试述鲍类前合子生殖隔离

生殖隔离是一个最重要的生物过程。虽然有许多机理还是未知的,但已研究清楚了物种之间的生殖隔离有两种方式。即通过配子不成熟、不受精的前合子生殖隔离和杂交后代的不育、不成活的后合子生殖隔离。在动物受精过程中,两个配子的质膜在接触融合之前,精子必须穿透包绕在卵细胞外的物质,为完成这一过程,大多数种类的动物都发展了精子结构,使其带有顶体泡,它通过泡吐作用释放具有溶解作用的蛋白质,由它担任穿透卵细胞外被的作用。成熟的鲍精子具有发达的顶体泡,里面含有多种蛋白质,但其中的两种蛋白质－细胞溶素（16kDa）和18kDa蛋白质与生殖有关,是生殖隔离的主要分子结构。当精子粘附到卵黄外膜上时就诱发了顶体反应,释放的16kDa蛋白质利用非酶解反应,在卵黄膜上穿一个小孔,精细胞便从此处穿过卵黄膜与卵细胞融合。鲍类的卵细胞由一层又厚又复杂的细胞外基质包被,并由胶状物、卵黄膜和细胞表面壳等几种成分组成。超微结构研究发现：胶状物位于卵细胞的最外层,由疏松排列的纤维组成,它在鲍类受精中的作用还没有研究不禁。鲍类的ESC层与海胆的卵黄膜十分相似,含有精子结合受体,它是不分支的糖蛋白,同同细胞溶素结合的惟一成分,它具有种属特异性。每个受体大约同60个细胞溶素结合。所以种间受精的抑制因素也许并不只有卵黄膜与溶解蛋白的反应,还可能有精子对ESC层的粘接作用。     

披针新月蕨的配子体发育及卵发生

采用显微观察技术对披针新月蕨（Pronephrium penangianum）的配子体发育和卵发生进行了研究.结果表明：披针新月蕨孢子褐色，二面型，接种后约12 d，孢子萌发，经丝状体和片状体阶段，发育成原叶体，孢子萌发是书带蕨型（Vittaria-type），原叶体发育是槲蕨型（Drynaria-type），成熟原叶体是心形，接种46 d后产生颈卵器和精子器.披针新月蕨的颈卵器起源于原叶体生长点下方的原始细胞.原始细胞经过2次不等分裂，形成3个细胞，分别是顶细胞、初生细胞和基细胞.其中，初生细胞不等分裂，形成中央细胞和颈沟细胞.随后，中央细胞不等分裂形成腹沟细胞和卵细胞.随着卵细胞成熟，颈沟细胞和腹沟细胞逐渐退化，但腹沟细胞通过孔区与卵细胞相连.卵细胞成熟后，细胞上表面具有明显的卵膜，中央具有受精孔.本研究对于完善蕨类植物生殖生物学和探讨蕨类植物的演化具有重要意义.     

动物卵母细胞透明带与受精的关系

阐述对哺乳动物卵母细胞透明带（ZP）在卵母细胞受精过程中的作用,指出卵母细胞ZP厚度、弹性、显微结构及理化结构是影响卵子受精过程的重要因素。     

同型孢子蕨类植物卵发生和受精作用的细胞学研究新进展

阐述了同型孢子蕨类植物有性生殖研究中卵发生和受精作用研究的一些新进展,包括颈卵器的形成、卵发育和受精作用3个方面．研究表明颈卵器来自于配子体生长点下方的原始细胞,其细胞质浓,核较大,位于细胞中央,原始细胞经2次分裂产生3层细胞,中间的为初生细胞,初生细胞经2次不等分裂形成1个卵细胞、1个腹沟细胞和1个双核颈沟细胞．卵成熟时,先后在卵细胞外产生分离腔和卵膜,进化的种类卵膜上形成了受精孔,首次证明腹沟细胞参与了受精孔的发生．受精作用研究表明精子是经受精孔钻入卵细胞的,受精时卵细胞剧烈地收缩和产生大的囊泡封阻受精孔可能是阻止多精受精的主要原因,接下来,受精卵经历核融合、雄细胞器的消化,合子细胞器的重排,质膜和细胞壁重建等过程,最终形成功能性合子．     

