rhGM-CSF/IL-3融合蛋白中残余菌体DNA的检测

本文利用地高辛标记及检测试剂盒,标记ｐｏｐ２１３６（ＰＭＴＧ３）工程菌染色体ＤＮＡ作为探针,检测基因工程药品重组人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子／白细胞介素－３（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ／ＩＬ－３）融合蛋白中残余的菌体ＤＮＡ．结果符合质量标准每剂＜１００ｐｇ．     

白藜芦醇抗肿瘤作用的体外实验研究

选用呼吸、消化、循环系统来源的４种癌细胞株：人肺癌ＰＧ细胞、人大肠上皮癌ｌｏｖｏ细胞、人肝癌细胞ＨｅｐＧ２、人白血病ＨＬ－６０细胞以及小鼠成纤维细胞３Ｔ３作为研究对象,检测Ｒｅｓ的体外抗癌活性。采用ＭＴＴ法检测细胞的生长增殖活性。结果显示,Ｒｅｓ不影响正常细胞（３Ｔ３）的生长增殖性、对ＰＧ、ｌｏｖｏ细胞的生长增殖也不发生作用;但明显抑制ＨｅｐＧ２、ＨＬ－６０细胞的生长增殖。表明Ｒｅｓ的抗癌作用具有     

MTT法检测Rh-bFGF提高Balb/c3T3细胞酶活性及促细胞增殖作用

以Ｂａｌｂ／ｃ３Ｔ３细胞为靶细胞,采用体外细胞培养方法,观察重组人碱性成纤维细胞生长因子的促分裂和提高酶活性作用。结果发现：重组人碱性成纤维细胞生长因子提高Ｂａｌｂ／ｃ３Ｔ３细胞酶活性的最佳作用浓度为６．２５ｎｇ／ｍＬ（μｇ／Ｌ）,而促分裂增殖的最佳作用浓度为１００ｎｇ／ｍＬ（μｇ／Ｌ）。两者分别与应的对照组比较Ｐ＜０．０１,具有统计学意义。从而证实了重组人碱性成纤维细胞生长因子具有促分裂和增强酶活性的作用。     

MTT法检测Rh—bFGF提高Balb／c 3T3细胞酶活性及？…

以Ｂａｌｂ／ｃ３Ｔ３细胞为勒细胞，采用体外细胞培养方法，观察重组人碱性成纤维细胞生长因子的促分裂和提高酶活性作用。结果发现：重组人碱性成纤维细胞生长因子提高Ｂａｌｂ／ｃ ３Ｔ３细胞酶活性的最佳作用浓度为６．２５ｎｇ／ｍＬ，而促分裂增殖的最佳作用浓度为１００ｎｇ／ｍＬ，两者分别与应的对照组比较Ｐ〈０．０１，具有统计学意义。从而证实了重组人碱性成纤维细胞生长因子具有促分裂和增强酶活性的作用。     

bFGF促进大鼠坐骨神经损伤修复的电生理学

用大鼠坐骨神经钳夹损伤模型和电生理学方法研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对周围神经损伤修复过程中的功能影响。分别对治疗组和对照组进行２、３、４和５周的观察，结果显示：治疗组受损神经的动作电位幅值及传导速度的恢复率较对照组明显加快，差异有显著性意义。表明ｂＦＧＦ能促进损伤的外周神经再生及功能恢复。     

GaP：V^3＋自旋允许谱的精细结构的研究

在ＧａＰ：Ｖ＾３＋晶体中，对＾３Ａ２→＾３Ｔ１（Ｆ），＾３Ａ２→＾３Ｔ１（Ｐ）以及＾３Ａ２→＾３Ａ２→＾３Ｔ２（Ｆ）３组自旋允许跃迁均已在实验中得到它们的精细结构。同时考虑静电、晶场自旋－轨道耦合作用，计算了ＧａＰ：Ｖ＾３＋的旋轨耦合分裂，理论计算与实验符合很好。此外，还对这３组自旋允许跃迁的精细结构进行了识别，结果表明，＾３Ａ２→＾３Ｐ１（Ｐ）跃迁的２条１３８７４，１３８９０和１３９４６ｃｍ＾－     

基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子的纯化和鉴定

牛碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＲ）ｃＤＮＡ在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达，高压均质破碎菌体后，上清液以Ｈｅｐａｒｉｎ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ亲和层析、Ｃ１８反相ＨＰＬＣ分高纯化得到一分子量为２．２５×１０￣４的蛋白质，其等电点为９．３４，并能与抗牛ｂＦＧＦＭｃＡｂ反应；其氨基酸组成与ｂＦＧＦ文献值一致；活性分析结果表明此蛋白质不仅能促进ＢＡＬＢ／ｃ３Ｔ３细胞增值，ＥＤ＿（５０）＝０．８５ｎｇ／ｍｌ，而且能促进鸡胚尿囊膜微血管增生，所得蛋白为具有生物活性的重组碱性成纤维细胞生长因子。     

