濒危植物延龄草愈伤组织诱导研究

通过延龄草愈伤组织诱导研究发现,延龄草根茎所产生的愈伤组织在1/2 MS BA(苄基氨基嘌呤)1.2 mg.L-1 IAA(吲哚乙酸)0.6 mg.L-1培养基中较好,诱导频率为83.33%;在1/2 MS BA 1.2 mg.L-1 IAA 1.2 mg.L-1培养基中次之,诱导频率为66.67%;在1/2 MS BA 1.2 mg.L-1 IAA 0.2 mg.L-1培养基中也能产生,但质地较差,诱导频率为22.22%;在1/2 MS BA 1.2 mg.L-1 NAA(萘乙酸)0.2mg.L-1培养基中也能产生少量.可见,以1/2 MS作为基础培养基,加入1.2 mg.L-1BA和0.6 mg.L-1IAA,以根茎为外植体进行延龄草组织培养,能产生大量的愈伤组织.研究表明,利用组织培养繁殖延龄草是一种有效、可行的途径.     

应用生物功能化色谱研究SSAO酶与底物和抑制剂之间的相互作用

应用生物功能化色谱技术——毛细管电泳法研究对氨基脲敏感的胺氧化酶(SSAO)与其底物苯甲胺、抑制剂2-溴乙胺之间的相互作用.活性检测表明,SSAO酶经固定化到脂质体上之后,仍然保留有70%~85%的活性.将有活性的固定化酶添加到磷酸盐缓冲液中,随着缓冲液中固定化酶浓度的增加,pH=5时,特异性底物苯甲胺的有效淌度从4.06×10-4cm2.V-1.s-1下降到0.81×10-4cm2.V-1.s-1,pH=7时,则从3.91×10-4cm2.V-1.s-1下降到0.29×10-4cm2.V-1.s-1.若将抑制剂2-溴乙胺与固定化酶同时添加到电泳缓冲液中,随着抑制剂浓度从10-6mol.L-1上升到10-1mol.L-1,苯甲胺的有效淌度则从1.42×10-4cm2.V-1.s-1上升到2.22×10-4cm2.V-1.s-1.     

NO_2~-在维生素B_(12)修饰电极上催化氧化

研究维生素 B12 (VB12 )修饰电极的制备 ,考察其对 NO-2 及共存离子的作用情况 ,对催化作用机理做初步探讨 .VB12 修饰电极在 0 .1mol.L-1KCl底液中对 NO-2 有良好的电化学催化作用和选择性 ,其催化电流在 NO-2 浓度为 0 .10～ 2 .0 0 mol.L-1范围内呈线性关系 ,NO-2 的浓度低至 0 .0 1mol.L-1仍可定量测定 .天然水中常见的离子不干扰测定 ,应用于雨水和湖水中 NO-2 的测定 ,回收率为 10 1%～ 10 3%.     

茜素紫褪色分光光度法测定食品中溴酸钾的含量

研究了在盐酸介质中,溴酸钾氧化茜素紫的适宜反应条件,建立了新的测定痕量溴酸钾的分光光度法.结果表明:褪色溶液最大吸收波长为460nm,表观摩尔吸收系数为1.9×104L.mol-1.cm-1,溴酸钾在1mg.L-1～20mg.L-1范围内符合比尔定律,加标回收率为95%～103%,相对标准偏差为2.4%,检出限为1.02mg.L-1.该法用于食品中溴酸钾含量的测定,结果满意.     

K~ 和Ca~(2 )对牛体外受精胚胎体外发育的作用

研究观察了在 SOF PVA这一化学成分明确培养系统条件下 ,不同浓度的 K 和 Ca2 对牛体外受精胚胎体外发育的影响 ,以便为今后进一步探讨影响牛早期胚胎体外发育的因素提供实验依据 .实验 1将牛体外受精卵培养分别于含有 0、5 .0、8.3 5和 2 1 .2 m MK 的 SOF PVA培养系统中 ,结果卵裂率分别为 2 0 .0 % a、87.0 % b、80 .8% b和 85 .7% b(ae,P<0 .0 5 ) .实验 2将牛体外受精卵分别培养于含有 0、1 .1 3、1 .71和 3 .0 m MCa2 的 SOF PVA培养系统中 ,结果卵裂率分别为 0 .9% g、86.6% h、80 .9% h 和 92 .0 % h(g相似文献   

