改变镉生物有效性对植物吸收积累镉的影响

土壤镉的生物有效性受土壤成分和土壤环境条件的影响,有机质、pH、氧化还原电位等的变化都会影响土壤中镉由有机结合态和残渣态一不能被植物吸收积累的镉形态向可交换态、碳酸盐态、铁锰氧化态一容易被植物吸收利用的形态转化．一些土壤改良剂、有机物料、营养元素以及微生物都可以改变土壤镉的有效性,进一步影响植物积累镉的量,对植物生长及品质造成影响．由于有效态镉直接影响植物对镉的吸收积累,寻找有利途径以减少土壤有效态从而降低植物对镉的吸收显得非常关键．     

镉对绿豆幼苗生长影响的研究

对不同镉离子浓度胁迫下绿豆幼苗生长状况进行了的比较分析，结果表明：不同镉离子浓度对绿豆幼苗的影响是显著的，对叶器官的毒害作用最大，其次是根，对茎的毒害作用最小；对株离生长的抑制影响高于根长的生长；镉离子浓度为0．5mg／L对绿豆全株生物量生长产生显著的抑制，随着浓度的增加对其生长的抑制作用也在增加；但0．5mg／L镉离子浓度对叶、根生物量积累没有显著影响，而10mg／L对两者的生长均产生显著影响。但在10-100mg/L范围内对两者的影响差异不大；从镉离子对株高的影响基本与对全株生物量一致，而不同镉离子浓度对根长的生长作用较为复杂．绿豆幼苗地上部分脯氨酸含量均随着镉离子浓度的增大而增大，到100mg／L时脯氨酸含量反而下降．     

IrrE重组大肠杆菌的构建和性能分析

利用p ET-28a(+)质粒将来源于耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans)R1的irr E基因在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中进行异源表达,在IPTG终浓度2,mmol/L、诱导温度37,℃、诱导培养6,h条件下进行了蛋白诱导.进一步考察Irr E异源表达对大肠杆菌生长性能和耐受能力的影响,结果表明:Irr E的表达能够提高大肠杆菌正常条件下的生长速率和最终生物量;同时,能够不同程度提高大肠杆菌在压力冲击下的存活能力,其中,高渗条件下存活能力的提高最为明显.而重组菌株在压力冲击下的生长速率和最终生物量均明显高于对照菌株.这说明Irr E在提高大肠杆菌的压力耐受性方面表现出良好的效果.     

镉胁迫下硫对甜高粱幼苗根系形态和生理特性的影响

以甜高粱为材料,采用水培试验的方法,研究了不同浓度S(0、120、240μmol/L)对镉(10μmol/L)胁迫下甜高粱幼苗根系的生长影响。结果表明:镉胁迫下,甜高粱幼苗根系的生长受到抑制、根系活力下降、丙二醛(MDA)大量积累、细胞透性明显增加、过氧化物酶(POD)活性降低,向培养液中添加不同浓度的硫,均能有效缓解镉胁迫对甜高粱幼苗的毒害,与无硫对照相比,施加硫可以促进甜高粱幼苗根系的生长,增加幼苗根系中的根系活力、提高POD的活性,降低细胞透性和MDA在根中的积累,其中,用120μmol/L的硫能够有效缓解镉对甜高粱幼苗根系的毒害作用。     

挥发油对大肠杆菌生长代谢作用的微量热法研究

从中药茵陈、大黄、麻黄中提取挥发油作用于大肠杆菌的生长,微量热法测定了不同浓度的挥发油药液对其生长的热功率-时间曲线,运用Logistic方程求出生长速率常数,通过计算机模拟建立了生长速率常数与药物浓度之间的关系,实验表明三种挥发油对大肠杆菌的生长都具有抑制作用,根据拟和曲线确定理论最小抑菌浓度,结果表明大黄挥发油的抑菌效果最好．     

强化工业大肠杆菌生长特性的研究

大肠杆菌是制药工业中的重要蛋白质药物生产菌株。然而乙酸积累、中心碳代谢负担过重等不良因素严重制约着大肠杆菌的高密度生长。利用Red同源重组技术,构建icd和ptsG双基因敲除大肠杆菌菌株,以分流碳代谢流,提高碳利用效率,最终增加菌体生物量。同时构建ppc过表达质粒,减少乙酸积累。发酵结果显示,构建的重组菌株产酸量大幅减少,pH值平均升高20%,菌体浓度增加了50%,生长特性得到了强化。     

