人体精子顶体蛋白酶的研究

用硫酸胺盐析、Sephadex G-100柱层析等方法,从人体精子中提纯得到电泳单点纯的顶体蛋白酶。用SDS-聚丙烯酰铵凝胶电泳法测定了人体精子顶体蛋白酶的相对分子质量(约为10470)。用N-末端分析和氨基酸组成分析等方法研究了这种酶的一些化学特征。实验结果表明,人体精子顶体蛋白酶由85个氨基酸残基组成,它是以亮氨酸为N-末端的单一多肽链。     

赤小豆胰蛋白酶抑制剂抑制人体精子顶体蛋白酶的动力学

通过一系列酶促反应动力学的研究，结果表明赤小豆胰蛋白酶抑制剂对人体精子顶体蛋白酶（Ａｃｒｏｓｉｎ）有较强的不可逆竞争性抑制作用．其Ｋｍ和Ｋｉ值分别为１．８６×１０－３ｍｏｌ／Ｌ和２．１×１０－５ｍｏｌ／Ｌ．     

冷冻保存对人类附睾精子功能的影响

目的：了解人类附睾精子经历冷冻保存后的精子功能变化。方法：应用精子功能检测方法。结果：１１ 例先天性双侧输精管缺如患者附睾精子标本冷冻保存后,每例冷冻标本均见活动精子,但精子活动率显著降低,精子活动能力减弱。精子膜完整率显著下降,头膜损伤－ 尾膜完整的精子率（ Ⅲ型精子） 显著升高,精子体外存活时间显著缩短。精子顶体蛋白酶活性降低。去透明带地鼠卵穿透试验检验精子体外授精能力失败的标本,采用显微注射技术可使精子辅助授精。结论：（１） 冷冻保存对附睾精子功能有显著的影响,造成精子功能减弱;（２） 冷冻精子仅用单一尾膜肿胀试验筛选,有可能拾取到的是尾膜完整,但头膜损伤的精子;（３） 建立显微授精技术可有效地对冷冻附睾精子辅助受精。     

冷冻保存对精子运动的影响

目的：观察精子运动状态,其中包括精子折断现象与冷冻损伤的关系。方法：对精液标本进行一步冷冻保存和分步冷冻保存,并用鉴别精子形态湿片法对冷冻前后精子运动状态及折断率进行评价。结果：冷冻保存复温后的精子活动率与冷冻前的精了活动率比较明显下降（P＜0．01）;含冷冻保护剂的实验组与不含冷冻保护剂的对照组比较,精子率呈显著性差异（P＜0．01）,精子折断率无显著性差异（P＞0．05）;一步冷冻和分步冷冻保存的精子之间活动率及折断率相比较,无显著性差异（P＞0．05）。结论：冷冻保存易造成精子活动率下降、运动形态异常,但不能显著地导致精子折断发生率增加。     

公鸭、公鸡精子对在液氮中低温冷冻保存耐受力的比较研究

比较公鸭和公鸡精子经低温冷冻保存后存活率、顶体完整率方面的差异.结果表明,公鸭冷冻精液解冻后的精子存活率和顶体完整率都不同程度地高于相同类型的公鸡冷冻精液,但差异均未达到显著水准（P＞0.05）.     

青虾精子超低温冷冻保存技术的研究

本文对青虾精子的超低温冷冻保存技术进行了研究.采用台盼兰染色法检测低温冷冻后青虾精子的活力,研究了3种稀释液(壬氏液,Kurokura extender,D-20)和3种冷冻保护剂(8%DMSO,12.5%甘油,10%甲醇)对青虾精子在超低温冷冻保存时的保护效果,以及不同保存时间后青虾精子活力的变化.结果表明,青虾精子以壬氏液为稀释液,添加8%DMSO作为抗冻保护剂,4℃平衡30 min,-20℃平衡15 min,-80℃平衡15 min后投入液氮中保存,解冻时将冷冻管浸入55℃水浴中10~15 s至半融取出自然解冻,精子能维持60%的存活力.本研究为青虾精子冷冻保存库的建立提供了实验依据和理论基础.     

人类睾丸精子和附睾精子的顶体蛋白酶活性

精子形成过程最明显的条件之一是顶体的发育，顶体蛋白酶则是顶体内发育的重要酶类。人类射出精子的顶体蛋白酶活性已有研究，但在人睾丸和附睾水平，顶体蛋白酶的活性状态国内外尚无报道。本文探讨顶体蛋白酶在人睾丸和附睾部位的活性和变化。先天性双侧输精管缺如者取睾丸精子和附睾精子；精索静脉曲张结扎者取睾丸精子和射出精子。睾丸精子从常规睾丸活检组织中分离；附睾精子在阴囊探查术或人工贮精囊术时获取。射出精子为手淫法取精。应用明胶薄层试验、去透明带地鼠卵穿透试验和透射电镜观察顶体蛋白酶活性及其影响。实验结果表明，睾…     

高压电脉冲处理对小鼠精子超微结构及体外受精的影响

用电脉冲法处理小鼠精子后进行体外受业有、体外受精贸的卵裂率和桑椹胚发育率都有所降低,以1．0kv/cm,30μs的最佳处理条件处理过的组其卵裂和桑椹胚发育率分别为63．5％和50．9％,与对照组的84．1％和80．0％相比,有显差异（P＜0．01）,说明电脉冲处理对精子受精率和胚胎的体外早期发育有影响。将1．0kv/cm,30μs和4．8kv/cm,90μs电脉冲处理后的精子与正常对照组（离心后重悬于电脉冲缓冲液）的精子分别离心固定后制作电镜切片,观察结果发现,电脉冲处理组的顶体外细胞膜膨胀了膨胀,覆盖顶体的细胞膜隐入,在顶体后区有细胞膜的断裂现象,其变化率分别是：1．0kv/cm,30μs处理组为36．3％;4．8kv/cm,90μs处理组为46．7％,较低电压脉冲处理组精子顶体部分发生了类似顶体反应的变化恩赐 高压电脉冲处理组的线粒体发现了空泡化和线粒体的大小不均一性变化。     

