小鼠腹腔注射卡介苗加脂多糖建立急性免疫性肝损伤的实验研究

目的比较卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)小鼠腹腔注射和尾静脉注射建立急性免疫性肝损伤模型的优劣。方法用不同剂量BCG和LPS腹腔注射诱导昆明小鼠建立急性免疫性肝损伤模型,与BCG 0.5 mg/只和LPS 7.5μg/只联合尾静脉注射诱导昆明小鼠建立急性免疫性肝损伤模型比较;以小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平变化及肝脏病理学检查指标作为肝损伤判断标准。结果BCG+LPS小鼠腹腔注射所造急性免疫性肝损伤模型,ALT和AST随注射剂量增加均逐步增高;第6组(BCG 0.5 mg/只+LPS7.5μg/只)和第13组(BCG1 mg/只+LPS15μg/只)相对较高。与空白组比较,ALT升高约3倍,AST升高1~3倍;肝组织病理损伤则随着BCG和LPS剂量增加逐渐升高。第5组大部分小鼠出现Ⅰ级或Ⅰ级以上肝细胞损害;第13组大部分小鼠出现Ⅱ级或Ⅱ级以上肝细胞损害。但与尾静脉注射造模相比,小鼠腹腔注射造模肝细胞损伤的特异性实验室指标ALT和AST表达不高,肝组织病理损伤较轻。结论"BCG+LPS"小鼠尾静脉注射建立急性免疫性肝损伤模型优于腹腔注射建立免疫性肝损伤模型。     

博来霉素和内毒素诱导两种品系小鼠肺纤维化模型的比较研究

目的 通过比较博来霉素和内毒素诱导ICR、C57BL/6两个品系小鼠的肺纤维化程度,从而建立合适的小鼠肺纤维化模型。方法 分别将ICR、C57BL/6两个品系小鼠随机分为对照组、博来霉素组、内毒素组。博来霉素组向气管注射博来霉素(5 mg/kg体质量),内毒素组尾静脉注射内毒素(40 EU/kg体质量),对照组气管注射等量生理盐水。两个品系的对照组、博来霉素组、内毒素组分别于造模后第7、14、28天各处死8只,观察小鼠一般情况,测量小鼠肺系数;采用HE染色观察肺组织病理学变化; ELISA法检测肺组织中羟脯氨酸的含量。结果 与对照组相比,两个品系的博来霉素组和内毒素组的肺系数、肺组织羟脯氨酸含量均不同程度增加,有显著性差异(P0. 05)。结论 C57BL/6小鼠对博来霉素和内毒素更敏感。博来霉素、内毒素均能够制备小鼠急性肺损伤肺纤维化模型。     

多瘤病毒的培养特性及血清抗体的检查

多瘤病毒最适宜的培养条件为接种病毒吸附1.5h,培养第4天换液1次,用无牛血清维持液培养12天,其血凝素达高峰。当培养物出现血凝素时,即有细胞内抗原的存在。应用血凝抑制试验(HI)和酶免疫法(EIA)两种方法进行对比性试验,检查实验感染多瘤病毒的10只SPF小鼠和192只普通小鼠血清多瘤病毒抗体的出现,实验结果表明HI较EIA敏感。多瘤病毒存在于我国普通饲养的实验小鼠群中。     

紫锥菊多糖对内毒素血症小鼠炎症的保护作用

为确定紫锥菊多糖对内毒素血症小鼠炎症反应的保护作用,将100只BALB/c小鼠随机分成正常组,模型组,紫锥菊多糖高、中、低剂量组(分别为2.0,1.0,0.5 g/kg),每组20只。模型组、紫锥菊多糖各组小鼠通过腹腔注射脂多糖(8 mg/kg)造模,正常组小鼠腹腔注射等量生理盐水。紫锥菊多糖分别于造模前灌胃给药5次(间隔24 h)并在造模后持续给药2次(间隔24 h);正常组和模型组小鼠只灌服等体积生理盐水。各实验组小鼠分别于造模后1,6,24,48 h剖杀,ELISA法检测血清中的肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)的浓度和肺脏组织的湿质量/干质量值。结果表明:紫锥菊多糖组小鼠的血清中TNF-α,IL-1β,IL-6浓度明显低于模型组(P0.05),肺脏组织的湿质量/干质量值明显低于模型组(P0.05),且紫锥菊多糖高剂量组小鼠的效果最好。因此,紫锥菊多糖能够为内毒素血症小鼠炎症提供保护作用。     

