透明质酸产生菌的化学诱变及发酵条件探索

以兽疫链球菌（Streptococcus zooepidemicus）C55151为原始菌种, 经N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍（NTG）诱变处理, 获得一株高产透明质酸（Hyaluroni c acid, HA）的变异株J18, 其HA产量较原始株提高一倍. 利用正交设计试验探索出该变异株的最佳发酵培养基配比为葡萄糖50 g/L, 酵母膏30 g/L, 硫酸镁0.5 g/L.　发现添加十二烷基硫酸钠（SDS）能够大幅度提高HA产量． 同时对原始株、 变异株的发酵过程进行了研究, 发现变异株J18在发酵的任何时间, 其HA产量都高于原始菌种, 且菌体浓度与发酵液中的葡萄糖浓度及pH值呈负相关性.     

原生质体诱变选育透明质酸菌株及发酵条件的优化

采用N 甲基 N′ 硝基 N 亚硝基胍(NTG)诱变原生质体,选育了一株产透明质酸的兽疫链球菌(Streptococcuszooepidemicus)H 35.并经过发酵条件的优化,确定了溶菌酶作用的最佳条件是0.6mg/mL溶菌酶高渗溶液,30℃水浴下酶解20min;H 35的最佳发酵条件是葡萄糖4.0%、酵母膏2.0%、NaCl0.2%、KH2PO40.2%、MgSO4·7H2O0.06%、初始pH7.0、35℃,200r/min、培养18h.发酵液中透明质酸的含量从最初的0.47g/L提高到优化后的1.43g/L.     

透明质酸产生菌的紫外诱变及摇瓶条件的优化

对马疫链球菌SH-0进行紫外诱变,筛选出溶血素和透明质酸酶双缺陷型突变菌株SH-2,使透明质酸产量提高5倍;突变株经5次传代,其产酸量及HA的相对分子质量保持稳定．经过发酵条件的优化,确定最佳摇瓶条件是初始pH7．6,发酵温度37℃,发酵时间44h．     

环孢菌素A产生菌诱变育种及发酵条件研究

采用UV、NTG复合诱变的方法对产环孢菌素A的茄病镰刀菌(Fusarinm solani)进行诱变处理,在含制霉菌素的平板上筛选到产生环孢菌素A水平较高的突变菌株FS-un26,并对突变菌株的发酵条件进行了优化研究,使环孢菌素产量比出发菌株提高了20.6%.     

一株产生透明质酸的菌株的筛选

从牛鼻粘膜中分离出一株产生透明质酸的细菌,经鉴定为兽疫链球菌（Streptococcus zooepidemicus）,在葡萄糖为碳源的摇瓶发酵中产量为3．1g/L,具有微生物发酵法生产透明质酸的潜力。     

CoA产生菌的诱变育种及发酵条件研究

研究了ＣｏＡ产生菌诱变育种及摇瓶发酵条件。以产氨短杆菌（Ｂｒｅｖｉｂａｃ－ｔｅｒｉｕｍ ａｍｍｏｎｉａｇｅｎｅｓ）ＡＳ１．８４４为出发菌株， 经单菌落分离获得了 ＢＳ１．８４４菌株，再经过紫外和 ＮＴＧ诱变，获得了对 ＴＭＴＤ具有抗性的 ＣＴ４００变异株， ＣｏＡ产量为 ５３５ ｕ／ｍＬ，比原亲株提高了 ２６９％。实验了不同的培养基组分，获得了最适培养基。采用两步补料法能显著提高 ＣｏＡ产量，比原一步补料提高 ３３％。不加热提取工艺能有效降低色素含量， ＣｏＡ得率略有增加。实验选用了 ４种阳离子型表面活性剂，以 ＣＰＣ对积累 ＣＯＡ效果最好。     

庆大霉素产生菌的紫外线诱变育种及发酵条件的研究

以庆大霉素产生菌ＪＹ１－１２为出发菌株，经紫外线照射，选育出性能优良菌株ＪＹ３－５，经正交试验确定了其最佳发酵培养基，研究了最佳发酵温及初始ＰＨ值，使其摇瓶效价提高３４．３％；３０ｍ＾３罐放大试验，比出发菌株效价提高１８．６％。     

普鲁兰产生菌的紫外诱变及其发酵条件

采用紫外照射法对原始菌株进行诱变和筛选, 得到一株高产普鲁兰变异菌株T1, 使普鲁兰的转化率达30.14%, 是原始菌株的5.7倍. 通过正交设计实验对原始菌株与变异 株T1的最佳发酵条件进行了比较, 确定了变异株T1的最佳发酵条件为: 蛋白胨0.5g/L, 蔗糖 50 g/L, 起始pH 5.0. 普鲁兰的转化率主要与氮源浓度有关. 并对该变异株与原 始菌株的发酵特征进行了研究, 发现变异株的特征发生了根本性改变.     

透明质酸发酵流加过程的研究

研究了透明质酸发酵的流加过程,对碳源的简单分批流加、指数流加、前中期指数流加+后期控制糖浓度的流加以及前期指数流加+中期控制糖浓度的流加这四种不同流加方式进行了探讨,得到最佳流加方式,透明质酸发酵水平稳定在4g/L以上。     

井冈霉素产生菌的诱变选育及发酵条件优化

本研究以一株能产生井冈霉素的吸水链霉菌井冈变种(Strepto myces hyroscupicusvar.Jingganggensis yen)J1为研究对象,通过紫外线(Uv)及硫酸二乙酯(DES)两次诱变,经平皿初筛,摇瓶复筛,获得茵株j1-U-D,效价达25874×10-6g/mL,比出发菌株提高29%.菌株经过5次传代,代间效价差异不明显,遗传性能较稳定.通过单因素实验和正交实验分析研究了摇瓶产井冈霉素的最适发酵培养基,该茵的最适发酵培养基为(%):淀粉12%、酵母粉4%、KH2Po4o.05%、NaCl 0.15%.最适发酵条件为:发酵起始pH值7.2,接种量8%,发酵温度37℃,发酵时间96 h.茵株最终效价达30610×10-6/mL,比出发茵株提高53%.     

