农产品和饲料中常见真菌毒素的种类和危害

对黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏马菌素、玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、展青霉素等常见真菌毒素的来源、种类、特点、毒性等进行了介绍,并进一步阐述真菌毒素对人类和动物健康的影响及国内外对农产品及饲料中真菌毒素控制的相关法律、法规和标准.     

CAC、欧盟、美国与中国粮食中真菌毒素限量标准的差异分析

真菌毒素是真菌产生的毒性次级代谢产物,危害较大的有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素A、单端孢霉烯族毒素、玉米赤霉烯酮、伏马毒素和麦角类生物碱等。制定真菌毒素的限量标准是真菌毒素一级预防的主要措施。通过对CAC、欧盟、美国和中国粮食中真菌毒素限量标准的对比分析,找出我国现行食品安全国家标准中有关粮食真菌毒素污染控制指标存在的差异,对修订我国粮食中真菌毒素含量的限量标准提供参考和借鉴。     

玉米呕吐毒素、玉米赤霉烯酮检测方法的探讨

文章探讨了玉米呕吐毒素、玉米赤霉烯酮含量与玉米生霉粒率的关系,并对采用酶联免疫试剂盒法测定呕吐毒素、玉米赤霉烯酮的注意事项进行探讨分析。     

光化学衍生检测玉米中4种黄曲霉毒素

建立了HPLC-免疫亲和柱净化,柱后光化学衍生检测玉米中4种黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的分析方法。玉米样品提取、浓缩、过滤后经免疫亲和柱净化,液相色谱分离后采用光化学衍生器对黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2进行在线衍生,通过配制荧光检测器的液相色谱同时检测玉米中B1,B2,G1,G2这4种黄曲霉毒素。结果表明,4种黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的色谱分析时间在6～11min内完成,检测定量限分别为:0.10,0.03,0.10,0.03μg/kg,完全符合并高于欧盟检测标准定量限,通过光化学衍生器在线衍生将B1、G1的分析定量限提高到2.7倍和3.6倍。玉米基质中B1,B2,G1,G2在添加水平为10,3,10,3μg/L时其回收率分别为:90.3%,85.6%,93.5%,92.8%。其线性范围分别为0～20μg/L,0～6μg/L,0～20μg/L,0～6μg/L,RSD 分别为 2.3%,1.5%,2.7%,3.2%。文章建立了分析玉米中4种黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的分析方法,经验证该方法定性准确,定量灵敏度高,可同时检测出玉米中4种黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2含量。     

全株玉米青贮饲料评价标准的制定及其应用研究

为了实现企业全株玉米青贮饲料品质的提升，本研究通过感官评价（颜色、气味、质地、籽实破碎度、切割长度）、营养指标评价（DM、Starch、ADF、NDF、CP、Ash）、发酵程度评价（p H、氨态氮、乳酸、乙酸、丁酸）和卫生指标评价（黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、T-2毒素、赭曲霉毒素、伏马毒素、霉菌、沙门氏菌）相结合的评价方式，制定玉米青贮评价标准，并对青贮窖中玉米青贮进行综合评价。评价结果一方面指导牧场奶牛饲料配方的调整及玉米青贮的管理，另一方面对下一年玉米青贮的制作提出意见，最终实现优质玉米青贮的高效利用和牧场饲喂成本的降低，实现牧场提质增效、转型升级的目标。     

全株玉米青贮制作及其品质评价标准的制定

全株玉米青贮营养丰富,是奶牛全混合日粮的主要成分,但目前存在制作技术不完善的问题,导致青贮饲料质量不稳定、利用率较低。为了提升全株玉米青贮品质,文章对全株玉米青贮收割时机、收割方式、压实、密封、发酵、贮藏、取用等关键工艺设定相应的技术标准,并对发酵后全株玉米青贮的感官、理化指标、发酵程度和卫生指标进行单项和综合评价,得出制作及评价优质玉米青贮的技术标准：干物质≥30%,淀粉≥30%,切割长度15～20 mm,籽粒破碎度≤3个/kg,留茬高度≥20 cm,压实密度以鲜重计≥750 kg/m3,密封发酵时间≥4月,黄曲霉毒素<3μg/kg,玉米赤霉烯酮<10μg/kg,霉菌<20000 cfu/g。此标准的制定可降低全株玉米青贮的制作成本,提高其利用效率,实现降低牧场饲喂成本、提高经济效益的目的。     