小鼠PICK1与Orai1蛋白质间的相互作用研究

从小鼠脑组织中提取总RNA,RT-PCR扩增PICK1及Orai1的CDS序列,构建原核表达载体GST-PICK1及真核表达载体myc-Orai1,重组质粒经SalⅠ和NotⅠ双酶切鉴定后测序.正确的质粒myc-Orai1在HEK293细胞中表达收获过表达蛋白,GST-PICK1进行原核表达并获得融合蛋白.将纯化后的GST-PICK1蛋白条带切下,进行蛋白质液相质谱分析.后将myc-Orai1蛋白与GST-PICK1蛋白混合,进行GST-pulldown实验,western-blot检测到myc-Orai1的条带.结果表明PICK1与Orai1在体外有相互作用.     

人角质细胞生长因子-1在水稻中的表达

人角质细胞生长因子(Keratinocyte growth factor,KGF)在组织的损伤修复中起着重要的作用.植物细胞生物反应器是一种成本低、安全性好的蛋白生产系统.本研究将人KGF-1经农杆菌介导法转入水稻中,共获得38株抗性再生植株.Southern杂交和RT-PCR结果表明KGF-1基因整合入水稻基因组中且部分转化株中KGF-1基因得到转录.Western blotting检测结果显示有两株转化水稻中能够表达KGF-1.     

吸附溶出伏安法同时测定水中痕量Zn和Mn

用电化学方法同时测定多种金属离子已有一些报道 ,但在 HSCN— KSCN溶液中直接用 SCN-作配合剂 ,采用玻碳电极同位镀汞的吸附伏安法同时测定 Zn和 Mn报道甚少 ,在该体系中 Zn和 Mn的 KSCN配合物均产生灵敏的吸附波 ,峰电位分别是 -1 .1 4 V和 -1 .5 6 V( vs,Ag/Ag Cl以下同 ) ,线性范围分别是 2 .0× 1 0 -8～ 2 .0× 1 0 -6mol/l和 1 .0× 1 0 -8～ 5 .0×1 0 -7mol/l,用该法测定水样中锌和锰 ,结果令人满意 .     

筛选与拟南芥绒毡层发育过程中重要的转录因子DYT1相互作用的调控蛋白因子

DYT1是拟南芥绒毡层发育过程中重要的转录因子.DYT1的缺失会导致绒毡层相关功能的缺陷.然而,DYT1并不是使绒毡层功能化的充分因素,暗示了DYT1蛋白需要和其他转录因子形成复合物才能发挥功能.利用酵母双杂交技术以DYT1蛋白为诱饵在拟南芥cDNA文库中筛选与DYT1相互作用的蛋白.通过筛选从文库中得到20个阳性克隆,通过BLAST序列比对得到8个候选基因序列,从中鉴定出6种候选基因编码可能的转录因子或者其他调控转录的蛋白因子.其中5个编码调控因子的基因都被证实在花药中表达.更进一步,发现另一个对花药发育所必需的转录因子AMS能与DYT1在酵母体内形成转录复合物.表明这2个蛋白可能形成异源复合物在花药中共同调节下游基因的表达.     

蛋白质-偶氮胂I复合物的光度性质研究

研究了蛋白质与偶氮胂 的显色反应 .在 p H3 .2的 Britton-Robinson缓冲溶液中 ,偶氮胂 I与蛋白质形成红色复合物 ,λmax为 551 nm,ε为 2 .5× 1 0 5 L· mol- 1· cm- 1 ,蛋白质含量在 1 3 .2～ 2 3 1 mg/L范围内服从Beer定律 .所提出的方法可直接用于血清、花生等生物样品中蛋白质的测定 .     

流动注射化学发光法测定环境水样中的铁

在盐酸介质中,高锰酸钾-甲醛-Fe( )为强化学发光体系,据此,建立了流动注射化学发光法测定铁的新方法,并探讨了发光反应的机理.方法的线性范围为1～100μg.L-1,检出限为0.6μg.L-1,对10μg.L-1的Fe( )标准溶液连续11次测定的相对标准偏差为2.0%.该方法可用于环境水样中微量铁的测定.     

