溴氰菊酯胁迫下小菜蛾泛素化蛋白的分析与鉴定

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳、Western Blot和LC MS/MS技术,对在溴氰菊酯胁迫下的小菜蛾(Plutellaxylostella)四龄幼虫的泛素化蛋白(Ubiquitinated protein)的组分进行分析,结果表明小菜蛾溴氰菊酯敏感品系与小菜蛾溴氰菊酯抗性品系里的泛素化蛋白表达量有显著差异.本实验成功证明了在药剂胁迫下小菜蛾泛素化蛋白存在表达上的差异,该研究结果为分析昆虫细胞中泛素的功能及其对昆虫生理、生化和环境胁迫等方面的调节作用提供了参考.     

杀虫剂的选择作用对小菜蛾表达蛋白质的影响

运用蛋白质双向电泳分析技术,通过对成虫蛋白质的提取,分离出水溶性的蛋白质组分,对比研究了溴氰菊酯抗性品系、杀螟丹抗性品系、杀虫双抗性品系和敏感品系小菜蛾成虫的蛋白质在表达上的差异．通过对电泳图谱分析,在澳氰菊酯的抗性和敏感品系中抉得了8个特异的蛋白质斑点,pH5．0～8．1,相对分子质量为46000～23000;在抗杀螟丹品系中得到了8个特异斑点,pH4．6～81,相对分子质量为92000～18000;在杀虫双的执性品系和敏感品系中产生了6个特异斑点,pH5．5～7．1,相对分子质量为31000—28000．虽然抗性品系是敏感品系通过多年的室内逐代的药剂选掸获得的,但是在杀虫刺选择压力作用下所引起的表达蛋白质的差异是否与浪氰菊酯、系螟丹和杀虫双的抗性有关还需进一步证实．     

小菜蛾成虫蛋白质组双向电泳图谱的建立及条件优化

通过选择合适的pH范围及长度的胶条,并对蛋白样品上样量、等电聚焦伏小时数、银染时间及样品前处理等进行优化,建立了以双向电泳技术为基础的小菜蛾成虫蛋白质组学研究方法.优化结果表明使用17 cm、pH3～pH10的非线性胶条可以得到分辨率较高的胶图.该方法的建立为小菜蛾抗药性差异蛋白质组学研究奠定了基础.     

溴氰菊酯胁迫下小菜蛾差异表达基因的筛选与分析

通过双向cDNA RDA,即分别以敏感品系为检测子(tester)、抗溴氰菊酯品系为驱赶子(driver)和以抗溴氰菊酯品系为检测子(tester)、敏感品系为驱赶子(driver)筛选2种品系中的差异表达基因,初步分析小菜蛾敏感品系和抗性品系之间的遗传差异.经过3轮消减杂交后,将所得的差异片段克隆于PMD 18-T载体,氨苄筛选阳性克隆,经菌落PCR鉴定后送样测序.得到2条序列与GenBank数据库中的部分已知序列有一定同源性,其中1条序列与编码S3a蛋白基因有较高的同源性.     

小菜蛾的抗药性研究

小菜蛾是十字花科蔬菜上最主要的害虫,也是目前产生抗药性最严重的害虫之一.本文采用浸叶法测定了常用6种农药对福安市小菜蛾的毒力,比较研究了福安市不同菜区的小菜蛾对其中3种常用农药的和抗药性差异,为小菜蛾的抗药性治理提供理论依据.     

小菜蛾抗药性及治理的研究进展

小菜蛾是一种世界性分布的蔬菜重要害虫,已报道小菜蛾对50多种杀虫剂产生了抗药性,包括有机氯、有机磷、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯类、昆虫生长调节剂及苏云金杆菌(Bt)类等杀虫剂.阐述了国内外及云南省小菜蛾抗药性的研究概况,包括小菜蛾抗性发展、抗性稳定性、抗性机理等方面的研究,并对云南省小菜蛾抗药性的治理策略进行讨论.     

不同盐度对Halomonas aquamarina外膜蛋白表达的影响

革兰氏阴性细菌的外膜蛋白(Omp)在维持细菌的生理状态和抵抗外界极端环境中起重要的作用.为研究革兰氏阴性细菌外膜蛋白的抗盐机制,通过比较深海中度嗜盐菌Halomonasaquamarina在正常盐度浓度(0.56mol/LNaCl)、较高(1mol/LNaCl)和高盐度(2mol/LNaCl)下外膜蛋白的双向电泳图谱,获得11个差异点.对这11个差异点进行肽质量指纹图谱及其生物信息分析,鉴定出其中的6个蛋白,并对中度嗜盐细菌外膜蛋白的抗盐机理做了初步的探讨.     