魔芋复方中草药方剂降血糖作用的研究

本研究以魔芋为主,选取黄芪、生白芍、丹参、甘草4味中药,按一定比例组成方剂,观察该方剂对肾上腺素所致高血糖小鼠和STZ糖尿病模型小鼠的降血糖作用。将60只小白鼠腹腔注射STZ建立糖尿病模型,将造模成功的32只小白鼠随机分为3个试验组和模型对照组,试验组口服该方剂20d后采血测血糖。另将50只小白鼠随机分为为3个试验组、模型对照组和健康对照组,试验组口服该方剂20 d后腹腔注射肾上腺素建立高血糖模型,30 min后采血测血糖。结果表明,该方剂能显著降低STZ糖尿病模型小鼠和肾上腺素致小鼠的高水平(P0.01),呈一定量效关系,高剂量组与健康对照组相比,血糖值差异不显著(P0.05)。     

Aurora-A对2型糖尿病小鼠模型中胰岛细胞增殖的影响

为研究Aurora-A在2型糖尿病小鼠中对胰岛细胞增殖的影响,通过Western blot、免疫组织化学染色、增殖细胞核抗原(proliferating cell nucler antigen,PCNA)染色等方法研究了Aurora-A在2型糖尿病小鼠胰腺组织中的表达以及抑制AuroraA后糖尿病小鼠胰岛细胞的增殖情况。将32只雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组,每组8只,分别为空白组、高脂饮食组、模型组和治疗组。模型组和治疗组采用高脂饲料(high fat diet,HFD)联合链脲佐霉素(Streptozotocin,STZ)腹腔注射造模,造模成功后治疗组以Aurora-A抑制剂连续灌胃2周;模型组则以等量的生理盐水灌胃。经药物干预后采用PCNA染色检测各组小鼠胰岛细胞的增殖情况。结果表明:与空白组相比,Aurora-A在模型组胰腺组织中明显表达升高;与模型组相比,治疗组小鼠经Aurora-A抑制剂治疗后胰岛细胞增殖率明显降低。可见,Aurora-A在2型糖尿病小鼠胰腺组织中表达升高;并对胰岛细胞的增殖起着重要的作用。     

国内期刊亮点

正构建黏蛋白1基因敲除小鼠模型黏蛋白1(MUC1)属黏蛋白家族成员,分布于上皮细胞膜表面,由于在免疫炎症反应以及肿瘤发生中的重要作用而日益受到重视。上海交通大学程布凯等为了进一步深入研究MUC1的生物学功能,构建了Muc1基因敲除小鼠模型。研究人员首先根据小鼠Muc1基因组序列设计基因剔除策略,将2个loxP位点分别插在外显子2和3两侧,构建基因剔除载体Muc1-ABRLFnpBR322。以电穿孔方法将载体导入胚胎干细胞(ES细胞),用G418和更昔洛韦进行正负筛选获得4个同源重组的ES细胞克隆。挑选其中一个阳性ES克隆行囊胚显微注射,获得16只嵌合率大于50%的雄鼠;其次,利用嵌合雄鼠与C57BL/6J野生型雌鼠交配后获得11只floxP杂合子小鼠(10雄1雌),通过杂合子小鼠回交,并进一步与EIIa-Cre小鼠交配,最终成功得到Muc1全身敲除小鼠,其中纯合子小鼠未     