鸡冠中透明质酸提取工艺条件的研究

以新鲜公鸡冠为原料对透明质酸的提取方法进行研究.以透明质酸得率为指标,确定采用乙醇处理为最佳方法,选择乙醇体积分数、料液比、提取时间为影响因素,通过单因素和正交试验确定了透明质酸的最佳提取条件:透明质酸提取液与乙醇体积比为1∶2;乙醇体积分数为85％;提取时间为26 h,得到该工艺条件下制备的透明质酸得率为4.84％.通过紫外光谱法检测,显示该提取物质与标准品峰形位置一致,确定该提取物质是透明质酸.     

非自然环境中选育青霉菌菌种的研究

对非自然环境中青霉菌菌株的培养选育进行了实验研究。结果表明, 随着辐射吸收剂量的增加, 菌株致死率也在增加; 在同一辐射吸收剂量下, 在非自然环境中培养经电离辐射（γ射线） 辐照的菌株时发现,随着非自然环境中的物理参数（如电场、磁场强度）的变化, 菌株致死率也相应变化, 一般说, 强度值增加时, 致死率也相应增加。当电场强度为３００ ｋＶ／ｍ 、磁感应强度为０－６ Ｔ时, 正变率有一极大值。     

辐照交联透明质酸的降解特性研究

用甲基丙烯酸缩水甘油酯（GM）对透明质酸（HA）进行接枝改性,制备交联透明质酸衍生物（GMHA）,通过辐照获得透明质酸凝胶。分光光度计测定吸光度表明所制备的HA凝胶是一种可降解的生物材料。其稳定性受到制备条件和环境条件的影响：如HA的分子量为70万时在相对长时间内比分子量为10万时表现的相对稳定;当分子量相同,辐照剂量为1kGy时降解明显,辐照剂量为5kGy时表现出较好的稳定性;HA凝胶在中性环境条件下容易引起降解,在pH=4时表现的相对稳定;中低温度有利于HA凝胶的稳定,在高温50℃时降解迅速。     

曲酸产生菌F31012变株的选育及发酵条件的研究

F31012变株是以Aspergillus oryzae(米曲霉）2336经3次紫外诱变处理,采用快速筛选方法而获得的突变株,研究了F31012变株发酵工艺条件,经过正交试验得出该突变株最佳发酵培养基为：玉米淀粉10％,酵母膏0．2％,K2HPO40.15,MgSO4.7H2O0.05%,KCl0.05%,pH6.0.移种量为15％,每300ml三角瓶装量75ml,时间6天,发酵培养基最适温度为30℃。     

外源性透明质酸减少R5-HIV对CD4~+T细胞感染的研究（英文）

目的探讨外源性透明质酸(HA)是否可以降低巨噬细胞嗜性(CCR5依赖,R5)人类免疫缺陷病毒(HIV)对CD4+T细胞的感染性。方法首先用TZM-bl细胞和未受刺激的CD4+T细胞检测,以评估外源性透明质酸(HA)能否降低R5-HIV的感染性。用透明质酸酶去处理未受刺激的CD4+T细胞,研究内源性HA对R5-HIV感染性的影响。最后,同时测量外源性和内源性透明质酸(HA)对R5-HIV对CD4+T细胞粘和力的影响。结果 (1)100μg外源性HA处理能够显著降低R5-HIV感染TZM-bl细胞和未受刺激的CD4+T细胞(P<0.001)。(2)透明质酸酶处理可增强HIV的感染性,但是如果加上100μg外源性HA可以逆转透明质酸酶的处理(P<0.001)。(3)100μg外源性HA可以减少R5-HIV对CD4+T细胞的粘和力,透明质酸酶处理可以提高R5-HIV对CD4+T细胞的粘和力(P<0.001)。结论外源性HA减少R5-HIV对未受刺激的CD4+T细胞的感染性,而透明质酸酶处理可以提高R5-HIV对CD4+T细胞的粘和力,能增强R5-HIV对CD4+T细胞的感染性。     

透明质酸发酵条件的初步研究

采用兽瘟链球菌 (Streptococcuszooepidemicus)进行发酵生产透明质酸 (hyaluronicacid ,HA) .摇瓶研究表明 :葡萄糖的补加量和补加方式对HA发酵有着较大的影响 ,采用 4 0g·L- 1的初始葡萄糖浓度及维持培养过程 10g·L- 1的糖浓度 ,可使HA的产量达到 4 .0g·L- 1,分子量在 2 .0× 10 6 Da以上 .     

透明质酸的发酵调控研究

采用马链球菌 (Streptococcusequi)进行发酵生产透明质酸 (hyaluronicacid ,HA) .5L发酵罐发酵研究表明 :发酵调控对HA的产量和分子量有较大的影响 ,采用 2 0 g·L- 1的初始葡萄糖浓度及维持培养过程 2 0 g·L- 1的糖浓度 ,补加 5 g·L- 1的硫铵 ,采用一定的 pH控制策略可使HA的产量达到 1.0 g·L- 1,分子量在 2 .84× 10 6 Da以上 .