穿梭油轮新型卧式艏装载系统设计研究

穿梭油轮在现代海洋原油运输中扮演着重要角色,艏装载系统是其核心组成部分之一,在原油串靠外输过程中至关重要。目前,我国海洋原油外输作业多采用船舯软管外输方式,与艏装载系统的船艏输送相比,存在一些局限性。针对南海东部地区船舶使用原油外输艏装载技术所面临的问题,从介绍艏装载系统船艏输送的作业流程出发,通过与国外传统穿梭油轮的艏装载方式相比,提出一种新型卧式艏装载系统布局方案,优化艏装载系统的结构,为穿梭油轮艏装载改造设计提供参考。     

弹性蛋白酶保护因子--Elafin结构基因腺病毒载体穿梭质粒的构建、鉴定及表达

构建能表达弹性蛋白酶保护因子———elafin基因腺病毒表达载体的穿梭质粒,为进一步包装能高效表达结构蛋白的腺病毒载体做准备.以含有elafin基因的真核质粒pEGFP-N1-Elafin为模板,PCR扩增elafin基因,PCR产物以SalⅠ、EcoRⅤ双酶切,定向插入到腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中CMV启动子下游SalⅠ与EcoRⅤ位点之间,获得重组腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV-Elafin,通过SalⅠ及EcoRⅤ双酶切、PCR及插入片段序列测定对该质粒进行鉴定,将pAdTrack-CMV-Elafin转染293细胞,以RT-PCR及Western-Blot检测其在293细胞中的瞬时表达.结果表明:双酶切、PCR及测序鉴定证实,pAdTrack-CMV-Elafin穿梭质粒的插入片段为elafin基因,用pAdTrack-CMV-Elafin穿梭质粒转染293细胞后可见绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR和Western-blotting表明其可在293细胞中瞬时表达.     

大肠杆菌—分枝杆菌启动子探针型穿梭载体pEQ3的构建

报道了大肠杆菌－分枝杆菌启动子探针型穿梭质粒ｐＥＱ３的构建过程。证明其保留了在大肠杆菌和分枝杆菌之间的穿梭功能，并具有启动子筛选功能。利用构建的ＰＥＱ３质粒，从卡介苗染色体中筛选出了具启动子活力的ＤＮＡ片段。     

带有XylE基因的EB病毒穿梭质粒pFD891的构建

构建了一个以EB病毒为基础、以邻苯二酚氧化酶(XylE)基因为靶基因、以潮霉素B邻酸转移酶为转化细胞的选择标记基因的穿梭质粒。这种质粒既能在细菌中复制,又能在真核细胞中自主复制,并有较高的拷贝数,因而能很容易地从真核细胞中分离出来,并可用来研究基因突变和突变类型的形成机制,建立一种化学物质诱变性的分子检测系统。     

穿梭质粒pNBC11的构建及性质研究

质粒 pUB110与 pUC18分别册 EcoRI 酶切,T_4DNA 连接酶进行连接,得到重组质粒 pBC11。琼脂糖凝胶电泳分析,该质粒分子量为4.8×10~6道尔顿。pBC11是一种穿梭质粒,能转化大肠杆菌和枯草杆菌,它对大肠杆菌 C600、JM101的转化率分别为:4×10~5、1.5×10~5转化体/μgDNA.对枯草杆菌 BR151、QB1130的转化率分别为1.5×10~3、2.15×10~3转化体/μgDNA。在基因表达方面,pBC11上的 K_m~r 基因能在大肠杆菌和枯草杆菌中复制和表达,但 pBC11的 Ap~r 基因不能在枯草杆菌中表达。     

三种新的穿梭质粒pCC10、pCCT7和pST16的构建和性质研究

利用大肠杆菌质粒pUC18、pTG206和金黄色葡萄球菌质粒pC194在体外构建3个嵌合质粒pCC10、pCCT7和pST16.3个新质粒均是大肠杆菌和枯草杆菌的穿梭质粒。它们在大肠杆菌中呈Ap~rCm~r型,在枯草杆菌中则为Cm~rAp~5型。其中pCCT7和pST16含有xylE基因,可作为启动子探测质粒。所有的新质粒都具有来自pUC18的多酶克隆位点,适合于在大肠杆菌和枯草杆菌中重组外源DNA以及比较它们的表达情况。     

大肠杆菌-链霉菌-假单胞菌穿梭表达BAC载体的构建

异源表达生理活性物质的生物合成基因簇是药物研发领域的一个重要的方向,它可通过异源表达来研究基因功能,获得目标化合物或对现有的化合物进行结构改造.生物合成基因簇一般较大,常规的DNA载体由于容量不足、拷贝数较低或不能在不同的异源宿主间穿梭表达而难以对其进行操作.本研究运用重组工程策略和常规的克隆手段,将多个异源表达所必须的功能基因克隆至常用的构建BAC文库的载体pECBAC1,获得了一个可在大肠杆菌-链霉菌一假单胞菌3个常见的异源表达宿主间进行穿梭表达的BAC载体.     

