在的问题

本文分析了乙醇酸氧化酶分子量相差很大的原因,但目前认为乙醇酸氧化酶为单一亚基所组成的观点难于解释为何乙醇酸氧化酶具有多个不是等电点,对等电点的正确认识将有助于揭示乙醇酸氧化酶分子结构。     

百日咳毒素的等电点测定及层析分离

百日咳毒素是百日咳杆菌(Bordetellapertussis)产生的一种主要毒力因子,也是百日咳菌苗的主要成分之一.用等电聚焦法测得其等电点为pH6 8.将百日咳杆菌液体培养液在等电点盐析后,通过DEAE-Sephadex-A50阴离子交换剂进一步分离纯化了百日咳毒素.ELISA测定其比活力表明,3批样品的提纯倍数分别为1 47,1 37和1 36.     

黑豆中抗真菌蛋白的纯化及活性鉴定

利用硫酸铵分级沉降、亲和色谱Affi-gel和离子交换色谱SP-Toyopearl从黑豆种子中分离出一种抗菌蛋白,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定达到电泳纯.利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳标准蛋白迁移率与分子量对数的关系,计算出该抗菌蛋白的分子量为93.3 kDa,还原和非还原状态下均显示单一区带,说明该抗真菌蛋白为单倍体蛋白.抑菌试验结果表明,此纯化的蛋白对植物致病菌瓜果腐霉病菌、棉花枯萎病菌、苹果轮纹病菌、葡萄灰霉病菌和菜豆根腐病菌等5种真菌的生长具有不同的抑制作用.     

用Blue一Sepharose·CL·6B亲和层析法分离纯化甲鱼和北京鸭LDH＿1、LDH＿5A亚基

用ＢｌｕｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ·ＣＬ．６Ｂ亲和层析方法分离纯化的甲鱼ＬＤＨ＿５、甲鱼ＬＤＨ＿１和北京鸭ＬＤＨ＿５，进行比较研究。从分子量、等电点、氨基酸组成、平均摩尔差异百分比及在ＢｌｕｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ·ＣＬ·６Ｂ层析柱上洗脱特性几方面进行比较，结果表明，两个不同纲的动物（甲鱼和北京鸭）的ＬＤＨ＿５的Ａ亚基之间的差异大于同一种动物的ＬＤＨ＿５的Ａ亚基和Ｂ亚基之间的差异，并说明不同纲的动物ＬＤＨ＿５之间具有同源性。     

沸点升高法测化合物的相对分子量

介绍改进后的一种利用沸点升高法测化合物的相对分子质量的实验方法：以乙醇为溶剂、相对分子质量已知的尿素作为样品，测定沸点升高常数和苯甲酸的相对分子质量．所需设备简单、测量精度符合物理化学实验教学的要求．     

花生蛋白质的主要种类和等电点的研究

花生蛋白等电聚焦显１１条区带，其中６条很明显，说明花生至少有１１类不同等电点的蛋白质。等电点分别为４，３、４．５、５．１、５．４、６．５、６．７的蛋白质是主要的，他们的聚丙烯酰胺凝胶电泳和花生蛋白乳状液的醋酸纤维薄膜电泳的结果都有３条区带，其中两条比较明显，说明花生蛋白有两种主要组分和一种次要组分；这三种组分可有多种等电点，一种等电点可同时有这三种组分。