常规水稻耐镉性及镉低积累种质的筛选

水稻是我国重要的粮食作物,水稻种质耐镉性及镉低积累筛选的研究对于保障粮食安全具有重要意义。本试验以30个常规水稻品种为试验材料,比较分析了对照处理和2 mg/L镉胁迫处理对水稻种子的发芽率、发芽指数、幼苗的根长、芽长等指标的影响,通过对供试水稻样品的各指标镉胁迫指数进行单因素方差分析,筛选出具有优良耐镉性的水稻品种。结果表明2 mg/L的镉溶液胁迫对水稻种子发芽率、发芽指数、幼苗芽长等的指标无显著影响,但对幼苗的根长生长抑制效果较明显,存在显著性差异,故水稻幼苗根长的胁迫指数可作为评价水稻种质耐镉性的生理指标。对根长镉胁迫指数采用最小显著差异数法分析得出30个常规水稻品种中,IR~24镉胁迫指数最高为0.6601,耐镉性最好且与其他品种存在显著性差异,而水稻品种粳1711镉胁迫指数最低为0.0636,表明耐镉性最差。     

浸矿细菌抗镉性能的试验研究

通过在培养基中加入一定浓度的镉离子,确定浸矿细菌对镉离子的抗性以及镉对浸矿细菌生长的影响.研究表明:不同浓度的镉离子对细菌的生长和活性起不同的作用.菌液中镉离子浓度低于0.1 mmol/L时,镉离子是浸矿细菌的营养物质,对细菌的生长起促进作用;随着镉离子浓度的增高,对细菌的生长起一定的抑制作用.浸矿细菌表现出良好的抗镉能力,镉离子浓度在高达8 mmol/L时,浸矿细菌仍然生长,保持好的活性.菌液中镉离子浓度为10 mmol/L时,浸矿细菌的生长受到影响.     

镉对大麦细胞分裂和染色体形态的影响

研究了不同浓度氯化镉溶液对大麦根的生长、细胞分裂和染色体形态的毒害效应。实验所用氯化镉浓度为０．５，１，３，５，７，１０，１５和２０ｐｐｍ。结果表明，随着镉浓度的增加和处理时间的延长，根的生长速率和有丝分裂指数递减。不同浓度的镉都能引起染色体畸变，包括Ｃ－有丝分裂，染色体桥和粘连，染色体断片以及微核等。恢复培养后根长和有丝分裂指数均有不同程度的增加，染色体畸变率降低。镉对大麦生长的抑制和毒害效应取决于镉浓度和处理时间。     

重组大肠杆菌分批-补料培养生产类人胶原蛋白的过程控制

目的优化重组大肠杆菌高密度发酵的调控工艺。方法通过考察比生长速率、3种控氧方式以及诱导强度对细胞和类人胶原蛋白产量的影响,确定最佳的发酵工艺。结果比生长速率显著影响类人胶原蛋白的产量,且最适比生长速率为0.15～0.20h-1;在提高罐压的条件下,细胞和类人胶原蛋白的浓度均显著高于其他两种控氧方式,充入富氧空气的细胞和类人胶原蛋白的浓度均最低;诱导强度对细胞生长和蛋白质表达的影响非常大,当细胞浓度达47±2g/L(DCW)时,开始升温至42℃进行诱导,最佳条件为42℃保温2～3h,然后降温至39℃继续培养5～6h。结论通过优化重组大肠杆菌分批补料培养生产类人胶原蛋白的工艺,使得细胞和类人胶原蛋白浓度分别达68.94g/L(DCW)和13.02g/L。     

纳豆激酶基因重组表达载体的构建及其稳定性

利用PCR方法从分泌纳豆激酶的纳豆杆菌基因组DN中扩增纳豆激酶基因,将该基因克隆到表达载体PBV220上,筛选重组子,通过限制性内切酶和PCR技术分析,初步确定该重组子所携外源基因为纳豆激酶基因,用凝块溶解时间法（CLT）测出表达产物具有溶解血栓活性,证明该基因可在大肠杆菌中表达,对重组菌中重组质粒的稳定性进行研究,结果表明质粒的插入对宿主菌的生长没有太大影响,该质粒在宿主菌中具有良好的分离稳定性,但结构稳定性较差,SDS-PAGE分析结果表明基因产物为分泌型,蛋白表达量占菌体蛋白的12%左右。     