用双向电泳-质谱初步分析大熊猫初乳和常乳中差异表达的乳清蛋白

目的 是分析大熊猫初乳和常乳中差异表达的乳清蛋白.利用双向电泳-质谱技术首次对一只大熊猫产后第1d和第22 d的乳清蛋白进行初步的分离与鉴定,结果成功得到11种差异表达的蛋白质,值得注意的是,其中有3种蛋白质与免疫、抗菌有关,包括抗白细胞蛋白酶、溶菌酶C,C反应蛋白.推测这3种蛋白质可能参与大熊猫乳腺或幼仔的防御功能.研究结果表明,用双向电泳-质谱技术可以分析大熊猫初乳和常乳中的差异表达蛋白质,有助于认识大熊猫乳的组成和功能特性.     

成年大鼠急性脊髓全横断损伤后差异表达蛋白的蛋白组学研究

为进一步阐明脊髓损伤(SCI)的修复机制,对SD成年大鼠进行急性全横断损伤,将损伤前后的大鼠脊髓总蛋白质进行固相pH梯度双向凝胶电泳(2D-PAGE),经考马斯亮蓝染色后,借助PDQuest软件从中找出差异表达蛋白质点.应用基质辅助激光解吸电离串联质谱对差异表达的蛋白质点进行鉴定,成功鉴定出38种蛋白质.其中表达上调的蛋白质有电压依赖的阴离子选择通道蛋白1,α-烯醇酶、硫氧还蛋白依赖的过氧化物还原酶3、生长因子受体结合蛋白2等,表达下调的蛋白质有谷氨酰胺合成酶、14-3-3 epsilon、磷脂酰乙醇胺结合蛋白1、血红蛋白β-1等.鉴定出的差异蛋白多数涉及到神经细胞的增殖、凋亡、应激反应等过程.     

α-三噻吩对白纹伊蚊抗溴氰菊酯品系幼虫的毒杀作用

目的：研究α-三噻吩（α-T）对白纹伊蚊抗溴氰菊酯品系幼虫的毒杀效果,与溴氰菊酯类药物是否存在交互抗性及对抗性品系幼虫生长发育的影响。方法：按WHO推荐的方法（幼虫浸渍法）测定α-T对白纹伊蚊抗性品系和敏感品系幼虫的LC50、LC95,α-T作用后抗性幼虫的化蛹率、羽化率、平均化蛹时间及平均羽化时间。结果：α-T对溴氰菊酯抗性品系幼虫的IC50为9．09μg／L,敏感品系幼虫LC50为5．34μg／L;α-T与溴氰菊酯的交互抗性倍数为1．70,α-T与拟除虫菊醋类药物溴氰菊醋之间不存在交互抗性;α-T能够显著抑制白纹伊蚊抗溴氰菊酯品系幼虫的发育和羽化：实验组的累计化蛹率（73．41％）,累计羽化率（55．17％）明显低于对照组（83．44％、85．48％）,平均化蛹时间（5．52d）、平均羽化时间（5．91d）均较对照组（3．87d、3．16d）明显延长。结论：α-T对常规农药产生抗性的蚊幼虫,是一种高效、实用的杀虫剂。     

小菜蛾对定虫隆的抗性选育和增效剂的作用

用定虫隆对小菜蛾进行抗性选育,结果表明:F1~5仍属敏感状态,F6的敏感性已下降,F7~10达到低水平抗性,F11~13达中等水平抗性。从F14开始停止汰选,无毒饲养到F20,具有明显的抗性衰退现象。以对定虫隆具有不同抗性水平的小菜蛾种群测定3种增效剂对定虫隆的增效作用,结果表明:对F0代,TPP对定虫隆是负增效作用或几乎没有增效作用,SV 1和PBO对定虫隆均有一定的增效作用;对F13代和F20代,3种增效剂均有增效作用,但以SV 1和PBO的增效作用更明显,最高增效倍数分别为24.26和13.79;增效剂的比例不同,增效的幅度也不同,质量比为5∶1的混配增效作用比3∶1的更明显,增效倍数随小菜蛾对定虫隆抗性水平的提高而增加。     

小菜蛾抗药性研究进展

小菜蛾作为各种十字花科蔬菜的重要害虫，对多种有机氯、有机磷、氨基甲酸酯；拟除虫菊酯、苯甲酰脲类昆虫生长调节剂、农用抗生素甚至植物源杀虫剂都产生了不同程度的抗药性。本文就小菜蛾的抗药性的形成与发展、杀虫剂之间的交互抗性、抗性的生理生化机制以及分子、遗传机制等方面研究进展进行了论述。     

杀虫剂对小菜蛾种群的控制作用

通过室内饲养与田间系统调查，应用生命表方法研究了５ 种杀虫剂对小菜蛾种群的控制作用，结果表明：对小菜蛾种群控制作用效果最好的杀虫剂是１ ．８ ％ 集琦虫螨克，其干扰作用控制指数为０．１５４；其次为：菜蛾敌粉剂、１ ％ 农哈哈、２．５％ 功夫和４５ ％ 马拉硫磷，其干扰作用控制指数分别为０ ．１９５ 、０ ．２０７ 、０ ．３０２ 和０．３５９ ．     

