加热对血管平滑肌细胞的影响实验研究

 为支架磁感应热疗预防和治疗PTCA术后血管再狭窄提供基础研究数据,对临床常用的316L型不锈钢冠脉支架进行磁感应诱导升温,探讨加热对兔血管平滑肌细胞（VSMCs）的增殖、迁移、凋亡及周期的影响。将平滑肌细胞置于恒温水浴槽中,待其达到预定温度（43、47℃）后持续10min,观察细胞形态变化,采用MTT法检测加热对血管平滑肌细胞增殖活性的影响,流式细胞术检测VSMC细胞周期和细胞凋亡,划痕实验检测加热对细胞迁移能力的影响,免疫细胞化学法检测不同温度作用后血管平滑肌细胞中增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。结果发现,支架在交变磁场下可以升温至热疗所需温度,加热后细胞增殖受到了显著抑制,43℃组细胞存活率为（83.23±2.87）%,47℃组细胞存活率仅为（37.58±0.78）%。细胞的凋亡率显著增加,47℃组细胞凋亡率为（87.37±2.95）%,与对照组相比具有极显著差异,而43℃组的凋亡率为（6.00±0.26）%,与对照组相比无统计学差异。细胞周期也受到抑制,被阻滞在S期。加热后随着时间的推移,47℃组细胞的迁移能力受到显著抑制,而加热对43℃组细胞的迁移能力无显著影响。免疫细胞化学检测显示,随着温度的升高,PCNA的表达受到明显抑制。研究表明,临床常用冠脉支架在交变磁场下升温可行。加热显著抑制了细胞的增殖并促进了细胞凋亡,使细胞周期阻滞在S期,且抑制了细胞的迁移。加热能显著抑制细胞PCNA的表达,这些可能是加热抑制细胞增殖和迁移、促进凋亡的机制之一。     

血管成形术后内膜增生的分子生物学机制

以经皮腔内冠状动脉成形术(PTCA)、冠脉内支架术(Stenting)为主体的介入治疗已成为冠心病的重要治疗手段。但术后血管再狭窄发生率较高影响了其远期疗效。因而，防止再狭窄一直是国内外研究的重要课题。冠脉介入术均有一共同的病理变化过程：术中对血管内膜甚至中膜造成一定损伤，血管内皮细胞的完整性受到破坏，在此基础上术后出现内膜增生是再狭窄形成的重要环节。关于内膜增生的机制，国内外学者研究较多，特别是近年来在分子水平上的研究成果，为今后如何在分子水平防治再狭窄提供了理论基础。下面就血管成形术后内膜增生的分子生物学机制作一综述。     

同型半胱氨酸与心血管疾病

目的 :综述HCY致心血管疾病的发病机制和与动脉粥样硬化、冠心病的关系。方法 :光盘检索有关文献 ,归纳综合整理。结果 :同型半胱氨酸是心血管疾病的一个独立的危险因素 ,它能够通过损伤内皮细胞、促进血管平滑肌细胞的增殖、促使血小板受损以及作为一种基因毒性等方式引起心血管疾病的发生。结论 :心血管疾病的发生是多因素综合作用的结果     

QKI对血管平滑肌细胞增殖的抑制功能

观察QKI蛋白对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响,进一步完善血管平滑肌细胞增殖的相关机制.以大鼠的原代主动脉平滑肌细胞为研究对象,观察分别过表达QKI5、QKI6对血清促增殖作用的影响.细胞增殖采用MTT法和Western blot测定.结果血清可促进大鼠的原代主动脉平滑肌细胞增殖,过表达QKI可抑制血清刺激的血管平滑肌细胞的增殖.说明过表达QKI对血清刺激的血管平滑肌细胞增殖具有抑制作用,该作用有可能在一定程度上能够抑制高血压等病伴发的血管平滑肌增殖.     