拟南芥中参与盐胁迫应答的基因 At1g14260的功能初探

拟南芥中未知基因At1g14260的表达受到多种非生物胁迫的诱导, 特别是在NaCl的诱导下, At1g14260的表达量明显增加. 对T DNA插入突变体at1g14260(salk 118406)的分析表明, 敲除了基因At1g14260的拟南芥相比野生型对盐胁迫更加敏感. 此外, 构建了融合表达载体PBi221 At1g14260 GFP并且成功转入拟南芥原生质体中, 在荧光显微镜下观察到融合蛋白定位于原生质体细胞核中. 因此, At1g14260可能参与了拟南芥中盐胁迫的过程.     

高效薄层色谱双波长扫描法测定颈复康冲剂中葛根素的含量

在硅胶G高效薄层色谱板上 ,以乙酸乙酯 丙酮 水 甲苯 ( 6 5∶4 5∶1 2∶0 7)为展开剂 ,采取双波长薄层扫描法测定了颈复康冲剂中葛根素的含量 .结果表明 ,葛根素的点样量在 0 2 1 5～ 1 .72 μg范围内呈良好线性关系 ,回归方程为 y =45 6 5 1x 1 3789,r =0 .9998.平均回收率为 99 76 % ,变异系数为 1 34 % .颈复康冲剂中葛根素的含量为 2 0 6 % .     

Fe2+对辽河沉积物中DDT、HCB缺氧生物降解影响研究

测定了 Fe SO4 .7H2 O对辽河沉积物中滴滴涕 (DDT)、六氯苯 (HCB)缺氧生物降解的影响 .在无外加碳源的情况下 ,Fe SO4 .7H2 O对辽河沉积物中 DDT和 HCB的缺氧生物降解起抑制作用 .外加 Fe SO4 .7H2 O时 DDT、HCB的缺氧降解动力学常数 KDDT =0 .0 1 70 d- 1 ,KHCB=0 .0 0 69d- 1 ,均分别小于无外加 Fe SO4 .7H2 O时的 0 .0 2 1 3 d- 1 和 0 .0 0 77d- 1 .在有外加碳源葡萄糖或乙酸钠时 ,Fe SO4 .7H2 O对辽河沉积物中 DDT的缺氧生物降解起到了明显的促进作用 ;外加 Fe SO4 .7H2 O时 DDT的缺氧降解动力学常数 K葡萄糖 ,DDT=0 .0 3 89d- 1 ,K乙酸钠 ,DDT =0 .0 3 2 7d- 1 ,均分别大于无外加 Fe SO4 .7H2 O时的 0 .0 2 5 6d- 1和 0 .0 2 69d- 1 .但 Fe SO4 .7H2 O对 HCB在辽河沉积物中缺氧生物降解的影响则不大 ,这与其分子结构有很大关系     

人脑蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1基因克隆与原核表达

从人脑组织中提取mRNA,通过RT-PCR扩增出目标cDNA,构建蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1-pEASY-E1重组质粒.将重组质粒转化进E.coli TOP10感受态细胞中,筛选阳性克隆进行验证,将测序正确的质粒转化到E.coli Transetta感受态细胞中表达SHP-1.进一步对SHP-1表达的诱导温度和IPTG浓度等条件进行优化.结果显示,所克隆的SHP-1基因片断经PCR鉴定和测序分析,与目标基因完全相符.通过蛋白表达条件的优化,发现20℃,0.4mmol/L IPTG对表达菌株进行诱导时,SHP-1可溶性蛋白表达量最大.     

固相萃取-气相色谱质谱法快速测定酒类产品中的邻苯二甲酸酯

建立了气相色谱质谱法(GC-MS)快速检测酒类产品中邻苯二甲酸酯的方法.采用正己烷-甲基叔丁基醚(1∶1,v/v)作为萃取剂,Cleanert PEP Plus萃取小柱净化,GC-MS检测,外标法定量.利用该方法研究了17种邻苯二甲酸酯溶液在0.5¹0 mg·L-1浓度范围的标准曲线,线性关系良好.利用优化后的方法测定了5个酒类样品中邻苯二甲酸酯的含量,在D类样品中分别添加浓度1 mg·L-1和2 mg·L-1的邻苯二甲酸酯混合标准工作液,回收率为78.2%10 mg·L-1浓度范围的标准曲线,线性关系良好.利用优化后的方法测定了5个酒类样品中邻苯二甲酸酯的含量,在D类样品中分别添加浓度1 mg·L-1和2 mg·L-1的邻苯二甲酸酯混合标准工作液,回收率为78.2%¹12.8%,相对标准偏差小于12.5%.     

