穿心莲内酯提取工艺研究

采用正交实验法探讨穿心连内酯的提取工艺,以提取的内酯量为参考指标,考察了料液比、乙醇浓度、提取温度和提取时间等影响因素。确定影响穿心莲内酯提取率的因素大小顺序为：乙醇浓度〉提取温度〉料液比〉提取时间,其最佳工艺条件为：60℃下,用1500mL75%的乙醇对100g穿心莲进行浸提2h,得622mg穿心莲内酯。     

穿心莲内酯提取工艺研究

目的：筛选穿心莲最佳醇提取工艺条件。方法：以穿心莲内酯为检测指标,考察不同工艺条件对其含量的影响。结果：确定其醇提最佳工艺。结论：对穿心莲药材以80％乙醇6倍量回流提取（温度80℃）2次,每次2小时,所得穿心莲内酯含量最高。     

蛹虫草子实体胶囊对S180小鼠抗肿瘤作用的实验研究

采用小鼠腋下S180实体瘤模型,通过检测抑瘤率、免疫器官重量以及血清NSE、CEA、CA72 4等指标,全面评价蛹虫草子实体胶囊对S180小鼠的抗肿瘤作用。结果表明,蛹虫草子实体胶囊中、高剂量能明显抑制S180实体瘤的生长（P<0.05）;高、中、低剂量均可延长S180腹水瘤小鼠的生存时间;高、中、低剂量组均能降低血清NSE的值;中、低剂量组均能增加血清CEA的值;高剂量组能增加血清CA72 4值,而中、低剂量则减少血清CA72 4值。研究认为,蛹虫草子实体胶囊对S180小鼠具有一定的抗肿瘤作用。     

穿心莲片中脱水穿心莲内酯在小鼠血浆中的药动学

建立简单、快速的测定穿心莲片中脱水穿心莲内酯在小鼠血浆中浓度的反相高效液相色谱法,研究脱水穿心莲内酯在小鼠血浆中的药动学.血浆样品经甲醇、醋酸缓冲液(pH3.6)及乙酸乙酯处理后用于测定.色谱柱为:C18-ODS,流动相为:甲醇—乙腈—水(11.5∶28.5∶60),检测波长为252 mm.小鼠ig穿心莲片药液后,脱水穿心莲内酯的药动学行为符合一室开放模型,主要药动学参数分别为:Ka=0.577±0.771 m in-1,Ke=0.010±0.002 m in-1,t1/2(Ka)=2.77±1.69 m in,t1/2(Ke)=74.08±15.49 m in,T(peak)=13.25±7.30 m in,C(max)=7.98±3.61 mg.L-1,AUC=1 036.45±658.06 mg.L-1.m in,CL/F(s)=0.006±0.004 g.kg-1.m in-1/mg.L-1,V/F(c)=0.57±0.32 g.kg-1/mg.L-1,Lagtime=3.55±1.23 m in.该方法能有效地监测小鼠血浆中脱水穿心莲内酯的浓度变化,实验结果可为人体内相关药动学研究提供参考.     

穿心莲片中脱水穿心莲内酯在大鼠血浆中RP-HPLC的测定

建立了一种简单、快速的测定穿心莲片中脱水穿心莲内酯在大鼠血浆中浓度的反相高效液相色谱法.使用C18反相柱(ID,4.0mm×250mm,粒径5μm),流动相为甲醇-水(55:45),流速为0.7mL/min,检测波长为252 nm.在此条件下,20min内脱水穿心莲内酯得到检测,分离良好,不受杂质干扰.在0.204.～10.175μg·mL-1时线性关系良好,r=0.9993.低、中、高浓度下的回收率、重现性均符合方法学要求.该方法能有效地监测大鼠血浆中脱水穿心莲内酯的浓度变化.     

反相色谱法快速测定3种穿心莲内酯含量

利用高效液相色谱法测定穿心莲叶及浸膏中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯及去氧穿心莲内酯含量 ,采用 WatersSymm etryshield C18色谱柱及甲醇提取方法。结果表明 ,穿心莲内酯在 0 .14～ 1.31μg范围内呈线性 ,脱水穿心莲内酯与去氧穿心莲内酯分别在 0 .14～ 1.2 9μg、0 .14～ 1.2 2μg范围内呈线性 ,相关系数 r分别为 0 .9976、0 .9913、0 .9985 ,该法可用于快速测定 3种内酯含量 ,对于穿心莲的质量评价有一定参考作用。     

穿心莲内酯衍生物构效关系的理论研究

选取已测活性的17个穿心莲内酯衍生物,利用高斯软件计算得到其结构参数,通过主成分分析筛选出主要影响参数,进一步利用BP神经网络对建立的活性评价模型进行验证.建立了穿心莲内酯衍生物的构效关系,为进一步开发具有更高活性的穿心莲内酯类药物提供理论依据.     