Synthesis and assessment of attractiveness and mating disruption efficacy of sex pheromone microcapsules for the diamondback moth,Plutella xylostella （L.）

Microcapsules of sex pheromone of the diamondback moth （DBM）, Plutella xylostella （Lepidoptera： Plutellidae） were synthesized through complex coacervation using gelatin and gum arabic as wall-forming materials. The encapsulated pheromone released from these microcapsules into the air was monitored over six weeks in the field. Results of a field trial show that the attractiveness of microcapsules was superior to that of rubber septa loaded with the same amount of pheromone. The mating disruption efficiency of the pheromone treatment was estimated through comparing numbers of moths captured in pheromone-baited traps placed in pheromone treatment fields and pesticide treatment fields. The estimated mating disruption efficiency of the pheromone treatments ranged from 76.94% to 98.67% during the season. This study shows that pheromone microcapsules might provide a new method for P. xylostella control.     

化州柚与柚的转录组比较及黄酮生物合成差异表达基因分析

为获得化州柚和柚的转录组数据及黄酮类成分生物合成相关的差异表达基因,采集化州柚和柚的嫩叶样本作为受试材料,采用高通量二代测序技术进行转录组测序,并运用Nr、Swiss-Prot、KOG、KEGG等网络数据库进行转录组中表达基因功能的生物信息学分析,共组装得到116 202个单基因(Unigene),注释了68 923个单基因(59.31%),柚转录组中表达基因有94 798个,化州柚中表达基因107 196个,化州柚与柚的转录组差异表达基因共6 419个.结果表明:化州柚相对于柚上调基因有3 799个,占差异表达基因的59.18%,下调基因2 620个,占40.82%.通过与KEGG数据库进行比对,共获得771个基因功能注释,涉及125条代谢通路,找到9个与类黄酮、黄酮和黄酮醇生物合成相关基因,为化州柚和柚的化学成分差异分子基础研究奠定了基因数据基础.     

小菜蛾泛素基因的克隆及序列分析

设计了一对简并引物,从小菜蛾Plutella Xylostella(L.)抗溴氰菊酯品系和敏感品系的雌雄成虫基因组中分别克隆了泛素基因的编码区,GenBank登录号分别为EU28778,EU28779,EU28780,EU28781.序列分析表明,该基因的长度为228bp,编码的多肽由76个氨基酸组成.不同品系和不同性别的小菜蛾泛素基因的核苷酸序列、氨基酸序列等均存在差异,其中敏感品系雌雄成虫间差异较大,序列相似性为81.1%;抗性品系雌雄成虫间差异较小,序列相似性为97.8%.推测这些差异可能与小菜蛾抗药性的形成有关.因而为进一步研究小菜蛾抗药性形成机制和遗传机理奠定了基础.     

天葵块根提取物对菜青虫、小菜蛾生长发育的影响

采用浸渍叶碟法研究天葵块根提取物对菜青虫、小菜蛾生长发育的影响.结果表明,天葵块根提取物对菜青虫、小菜蛾具有明显的生长发育抑制作用,800mg/L对菜青虫、小菜蛾的生长发育抑制率分别为67.18%,68.31%.该提取物对菜青虫、小菜蛾生长发育抑制IC_(50)分别为389mg/L,251mg/L,对试虫的体重增加也有显著影响,处理组的平均体重增加值显著低于对照.     

颗粒体病毒对小菜蛾幼虫酚氧化酶及保护酶活性的影响

研究了小菜蛾颗粒体病毒(Plutella xylostella granulovirus,PxGV)对小菜蛾幼虫体内的酚氧化酶(PO)和保护酶活力的影响.结果表明,颗粒体病毒感染后,虫体内PO活力与对照组相比相对升高.对照组虫体内PO活力一直随日龄增大而下降;感染组虫体内前3 d PO活力也随日龄增大而下降,第5天降至最低点,第6天后又反弹升高.PxGV感染对虫体3种保护酶的影响程度各不相同.其中,过氧化氢酶(CAT)活力在对照组和感染组虫体中均随日龄增大而升高;同时,感染组虫体CAT活力显著高于对照组.相比之下,PxGV感染对小菜蛾幼虫体内过氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活力变化的影响较小.     

天葵几种粗提物对菜青虫、小菜蛾的拒食活性筛选

本文研究报道了天葵几种粗提物对菜青虫、小菜蛾的拒食活性筛选。经石油醚、氯仿、丙酮粗提物的拒食活性比较,结果表明石油醚粗提物的拒食效果较好,石油醚粗提物经进一步分离得油状和结晶粗提物,二者经拒食活性比较,结果表明石油醚油状粗提物的活性较强。