小鼠附睾精子的显微受精

目的：建立显微受精的方法,并探讨小鼠附睾精子在显微注射进入卵母细胞后的受精能力。方法：用显微注射法把小鼠附睾头和附睾尾精子注入卵母细胞的胞质内或卵周隙进行显微受精。结果：把单个附睾尾精子注入卵细胞质中,培养后１４个存活的卵细胞中,有５个卵裂为２－细胞期胚胎;将单个附睾头精子注入卵母细胞中,有２５个存活,其中９个受精发育为２－细胞期胚胎;将附睾尾精子注入卵周隙进行带下受精,３０个存活的卵细胞中有４个     

动物卵细胞在受精时的电变化与皮质结构变化

成熟的动物卵细胞内部含有受精后胚胎发育的必要物质,处于代谢的抑制状态。受精可以使它迅速从抑制状态解脱出来开始个体的发育。家兔卵在输卵管内受精寿命约6小时[1];在鱼和两栖动物,卵排出后的受精寿命只有数秒至数分钟[2];一般动物卵的受精寿命不超过24小时,人类约为6～24小时[3][4]。受精时卵细胞激活会迅速产生大量的各种变化,其中最早的变化是发生在卵细胞膜上的电变化和结构变化。深入研究卵细胞受精时的各种变化特点及其机制,不仅具有理论意义,而且对于人工受精、人工繁殖以及积极有效地控制生育也具有不可估量的实践意义。本文仅就卵细胞受精时的电变化与皮质结构变化两个方面迄今为止的一些研究成果作一概述。     

哺乳动物有性与无性生殖的实验胚胎学研究

近50年来，发育生物学和生殖生物学领域出现了两大突出进展，震撼了生物学界和整个世界。一是哺乳动物精子获能的发现而创建了试管动物和试管婴儿技术，它标志着人们对生殖生理和生殖控制的完善；二是以卵子为受体的克隆动物的诞生，使哺乳动物体细胞克隆成为可能，这标志着人类对生殖和发育机制的发挥和创新，并为人类干预生殖和发育开拓了广阔前景。虽然受精生物学与动物克隆是研究生命启动奥秘的一门学科，已成为生命科学研究的核心之一，但是还有诸多问题亟待发掘并需要深入研究。本文主要从以下两方面介绍20年来在该领域研究中取得的进展与成果：（1） 动物有性生殖研究方面侧重介绍受精机理和显微受精的研究成果；（2） 动物无性生殖研究方面重点介绍克隆牛及其基础研究的进展。     

肾蕨颈卵器中轴列细胞发育的超微结构研究

利用电子显微镜对肾蕨颈卵器中的中轴列细胞发育进行了超微结构的研究．肾蕨颈卵器中轴列细胞由1个卵细胞、1个腹沟细胞和4个颈沟细胞组成．其中卵细胞是中轴列细胞中最重要的细胞．卯细胞在刚刚形成时,细胞核椭圆形,核仁明显,细胞中细胞器丰富,随着卵细胞的发育,卵细胞与周围细胞间形成分离腔,并在表面出现附加膜,同时核伸长呈新月形,形成核外折的结构．本文重点报道了卵细胞发育过程中附加膜、分离腔的形成以及细胞核和细胞器的形态与分布的变化,同时探讨了卵细胞的结构变化在受精过程中的重要作用．     

龟足（Pollicipes mitella）的胚胎发育

本文详细描述了龟足（Ｐｏｌｌｉｃｉｐｅｓｍｉｔｅｌｌａｌｉｎｎａｅｕｓ１７５８）从受精卵至孵化成无节幼虫的发育过程。卵细胞的两次成熟分裂是在受精后才先后完成，卵裂为螺旋形卵裂，若水温为２９～３１℃，从受精至孵化约需８～１５天。     

攀枝花苏铁（CycasPanzhihuaensisL.ZhouetS.Y.Yang）受 …

报道了Ｃ．ｐａｎｚｈｉｈｕｎｅｎｓｉｓ的受精作用,胚生和分化。人工授粉１５ｄ后,颈卵器开始发育,７月底到８月中旬受精作用发生,受精过程有三种情况：即球形精细胞或蠕虫状精子从卵顶部进入卵细胞内,纤毛胎发生经历较长的游离核原胚阶段。     

