长春新碱抗CD20免疫脂质体的制备及其对人B细胞淋巴瘤的靶向特异性杀伤作用研究

目的:利用单克隆抗体药物的靶向特异性,探索常规化疗药物长春新碱的免疫脂质体制剂制备方法.方法:通过逆向蒸发法制备空白脂质体,pH值梯度法包裹长春新碱,抗体修饰脂质体制备免疫脂质体制剂.采用流式细胞技术检测免疫脂质体对人B淋巴瘤细胞的靶向特异性.通过细胞增殖、细胞毒性实验来验证长春新碱免疫脂质体对人B淋巴瘤细胞的杀伤作用.结果:粒径分析表明,制备的空白脂质体平粒径在130nm左右,包裹长春新碱后脂质体平均粒径在140-150nm左右.流式细胞仪检测结果显示,抗CD20免疫脂质体对人B淋巴瘤细胞Romas和Raji细胞具有明显的靶向特异性.细胞增殖、细胞毒性实验表明,包裹长春新碱的抗CD20免疫脂质体较非免疫脂质体对人B淋巴瘤细胞杀伤效果更好.结论:获得了一种具有免疫靶向的长春新碱脂质体制剂的制备方法,初步的体外实验表明其在人B淋巴瘤治疗方向具有潜在的应用前景     

酞菁光敏剂抗小鼠宫颈癌的光动力学实验

探究可溶性酞菁光敏剂五聚赖氨酸-β-羰基酞菁锌对人宫颈癌细胞Hela和荷瘤小鼠的抗肿瘤效果.在670 nm、 1.5 J·cm~(-2)的光照条件下,五聚赖氨酸-β-羰基酞菁锌对人宫颈癌细胞具有明显杀伤作用(半抑制浓度IC_(50)为(30.5±3.1)nmol·L~(-1)),且该光敏剂在肿瘤细胞中的摄取与其孵育时间呈正相关;建立Hela宫颈癌小鼠模型,在670 nm、 30 J·cm~(-2)的激光照射条件下,该光敏剂在低剂量(0.84μg/20 g体质量, 0.3μmol·L~(-1))即对荷瘤小鼠的瘤体具有明显抑制作用;该光敏剂浓度为1.0μmol·L~(-1)时,荷瘤小鼠的瘤体几乎消失.研究为五聚赖氨酸-β-羰基酞菁锌进一步开发应用于临床宫颈癌的治疗提供依据.     

光敏剂与紫外正性抗蚀剂合成工艺的改进

抗蚀剂是由酚醛树脂成膜剂、重氮萘醌光敏剂、添加剂和溶剂四大类组成，为提高集成电路等器件制作的生产量，就要缩短曝光时间，增加抗蚀剂的感光灵敏度，光敏剂的结构及加入量将影响胶的感光性、曝光量、操作宽容度和耐热性等．本文对正性抗蚀剂合成过程中加入光敏剂的效果作一报道，以设计出一条提高其酯化度的工艺路线。     

酞菁光敏剂抗小鼠宫颈癌的光动力学实验研究

探究可溶性酞菁光敏剂——五聚赖氨酸-β-羰基酞菁锌对人宫颈癌细胞Hela和荷瘤小鼠的抗肿瘤效果。结果表明在670 nm、1.5 J·cm-2的光照条件下,五聚赖氨酸-β-羰基酞菁锌对人宫颈癌细胞Hela具有明显杀伤作用（半抑制浓度IC50为30.5±3.1 nmol·L-1）,而且该光敏剂在肿瘤细胞中的摄取与其孵育时间呈正相关;通过建立Hela宫颈癌小鼠模型,在670 nm波长的激光照射条件下（光剂量为30 J·cm-2）,该光敏剂在低剂量（0.84 μg/20 g体重,0.3 μmol·L-1）即对荷瘤小鼠的瘤体具有明显抑制作用;该光敏剂浓度为1.0 μmol·L-1时,荷瘤小鼠的瘤体几乎消失。本研究为五聚赖氨酸-β-羰基酞菁锌进一步开发应用于临床宫颈癌的治疗提供了依据。     

三种金属酞菁光敏剂的光动力作用研究

选取三种不同金属离子、不同取代基的金属酞菁光敏剂 苯硫基酞菁锌 (C56 HmN8 S4Zn)、苯硫基铝酞菁(C56 H32A1C1N8 S4)和烷氧基铝酞菁（C56A1C1N8 O4)，进行了光 敏剂对人肝癌细胞的杀伤实验。结果表明，既亲水又亲脂的取代基可以更好地与癌细胞结合， 有效杀伤癌细胞，具有较好的光动力杀伤效果。     