RP-HPLC测定穿心莲、路边青配伍药液中脱水穿心莲内酯在小鼠血浆中的浓度

建立一种简单、快速的反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定穿心莲、路边青配伍药液中脱水穿心莲内酯在小鼠血浆中的浓度.使用C18反相柱(4.0mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-水(13∶17∶70),流速:1.0mL·min-1,检测波长:252nm.血药浓度在0.102～20.305mg·L-1(r=0.9998)时线性关系良好;低、中、高浓度下的回收率、重现性均符合方法学要求.该方法能有效地监测小鼠血浆中脱水穿心莲内酯的浓度变化.     

以糖和穿心莲内酯为原料合成1,2-和1,3-二醇环磷酸酯

以1,2-丙叉基木糖、1,2-丙叉基葡萄糖、穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯为原料和磷酰氯作用,通过一锅法以较高的产率分别得到了六元和五元环磷酸酯,并对反应条件进行了优化.所合成的化合物结构经13C-NMR、1H-NMR、31P-NMR、MS和元素分析确证.     

穿心莲内酯对小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖及细胞周期的影响

目的:研究穿心莲内酯对小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖及细胞周期的影响,并对其免疫调节作用进行初步探讨.方法:分离小鼠淋巴结细胞,以双色荧光抗体染色技术结合流式细胞术检测在刀豆蛋白A(Con A)的刺激下,穿心莲内酯对T淋巴细胞早期活化抗原CD69表达的影响;用羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色分析穿心莲内酯对T淋巴细胞增殖的影响;用碘化丙锭染色分析细胞周期的分布.结果:终浓度为10、20、30、40 μmol/L的穿心莲内酯对Con A刺激的早期活化抗原CD69的表达具有明显的抑制作用(P<0.01);对Con A刺激的T淋巴细胞增殖具有明显的抑制作用(P<0.01);并明显阻止T淋巴细胞进入S期,且呈剂量依赖性.结论:穿心莲内酯对小鼠T淋巴细胞的体外活化及增殖均具有明显的抑制作用,并抑制T淋巴细胞进入分裂周期.     

超声激活血卟啉对S180肿瘤细胞膜脂的影响

通过应用TBA法、比色法和荧光偏振法研究腹水型S180细胞在超声激活血卟啉处理后膜脂质过氧化程度,游离脂肪酸含量和膜流动性,探讨声动力疗法对腹水瘤膜脂结构和功能的作用以及声动力抑癌作用的生物学机制.研究结果显示,单纯超声可使肿瘤细胞膜脂质过氧化,磷脂降解而降低膜流动性.超声结合血卟啉显著增强单纯超声的作用,单纯血卟啉无作用.声动力疗法处理后,膜流动性的下降与脂质过氧化和磷脂降解呈显著相关,且与磷脂降解关系更为密切.分析得出,声动力疗法能使肿瘤细胞膜脂质过氧化程度明显升高,磷脂降解加剧,显著降低膜流动性,从而影响细胞正常代谢,抑制肿瘤细胞的恶性增殖.     

亮菌多糖对S180荷瘤小鼠免疫功能的研究

通过对荷瘤小鼠腹腔注射亮菌多糖后,观察其对荷瘤小鼠淋巴细胞增殖反应、NK细胞活性及对IL-1、IL-2、TNF-α、IFN-γ诱生的影响.研究结果表明：亮菌多糖能够显著提高荷瘤小鼠NK细胞杀伤活性、对ConA刺激的小鼠淋巴细胞有明显的促进作用,提高荷瘤小鼠脾细胞产生IL-2的能力;促进荷瘤小鼠机体细胞分泌TNF-α;明显提高荷瘤小鼠血清中IFN-γ的含量.提示亮菌多糖可通过调节机体免疫功能而间接起到抗肿瘤的作用.     

卡莫司汀缓释植入剂对S180肉瘤的抑制作用

以PLGA为载体的卡莫司汀缓释植入剂能有效抑制小鼠S180肿瘤的生长.含15%和25%卡莫司汀的缓释植入剂对肿瘤的抑制率分别为99%和98%(P<0.05).观察2个月发现,对照组小鼠平均存活时间为30.4天,15%卡莫司汀组小鼠平均存活52.7天(P<0.05),25%卡莫司汀组小鼠平均存活20天,瘤内注射组小鼠平均存活10天.     