新概念无人穿梭艇静水操纵性能

引入一种具有单体半滑行穿浪船型的新概念无人艇——穿梭艇,对其优良的操纵性能进行研究和分析.根据国际海事组织船舶操纵性试验标准,搭建穿梭艇自航模系统,进行标准的自航操纵性试验,获取相关的静水操纵性数据.采用船舶操纵性理论,结合试验数据对穿梭艇的操纵性能进行研究和分析.试验和分析结果表明穿梭艇具有良好的操纵性能和灵活性、独特的操纵性特点和优势.此外,采用数值计算方法,对其独特的操纵性特点进行了理论分析.     

微生物异化还原及其对硝基苯的耦合降解

通过静态实验对地下环境中微生物异化还原降解硝基苯作用及其影响因素进行了研究。结果表明,铁还原微生物能以简单有机物为碳源生长并还原针铁矿,硝基苯可以作为唯一碳源被铁还原微生物利用,随着硝基苯浓度的升高,铁还原微生物的生长逐渐受到抑制,硝基苯浓度为600mg/L时,铁还原微生物的生长停滞。针铁矿浓度0.3mg/L、铁还原微生物浓度2?08cells/mL时耦合体系对硝基苯降解效果最好,硝基苯降解率达78.5%以上。腐植酸能作为电子穿梭体促进耦合体系中硝基苯的衰减,硝基苯降解率达88.8%以上,而维生素B2（VB2）抑制了硝基苯的降解。     

杀虫防菌Bt工程菌的构建

N-乙酰高丝氨酸内酯（N-acyl-homoserine lactones,AHLs）是革兰氏阴性细菌胞间通讯的信号分子,能够调控许多植物病原菌的致病基因的表达,但如果内酯酶将其水解,则会影响病原菌的致病活性,植物就不会染病。苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）,作为生物杀虫剂已有多年使用的历史,本研究通过生物技术手段成功地构建了携带信号分子AHL水解酶基因的穿梭载体pHTss10304,并转入到具有Bt中,构建成工程菌Bt24、工程菌Bt33、工程菌Bt34和工程菌Bt36。通过设计,实现了Bt工程菌的多功能改造,为BT工程菌的应用提供了更为广阔的空间,为生物防治菌的开发现有菌剂提供了新的思路。     

预处理对于不同酵母细胞膜渗透性以及酶促磷酸化合成ATP的影响

酵母用于酶促磷酸化合成ATP主要受酵母细胞膜渗透性限制。显然,不同的预处理对不同菌株酵母细胞膜的渗透性有不同的影响。冷水浸洗的啤酒酵母和日晒干燥的面包酵母,其细胞膜的渗透性稍有提高,酶促磷酸化反应可在细胞内进行。因而可提供固定化细胞的条件,用于工业生产ATP。烘干的面包酵母和冰冻的白酒酵母,其细胞膜的渗透性大幅度增加,致使酶促磷酸化反应既不能在细胞内,也不能在细胞外进行,实验还证明,葡萄糖对白酒酵母细胞中的已糖激酶释放有促进作用,因而可用以提取酶液,或进一步制成固定化酶,工业生产ATP。     

无稀释剂法K-Ar定年的原理及地质应用

年轻火山物质K-Ar定年中Ar的精确测量一直是地质年代学研究的重要课题。在常规K-Ar定年法中,样品外来氩的⁴⁰Ar/³⁶Ar比值被假定为295.5。但研究表明,这种假定在某些情况下,尤其是在年轻样品的测量中受到了限制。一种无稀释剂的测Ar技术已在近年来得到了发展和应用。该方法的优势在于测氩系统不受³⁸Ar稀释剂的混染,利用标准大气的校准可测得样品中的⁴⁰Ar、³⁸Ar和³⁶Ar。考虑火山岩中大气氩分馏造成的影响,利用测得的³⁸Ar/³⁶Ar比值还可以对所测样品中的外来⁴⁰Ar/³⁶Ar比值进一步加以校正,给出精确的放射性成因⁴⁰Ar^*含量计算和K-Ar定年。目前,无稀释剂的K-Ar定年技术在地质上已有广泛应用,并能取得晚第三纪到第四纪可靠的年龄,对地质事件做出合理地解释和重建岩浆活动历史。对无稀释剂法K-Ar定年原理及地质应用的介绍,将为K-Ar年代学应用于研究晚第三纪以来的年轻火山岩提供一种有力的手段和解决途径。     

肥大细胞作用机理及功能研究的新进展

肥大细胞(mast cell)是一类重要的细胞类群,人们对其功能的研究越来越广泛,也越来越精细.本文将综述近年来人们对肥大细胞作用机理进行分子水平研究的主要成果以及肥大细胞新功能的研究概况.     

