原位和子宫腺肌病异位内膜Bcl-2的表达

目的：研究原位子宫内膜和子宫腺肌病异位内膜Ｂｃｌ－２在月经周期中的表达情况,并探讨子宫腺肌病和子宫内膜异位症Ｂｃｌ－２不同表达的原因。方法：应用免疫组织化学ＬＳＡＢ方法研究２０例原位子宫内膜和子宫腺肌病异位内膜的Ｂｃ１－２表达。结果：原位子宫内膜腺体的Ｂｃｌ－２表达在月经周期中存在周期性变化：从增生早期至分泌早期,腺上皮细胞均呈Ｂｃｌ－２阳性反应,增生中晚期Ｂｃｌ－２表达最强,至分泌中晚期则表达基     

维生素D受体蛋白及其mRNA在人输卵管黏膜上皮的表达

目的:探讨人输卵管黏膜上皮维生素D受体(VDR)蛋白及其mRNA的表达.方法:30例输卵管标本取自具有正常妊娠生育史,因子宫肌瘤、子宫腺肌病等行腹式子宫切除术,一并切除输卵管的妇女.输卵管取材包括峡部、壶腹部和伞部,按子宫内膜组织学分期分为增生早期组6例、增生中晚期组9例、分泌早期组7例、分泌中晚期组8例.应用免疫组织化学法和逆转录聚合酶链反应法检测人输卵管黏膜上皮VDR的表达.结果:人输卵管黏膜上皮中检测到VDR蛋白及其mRNA表达.VDR蛋白主要表达于输卵管上皮细胞的细胞核中,部分间质平滑肌细胞核内亦有表达.相同时期各不同部位输卵管上皮细胞VDR蛋白表达无明显差别(P＞0.05),随月经周期变化,各不同部位输卵管上皮细胞VDB蛋白表达发生改变,在增生早期和分泌中晚期较低,与之比较,在增生中晚期和分泌早期其表达明显增高(P＜0.01),至分泌早期达最高值;壶腹部输卵管黏膜上皮组织VDR mRNA表达在增生早期和分泌中晚期较低,在增生中晚期和分泌早期明显增高(P＜0.01).结论:人输卵管黏膜上皮组织存在VDR蛋白及其mRNA表达,在增生中晚期和分泌早期其表达明显增高,且具有周期性变化.     

肥大细胞在人正常子宫的分布规律

目的：探讨肥大细胞(mast cell,MC)在人正常子宫内膜和肌层中的变化规律。方法：采用免疫组织化学和图象分析系统,对11例增生期、10例分泌期、9例绝经期子宫组织切片的MC进行测定。结果：人子宫内膜的MC数在增生期和分泌中晚期中明显增多,在分泌早期减少,在绝经期中显著减少。在肌层则未见MC数有周期性改变。结论：MC在子宫内膜呈周期性变化,分泌早期MC数量减少,将有利于胚泡的着床,绝经期MC数量的显著减少,提示其可能与绝经期妇女易患妇科恶性肿瘤相关。     

孕激素不是形成人子宫内膜核仁管道系统的必备条件

核仁管道系统(Nucleolar Channel System.NCS)是人子宫内膜腺上皮细胞的一种特殊结构。它通常出现于分泌早期,偶尔见于分泌中期的人子宫内膜腺上皮细胞的细胞核,增殖期及分泌晚期的人子宫内膜则未见有 NCS 出     

上皮型钙粘附蛋白在人子宫内膜和早期胚胎的表达和变化

目的 :探讨上皮型钙粘附蛋白 (E -cadherin)在人子宫内膜和早期胚胎的表达和变化。方法 :采用免疫组织化学、间接免疫荧光和激光共聚焦显微镜等方法 ,检测人子宫内膜和人早期胚胎E -cadherin的表达。结果 :月经周期各阶段子宫内膜腺上皮均见E -cadherin表达 ,分泌中期达高峰 (P <0 .0 5 ) ,间质细胞未见表达。卵母细胞和早期胚胎表面均见E -cad herin表达 ,囊胚组的表达显著高于 2 - 7细胞期胚胎组 (P <0 .0 5 )。结论 :E -cadherin在子宫内膜及胚胎的表达增多变化有同步性 ,可能有利于着床。     