甘油-3-磷酸对甲肝疫苗诱导的体液免疫影响*

目的 研究甘油-3-磷酸对甲肝疫苗诱导的小鼠体液免疫应答的影响。方法 选取49只雌性ICR小鼠,分7组,每组7只,这7组小鼠分别为阴性对照、单纯抗原组、铝佐剂组和4组甘油-3-磷酸组,分别在免疫之后的第4、8、12、16、20周用酶联免疫法(ELISA)测定小鼠血清中的特异性的anti-HAV IgG水平。结果 在小鼠免疫之后的第4、8、12、16、20周单纯抗原组、铝佐剂组和4组不同剂量甘油-3-磷酸组均能检测到特异性抗HAV抗体,并且趋势为先升高后降低,且在免疫后的第8周最高;第4周和第8周的甘油-3-磷酸实验组的结果均高于单纯抗原组,且差异均具有统计学意义(P<0.05),并且第4周甘油-3-磷酸组抗体水平均超过铝佐剂组,并具有统计学意义(P<0.05),其中甘油-3-磷酸2 mg为最佳剂量组,其抗体水平在免疫后的第4、8、12、16、20周均高于单纯抗原组,且在第8周抗体水平达到峰值,抗HAV IgG水平为lg(3.064±0.07851),铝佐剂的也是在第8周抗体水平达到峰值,抗HAV IgG水平为lg(3.150 ±0.1382)。结论 甘油-3-磷酸有免疫佐剂的作用,能够有效、迅速地增强HAV诱导的体液免疫应答,是一种潜在、安全有效的新型疫苗佐剂。     

颗粒蛋白前体小干扰RNA提高小鼠皮肤创面修复的质量

为探讨颗粒蛋白前体(progranulin, PGRN)小干扰RNA对提高小鼠切创损伤创面愈合质量的作用,通过选取33只健康雄性BALB/c小鼠,制做小鼠背部皮肤孔状切除模型,按照处理因素不同随机分为3组：健康小鼠对照组(Control组)、溶剂+皮肤孔状切除组(Vehicle组)和Si-m-PGRN+皮肤孔状切除组(Si-m-PGRN组)。分别于造模后0、4、8、12和16天背部皮下注射30 ul的生理盐水或Si-m-PGRN。各组小鼠分别于4、8、12、16和20天麻醉处死取材,采用大体观察、常规组织学检查和免疫组织化学染色等方法研究了创面愈合情况。结果表明： Si-m-PGRN组与Vehicle组相比,创面面积缩小明显,愈合率较快,新生表皮的细胞层数较多,表皮较厚,分层明显。可见PGRN小干扰RNA在一定程度上可以显著提高创面愈合的质量,这些初步结果为皮肤损伤由解剖修复到功能修复的完美愈合提供了新的治疗思路。     

C57BL/6小鼠实验性变态反应性脑脊髓炎模型的建立

目的 为更好地研究多发性硬化症(MS)的发病机理、开发具有良好效果的MS治疗药物,建立起能高度模拟人类多发性硬化症发生发展的小鼠模型则显得尤为必要且具有极高的应用价值。本文使用已广泛应用的标准化C57BL/6小鼠作为实验对象,成功地构建了实验性变态反应性脑脊髓炎模型(EAE)。此模型为研究人类多发性硬化症的发病机理及开发相关临床治疗药物提供了良好的小鼠模型。方法 C57BL/6雄性小鼠20只,分为2组。EAE组10只,皮下注射混匀的弗氏不完全佐剂与MOG53-58及结核分枝杆菌的悬浊液,同时分别在day0和day2腹腔注射百日咳毒素0.2μg/只;正常对照组10只,仅注射生理盐水。采用HE染色方法观察小鼠组织学变化;免疫组织化学方法进一步研究小鼠病理变化。结果 从抗原免疫后第10天开始EAE组小鼠陆续发生EAE临床症状且发病率达到100%,而正常对照组小鼠未发生任何EAE临床症状。组织病理学结果分析显示,EAE组小鼠脊髓及脑组织中出现大量炎性细胞浸润且脱髓鞘严重。结论 本实验成功构建的EAE小鼠模型病程稳定且发病率高,可用于MS机制研究及MS防治药物的筛选。     

大鼠SNL神经性疼痛模型的建立

摘要:目的　建立大鼠L5和L6脊神经结扎(Spinal nerve ligation,SNL)疼痛模型并进行评价, 方法　根据大鼠痛阈值测定结果,选择90只符合要求的SD雄性大鼠进行手术操作,术后每隔1d测定大鼠后足的机械痛阈值,比较术前和术后大鼠对疼痛刺激的反应变化。 结果　术后大鼠左足的痛阈值逐渐降低,至10d 后趋于稳定,与术前有明显差异(P≤0.01);右足的痛阈值微有升高,保持在稳定的水平内。 结论　本研究建立的大鼠SNL模型机械痛阈变化明显,稳定性好,可靠性高,可以作为大鼠一种神经病理性疼痛的模型。     