清热解毒药对血管平滑肌细胞增殖、细胞周期的影响

目的 :观察清热解毒药双花、公英、虎杖、连翘对血管平滑肌细胞生长、贴壁和增殖抑制作用 ,并从对细胞周期的影响角度分析它们的作用机制。方法 :采用细胞计数、MTT法和流式细胞技术。结果 :双花、公英、虎杖、连翘对h PDGF B/B刺激下的平滑肌细胞生长和贴壁均有抑制作用。对平滑肌细胞增殖抑制率分别达 9.2 6%～ 77.35% ,7.78%～ 62 .65% ,5.88%～ 47.81 % ,3.98%～ 33.35% ,其增殖抑制作用呈量效时效关系。通过对细胞周期分析知道 ,双花、公英、虎杖均可以减少 S期 ,增加 G0 /G1期细胞数目。结论 :清热解毒药双花、公英、虎杖、连翘对平滑肌细胞生长及增殖有抑制作用 ,其作用机制可能是通过抑制 DNA合成 ,减少进入 S期细胞数目 ,使细胞增殖停留在 G0 /G1期来实现的     

左旋精氨酸对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖和血管内皮生长因子表达的的影响

观察左旋精氨酸(L-Arg)对大鼠主动脉平滑肌细胞一氧化氮(NO)含量,细胞增殖以及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨其发生机制。原代培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞分为2组,对照组和L-Arg组。各组培养24 h后检测NO、XTT、VEGFmRNA。L-Arg组NO释放量,VEGF表达量远远高于对照组(P<0.01),但XTT显示细胞增殖活性明显下降(P<0.01)。L-Arg可有效抑制血管平滑肌细胞的增殖、增加NO、VEGF的表达,其机制可能与NO的作用,以及NO与VEGF之间的相互调控有关。     

水溶性壳聚糖对血管平滑肌细胞增殖的影响

通过化学方法测定了水溶性壳聚糖(water-solubility chitosan,WSC)的部分理化性质;通过原代分离培养大鼠腹主动脉平滑肌细胞和MTT实验,研究了1,10,100和1000μg/mL的WSC对血管平滑肌细胞的增殖作用.实验结果表明,WSC溶解度为125,含水量13.19%,脱乙酰度54.73%,重均相对分子质量1.17×105.在24h和48h时,大于10μg/mL的WSC可抑制原代培养的血管平滑肌细胞的增殖.其中,100和1000μg/mL的WSC在48h时对细胞的增殖的抑制作用最明显,表明在一定条件下,WSC可抑制血管平滑肌细胞增殖,减轻由血管平滑肌细胞增殖所引起的血管狭窄问题.     

白介素-10对TNF-α介导血管平滑肌细胞增殖的影响

观察重组人白介素 10 (rhIL_10 )对肿瘤坏死因子 (TNF_α)刺激的离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响。体外培养SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞 ,采用MTS PES法确定血管平滑肌细胞的增殖状态。结果显示 ,TNF_α对血管平滑肌细胞增殖具有明显的刺激作用。rhIL_10单独应用对血管平滑肌细胞生长没有影响。在TNF_α刺激下 ,低至 10ng mL的rhIL_10可明显抑制血管平滑肌细胞的生长 (P <0 0 5 )。     

重组诱导型一氧化氮合酶基因转染血管平滑肌细胞及对其增殖的影响

探讨重组诱导型一氧化氮合酶基因转染血管平滑肌细胞及产生的一氧化氮对血管平滑肌细胞增殖的影响。将诱导型一氧化氮合酶基因通过真核表达载体转入血管平滑肌细胞中 ,用Griess法测定转染细胞生成的一氧化氮的量。观察转染后平滑肌细胞生长状态情况 ,用流式细胞仪分析细胞周期的变化。结果正常细胞组NO的含量为78.4 4± 1 5 .38,而iNOS转染组NO含量为 2 36 .5 7± 31 .83,两组相比有非常显著差异 (P =0 .0 0 0 ,n =6 ) ,血管平滑肌细胞转染后生成一氧化氮。转染后的平滑肌细胞生长明显受到抑制 ,主要抑制平滑肌细胞周期G1 S期的过渡 ,使细胞停留在G1期。说明血管平滑肌细胞可以成功转染iNOS基因 ,生成的一氧化氮可明显抑制平滑肌细胞的增殖 ,为从血管非内皮成分进行iNOS基因转染提供了实验研究的依据     