C-S-H表面上吸附态C1-离子的分布特点

应用表面物理化学理论,分析了C-S-H在不同浓度、不同种类氯化物溶液中浸泡后ζ电位发生变化的原因,并在此基础上推测了被吸附的C1-离子在C-S-H表面上的分布状态.C1-离子似乎是C-S-H的特性吸附离子,只要C-S-H浸泡于氯化物溶液中,C1-离子将优先进入吸附层.吸附于C-S-H表面的C1-离子的总量包括吸附层中的C1-离子量和扩散层中的C1-离子量.随浸泡液中C1-离子浓度的增大,C1-离子不断进入吸附层,但吸附层的空间是有限的,吸附层中C1-离子增加的速度逐渐减慢.扩散层的C1-离子量取决于ζ电位的大小.在较高浓度的AlCl3溶液中浸泡的C-S-H对C1-离子的吸附量显著增大,由于此时双电层已显著变薄,因而不能忽略C-S-H表面长程范氏力对C1-离子的吸引作用.     

转录因子FOXM1剪接异构体在乳腺癌EMT过程中的初步研究

探究转录因子FOXM1不同的剪接异构体对乳腺癌EMT过程中的影响.采用基因工程方法分别构建了表达FOXM1B-EGFP和FOXM1C-EGFP两种FOXM1剪接异构体真核表达质粒,并将其转染进乳腺癌细胞,采用RT-PCR和Western印迹检测细胞样本中FOXM1剪接异构体的表达和EMT相关基因表达,同时采用transwell检测高表达不同FOXM1剪接异构体细胞的侵袭和迁移能力.成功构建了FOXM1B-EGFP和FOXM1CEGFP真核表达质粒.外源FOXM1B在乳腺癌间质型细胞的表达高于上皮型细胞,并主要存在于细胞核内,且高表达FOXM1B能够显著促进乳腺癌细胞的侵袭和EMT过程.外源FOXM1C在乳腺癌上皮型细胞中的表达高于间质型细胞,并且在细胞核和细胞质中均有表达,高表达FOXM1C能够显著抑制细胞的侵袭和EMT过程.实验结果表明,在乳腺癌细胞中,FOXM1B主要存在于细胞核内,FOXM1C在细胞核和细胞质中均有表达.本研究预示FOXM1B和FOXM1C对乳腺癌细胞EMT过程发挥不同的影响.     

同音词及其类型

同音词是语言中存在的一种客观现象,是某种词汇系统中语音形式完全相同的一组词.根据词义的词汇意义(A)语法意义(B)色彩意义(C)的不同或相距较远(1)和相同或相近(2)给现代汉语同音词分成如下八类:1.A1B1C1,2.A1B1C 2,3.A1B 2C1,4.A1B2C2,5.A2B1C1,6.A2B1C2,7.A2B2C1,8.A2B2C2,并指出在词汇意义相近的前提下,语法意义和色彩意义对同音词的运用影响较大.     

GGT1基因的真核表达载体构建及其表达定位

构建GGT1重组真核表达载体,观察GGT1在COS7细胞中的定位.利用PCR技术扩增GGT1全长基因,经HindⅢ和EcoR Ⅰ酶切后连接入pEGFP-N1真核表达载体.将构建完成的重组表达质粒转染入COS7细胞,利用激光共聚焦显微镜观察GGT1在细胞中的定位.构建载体经双酶切和序列测定证实重组载体包含有正确的GGT1编码序列.激光共聚焦显微镜观察到,整个细胞内弥散绿色荧光,绿色荧光分布于COS7细胞浆中,提示GGT1定位于细胞浆中.成功构建人pEGFP-N1-GGT1真核表达载体,检测到GGT1定位于哺乳细胞的细胞浆中,为GGT1的功能研究提供了线索.