洪山公鸡精液冷冻保存方法及效果的研究

研究比较了两种不同类型的冷冻精液在解冻后精子活率、顶体完整率以及受精率方面的差异。实验结果表明,细管型冷冻精液解冻后的活率显著高于颗粒型(n=20,p<0.01)。细管型冷冻精液解冻后的顶体完整率显著高于颗粒型(n=20,p<0.05)。受精实验结果表明,两种类型的冷冻精液的受精率都显著低于以新鲜精液输精的对照组(p<0.01),颗粒型冷冻精液的受精率显著高于细管型冷冻精液(p<0.01)。     

多聚体化对蛋白酶生理功能的影响研究进展

蛋白酶是生物体维持正常生命活动不可缺少的酶类,在食物消化、凝血、胚胎发生、组织重建、肿瘤发生等诸多生理过程中发挥着重要功能。综述了半胱氨酸蛋白酶、丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶中存在的多聚体化状态,分析了多聚体化对蛋白酶的高级结构、生物活性及酸碱稳定性的调节作用,进而探讨多聚体化对蛋白酶在细胞迁移、炎症发生、血管生成、HIV复制等生理、病理过程中功能的影响,以期为蛋白酶的多聚体化研究及开发利用提供有益参考。     

蛋白酶对脂肪酶活性影响的研究

为了弄清洗涤剂中碱性蛋白酶及金属离子对碱性脂肪酶稳定性的问题，对加酶洗涤剂中的碱性蛋白酶及金属离子对圆弧青霉ＰＧ３７所产碱性脂肪酶的活力影响进行了研究。在碱性脂肪酶溶液中分别添加不同量的碱性蛋白酶和金属离子，并在２５℃保温３０ｍｉｎ，分别测定保温前后的脂肪酶活力。结果表明：在一定浓度范围内的蛋白酶对ＰＧ３７碱性脂肪酶活力的影响较小，可同时应用于洗涤剂中；金属离子对脂肪酶活力无明显影响，甚至在一定浓度范围内对酶活有激活作用。总之，ＰＧ３７菌株所产碱性脂肪酶具有良好的酶学特性，非常适合于洗涤剂用酶。     

芽孢杆菌嗜热蛋白酶的性质研究

对芽孢杆菌嗜热蛋白酶的性质进行了研究.该酶的分子量为32kD,最适作用pH为9 0,最适作用温度为85℃,具有良好的pH稳定性(在60℃时,pH稳定范围为6 0～11 0;在80℃时,pH稳定范围为6 0～10 0)和热稳定性(90℃时酶活的半衰期为20min).钙离子和有机溶剂能提高该酶的热稳定性,而EDTA和PMSF则能抑制该酶活性.     

运动训练对小鼠心肌蛋白酶活性的影响

采用活性电泳方法，研究了运动训练对小鼠心肌蛋白酶活性的影响。结果表明：（1）随着运动强度的增加，不同运动训练组小鼠心肌的中性和碱性蛋白酶活性有不同程度的升高。酸性条件下，未检测到蛋白酶活性；（2）运动心心肌碱性蛋白酶活性的影响比对中性蛋白酶活性的影响更为显。     

马铃薯蛋白酶抑制因子特性的研究

本文研究了马铃薯蛋白酶抑制因子的稳定性及其对胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的抑制能力,结果表明：该抑制因子对胰蛋白酶活性的抑制作用较弱,最大抑制程度为６５％;对胰凝乳蛋白酶活性的抑制作用较强,抑制程度最高可达９５％以上,并且,它对ｐＨ及温度的变化均具有较强的稳定性．     

产分泌蛋白酶酵母菌株的筛选

用含有脱脂奶粉平板上点种培养的方法,从分属９３个属,４９２个种的２１２９０个酵母菌株中进行筛选,发现有分属２７个属,８７个种的１６５个酵母菌株可产一不同程度的分泌蛋白酶,并对其中３株产酶较高的菌株进行培养基对产酶量的研究。     

嗜热蛋白酶生产菌的筛选

从温泉水、高温堆肥等样品中初筛到62株嗜热蛋白酶生产菌,进一步复筛出一株高产嗜热蛋白酶的生产菌株DPE7(菌株来自温泉水),该菌株被初步鉴定为芽孢杆菌(Bacillus sp．)．嗜热蛋白酶生产的最适碳源是葡萄糖, 最佳氮源为酵母粉加硫酸铵,Ca2 对菌株产酶具有促进作用．在65℃、175 r／min、pH 9的产酶培养基中振荡培养 24 h后,发酵液中的酶产量高达23．4 U／mL(60℃测定)．     

高产酸性蛋白酶黑曲霉菌种选育

从麸醋醋母中分离出黑曲霉Asp5609,用15W紫外灯照射8min,照射距离30cm,在暗处30℃培养3d后挑取透明圈大的茵落用亚硝基胍诱变处理,筛选出高产酸性蛋白酶变异株A5p5609-7．在培养基pH5．0,含水量50％,培养时间60h,变温培养等优化条件下获得固体发酵达35000U／g．干基的酸性蛋白酶物料．