有限域GF（p^m）（p≥3）上3p^1,p^l＋1,P3次方程的根

提出了ＧＦ（３＾ｍ）上３次方程根的判别方法，讨论了有限域ＧＦ（ｐ＾ｍ）（ｐ≥３）上３ｐ′次方程根的状况，给出了ＧＦ（ｐ＾ｍ）上ｐ次和ｐ＾ｌ＋１次方程根的判别方法。     

掺锑α－Fe_2O_3超微粉材料的晶粒生长、微结构与气敏特性

用化学共沉淀法制得掺有一定量锑离子的α－Ｆｅ２Ｏ３，超微粉料．ＴＧ－ＤＴＡ、ＸＲＤ及ＳＥＭ等分析表明，掺锑量（Ｓｂ／Ｆｅ原子比）小于０．２时，材料仍保持α－Ｆｅ２Ｏ３的晶体结构，但其晶化温度随Ｓｂ含量的增加向高温区移动；在低温段纯α－Ｆｅ２Ｏ３的晶粒生长活化能（Ｑ＝１０．３ｋＪ／ｍｏｌ）远小于Ｓｂ／Ｆｅ＝０．１（Ｑ＝３５．３ｋＪ／ｍｏｌ）粉料的活化能；Ｓｂ５＋取代α－Ｆｅ２Ｏ３晶粒中Ｆｅ３＋格位与在４５０℃下长期工作粉料颗粒不易长大，是造成掺锑α－Ｆｅ２Ｏ３元件电阻降低一个多数量级及气敏性能显著改善的主要原因．     

碱性成纤维细胞生长因子在鼓膜刺激疗法中的应用

目的：为观察碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）在鼓膜刺激闻法中的作用。方法：对慢性单纯性中耳炎所致的残余鼓膜穿孔及外伤性鼓膜穿孔，行非手术鼓膜刺激疗法，修补鼓膜共３２耳作临床分析总结，ｂＦＧＦ治疗组１７耳（残余性中耳炎１２耳，外伤性５耳）；且１５耳（残余性中耳炎１０耳，外伤性５耳）。按常规鼓膜刺激疗法，鼓室内放入蘸有ｂＦＧＦ的明胶海绵进行治疗观察。结果：ｂＦＧＦ组成功率为１００％（１２耳），对照组     

重组人碱性成纤维细胞生长因子类似物在大肠杆菌中的分泌表达研究

用带有大肠杆菌外膜蛋白信号肽序列的重组分泌型表达载体pSE-hbFGF，在大肠杆菌BL21中分泌表达了rhbFGF类似物。SDS－PAGE、免疫印迹结果表明，表达产物分泌到了细胞周质和培养液中，用间接ELISA测定出培养上清中的rhbFGF类似物为24.5mg/L，周质中为36.5mg/L菌液（O.D600nm=10)。同时探讨了发酵培养中影响rhbFGF表达的几个关键因素，如诱导时期的选择、诱导时间的长短、培养基的选择及诱导剂的浓度等。     

测定血小板衍生生长因子活性方法的改进

以BALB／C小鼠胚胎成纤维细胞(BALB／C3T3)作为靶细胞，经20mmol／L醋酸钠平衡后的CM—Sepharose(CMS)吸附过的胎牛血清作为基础培养血清，应用[3-(4，5-dimethylthi—azolyl)-2，5-diphenyhetrazolium bromide，MTT]方法测定血小板源生长因子(platelet—derived growth factor，PDGF)诱导细胞增殖的生物活性，结果表明，该方法具有良好的量效关系，且精确度、重现性均较高。     

Involvement of p21ras in Xenopus mesoderm induction.

During early vertebrate embryogenesis, mesoderm is specified by a signal emanating from prospective endoderm. This signal can respecify Xenopus prospective ectoderm as mesoderm, and can be mimicked by members of the fibroblast growth factor and transforming growth factor-beta families. In other systems, the p21c-ras proto-oncogene product has been implicated in signal transduction for various polypeptide growth factors. We report here that a dominant inhibitory ras mutant blocks the mesoderm-inducing activity of fibroblast growth factor and activin, as well as the endogenous inducing activity of prospective endoderm. A constitutively active ras mutant partially mimics these activities. These results indicate that p21ras may have a central role in the transduction of the mesoderm inductive signal. Basic fibroblast growth factor and activin have emerged as candidates for endogenous mesoderm-inducing molecules. The character of the mesoderm induced by these two factors is overlapping but distinct when assessed both by histological and molecular criteria. The signal transduction pathways used during induction by these factors are unknown. We used messenger RNA microinjection of Xenopus eggs to express a dominant inhibitory mutant ras, p21(Asn 17)Ha-ras, in cells competent to respond to inducing factors to examine the role of p21ras in this response. This mutant, which has a reduced affinity for GTP relative to GDP, blocks a variety of mitogenic signals in 3T3 fibroblasts as well as the differentiation of pheochromocytoma cells in response to nerve growth factor.     

