海藻酸钠包埋啤酒酵母絮凝剂的制备研究

为了提高固定化啤酒酵母絮凝岩溶水硬度和矿化度的能力,采用固定化剂海藻酸钠包埋啤酒酵母,并制备了粒径1~2mm的固定化啤酒酵母絮凝剂小球。以啤酒酵母固定化菌的物理性质及对岩溶水硬度和矿化度絮凝率为指标,考察了固定化因素海藻酸钠质量分数、菌体海藻酸钠质量比、交联时间及氯化钙质量分数对固定化小球的物理性质及絮凝岩溶水的影响。结果显示,制作固定化菌的最优固定化条件分别为:海藻酸钠质量分数2.0%-3.0%、菌体海藻酸钠质量比6%-8%、交联时间6~10h和氯化钙质量分数2.0%-4.0%,此时的啤酒酵母固定化菌物理性质最优。由正交实验确定影响因素主次顺序及最优水平组合后,结果发现:较其他因素而言,海藻酸钠质量分数与菌体包埋比对絮凝率影响较大;当选取质量分数为2.0%的海藻酸钠、10%的菌体质量比、4.0%的氯化钙和10h的交联时间条件下制作的固定化小球,在投加量4g·L-1,絮凝时间60min时,对岩溶水的矿化度和硬度絮凝率分别达到76.97%和59.77%,处理后的岩溶水矿化度从3 109mg·L-1降到1 258mg·L-1,矿化度达到了《地下水质量标准》(GB/T14848-93)的Ⅳ类用水标准,硬度从2 856mg·L-1降到了658mg·L-1,硬度接近《地下水质量标准》(GB/T14848-93)的Ⅳ类用水标准。     

硅藻土强化吸附壳聚糖固定化青霉素酰化酶

文中针对壳聚糖颗粒机械强度不够和比表面积不大的缺点,用无机多孔材料硅藻土(celite)在低压下强化吸附壳聚糖,再用戊二醛使其活化,以此为载体通过共价结合固定化青霉素酰化酶。以酶活和回收率为指标,讨论了活化、固定化及酶反应的不同条件对固定化青霉素酰化酶的酶活和回收率的影响。当戊二醛溶液质量分数为5%、pH值为8.5;酶固定化温度为27℃,固定化pH值为7.6,固定化时间为12～18h时,为最佳固定化条件。固定化酶的酶活可达10000mol/s左右,回收率约为40%。固定化酶的储存稳定性和热稳定性好,载体有良好的强度。     

蔗糖异构酶PalI包埋和交联固定化方法比较

采用海藻酸钠包埋法和戊二醛交联法两种固定化方法,对来源于Klebsiella sp. LX3的蔗糖异构酶PalI的稳定性和可重复利用性进行研究。结果发现,海藻酸钠包埋法在海藻酸钠、CaCl2 质量分数为1.5%、2%时,所得固定化酶的酶活最高,其最适反应温度为40℃,最适pH值为6;戊二醛交联法在(NH₄)₂SO₄质量分数为90%,戊二醛体积分数为2.5%时得到的固定酶酶活最高,交联酶的最适反应温度为50℃,最适pH值为5。通过对酶的稳定性比较,两种方法酶稳定性都优于游离酶。4℃保存20d后游离酶的酶活降低到30%,而戊二醛交联酶活性在95%以上,海藻酸钠固定化酶残余酶活仍在60%左右。戊二醛交联法固定酶活性优于海藻酸钠固定化酶,重复利用12次戊二醛交联酶,其残余酶活仍为80%。     

固定化乳酸菌发酵制备L-乳酸的初步研究

对影响固定化乳酸菌发酵玉米淀粉糖化液的主要因素进行了研究,并用响应面分析法优化了固定化发酵的培养基成分.结果表明,海藻酸钠质量分数为2%,凝胶颗粒直径在1.3～1.7 mm为固定化乳酸菌的最优条件;糖化液140 g/L,玉米浆76.3 g/L,CaCO3 70 g/L为固定化发酵的最佳培养基组成,在此条件下乳酸产量可达132.4 g/L.     

固定化真菌α淀粉酶在海参饵料添加剂方面的应用研究

采用海藻酸钠为载体固定化真菌α-淀粉酶,首次作为海参饵料添加剂考察了固定化的最适条件和固定化酶的酶学性质.结果表明:海藻酸钠质量分数2.5%,加酶量15%,CaCl2质量分数2%,固定化时间1.0 h固定化酶活力最高.固定化酶的最适温度范围在55～60℃,最适pH在5.0～5.5之间.固定化酶在添加量为0.16 mg/g(干饵料),酶解时间25～30 min效果最佳.     

分子筛固定化葡萄糖淀粉酶性能的研究

研究了温度、pH值、底物流速、底物浓度、底物的葡萄糖当量值(DE)等因素对分子筛固定化黑曲霉葡萄糖淀粉酶水解淀粉液化液反应性能的影响规律,考察了固定化酶催化剂的寿命. 在适宜条件下,供给质量百分数10%的淀粉液化液,连续22 d可产生DE值95以上的糖化液,运转30 d,活力仅下降25%. 以DE值15的玉米淀粉液化液为底物,糖化液中葡萄糖的质量百分数可达97%以上.     