新型雌激素受体GPR30抑制子宫肌瘤平滑肌细胞的增殖

子宫肌瘤是女性生殖器最常见的一种良性肿瘤,是由子宫平滑肌细胞异常增殖形成的,故又称为子宫平滑肌瘤.GPR30是新型雌激素偶联G蛋白受体,在乳腺癌的发生发展中起到重要作用,但是在子宫肌瘤疾病中的作用未见报道.对取自临床病人样本的子宫肌瘤和周边正常子宫肌组织,分离其平滑肌细胞,通过应用Western blot、real-time PCR(RT-qPCR)、免疫荧光等技术,验证GPR30对其增殖的影响.结果表明,在子宫肌瘤组织和子宫肌瘤平滑肌细胞中,GPR30的mRNA和蛋白的表达水平显著高于周边的正常子宫肌组织和子宫肌平滑肌细胞.在子宫肌瘤平滑肌细胞中,GPR30的特异性激动剂G-1,可以激活表皮生长因子受体EGFR,抑制细胞的增殖.这为子宫肌瘤的研究与治疗提供了新视角,具有重要的理论和实际意义.     

Deletion polymorphism in the gene for angiotensin-converting enzyme is a potent risk factor for myocardial infarction.

Factors involved in the pathogenesis of atherosclerosis, thrombosis and vasoconstriction contribute to the development of coronary heart disease. In a study comparing patients after myocardial infarction with controls, we have explored a possible association between coronary heart disease and a variation found in the gene encoding angiotensin-converting enzyme (ACE). The polymorphism ACE/ID is strongly associated with the level of circulating enzyme. This enzyme plays a key role in the production of angiotensin II and in the catabolism of bradykinin, two peptides involved in the modulation of vascular tone and in the proliferation of smooth muscle cells. Here we report that the DD genotype, which is associated with higher levels of circulating ACE than the ID and II genotypes, is significantly more frequent in patients with myocardial infarction (n = 610) than in controls (n = 733) (P = 0.007), especially among subjects with low body-mass index and low plasma levels of ApoB (P < 0.0001). The ACE/ID polymorphism seems to be a potent risk factor of coronary heart disease in subjects formerly considered to be at low risk according to common criteria.     

纯阳子对动脉损伤后内膜增生的抑制作用研究

为寻找防治PTCA术后再狭窄的药物治疗途径，以火棘植物果实纯阳子干预动物，观察球囊拖伤兔髂和腹主动脉内皮后内膜增生的程度，并与非用药组对照观察。研究结果表明，纯阳子对防治PTCA术后再狭窄有一定价值。     

Thymosin beta4 induces adult epicardial progenitor mobilization and neovascularization

Cardiac failure has a principal underlying aetiology of ischaemic damage arising from vascular insufficiency. Molecules that regulate collateral growth in the ischaemic heart also regulate coronary vasculature formation during embryogenesis. Here we identify thymosin beta4 (Tbeta4) as essential for all aspects of coronary vessel development in mice, and demonstrate that Tbeta4 stimulates significant outgrowth from quiescent adult epicardial explants, restoring pluripotency and triggering differentiation of fibroblasts, smooth muscle cells and endothelial cells. Tbeta4 knockdown in the heart is accompanied by significant reduction in the pro-angiogenic cleavage product N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline (AcSDKP). Although injection of AcSDKP was unable to rescue Tbeta4 mutant hearts, it significantly enhanced endothelial cell differentiation from adult epicardially derived precursor cells. This study identifies Tbeta4 and AcSDKP as potent stimulators of coronary vasculogenesis and angiogenesis, and reveals Tbeta4-induced adult epicardial cells as a viable source of vascular progenitors for continued renewal of regressed vessels at low basal level or sustained neovascularization following cardiac injury.     

Cytochrome P450 2C is an EDHF synthase in coronary arteries.