竞争免疫荧光分析法高灵敏、高选择性检测赭曲霉毒素

基于半抗原与二抗竞争结合固相抗体的免疫模式,建立了一种高灵敏、高选择性检测赭曲霉毒素的新型免疫荧光分析法.赭曲霉毒素具有半抗原性,可与基底抗体作用.当赭曲霉毒素加入到该体系后,与异硫氰酸荧光素标记的羊抗兔(IgG-FITC)发生竞争反应,随着赭曲霉毒素浓度的增加,IgG-FITC与抗体结合的浓度减少,荧光强度降低.在最佳实验条件下,荧光强度的变化值(ΔF)与赭曲霉毒素浓度的对数在1nmol/L-100μmol/L范围内呈良好的线性关系,相关系数R=0.9932.方法的检出限为0.35nmol/L.将该方法用于不同种类的酒样中赭曲霉毒素的测定,结果令人满意.与传统方法相比,本方法是一种低成本、高灵敏度、高选择性的检测方法,在食品安全领域中具有潜在的应用价值.     

胶体金测试条快速定量测定呕吐毒素技术在粮食中的应用

采用胶体金测试条法对根食中呕吐毒素进行快速定量检测,结果表明,呕吐毒素的检测限为118μg/kg,定量限为316μg/kg,500-5 000 μg/kg质量浓度范围内,相关系数：为0. 9987.采用有证实物参考物质进行比较,正确度为90. 3%一116.6%,变异系数为4. 7%一19.6%.采用配对t-检验,与高效液相色谱法的测定结果相比较,二者无显著差异.     

玉米赤霉烯酮检测方法研究进展

玉米赤霉烯酮是一种由镰刀菌分泌、广泛污染谷物类粮食作物的真菌毒素,其化学性质稳定,高温下难分解,且具有肝毒性和免疫毒性,严重威胁人类健康。因此,建立快速、灵敏、准确的玉米赤霉烯酮检测方法对食品安全具有重要的意义。本文结合国内外的研究进展,简述了玉米赤霉烯酮的检测方法,简要介绍了各种检测方法的原理及其在实际样品检测中的应用,为玉米赤霉烯酮的检测方法的探索起到重要的作用。     

广州地区市售酱油污染黄曲霉毒素和花椒毒素的抽样调查

目的:对2000年广州地区部分市售品牌酱油以及12所高校的35间食堂、餐厅、饮食店等使用的酱油进行了污染黄曲霉毒素B1(AFB1)、花椒毒素(XAT)情况进行抽样调查,以了解当年该地区市售酱油的污染情况.方法:采用国际通用的高效薄层层析法(HPTLC)进行检测.结果:AFT阳性(AFB1≥5μg/kg)检出率为24%～33%,污染量从5μg/kg到25μg/kg,最高的高出国家标准4倍;样品中XAT阳性(XAT≥5μg/kg)检出占20%.结论:当年该地区部分市售酱油存在着黄曲霉毒素及花椒毒素的污染.     

柱后碘衍生—高效液相色谱法测定脂必妥片中黄曲霉毒素B1的含量

为建立测定脂必妥片中黄曲霉毒素B1含量的高效液相分析法,样品经80%甲醇溶液超声提取后,通过免疫亲合柱净化、柱后碘衍生化,以荧光检测器检测,采用Waters Sunfire C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);甲醇—乙腈—水(40∶18∶42)为流动相;流速,0.8 m L/min;柱温,25℃;衍生溶液为0.05%的碘溶液,衍生化泵流速,0.3 m L/min,衍生化温度70℃;激发波长λex=360 nm,发射波长λem=450 nm.结果显示,黄曲霉毒素B1在0.0008~0.0040 ng(r=0.9999)范围内呈良好的线性关系;回收率为97.13%(RSD=0.73%),检出限为0.5μg/kg.本方法简便,结果准确可靠,适于测定脂必妥片中黄曲霉毒素B1的含量.     