W12-1海洋平台振动测试及振源分析

对W12-1海洋平台进行全面的振动测试，按照距离振动最剧烈区域的近远，在底层甲板上布置了6个系列的测点，在中层甲板上布置了2个系列的测点，在平台的4列桩腿上布置了4个系列的测点。对从这些测点采集到的振动信号进行了频谱分析，确定了平台的主振源。以此为基础，提出了对平台进行振动控制的措施。     

百麦外用中药制剂对小鼠乳腺增生的实验研究

目的:观察外用中药制剂对小鼠乳腺增生的预防作用并探讨其机理。方法:采用苯甲酸雌二醇腹腔注射造模,分对照组、模型组与预防组。模型组与预防组腹腔注射苯甲酸雌二醇,隔天1次,并且预防组小鼠乳房涂抹百麦外用中药制剂,每天1次,共30天;对照组小鼠腹腔注射生理盐水,隔天1次,共30 d。测定各组小鼠体重变化,乳晕及乳头直径变化,血清雌激素(E2)、孕激素(P)指标,并取小鼠第二对乳房组织病理切片检查。结果:预防组与模型组小鼠体重、乳晕及乳头直径比较均有显著性差异(P0.05);预防组与模型组比较,E2水平明显降低(P0.05),P水平明显升高(P0.05);预防组小鼠增生的乳腺小叶、腺泡数、腺泡腔直径、导管直径以及胞浆面积较模型组降低。结论:百麦外用中药制剂具有预防乳腺增生的作用,其机理可能是通过抑制血清雌二醇水平而实现。     

A shared antigenic determinant between natural killer cells and nervous tissue

Considerable evidence for shared antigenic determinants between nervous elements and lymphocytes has accumulated. It has also been suggested that this cross-recognition may be involved in the pathogenesis of human neurological diseases such as myasthenia gravis and multiple sclerosis. We report here evidence that a marker for natural killer (NK) cells, anti-Leu-7 (HNK-1), specifically binds to components of human and rodent central nervous tissue as well as peripheral nervous tissue, especially to myelin sheaths. In contrast, another NK-cell marker (VEP13) did not react with nervous tissue. Since NK-cell function is impaired in a population of multiple sclerosis patients, the observed cross-reactivity indicates that autosensitization against myelin may simultaneously cause a defect of NK-cell function. Furthermore, the shared antigenic determinant may help to identify a hitherto undefined nervous tissue antigen and simultaneously increase the knowledge about the nature of NK-cell antigens.     

氢气对实验性小鼠过敏性鼻炎减轻作用的研究

目的 观察氢气能否减轻小鼠过敏性鼻炎.方法 BALB/c雌鼠24只,随机分成正常组、模型组、氮氧组、氢氧组.除正常组外,其余三组小鼠,前14 d内,每2天一次,腹腔注射溶有50μg卵白蛋白(ovalbumin,OVA)+2 mg氢氧化铝[Al(OH)3]的生理盐水0.3 mL;第15～21天给予两鼻腔内滴10μL内含2...     

Linkage of Mls genes to endogenous mammary tumour viruses of inbred mice.

T cells that recognize self antigen are clonally deleted in the thymus--a maturation process that occurs in the context of histocompatibility molecules and the T-cell receptor. The minor lymphocyte stimulation antigens (Mls) effect these deletions through interactions with the V beta portion of the T-cell receptor, thus mimicking bacterial 'superantigens'. Intrigued by the fact that each known Mls gene maps to the same chromosomal region as an endogenous mouse mammary tumour virus (Mtv), we reevaluated the linkage relationships between the two gene families. Here we report perfect concordance in inbred and recombinant inbred mice between the presence of four Mtv proviruses with the expression of Mls gene products. These data suggest a general model in which mammary tumour virus gene products themselves are the ligands that shape a considerable portion of the immunological repertoire of common laboratory mice.     