大鼠胎脑神经干细胞的分离和培养

胚龄14．5～16．5d(E14．5～16．5)的大鼠胎脑组织获得大鼠胎脑神经干细胞(rat fetal neural stem cells，rFNSCs)，培养于含有碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)和表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)的无血清培养液DMEM／F12中，用^3[H]胸苷掺入试验检测EGF和bFGF对大鼠胚胎神经干细胞分裂和增殖的影响．BrdU结合反应和nestin免疫组化检测显示培养细胞在早期时代约90％以上具有分裂增殖能力并显示nestln阳性，而且这些细胞在培养过程中可以分化神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞，证明分离培养的是神经干细胞，可用于移植、定向分化和基因转移的研究．     

rh—bFGF抑制顺铂诱导的人胃腺癌BGC—823细胞凋亡

目的：评价外源加入的rh-bFGF对抗肿瘤药物顺铂所致人胃腺癌细胞凋亡的影响。方法：利用顺铂诱导人胃腺癌BGC-823细胞产生的凋亡作模型,体外培养时在顺铂作用前或作用后加入不同浓度的rh-bFGF,观察细胞形态的变化和细胞凋亡经率的变化。结果：预培养的rh-bFGF质量浓度为10ng/mL及1ng/mL时抑制细胞凋亡的发生,共培养时则在质量浓度为1ng/mL时产生抑制调亡的作用。结论：外源加入的rh-bFGF在一定的浓度范围内,不信纸预培养还是与顺铂的共培养12h,均可不同程度的抑制顺铂胃腺癌BGC-823细胞的凋亡,并且这种剂量效应与rh-bFGF影响BGC-823细胞的细胞周期相关。     

重组人碱性成纤维细胞生长因子诱导Balb/c3T3细胞增殖的实验研究

目的研究不同浓度重组人碱性成纤维细胞因子对Balb/c 3T3细胞增殖活性的影响.方法重组质粒pGEX-bFGF转入到DH5α大肠杆菌体内,增菌培养表达bFGF,亲和层析纯化,制备8种不同药物浓度的bFGF,分别进行诱导Balb/c 3T3细胞增殖实验研究,MTT法检测各组细胞增殖活性.结果 bFGF诱导Balb/c 3T3细胞增殖存在浓度依赖性,最适浓度为4～16μg/L.结论 bFGF具有较好的诱导Balb/c 3T3细胞增殖的能力,为后续研究工作奠定实验基础.     

成年小鼠成纤维细胞体外培养

成年小鼠皮肤成纤维细胞可从尾部取材用组织块培养法进行原代培养,添加血清的M 199(E arle′s)和低糖的DM EM均能较好的满足原代细胞的生长.两种培养液中细胞增殖的速度无明显差异.用0.25%胰蛋白酶消化小鼠尾尖原代培养物,上皮细胞与成纤维细胞有明显的敏感度差别.经控温控时消化传代,可将上皮细胞与成纤维细胞分离纯化.     

蜡状芽孢杆菌Bc-05菌株纤溶酶的酶学性质

对蜡状芽孢杆菌Bc-05茵株的发酵上清液经硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析所获得的纤溶酶进行性质研究.结果表明:经纤维蛋白平板法检测该酶有直接水解纤维蛋白和激活纤溶酶原的双重作用,最适作用温度37℃,最适pH=8.0,在pH=8.0条件下25℃和37℃放置24 h酶活力仍保持77.52%和78.96%,该酶体外对兔血凝块有明显的溶解作用;Ca2+,Mn2+离子对该酶具有激活作用,而Cu2+,Fe3+完全抑制其纤溶活性,PMSF,EDTA和DTT对该酶有抑制作用,说明活性中心含有二硫键、金属离子和丝氨酸;测其N端10个氨基酸序列为NH2-Val-Thr-Pro-Thr-Asn-Ala-Val-Asn-Thr-Gly,与其他生物来源的纤溶酶相比较没有同源性.     

不同培养基对山羊毛囊体外培养的影响研究

为得到1种简捷而适宜的山羊毛囊体外培养方法,采用3因子3水平的拉丁方正交试验设计(L9(34))方法,对比研究了无血清的Williams E培养基、无血清的DMEM培养基和添加10％FCS(胎牛血清)的DMEM培养基,及其在3种培养基中分别添加0、2和10ng／mL 3种不同质量浓度的血管内皮细胞生长因子(VEGF)和表皮细胞生长因子(EGF)时对毛囊体外培养的影响。将成年青山羊皮肤上的单根毛囊完整地分离出来,并同时平行培养在9种培养基中,借助于倒置显微镜和目镜测微尺随时不断地观察毛囊生长的形态变化和测量毛根的长度。结果发现:山羊游离毛囊在9种培养基中均能很好地生长;但以无血清的培养基和在Williams E培养基的效果最好;分别和同时添加2％～10％的VEGF和EGF时可加快毛囊的生长;添加10％FCS和不添加细胞生长因子时毛囊也能生长,但生长速度较慢。