省外技术市场之窗——江苏技术项目展示

该试剂盒采用固相酶联免疫吸附ELISA原理,通过抗黄曲霉毒素B_1抗体与酶标抗原、待测抗原的竞争免疫反应以及酶的催化显色反应相结合,来检测Aft.B_1,其特点是灵敏度高,特异性好,操作简便,结果易判读。 主要技术指标 (1)抗体效价 1:500000以上;(2)酶标抗原的酶活回收率85％以上;(3)测定限5μg/kg以下;(4)检测范围0～100μk/kg。 推广的主要技术内容     

玉米赤霉烯酮降解酶在马克斯克鲁维酵母中的表达及高产菌株的诱变筛选

玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)是镰刀菌属霉菌产生的一种霉菌毒素,常见于霉变的玉米、小麦等谷物中.研究发现,来源于粉红黏帚霉(Gliocladium roseum)的α/β水解酶ZHD101能够断裂ZEN的内酯键,破坏ZEN的毒性.本文利用食品安全级的马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)重组分泌表达了ZHD101,发酵液上清中的表达产物具有水解ZEN的活性.利用UV和~(60)Co-γ联合诱变方法,提高了ZHD101在马克斯克鲁维酵母中的表达水平.高效液相色谱(HPLC)分析表明,重组菌株分泌表达的ZHD101酶蛋白既能水解标准品ZEN,又能在较温和的条件下水解发霉玉米样本中的ZEN,结果表明该重组菌株表达的玉米赤霉烯酮降解酶ZHD101,可应用于发霉玉米的脱毒处理.     

液相色谱-质谱联用法检测鸡蛋中8种氟喹诺酮类药物残留

建立了一种液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)快速测定鸡蛋中8种氟喹诺酮类药物残留的方法.样品经磷酸-乙腈提取,冷冻离心,旋转蒸发浓缩,初始流动相溶解,然后用正己烷脱脂,有效地去除杂质,随后进行LC-MS/MS定性定量分析.8种氟喹诺酮类药物含量在2~50μg/kg线性关系良好,相关系数R均大于0.995 6;添加量在5,10和20μg/kg时,该方法的加标回收率为65.4%~119.6%,相对标准偏差均小于7.52%.该方法的检出限为0.000 5~0.22μg/kg,定量限为0.02~0.74μg/kg,适用于鸡蛋中8种氟喹诺酮类药物残留的定性和定量检测.     

酵母菌对饲料中黄曲霉毒素B_1的降解和脱除作用研究

研究了含有活性酵母菌、酵母菌细胞壁及水合铝硅酸盐等酵母霉菌毒素降解剂对霉变饲料中黄曲霉毒素B_1的降解和脱除效果.结果表明:随着酵母霉菌毒素降解剂添加量的增加,对黄曲霉毒素B_1的体外吸附率逐渐升高,而且试验用鸡粪便中黄曲霉毒素B_1排出率也逐渐升高,当加入的毒素降解剂质量浓度为0.25 mg/m L时,对黄曲霉毒素B_1的体外吸附率效果最好,达到98.21%,黄曲霉毒素B_1的排出率达到86.07%.试验结果表明该毒素降解剂对霉变饲料中的黄曲霉毒素B_1脱除和降解效果显著,可有效预防动物食用霉变饲料中毒.     

基于QuEChERS-GC-MS/MS同时测定西红花中9种有机磷农药残留

建立了一种改良的QuEChERS前处理结合气相色谱-三重四极杆串联质谱(GC-MS/MS),快速便捷同时检测西红花中9种有机磷农药残留的方法.样品用1%乙酸-乙腈溶液提取,经改良QuEChERS法净化,以GC-MS/MS采取多反应离子监测模式检测,基质校准曲线外标法定量.在2.0～100.0μg/kg浓度范围内,9种有机磷农药线性关系良好,相关系数(r~2)均大于0.999;检出限为0.5～1.3μg/kg,定量限为2.0～3.2μg/kg.平均加标回收率为73.2%～103.9%,相对标准偏差为0.64%～6.1%(n=6).本方法快速方便、准确度和灵敏度良好,适用于西红花中有机磷农药多残留的检测.     