介孔分子筛MCM-41固定化木瓜蛋白酶的研究

文中以介孔分子筛MCM-41作为载体,戊二醛作为交联剂,对木瓜蛋白酶进行了固定化。研究了固定化条件对酶活性及酶活性回收率的影响,并对固定化酶的连续操作稳定性做了初步探讨。结果表明：当1g载体的给酶量为20mg,固定化温度10～20℃,固定化时间2h,pH值7.0,戊二醛体积分数0.75%时,木瓜蛋白酶的固定化效果最好,此时酶活性平均回收率达55%左右。固定化酶具有良好的连续操作稳定性,半衰期可达26d。     

固定化反硝化聚磷菌制备方法的研究

选用海藻酸钠(CA)和聚乙烯醇(PVA)混合物作为包埋载体,对经富集培养的以反硝化聚磷菌为主的活性污泥固定化制备方法进行了研究.利用正交实验考察了包埋菌体量、海藻酸钠质量分数、沸石添加量和交联时间对固定化菌除磷效果的影响,着重研究了包埋菌体量和沸石添加量这2个显著性影响因素对固定化小球性能的影响.研究表明,制备固定化反硝化聚磷菌的最佳包埋条件是:PVA质量分数为8%,CA质量分数为3%,包埋菌质量体积浓度为25g/L,沸石质量体积浓度为20 g/L,固定化小球交联时间为18 h.     

农药杀虫单降解菌的固定化研究

对杀虫单高效降解菌进行固定化试验，采用海藻酸钠和聚乙烯醇混合进行包埋，设计正交试验，考察固定化菌体对土壤中杀虫单的降解能力，并与游离菌进行相对降解活性的对比．得到最佳的固定化条件为：聚乙烯质量分数为10％，海藻酸钠质量分数为1．5％，氯化钙质量分数为1．5％，菌质量分数为2％．     

固定化米曲霉氨基酰化酶拆分DL-茶氨酸

研究固定化米曲霉Aspergillus oryzae AS3.381氨基酰化酶细胞拆分DL-茶氨酸制备L-茶氨酸的最佳工艺条件.将DL-茶氨酸乙酰化为N-乙酰-DL-茶氨酸,利用固定化米曲霉细胞立体专一性去乙酰化,可以获得L-茶氨酸,并分析固定化条件对比酶活的影响.结果显示:最适固定化条件为戊二醛浓度0.5%、交联时间2 h、温度55℃、pH8.0、底物0.2 mol/L、菌液比12 g菌体/100 mL戊二醛溶液,此时拆分率可达98%以上.菌体重复操作7批次,固定化细胞仍保留最高酶活的75%.与直接利用游离菌体转化相比,本法具有反应温度高、酶活高且稳定、能反复利用、酶活损失少等优点.     

贻贝的细菌污染研究

在模拟生态条件下,以贻贝为材料,用大肠埃希氏菌,粪链球菌和金黄色葡萄球菌对其污染,在5d内,分析细菌污染过程及其变化规律,研究表明,贻贝的细菌污染非常迅速,最大的污染程度在其接触受污染海水后60min就出现,并维持这一水平至4h之久,随后,贻贝的污染则依不同细菌以不同速度下降,贻贝对不同细菌的捕获,富集也表现出明显的差异性,粪链球菌的平均富集系数为33.2,大肠埃希氏菌为15.6,金黄色葡萄球菌为66.1。     

嗜热链球菌产胞外多糖的研究

以嗜热链球菌为材料,MRS培养基为基础培养基,研究了影响嗜热链球菌菌体生物量及胞外多糖生物合成的因素以及多糖提取的工艺条件.采用单因素法分析了碳源、氮源、初始pH值、温度、时间对嗜热链球菌生物量及胞外多糖生物合成的影响,结果表明嗜热链球菌生长的最佳条件为:葡萄糖20 g/L、大豆蛋白胨5 g/L、胰蛋白胨5 g/L、培养液初始pH 6.5、培养温度为37℃、培养时间24 h时,菌体生物量达5.00×1019个/mL;嗜热链球菌产胞外多糖的最佳条件为:葡萄糖20 g/L、大豆蛋白胨5 g/L、胰蛋白胨5 g/L、培养温度为40℃时、培养时间27 h、培养液初始pH 6.5,胞外多糖产量达到为914.33 mg/L,胞外多糖产量相对于茵体的生长在时间上表现出滞后现象.多糖提取工艺的研究结果表明:以4倍体积的sevag液加入多糖溶液脱蛋白,用三倍体积90%的乙醇于4℃时沉淀12 h,多糖的提取效果最好.     