间质干细胞来源、鉴定、可塑性和应用前景(综述)

间质干细胞(MSCs)存在于骨髓、肌肉、骨、软骨等部位,可分化为中胚层的细胞,如成骨细胞、成软骨细胞、成脂肪细胞等,亦可分化为内胚层、外胚层的细胞,如神经细胞、肝脏细胞、肾脏细胞等,同时由于来源广、易于分离扩增和基因转染,在临床、科研上有很大的潜在应用价值。     

二甲亚砜(MDSO)对血红细胞膜通透性增强作用的研究

通过7230分光光度计,测定不同物质环境情况下的鸡血红细胞溶液的透光率随时间的变化率,得出各物质对鸡血红细胞膜通透性水平。在测试二甲亚砜对甘油和尿素的通透性影响时发现:(1)不同浓度二甲亚砜的影响作用不同;(2)在鸡血中分别人1.1mL,1.8mL 二甲亚砜,可以使红细胞膜对甘油、尿素的通透性在瞬时内明显加强。(3)用纯二甲亚砜先处理则增强作用明显。     

MgO—MgCl2—H2O体系的凝固过程

用X射线衍射和差热分析方法研究MgO、MgCl_2与H_2O的凝结物,摩尔比分别为5:1:13、3:1:11、5:1:11.39和3.75:1:12.25四种配凝体系,在不同凝结时间内的相组成与相含量。两种实验方法的结果表明:不同配比时其凝固过程的相组成不同;5Mg(OH)_2MgCl_28H_2O晶相可以是稳态,也可以是亚稳态,这与配凝体系中有无胶凝物质或其他物质的存在有关。他是强度的主要相。     

阳极支撑型固体氧化物燃料电池电化学数值分析

根据阳极支撑平板型固体氧化物燃料电池(Solid Oxide Fuel Cell,SOFC)的工作原理,建立了SOFC的三维热流电化学模型,研究燃料电池进气方式、进气速率、燃料气组成对其温度场、燃料利用率以及电池性能的影响.结果表明,相比于反向进气方式,采用同向进气,电池温度分布更均匀,热应力更小;适当提高阴极侧空气进气速率会降低电池平均温度和热应力,同时也有利于提高电池功率密度和燃料利用率;增加燃料气的进气摩尔分数,反应速率、系统温度梯度和功率密度随之加大,由于温度梯度的增大最终导致热应力增加.     

Control of malarial invasion by phosphorylation of the host cell membrane cytoskeleton

It has been shown that the entry of the malaria parasite into the red blood cell requires the presence of ATP in the host cell cytoplasm. In red blood cell ghosts that contain no ATP the receptor on the extracellular surface remains in place and parasites will bind to the membrane, but will not enter. ATP is thus necessary for one of the steps in the invasion sequence that follows recognition and attachment. The process of entry appears to involve the active participation of the host cell membrane cytoskeleton. We have suggested that the function of the intracellular ATP may be to regulate phosphorylation of the cytoskeleton. We now present evidence that the activity of the membrane-associated cyclic AMP-independent kinase of the red blood cell is inseparable from invasion; the active substrate may be spectrin.     

大鼠中性氨基酸转运蛋白SNAT1-HA融合蛋白的构建和表达(英文)

Na+偶联的中性氨基酸转运蛋白SNAT1是一种膜蛋白,属于转运蛋白第38家族(SLC38),在中枢神经系统(CNS)中起到重要的生理学作用.为了更容易地检测SNAT1在细胞膜上的表达,以pBK-CMVΔ-SNAT1为模板,用PCR,双酶切和T4连接酶连接的方法在SNAT1的C端加上了一个HA标签蛋白,构建了一个新质粒pBK-CMVΔ-SNAT1-HA.用该质粒瞬时转染人胚胎肾细胞(HEK293T),转染36 h以后,融合蛋白SNAT1-HA可以用HA抗体检测.Western blot结果显示在约54 kDa处有一条特异性条带,与预期分子量大小一致.利用重组质粒pBK-CMVΔ-SNAT1-HA可以更方便地检测到SNAT1在细胞膜上的表达与定位,为进一步研究SNAT1结构与功能奠定了基础.     

Red cell sodium fluxes catalysed by the sodium pump in the absence of K+ and ADP

In the absence of extracellular Na+ or K+, the sodium pump catalyses an ouabain-sensitive "uncoupled" Na+ efflux1-4. With red cell ghosts Glynn and Karlish5 showed that this Na+ efflux is accompanied by ATP hydrolysis and that extracellular sodium ions, at low concentrations, inhibit this efflux as well as the associated ATP hydrolysis. At higher concentrations, extracellular sodium ions restore the hydrolysis of ATP3,6 but it is not known whether there is an associated increase in Na+ efflux and, perhaps, an influx. To answer this question we have used inside-out red cell membrane vesicles which are specially suitable for controlling the composition of the medium at the two membrane surfaces while measuring 22Na+ fluxes in both directions. We report here that the sodium pump can operate in a mode in which influx and efflux of sodium are associated with ATP hydrolysis. This mode is different from the Na-Na exchange described by Garrahan and Glynn7, and Glynn and Hoffman8, which requires ADP as well as ATP9 and is probably associated with ADP-ATP exchage rather than ATP hydrolysis10,11.