夹竹桃多糖抗小鼠S180肉瘤的实验研究

用水提醇沉法提取夹竹桃叶多糖(NP),观察其对小鼠S180皮下移植瘤和S180腹水瘤的生长抑制作用,采用免疫组化法检测了移植瘤组织中PCNA、bcl-2、bax蛋白表达的变化,采用药物相互作用指数研究了NP与环磷酰胺联用对S180移植瘤的协同抑制作用.苯酚-硫酸法测定结果表明,提取物中的多糖质量分数为81.14%.NP对小鼠S180移植瘤有显著的抑制作用并且能延长腹水瘤小鼠的寿命,50,100,150 mg/kg剂量组的抑瘤率分别为40.00%,50.83%,44.17%,生命延长率分别为42.86%,64.29%,43.88%.NP作用后瘤组织中PCNA、bcl-2细胞的阳性率显著降低,bax细胞的阳性率显著升高,NP与环磷酰胺有一定的协同效应.     

IRM-2小鼠自发淋巴瘤、S_(180)、U_(14)的宿主排斥性的比较研究

目的研究IRM_2小鼠自发淋巴瘤是否适应其它品系的小鼠,为更好地使用该小鼠自发肿瘤提供实验依据。我们研究了IRM_2小鼠自发淋巴瘤、肉瘤S180、宫颈癌U14对多种宿主的排斥性。方法采用S180、U14肿瘤为对照,将IRM_2小鼠淋巴瘤、S180、U14用多种方法接种于ICR、IRM_2、HL和KM等小鼠身上,于10~12d后取出肿瘤称重。结果多种方法接种S180、U14于几种小鼠身上都能使肿瘤生长;而多种比例浓度的方法接种IRM_2小鼠自发淋巴瘤于ICR、KM、HL身上肿瘤都不生长。结论S180、U14对宿主无排斥性,而IRM_2小鼠白发淋巴瘤对宿主有排斥性。     

关于肿瘤移植模型病理学方面的探讨

应用小鼠S1 80 肉瘤 ,小鼠EAC腹水瘤实体型两种瘤株 ,进行BALB c小鼠移植瘤模型的研究。试验设S1 80 对照组 ,S1 80 给药组 ,EAC对照组 ,EAC给药组 ,比较给药 10d后实体瘤大小及其病理学变化特征。病理学观察对照组和给药组间、瘤体切面积和瘤细胞坏死率差异均有极显著性 ,两对照组的小鼠肝脏内均发现有瘤细胞转移。由此说明病理学观察具有重要的参考价值     

聚焦超声激活血卟啉对在体S180肿瘤细胞的抑制作用研究

目的 研究频率为2.2MHz的聚焦超声结合血卟啉对在体S180肿瘤组织的杀伤作用.方法 计算不同处理后对肿瘤组织的生长抑制作用,并通过透射电镜观察处理后不同时间段取材S180实体瘤超微结构的变化.结果 单纯血卟啉对在体S180肿瘤细胞几乎没有生长抑制作用;单纯超声对S180肿瘤组织有一定的生长抑制作用,且随着超声强度的增加,抑制效应逐渐显著,而超声结合血卟啉所产生的协同效应对S180肿瘤细胞的生长抑制作用明显高于单纯超声组,电镜下观察到超声激活血卟啉可以破坏肿瘤细胞的超微结构,尤其是对肿瘤细胞膜和膜性细胞器的通透性和结构的损伤,并且随着取材时间的延长,损伤效应进一步加强.结论 超声结合血卟啉能有效地抑制S180肿瘤的生长作用.     

接种S180肉瘤的小鼠肿瘤组织和器官中组蛋白与正常小鼠的比较研究

采用酸抽提法分别提取接种S180肉瘤的小鼠肿瘤组织以及肝、脾、肾等器官的组蛋白和正常小鼠相应组织和器官的组蛋白，并采用SDS-PAGE方法进行检测．结果表明，正常小鼠的肝、脾、肾等器官提取的组蛋白在检测中可以看到组蛋白H1的亚带，而接种了S180肉瘤的小鼠的肿瘤组织以及肝、脾、肾等器官的组蛋白在检测中基本无明显的条带．这说明发生在小鼠身上的S180肿瘤组织对小鼠的肝、脾、肾组织中的组蛋白产生一定影响．     

番荔枝不同部位醇提物对S_（180）荷瘤小鼠的抑瘤和一般毒性作用

为评价番荔枝的叶、枝、种子乙醇提取物的抑瘤和一般毒性作用,以3 mg/kg顺铂为阳性药,将不同剂量的醇提物对S180荷瘤小鼠给药10 d后测定小鼠抑瘤率、体重、胸腺指数和脾指数.结果显示：17.5,35,70 mg/kg的种子醇提物有明显的抑瘤作用（P〈0.05）,其抑瘤率分别为51.3%、42.7%和39.5%,并显著降低荷瘤小鼠体重、胸腺指数和脾指数（P〈0.01）.而300,600 mg/kg叶和枝醇提物无抑瘤作用,不能降低荷瘤小鼠体重、胸腺指数和脾指数（P〉0.05）.表明番荔枝的抗肿瘤和毒性成分主要分布在种子部位.