Bc1-2 基因加强表达对 OA 诱发的细胞编程死亡的效应

ＯＡ能诱发人神经母细胞瘤ＳＫ细胞进行编程死亡．死亡细胞缩小变圆，细胞质凝聚，ＤＮＡ有控降解成约２００ｂｐ左右的片段，且这一过程可由蛋白质合成抑制剂亚胺环己酮（ＣＨＸ）抑制．将编码Ｂｃ１－２全长蛋白质的ｃＤＮＡ植入ｐＸＪ４１ｎｅｏ载体中，使其表达由ＨＣＭＶ病毒启动子控制．形成的顺义（ｐＢｃｌ－２－Ｓ）及反义（ｐＢｃｌ－２－ＡＳ）表达质粒经转染导入ＳＫ细胞中获得稳定转染子，Ｗｅｓｔ－ｅｒｎ印迹表明顺义转染子表达较大量的２６ｋｄＢｃ１－２蛋白，而反义转染子则不表达．增强表达的Ｂｃ１－２基因产物对ＯＡ引ＳＫ细胞编程死亡无抑制效应．     

孕激素对子宫内膜上皮细胞增殖调控机制研究进展

子宫内膜是卵巢激素的主要靶器官,女性进入青春期后,在下丘脑垂体的调节下,雌激素、孕激素出现周期性分泌,子宫内膜的形态和功能也随之发生改变.黄体期,血清中上升的孕激素可拮抗雌激素的作用,抑制子宫内膜上皮细胞的增殖,使其分化为具有分泌功能的上皮细胞.孕激素抑制子宫内膜上皮细胞增殖并促使其分化的机制主要是:一方面孕激素通过降低子宫内膜上皮细胞雌激素受体(ER)的表达,降低颗粒细胞分泌细胞色素P450芳香化酶的表达和活性,增加17β-HSDII在子宫内膜局部的表达和活性,增强雌激素代谢,从而抑制雌激素对子宫内膜上皮细胞的促增殖作用,间接抑制子宫内膜上皮细胞的增殖;另一方面孕激素通过与子宫内膜上皮细胞的孕激素受体结合后进入核内,调节细胞周期调控蛋白、原癌基因等参与细胞周期调控的分子表达,直接抑制子宫内膜上皮细胞的增殖并促使其分化.     

多囊卵巢综合征大鼠子宫内膜细胞凋亡及VEGF-A的表达

目的:观察多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠子宫内膜细胞的凋亡情况以及VEGF-A的表达变化,探讨细胞凋亡及VEGF-A在PCOS子宫内膜发生功能失常的过程中的作用.方法:大鼠皮下注射硫酸普拉睾酮钠来构建PCOS模型,TUNEL法检测大鼠子宫内膜细胞凋亡情况、免疫组织化学法和蛋白质免疫印迹法检测VEGF-A在大鼠子宫内膜中的表达情况.结果:TUNEL结果显示PCOS组大鼠子宫内膜细胞凋亡率较对照组明显降低(P 0. 05);免疫组织化学结果显示VEGF-A在PCOS组大鼠子宫内膜腺上皮细胞中的表达较对照组明显减弱(P 0. 05);蛋白质免疫印迹分析显示PCOS组大鼠子宫中VEGF-A蛋白的表达较正常对照组明显降低(P 0. 05).结论:PCOS子宫内膜功能失常可能与子宫内膜细胞凋亡减少有关,VEGF-A表达下调可能是PCOS子宫内膜增生过度的一种代偿性作用.     

肺癌影像学表现与erbB—2,bcl—2表达相关性的初步观察

为了从基因水平探讨肺癌影学表现的分子生物学基础，利用免疫组化技术及计算机图象系统测定手术病理证实之３３例肺癌标本中癌基因ｃｒｂＢ－２、ｂｃｌ－２的表达水平，系统分析其表达水平影像学表现的相关性。结果显示肺癌的结影像学征象如肿块大小，三级支气管受累、胸膜受侵及肺门纵隔淋巴结转移均与其癌基因ｅｒｂＢ－２、ｂｃｌ－２的表达水平密切相关，而且这两类基因的表达对其影像学征象的影响呈现相互抑制的关系。     

子宫内膜异位症与雌、孕激素受体亚型间关系的研究进展

本文综述了雌、孕激素受体亚型在在位内膜和异位内膜的不同表达,在子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞的不同表达以及在月经周期的不同时期的不同表达,并进一步阐述了雌、孕激素受体亚型在子宫内膜异位症的发生发展中所起的不同作用。     

Expression of Smad2 and Smad4 in rhesus monkey endometrium during the menstrual cycle and early pregnancy