In most arterial beds a significant endothelium-dependent dilation to various stimuli persists even after inhibition of nitric oxide synthase and cyclo-oxygenase. This dilator response is preceded by an endothelium-dependent hyperpolarization of vascular smooth muscle cells, which is sensitive to a combination of the calcium-dependent potassium-channel inhibitors charybdotoxin and apamin, and is assumed to be mediated by an unidentified endothelium-derived hyperpolarizing factor (EDHF). Here we show that the induction of cytochrome P450 (CYP) 2C8/34 in native porcine coronary artery endothelial cells by beta-naphthoflavone enhances the formation of 11,12-epoxyeicosatrienoic acid, as well as EDHF-mediated hyperpolarization and relaxation. Transfection of coronary arteries with CYP 2C8/34 antisense oligonucleotides results in decreased levels of CYP 2C and attenuates EDHF-mediated vascular responses. Thus, a CYP-epoxygenase product is an essential component of EDHF-mediated relaxation in the porcine coronary artery, and CYP 2C8/34 fulfils the criteria for the coronary EDHF synthase.     

Inhibition Mechanism of Emodin on Rabbit Vascular Smooth Muscle Cells Proliferation

ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎＥｍｏｄｉｎｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓ[1] ,ｗｈｉｃｈｅｘｉｓｔｓｉｎｍａｎｙｍｅｄｉｃａｌｐｌａｎｔｓｓｕｃｈａｓｒａｄｉｘ ｐｏｌｙｇｏｎｉｍｕｌｔｉｆｌｏｒｉ,ｒｈｉｚｏｍａｐｏｌｙｇｏｎｉ,ｅｔｃ .Ｅｍｏｄｉｎｉｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｍｅｄｉｃｉｎｅ .Ｉｔｈａｓｍａｎｙｂｉｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｓｕｃｈａｓａｎｔｉ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ,ｄｅｃｒｅａｓｉｎｇｂｌｏｏｄｌｉｐｉｄｓｃｏｎｔｅｎｔ ,ｅ…     

冠状动脉平滑肌细胞和内皮细胞膜电位对冠状动脉血管紧张性的影响

冠状动脉平滑肌细胞和内皮细胞的膜电位对冠状动脉血管紧张性的调节具有极其重要的意义.平滑肌细胞和(或)内皮细胞的超极化可导致冠状动脉舒张,平滑肌细胞和(或)内皮细胞的去极化可导致冠状动脉收缩.各种不同因素刺激平滑肌细胞和(或)内皮细胞可使它们产生超极化或去极化的反应从而导致冠状动脉血管舒张或收缩.掌握这一机制可以在临床治疗当中很好的控制患者的冠状动脉血流.     

同型半胱氨酸、超敏C反应蛋白与2型糖尿病合并高血压、冠心病关系的研究

目的探讨血浆同型半胱氨酸、超敏C反应蛋白水平与2型糖尿病合并高血压、冠心病的关系。方法将113例2型糖尿病患者依病情分为3组,即单纯2型糖尿病组45例（A组）。2型糖尿病合并高血压组38例（B组）,2型糖尿病合并冠心病组30例（c组）,以38例体检健康者为对照组。测定各组空腹同型半胱氨酸、超敏C反应蛋白水平。结果与正常对照组相比．3组2型糖尿病患者的平均同型半胱氨酸、超敏c反应蛋白水平升高,差异有统计学意义（P〈0．05）;2型糖尿病患者3组中,B组同型半胱氨酸、超敏C反应蛋白水平高于A组,差异有统计学意义（p〈0．05）;c组同型半胱氨酸、超敏C反应蛋白水平高于B组,且差异有统计学意义（P〈0．01）;同型半胱氨酸和超敏C反应蛋白水平无相关性。结论2型糖尿病合并高血压、冠心病时,同型半胱氨酸、超敏c反应蛋白水平显著升高;高同型半胱氨酸、超敏C反应蛋白是2型糖尿病发生血管病变的重要危险因素。