一种新型太阳能电池菁染料光敏剂的合成及其性能研究

设计合成了Cy3菁染料太阳能电池光敏剂,其结构特点是分子中吲哚环氮原子上的取代基为对羧苄基。本文通过自行合成的染料中间体N-对羧苄基-2,3,3-三甲基-3H-吲哚啉-5-磺酸钾在超声波作用下与原甲酸三乙酯缩合制备得到了该染料。结果表明,超声波法具有反应时间短、温度低和收率高等优点;探讨了3种洗脱剂对产品的柱分离效果,其中异丙醇∶水=5∶1效果最佳;分析测试了Cy3菁染料的光谱性能,在水溶液中Cy3的最大紫外-可见吸收波长为551 nm,最大荧光发射波长为565 nm;与其相比,在-环糊精水溶液中,最大吸收和荧光发射波长不变,荧光发射强度有所增加。     

抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体的制备研究

从影响融合率的2个主要因素探讨骨髓瘤细胞系Sp2/0细胞与黄曲霉毒素B_1免疫的脾细胞融合的最佳条件,使融合率达到100%.经筛选和克隆化,获得3株稳定分泌单克隆抗体的细胞株,分别命名为3B3、3H9、5G9.经过鉴定3株均为IgG_1亚类.其中3B3抗体与其他黄曲霉毒素几乎不发生交叉反应,腹水效价为1∶2×10~5,亲和力常数为3.1×10~7 L/mol,竞争性ELISA测出3B3抗体的最低反应浓度为0.05μg/L标准AFB_1样品的的回收率达96%.另外两株腹水抗体水平低,交叉反应强烈,腹水效价仅在1∶10~4数量级.     

超声激活血卟啉对SW-480癌细胞的杀伤作用

采用1．1MHz,0．9W／cm^2低强度超声,结合血卟啉对体外培养的人肿瘤细胞SW—480进行声照处理,通过噻唑蓝(MTT)法、PI,HO双荧光染色等方法,根据癌细胞形态结构和功能的变化,探讨超声激活血卟啉对肿瘤细胞的杀伤作用。结果表明：血卟啉对癌细胞无明显的损伤,超声加血卟啉处理30s是引起SW—480细胞受损的敏感位点,90s为杀伤癌细胞的优选时间段;杀伤作用呈癌细胞显微结构逐步破坏的变化,并随声照时间的延长而加剧;声照时间在30s至90s区间细胞具有明显凋亡特征,提示超声激活血卟啉杀伤癌细胞机制中可能存在诱导肿瘤细胞凋亡的作用。     

用脾内免疫法制备抗人尿激酶单克隆抗体

用常规免疫法制备抗人尿激酶单克隆抗体费时、费样品。本文采用脾内直接注射的免疫方法,利用杂交瘤技术制备了3C_6抗尿激酶单克隆抗体,3C_6单克隆抗体属IgM亚类,主要识别MW 54,000的高分子量尿激酶和MW 33,000的低分子量尿激酶。3C_6单克隆抗体与结构类似的胰蛋白酶和纤溶酶原无交叉反应,与胰凝乳蛋白酶原和胰凝乳蛋白酶有一定程度的交叉反应。     

DNA免疫制备抗人CD154单克隆抗体及其轻链可变区基因序列分析

采用pcDNA3 1 hCD15 4重组质粒DNA免疫BALB c小鼠 ,制备抗人CD15 4单克隆抗体 ,得到了能分泌针对人T细胞表面CD15 4分子的特异性单抗的杂交瘤细胞株 (7E8)。通过RT_PCR扩增 7E8单抗轻链可变区基因 ,并对其进行克隆、测序、DNA序列分析和氨基酸推导 ,结果显示轻链可变区基因和氨基酸序列完全符合小鼠Ig轻链的结构特征 ,为制备基因工程抗体并应用于临床打下了基础。     

温和气单胞菌单克隆抗体的制备及特性分析

利用细胞融合技术建立了5株分泌抗温和气单胞菌CR79-1-1株单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞系,通过特异性鉴定获得两株与参考菌株中的温和气单胞菌发生反应,但与嗜水气单胞菌以及鳗弧菌、爱德华氏菌、克鲁氏耶尔森菌、大肠杆菌、荧光假单胞菌均不反应的杂交瘤细胞系,分别命名为2G3和1A4.快速酶联免疫分析法(ELISA)测得2G3和1A4的亲和常数分别为1.72×108和5×108M-1;应用方阵配对实验证实,2株单抗针对特异性抗原上不同表位.     