Expression of Smad2 and Smad4 mRNAs in the endometrium of rhesus monkey on Days 8, 20 and 28 of the normal menstrual cycle and on Days 12, 18 and 26 of early pregnancy was detected using in situ hybridization. The results showed that Smad2 and Smad4 mRNAs were mainly localized in luminal epithelium and glandular epithelium. The expression of Smad2 mRNA in glandular epithelium was sustained at moderate level on Days 8, 20 and 28 of the menstrual cycle, while the expression of Smad4 gradually increased with the menstrual cycle. Both Smad2 and Smad4 mRNAs in functionalis glandular epithelium were expressed at the highest levels on Day 12 of early pregnancy, while in basalis glandular epithelium the most abundant expression of both Smads occurred on Days 12 and 18 of pregnancy. On Day 26, both Smads mRNAs were expressed at the lowest levels either in functionalis or in basalis. The data suggest that the epithelium is the major compartment where TGF-βs/activins exert their biological effects via Smads, and that Smad4 may play a role in the maintenance of endometrial gland function during secreting period of the menstrual cycle. During lacunar stage of early pregnancy, Smad2 and Smad4 are implicated in the tissue remodeling of endometrial functionalis and basalis, and during early villous stage both Smads are functional primarily in basalis.     

克罗米酚对继发性不孕患者子宫内膜组织形态及E2和P的影响

本研究观察了８名继发性不孕患者子宫内膜组织形态结构及血清Ｅ２、Ｐ在克罗米酚治疗前后自身变化对比,发现克罗米酚治疗前子宫内膜腺上皮组织形态明显落后于分泌中期应有的形态结构;克罗米酚治疗后子宫内膜腺上皮组织形态符合或接近分泌中期。光镜下分泌早期或分泌中期子宫内膜腺上皮形态结构克罗米酚治疗前、后同期比较无明显区别。提示：克罗米酚可改善继发性不孕子宫内膜腺上皮的生长与成熟,其机理可能与克罗米酚使排卵作用有关。克罗米酚治疗后７名患者血清Ｅ２水平较用药前升高（经检验,Ｐ＜００５）,差别有显著意义,其机理可能与克罗米酚促排卵作用及促卵巢及肾上腺的雄烯二酮转化为Ｅ２有关。     

Hormonal regulation of K+-channel messenger RNA in rat myometrium during oestrus cycle and in pregnancy

The dramatic enhancement of smooth-muscle excitability in the uterus which occurs at oestrus and at term in pregnant rats is closely related to increased blood oestrogen concentrations. How oestrogen alters the electrical properties of myometrial cells is unclear, although electrical coupling between cells has been shown to increase. Many examples are known of changes in cellular excitability involving modification of existing ion channels by second-messenger pathways. Steroid hormones, in contrast, are generally thought to influence cellular processes mainly through effects on gene expression, inducing the synthesis of new proteins. Previous work, using an oocyte translation system, has shown that a very slowly activating, voltage-dependent K+ current can be expressed from the poly(A)+ RNA of oestrogen-treated rat uteri. We report here that the messenger RNA species producing this channel is rapidly and reversibly induced in the presence of oestrogen, as shown by the appearance and disappearance of this mRNA during the oestrous cycle, its emergence at the end of pregnancy, and its presence or absence following hormonal treatments. These results suggest that oestrogen controls the expression of a voltage-dependent ion channel in uterine smooth muscle cells.     

人正常子宫内膜树突状细胞的周期性变化

目的：研究人正常子宫内膜上树突状细胞(dendritic cell，DC)的分布特点。方法：对10例人正常子宫内膜组织应用HLA-DR单克隆抗体和CD1a蛋白抗体进行免疫组化染色，其中增殖期内膜4例、分泌期内膜3例、绝经期内膜3例，观察其中的阳性细胞。结果：10例正常子宫内膜标本中，5例呈HLA-DR阳性表达(增殖期4例，分泌期1例，绝经期0例)；4例呈CD1a阳性表达(增殖期3例，分泌期1例，绝经期0例)。结论：人正常子宫内膜组织中存在表达主要组织相容性复合体-Ⅱ(MHC-Ⅱ)类分子的DC，各时期的子宫内膜DC检出率不同。     

PPARγ激动剂诱导HT-29凋亡及周期阻滞的作用

PPAR属于核受体超家族,与特异配体结合后调控一些基因的表达,这些受调控的基因涉及脂质的代谢,糖尿病以及肿瘤等多个方面.目的是研究PPAR γ激动剂罗格列酮诱导结肠癌细胞HT-29凋亡及细胞周期阻滞的作用,并对其机制做相应的探讨.试验结果显示,罗格列酮可诱导HT-29细胞发生凋亡,并阻滞细胞于G1期,此效果伴随着Bcl-2的表达降低,p21的表达升高.罗格列酮在升高PPAR γ表达的同时,也激活了细胞内ERK的传导通路.因此,罗格列酮是通过诱导结肠癌细胞凋亡及周期阻滞而发挥其抗肿瘤作用,此作用为PPAR γ依赖的,并且与激活ERK通路有关.这些研究结果提示PPAR γ有望成为结肠癌治疗的分子靶点.     