大肠杆菌可诱导启动子表达系统的构建

大肠杆菌作为现代基因工程最为常用的原核表达系统，其核心为基因启动元件的高效性和可控性．为了获得不依赖IPTG和温度诱导的新型启动子，克隆得到大肠杆菌中通过低pH诱导的启动子Padi，并采用点突变获得几个活性各异的启动子单元，启动子的转录效率最多提高18．8倍．结果表明：该受低pH条件诱导的启动子经点位突变后，提高转录活性的同时诱导的严谨性有一定下降；在调控蛋白和启动子的协同表达后，诱导的严谨性得到提高．     

稀土药物对大肠杆菌作用的初步研究

目的探讨新的有效抗菌药物及其研究策略和新的抗菌活性筛选试验方法。方法用TAM air微量热仪测定了新合成的二种稀土药物[La（Hsal）2·（tch）]·2H2O和La（Hsal）2·（hq）在37℃时对大肠杆菌作用的产热曲线。结果实验表明药物[La（Hsal）：·（tch）]·2H2O在低浓度下对大肠杆菌有刺激作用,高浓度下为抑制作用,说明药物[La（Hsal）2·（tch）]·2H2O对微生物的生长具有双向生物效应。结论药物La（Hsal）2·（hq）的抑制效果优于[La（Hsal）2·（tch）]·2H2O。     

稀土元素铈对小麦幼苗镉伤害的防护效应

通过长期暴露（7d,16d)试验和无矿质营养元素竞争短期暴露（24h)试验,研究镉对小麦幼苗生长影响及其生物可利用性,进而研究稀土元素铈对镉造成的小麦损伤的防护效应及生物可利用性的影响。结果表明,镉抑制小麦生长、降低根系及茎叶矿质元素的含量。铈对镉引起的生长抑制及营养障碍无明显的保护作用。但铈可明显降低小麦幼苗茎叶及根系中隔的生物富集量。     

大肠杆菌热敏肠毒素的检测及纯化

采用平板免疫溶血试验、兔回肠结扎试验,探讨了大肠杆菌耐热肠毒素制备的方法和检测方法。试验表明：平板免疫溶血试验能够快速灵敏地检测出热敏感肠毒素．并具有很强的特异性,比肠结扎试验灵敏度高,而且简便易行;试验将细菌接种到产毒素培养基上培养．进行增菌,然后离心取上清液,沉淀溶于PBS液中用多黏菌素B浸出,均用80％饱和度的（NH4）2SO4盐析,之后用SephadexG-100凝胶层析分离纯化,最后用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测热敏肠毒素的纯度。     

渗透冲击对大肠杆菌糖运输的影响

渗透冲击对大肠杆菌半乳糖运输有明显的降低作用,对葡萄糖影响较小,对乳糖检测不出有影响。营养条件对大肠杆菌冲击细胞半乳糖的运输产生影响。     

大肠杆菌内毒素对Vero细胞培养的作用研究

将精制大肠杆菌内毒素(E.COliEndotoxin)加入含血清细胞培养液(MEM)中,配制成浓度分别为50、100、200、500EU/mL的细胞培养液 用此培养液对Vero细胞进行培养,测定细胞生长曲线、细胞平均倍增时间、最大增殖浓度及台盼蓝拒染率等指标,研究大肠杆菌内毒素对非洲绿猴肾细胞(Vero)培养的影响 结果显示,内毒素含量为50EU/mL时,Vero细胞仍能正常生长 当内毒素含量逐渐升高,培养时间逐渐延长时,细胞的增殖速度及活率明显下降 这表明,内毒素对Vero细胞的生长及活性具有明显的抑制作用,且该作用具有一定的时间、剂量依赖性     

重组大肠杆菌生产rhG-CSF发酵工艺的研究

在5L发酵罐中，研究了溶解氧(DO)、诱导时机、接种量等因素对重组大肠杆菌DH5α／pBV220生产rhG-CSF的影响．结果表明，在ω(D0)≥50％，茵体光密度D600≈4．50，42℃诱导表达4h的条件下rhG-CSF的茵体干重可达6．61g／L，表达量为38．1％．     

20kV/cm高压脉冲电场下外界因素对大肠杆菌杀灭效果的影响

在20kV/cm高压脉冲电场作用下,以大肠杆菌为研究对象,随着脉冲数的增加,探讨外部因素如介质温度、介质性质、微生物生长期对高压脉冲电场杀菌效果的影响,结果表明介质温度对大肠杆菌致死的影响并不明显,低pH值会对大肠杆菌的致死起到协同增效的作用,在大肠杆菌延滞生长期时的杀菌效果最好。