植物糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白LORELEI家族研究进展

植物LORELEI （LRE）蛋白家族是植物糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白（GPI-AP）亚家族的一种,在拟南芥中有4个成员,分别为LRE,LRE-like GPI-AP 1（LLG1）,LLG2和LLG3。这些成员在植物体内的表达位置和功能不同。LRE主要在雌配子体的助细胞、卵细胞和中央细胞表达,在助细胞中表达量最高,另外在受精卵与胚乳中也有部分表达。LRE主要参与高等植物的双受精作用,介导花粉管接受并调控胚胎的早期发育。LLG1在植物各组织器官中都有表达,在营养器官（根和叶）中表达水平最高,主要调控植物生长发育（如根与根毛生长）、盐逆境应答,以及免疫应答过程。LLG2和LLG3主要在成熟花粉粒和花粉管中表达,调控花粉管生长与爆裂,释放精子完成双受精作用。该文综述了植物LRE家族成员组成、蛋白质特征,及其在植物生长发育与逆境应答过程中的作用。     

芒苞草(Acanthochlamys bracteata P.C.kao)形态学和胚胎学研究 Ⅲ.双受精,胚乳发育和胚胎发生的研究

芒苞草(Acanthochlamys bracteata)为珠孔受精,进人胚囊的二个精子分别与卵细胞和中央细胞的次生核进行正常的双受精,其受精作用属有丝分裂前型.受精后的初生胚乳核立即分裂,其发育方式为核型。合子休眠期较长,胚胎发育过程中基细胞有两种分裂方式。也观察了在以上发育过程中蛋白质与淀粉粒的积累与消失。     

攀枝花苏铁（Cycas Panzhihuaensis L．Zhou et S．Y．Yang）受精作用及胚胎发生的研究

报道了C .panzhihuaensis的受精作用 ,胚胎发生和分化 .人工授粉 15d后 ,颈卵器开始发育 ,7月底到 8月中旬受精作用发生 ,受精过程有三种情况 :即球形精细胞或蠕虫状精子从卵顶部进入卵细胞内 ,纤毛带遗弃在颈卵器室中 ,或具纤毛带的精细胞进入卵中 ,纤毛带遗弃在卵细胞质内 ,精卵核融合 .胚胎发生经历较长的游离核原胚阶段 ,游离核原胚形成细胞后 ,幼胚开始分化 .受精后的雌配子体发育成胚乳 .成熟的胚由子叶 (二片 )、胚芽、胚根、胚根鞘及螺旋折叠的胚柄组成     

动物卵母细胞透明带与受精的关系

阐述对哺乳动物卵母细胞透明带(ZP)在卵母细胞受精过程中的作用,指出卵母细胞ZP厚度、弹性、显微结构及理化结构是影响卵子受精过程的重要因素。     

紫贻贝配子细胞表面糖基的定位研究

细胞表面糖蛋白中糖的特性对于细胞的相互识别起重要作用,配子细胞表面糖配基的差异恰恰体现不同物种间受精作用的特异性,本研究分别选用可以特异性结合半乳糖、葡萄糖、甘露糖、岩藻糖的FITC标记凝集素,对紫贻贝配子细胞中对应的糖进行研究。结果显示,4种糖在卵细胞边缘的标记特征不明显,仅半乳糖和葡萄糖在一些卵细胞边缘有区域性分布,但在细胞质区,这4种糖均有少量分布;半乳糖和岩藻糖在贻贝的精巢的精细胞和成熟精子区为较均匀的弱阳性标记,甘露糖仅在输精小管边缘有分布,葡萄糖的含量相对较多,但也只是在输精小管边缘以及成熟精子区有一定的标记。上述结果表明,紫贻贝配子细胞表面不同糖基的分布和含量存在一定的差异,造成配子间起到识别作用的糖蛋白组成和结构不同,决定了紫贻贝配子识别的特异性。     