Identification of the lethal target of benzylpenicillin in Streptococcus faecalis by in vivo penicillin binding studies

The mode of bacterial killing by penicillins is still unknown in spite of many studies on the subject. The recent finding of multiple penicillin binding proteins (PBPs) in sensitive bacteria and the possibility of analysing the binding of the antibiotic to exponentially growing cells have provided new directions for investigating this problem. Sensitivity to lethal and other effects of penicillin varies very significantly with the conditions of growth of the cells. If PBPs were the penicillin target, changes in conditions of growth causing variations in penicillin sensitivity should be accompanied by changes in these proteins. Furthermore, if one of PBPs could be identified as the killing target, it could possibly be demonstrated to show changes in cells growing in different conditions. We show here that in Streptococcus faecalis ATCC 9790 changes in conditions of growth are accompanied by changes in PBPs. Furthermore, in the presence of the minimal dose of 14C-benzylpenicillin causing complete inhibition of cell growth, 100% of the total radioactivity is bound to a single protein (PBP 3).     

透明质酸产生菌的诱变育种及发酵条件

本文研究了透明质酸（ＨＡ）产生菌的诱变育种及摇瓶发酵条件。以兽疫链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｚｏｅｐｉｄｅｍｉｃｃｕｓ）ＮＣＴ６１８０为出发菌种，在普通加血培养基上研究了ＨＡ的产生能力，用正交法研究了野生菌的最佳培养条件，通过单菌落分离得到野生高产菌株。再通过紫外和ＮＴＧ诱变得到溶血性较弱的菌株，部分菌株比出发菌株产量提高一倍以上。在摇瓶条件下，ＰＨ值的控制及葡萄糖的加入均有利于ＨＡ的产生。     

高效液相色谱分析L-瓜氨酸的研究

文中建立了L-瓜氨酸的HPLC检测方法,实验应用2,4二硝基氟苯(DNFB)柱前衍生化法将L瓜氨酸衍生后在HPLC上进行定量分析,探讨和优化了L-瓜氨酸的HPLC分析色谱条件。研究结果表明,L 瓜氨酸样品检测线性范围为2～10μg ,相关因数r=0.9990,精密度为1.7%。该方法灵敏,重复性好,结果准确,分析迅速,能有效的指导L-瓜氨酸的发酵生产。     

Transformation of Streptococcus zooepidemicus with Genes Responsible for Polyhydroxybutyrate Synthesis

IntroductionGenetic manipulation of bacteria has become apowerful tool for elucidating fundamentalbiological mechanisms.While many techniques areavailable to introduce foreign DNA into severalbacterial species[1 ] ,some bacteria,such asStreptococcus spp.,have proven to be resistant totransformation with mostprotocols thathave beendescribed.In addition,there are large differencesin the transform ability among various strains ofStreptococcusspp.　Streptococci have been divided into six majorph…     

大蒜素纳滤提取及对粪肠球菌的体外抑菌研究

以白皮大蒜为原料,研究大蒜素的纳滤提取条件和大蒜素对粪肠球菌Enterococcus faecalis的体外抑菌特性．研究结果表明：0.45 μm膜过滤后的大蒜液在压力0.6 MPa、温度36℃操作条件下经孔径300 Da的纳滤膜纳滤后,大蒜原料中大蒜素的有效提取率为81.9%,纳滤液中大蒜素含量为2.07 mg/mL．大蒜素对E. faecalis的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度在好氧和厌氧培养条件下无明显差异,分别为15 mg/mL和23 mg/mL．20 mg/mL的大蒜素对E. faecalis     

L-瓜氨酸与牛血清白蛋白相互作用的研究

采用荧光猝灭法以及紫外吸收差谱法研究了L-瓜氨酸与牛血清白蛋白在不同pH值下的相互作用机制,初步了解到L-瓜氨酸对牛血清白蛋白有猝灭作用,其猝灭机制为静态猝灭。利用Stern-Volmer方程求解出的各种参数表明pH值对两者的结合能力影响较大。同步荧光分析发现L-瓜氨酸的存在没有改变牛血清白蛋白的分子构象,依据Forster非辐射能量转移理论,确定了给体-受体间的结合距离和能量转移效率。     

超声波-微波协同萃取虎杖中大黄素

以大黄素含量为指标对虎杖中有效成分进行了超声波-微波协同萃取。采用正交设计法优化了萃取条件。试验结果表明在超声波功率内置为50 W的仪器条件下影响大黄素萃取的主要因素依次是:乙醇浓度、提取时间、乙醇用量、微波功率。大黄素的最佳萃取条件是:乙醇浓度为90%,乙醇用量为75 mL,提取时间为5 min,微波功率为30 W。正交优化条件下,大黄素得率可达1.26%。萃取效果明显优于传统的溶剂回流方法和超临界流体萃取。     

罗非鱼无乳链球菌LAMP快速检测方法的建立

针对无乳链球菌高度保守的表面免疫相关蛋白基因,采用环介导等温扩增技术(LAMP),设计4条特异性引物,优化反应体系,建立罗非鱼无乳链球菌快速诊断方法.研究结果表明,LAMP方法检测灵敏度达到30 CFU·m L-1,且对2株罗非鱼源无乳链球菌均能扩增出特异性片段,而对14株非无乳链球菌均未扩增出相应片段.建立的LAMP检测方法具有高度的特异性和灵敏性,反应在1 h内完成,为罗非鱼无乳链球菌病的快速诊断提供了一种重要的技术手段.