铁路车站设施建设与旅客游憩活动——以上海站和杭州东站为例

通过对铁路上海站和杭州东站的实地考察，以及问卷调查分析，着重探讨铁路车站设施现状与旅客游憩活动的需求关系，为进一步研究铁路车站旅游功能与模式的开发提供参考     

抗甲胎蛋白单克隆抗体的研制及其在免疫组化中的应用

以高纯AFP为抗原,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞和小鼠SP2/0 Ag14骨髓瘤细胞融 合,经2次亚克隆,建立5株稳定分泌抗AFP特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。应用经纯化 的该单克隆抗体进行了原发性肝癌组织切片的免疫组织化学实验,结果显示全部5种抗AFP单 克隆抗体对肝癌亚细胞组分均呈现特异性结合。表明已筛选出适于制作甲胎蛋白临床诊断试 剂盒所需的特异性单克隆抗体。     

ELISA定量测定单克隆抗体方法改进

本文介绍了以亲和层析纯化的免抗鼠IgG类抗体及其酶标物作为捕获及检测抗体进行鼠杂交瘤培养上清及腹水中IgG类单克隆抗体的ELISA定量测定方法。结果表明:小牛血清(BS)、免血清(RS)、马血滑(HS)、人血清(HuS)及非抗体产生细胞的培养上清对本项εLISA实验无干扰,使测定的结果较可靠,测定的鼠IgG各亚类的标准曲线的线性范围均在5～100ng/ml之间,因此这个快速、可靠的方法可为鼠IgG类单克隆抗体的定量测定提供一种实用的手段。     

抗人癌胚抗原单克隆抗体的研制及其在免疫组化中的应用

以高纯CEA为抗原,免疫BALB／c小鼠．取其脾细胞和小鼠SP2／0-Ag14骨髓瘤细胞融合．经2次亚克隆。建立3株稳定分泌抗CEA特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。应用经纯化的该单克隆抗体进行了结肠癌组织切片的免疫组织化学实验．结果显示全部3种抗CEA单克隆抗体对结肠癌亚细胞组分均呈现特异性结合。表明已筛选出适于制作癌胚抗原临床诊断试剂盒所需的特异性单克隆抗体。     

缩酮制备方法的改进

缩酮是一类重要的有机化合物.前人对缩酮反应的研究很多,所采用的催化剂大多数是质子酸。2,2-二甲基-4-羟甲基-1,3-二氧戊环是链状酮缩合的代表物,其制备方法的研究具有典型意义。Fischer对该化合物的合成做了多次的改进。本文使用铁盐及负载催化剂,对该化合物的制备反应进行了研究,不仅提高了产率,而且简化了实验操作。将其用于环状酮缩合代表物——螺环-1,4-二氧癸烷的制备,也取得了良好结果。     

糖基-羧基酞菁锌偶联衍生物的合成及相关性质

以碳酸钾为催化剂分别将1（4）,8（11）,15（18）,22（25）－四（4－羧基苯氧基）酞菁锌（1）和卜（4-羧基苯氧基）酞菁锌（2）与溴代乙酰糖基（乳糖、麦芽糖和葡萄糖）偶联,得到5种糖基酞菁偶联衍生物,IR,MS和UV—Vis光谱证实羧基酞菁与糖基成功偶联．糖基过量时,由1主要获得糖基二取代产物．溶解性和稳定性研究表明：5种偶联衍生物易溶或可溶于DMF、丙酮、THF、氯仿和甲醇中,不溶于水,它们在DMF中避光均能稳定存在．在DMF、丙酮、THF、甲醇和氯仿中它们显示相似的酞菁单体的电子吸收光谱,在体积分数O．1％DMF的水中出现聚集,这些体系中的Q带特征吸收峰位于670～690nm;在DMF和含O．1％DMF的水中的荧光量子产率分别为0．358－0．721与0．121～O．198,为原酞菁（1和2）的2～3倍和3～5倍．     

低强度超声激活血卟啉对S180细胞的杀伤作用

为探讨低强度超声激活血卟啉对在体S180肉瘤细胞的杀伤作用，对荷瘤小鼠采用声动力疗法处理，分别从癌组织生长状况、显微结构及超微结构等方面进行研究。结果表明：超声激活血卟啉对肿瘤生长的抑制作用明显大于其他实验组，癌细胞在处理后的不同时间段，其显微结构及超微结构均表现出不同程度的损伤。     

葡萄糖酶电极的制备和测试

以自制的铂电极为基础,制备了葡萄糖酶电极,并测试了淀粉-糖化酶水解液中的葡萄糖,测定的范围为2×10~(-6)～5×10~(-3)mol/L。