棉花细胞壁蛋白基因分离鉴定与表达分析

棉纤维起源于棉花胚珠外层表皮细胞．研究棉纤维发育,具有重要理论和实践意义．从棉纤维等组织cDNA文库中分离了186个棉花细胞壁结构蛋白基因,按照所编码的蛋白质结构特点,可将这些基因分为三类;富含脯氨酸细胞壁蛋白（Proline—rich cell wall proteins,PRPs）基因、伸展蛋白（Extensins）或者富含羟脯氨酸糖蛋白（Hydroxyproline—rich glycoprotein,HRGP）基因,富含甘氨酸蛋白（Glycine—rich proteins,GRPs）基因．采用cDNA microarray技术,比较上述基因在开花后10天的野生型棉花纤维和无絮无绒（fuzzless—lintless,fl）突变体胚珠表皮中表达谱发现,其中有7个基因在野生型纤维中特异性或高效性表达,表明它们可能与纤维发育有关．     

小鼠子宫内膜LIF基因表达与孕激素的关系研究

白血病抑制因子（LIF）是一种多功能活性的糖蛋白，LIF基因在大多数妊娠第4天的小鼠子宫内膜进行着强烈的表达，然而LIF基因表达调控的机理目前尚不清楚，本实验对130只妊娠4－5d的小鼠LIF基因表达和血清中孕激素水平分别进行了检测，发现12只小鼠（占总数的9．23％）无LIF基因表达，无该基因表达小鼠血清中孕激素水平显著低于其它表达的小鼠。实验结果表明：孕激素可能是LIF基因表达的复杂的调控体系中的一个重要的调控因素。     

蕨雌性生殖器官发育的初步研究

以蕨为实验材料，利用电子显微镜研究颈卵器的发育过程，报道了颈卵器发育过程中各种细胞的超微结构变化，蕨孢子接种后，约28d颈卵器表面原始细胞发生，并很快形成中央细胞，中央细胞分裂形成初生腹细胞和初生沟细胞，初生腹细胞进一步分裂形成卵细胞和腹沟细胞，卵细胞进一步发育，以卵细胞的细胞壁的增厚为标志，颈卵器发育成熟，颈卵器颈部顶端细胞打开，成熟的卵细胞准备受精。     

睾丸生殖细胞瘤易感基因Dnd1互作蛋白质的筛选与鉴定

小鼠睾丸生殖细胞瘤（testicular germ cell tumour,TGCT）易感基因Dnd1属于RNA结合蛋白基因家族成员．Dnd1在进化中具有保守性,Dnd1缺乏导致小鼠原始生殖细胞（primordial germcell,PGC）的丧失、TGCT的发生和部分胚胎死亡,但Dnd1作用机制还未明了．利用酵母双杂交系统,构建小鼠Dnd1基因诱饵载体pDBLeu-Dnd1,筛选10．5d的小鼠胚胎cDNA文库,成功筛选到4个与Dnd1相互作用蛋白,其中之一为原癌基因Jun蛋白;进一步的酵母双杂交实验和GST pull down实验再次确认Dnd1与Jun蛋白之间的相互作用．研究发现Dnd1新的相互作用蛋白,这为探明其信号传导通路及Dnd1致病机制研究建立了基础．     

猪2号染色体MYOD1区域的RH定位和连锁定位

在已经定位的QTL区域中开展基因连锁定位是寻找候选基因的重要途径．运用比较基因组方法筛选出猪2号染色体上生长、胴体和肉质性状QTL区域中与肌肉发育相关的5个基因（MYOD1、LDHA、CSRP3、TEF-1和COPB1）,通过RH和连锁定位方法研究这5个基因的排列顺序和距离,并与人和小鼠基因的顺序进行了比较．结果表明这5个基因在猪2号染色体上的排列顺序和距离是：MYOD1（75．2cM）-LDHA（79cM）-CSRP3（83．8cM）-TEF-1（86．5cM）-COPB1（90cM）,猪与小鼠基因的顺序相同,而与人（TEF-1—COPB1-MYOD1-LDHA—CSRP3）的顺序不一致．本研究结果对于进一步开展这5个基因的功能研究奠定了基础．