建立小鼠学习记忆损伤模型的方法学研究

目的 通过避暗和Morris水迷宫实验研究建立小鼠学习记忆损伤模型的有效方法。方法 分别在小鼠避暗电击训练之前20 min腹腔注射东莨菪碱1 mg/kg体质量,电击训练结束之后立即皮下注射亚硝酸钠90 mg/kg和下次电击测试之前15 min给小鼠灌服35%乙醇0.1 mL/10 g,建立记忆获得、记忆巩固和记忆再现障碍模型,测定各组小鼠在电击训练后6 h、24 h、30 h、48 h后的避暗潜伏期、错误次数和探头次数等多项指标,评价三种记忆障碍模型方法各指标的敏感性和最适测试时间。小鼠分别腹腔注射东莨菪碱1 mg/kg和灌服35%乙醇0.1 mL/10 g造成学习记忆损伤,通过Morris水迷宫定位航行试验和空间探索试验用于测试实验动物对空间位置感和方向感(空间定位)的学习记忆能力,建立空间学习记忆障碍小鼠模型的评价方法。结果 避暗实验显示：和空白组比较,东莨菪碱造成记忆获得障碍模型小鼠在电击训练之后6 h、24 h避暗潜伏期明显缩短,错误次数也明显增多(P0.05)。结论 避暗实验中使用东莨菪碱、亚硝酸钠构建小鼠记忆获得障碍和记忆巩固模型时应在造模后24 h和30 h检测相应指标;乙醇造成的记忆再现障碍模型,应在电击训练24 h后,在下次测试之前15 min给小鼠灌服乙醇后检测,指标以避暗潜伏期、错误次数和探头次数为宜。Morris水迷宫实验提示东莨菪碱能够损害小鼠空间学习记忆,可以作为构建小鼠空间学习记忆障碍模型的药物,乙醇并不能建立小鼠的空间记忆障碍模型。     

MPTP致C57BL/6小鼠帕金森病模型的复制及常用的行为学分析方法

目的介绍1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱发C57BL/6小鼠的帕金森病(Parkinson disease,PD)模型的复制及常用的行为学分析方法。方法C57BL/6小鼠腹腔注射MPTP(40 mg/kg),每天1次,连续注射7 d;同时每天进行小鼠的爬杆实验、悬挂实验、游泳实验和震颤麻痹评分;最后取材,用HPLC-ECD法测定纹状体内的多巴胺含量,用Lowry法测定纹状体内的蛋白总量,并计算多巴胺(ng)/蛋白总量(mg)的比值。结果爬杆实验结果表明,PD模型组小鼠爬杆所用的时间明显长于对照组,其分值低,对照组和PD模型组间有极显著性差异(P<0.01);悬挂实验表明PD模型组小鼠悬挂能力明显低于对照组(P<0.01);游泳实验表明PD模型组小鼠游泳能力明显低于对照组,小鼠肢体运动协调情况不好,组间有极显著性差异(P<0.01);震颤麻痹评分显示,PD模型组分值很高,震颤麻痹症状非常明显,较对照组有极显著性差异(P<0.01);多巴胺含量分析显示,PD模型组多巴胺(ng)/蛋白总量(mg)的比值明显低于对照组,有极显著性差异(P<0.01)。结论用MPTP诱发C57BL/6小鼠的帕金森病模型的复制方法以及爬杆试验、悬挂实验、游泳实验和震颤麻痹评分简单可靠,是用于帕金森病治疗研究的良好方法。     

IgM-autoantibodies against isologous erythrocytes also react with isologous IgG(Fc)

The mechanisms by which the adaptive immune system of animals discriminate between foreign and self components are not known. It is generally believed that antibodies are produced only in response to foreign agents. However, against this axiom there is mounting evidence that normal animals produce autoantibodies against a variety of self components. In two murine model systems, a high proportion of IgM-producing cells secrete autoantibodies. In one model, the autoantibodies are specific for isologous mouse IgG(Fc) and in the other, the autoantibodies are specific for antigens revealed on the surface of mouse erythrocytes (RBC) by proteolytic enzymes. The function of these two autoimmune responses is a mystery. Here we show that the two responses are related. The lysis of mouse RBC, modified with bromelain (brom) by IgM autoantibodies was completely inhibited by isologous IgG(Fc), and antibodies against mouse IgG(Fc) formed precipitin bands with solubilized membranes from mouse RBC. We conclude that mouse RBC membranes and IgG(Fc) have at least one antigenic determinant in common and that this determinant is the target for autoimmune responses in normal mice.