柱后碘衍生—高效液相色谱法测定脂必妥片中黄曲霉毒B1的含量

为建立测定脂必妥片中黄曲霉毒素B1含量的高效液相分析法,样品经80％甲醇溶液超声提取后,通过免疫亲合柱净化、柱后碘衍生化,以荧光检测器检测,采用Waters Sunfire C18色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5 μm);甲醇—乙腈—水(40∶ 18∶42)为流动相;流速,0.8 mL/min;柱温,25℃;衍生溶液为0.05％的碘溶液,衍生化泵流速,0.3 mL/min,衍生化温度70℃;激发波长λex=360 nm,发射波长λem=450 nm.结果显示,黄曲霉毒素B1在0.0008～ 0.0040 ng(r=0.9999)范围内呈良好的线性关系;回收率为97.13％ (RSD=0.73％),检出限为0.5μg/kg.本方法简便,结果准确可靠,适于测定脂必妥片中黄曲霉毒素B1的含量.     

马蹄金中10种真菌毒素UPLC-MS/MS检测方法的建立

建立马蹄金中10种真菌毒素的测定方法.基于QuEChERS法对样品进行前处理,应用UPLC-MS/MS法进行样品检测,色谱柱：Boltimate C₁₈(2.1×100 mm, 2.6μm);流动相：0.1%甲酸溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱;流速：0.3 mL/min;进样量：1μL;电离模式：正、负离子同时电离;监测采集模式：MRM(多反应监测模式);定量分析方法：基质标准曲线法.结果表明,在各自浓度范围内,10种真菌毒素均有良好线性关系,10种真菌毒素检出限为(0.2～13.6μg/kg),定量限为(0.7～45.3μg/kg),回收率为82.5%～109.2%,RSD为1.1%～5.8%.不同来源的样品中真菌毒素检出率为70%,污染值范围分别为AFB1(0.8～3.9μg/kg)、AFG1(0.9μg/kg)、OTA(2.0～7.5μg/kg)、ZEN(11.6～58.7μg/kg)、FB1(28.6～43.0μg/kg)、DON(79.4～139.3μg/kg).该方法操作简便、快速、准确、灵敏度高,适用于马蹄金中10种真菌毒素的快速测定.     

超高效液相色谱-串联质谱法测定保健品中15种那非类药物

本研究建立了超高效液相色谱-串联质谱法检测保健品中15种那非类药物的分析方法。样品经乙腈直接提取,用Waters Acquity BEH C_(18)柱(2.1mm×100mm,2.5μm)分离,以0.1%甲酸水和乙腈为流动相梯度洗脱,电喷雾正电离多反应模式监测,外标法定量。结果表明:15种那非类药物在0.1～50 ng/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数大于0.999 0;检出限为2.5～12.5μg/kg;定量限为5.0～25.0μg/kg;加标水平为5.0μg/kg～250μg/kg时,回收率范围为72.4%～97.6%;相对标准偏差为0.77%～9.91%;此方法简便快速、选择性强、灵敏度高,可用于保健品中15种那非类药物的测定。     

陈炜瑶,王华,林冬杰

研究以超高效液相色谱—三重四级杆串联质谱联用技术(UPLC-MS/MS)测定陈皮中T-2毒素含量的方法.陈皮用乙腈-0.1%甲酸溶液提取,经PSA(乙二胺-N-丙基硅烷)净化,LCMS/MS电喷雾正离子多反应监测(MRM)模式检测.T-2毒素在1～25μg.L-1的浓度范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9996),陈皮中T-2毒素的检测限为2.0μg.kg-1.平均加样回收均为91.86%,RSD为2.88%(n=9).该法操作简便,结果准确,可作为陈皮中T-2毒素残留量检测方法.