BMP2，BMP4及BMP信号通路相关成员在发情周期小鼠子宫中的表达

研究目的：研究骨形态发生蛋白（BMP）2,4及BMP信号通路相关成员在发情周期小鼠子宫中的表达模式。创新要点：运用实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）系统地研究了Bmp2和Bmp4及其BMP信号通路相关成员在小鼠子宫中mRNA水平表达模式,同时运用免疫组化方法研究了BMP2蛋白在小鼠子宫中的定位模式。研究方法：重要结论：收集发情周期各个时期小鼠子宫,一侧子宫角贮存于液氮或-80℃冰箱用于实时荧光定量PCR,另一侧子宫角用40mg／ml多聚甲醛固定用于BMP2蛋白免疫组化定位。实时荧光定量PCR结果表明,Bmp2的表达水平在发情前期显著高于发情期和发情后期（P〈0．05）,Bmp4的表达水平呈现显著波动,但Bmp2与Bmp4差异不显著（P〉0．05）。Bmprla和Bmpr2的表达水平在整个发情周期无显著变化（P〉0．05）。然而,Bmprlb的mRNA水平在发情期显著下降（P〈0．05）,在发情后期上升。此外,Bmprlb的mRNA水平显著低于相应时期Bmprla和Bmpr2的mRNA水平（P〈0．05）。三种R—Smads差异地表达于小鼠子宫,并且Smad1和Smad5的表达水平显著高于Smad8（P〈0．05）。此外,Smad4的表达水平在整个发情周期无显著变化。免疫组化结果显示,BMP2蛋白在整个发情周期差异表达,并主要定位于子宫腔上皮细胞和腺上皮细胞。我们的结果提供了BMP2和BMP4及其BMP信号通路相关成员mRNA水平表达变化信息,这些数据为论证BMP在子宫内膜中的作用如子宫内膜的退化与重塑提供量化和有用的信息。     

HCAP1基因对Raji细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bax/Bcl - 2的作用

目的：研究外源HCAP1基因产物对Burkitt淋巴瘤细胞系Raji细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bax／Bcl-2的作用。方法：用脂质体介导的基因转移方法，把外源HCAP1基因转染到Raji细胞中，用流式细胞术和Hochest 33258荧光染色检测细胞凋亡；用Western blot检测外源HCAP1基因对凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2蛋白表达的调节。结果：外源HCAPl基因导入Raji细胞24、48和96h后，细胞凋亡率增加。Western blot显示Bax／Bel-2蛋白表达比值明显增高。结论：转染外源性HCAP1基因可诱导Raji细胞凋亡，使Bax／Bcl-2蛋白表达比例上调可能是HCAP1诱导凋亡的机制之一。     

皮蛋模拟胃肠道消化物对HepG2细胞的影响

皮蛋是中国传统食品,其水解物具有抗氧化、抗炎和抗癌等功效,具有良好的医学前景,但目前皮蛋发挥抗癌功效的途径及作用机制尚不清楚。探究了皮蛋模拟胃肠道消化物(preserved eggs simulated gastrointestinal digests,PESD)对人肝癌HepG2细胞增殖和细胞周期的影响。将皮蛋经体外模拟胃肠道消化处理后,进行细胞实验,用CCK-8法进行细胞增殖分析,研究PESD对HepG2细胞存活率的影响,采用碘化丙啶(propidium iodide, PI)染色标记的方法,通过流式细胞术测定PESD对HepG2细胞周期的影响,用western blot法测定细胞周期相关调控蛋白的表达。研究发现:PESD以剂量依赖性方式对HepG2细胞增殖进行抑制,IC₅₀为4.17mg/mL;PESD处理显著增加了S期细胞的占比(P<0.05),使HepG2细胞阻滞于S期;4mg/mL的PESD处理HepG2细胞24h后,细胞中cyclin A、cyclin E、ATM、chk2和CDC25A的蛋白表达水平上升(P<0.05),而CDK2蛋白表达水平下降(P<0.05)。研究认为,皮蛋模拟胃肠道消化物是以剂量依赖性的方式来抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,主要是通过ATM-chk2-CDC25A信号通路,上调cyclin A和cyclin E蛋白的表达,下调CDK2蛋白的表达来实现人肝癌HepG2细胞阻滞于S期,影响人肝癌HepG2细胞周期进程,抑制癌细胞的增殖。研究结果旨在为皮蛋抗癌作用机制的阐明提供一定的理论基础。