稀有鮈鲫消化系统与神经系统的组织学观察

目的 本文针对成体稀有鮈鲫的消化系统和神经系统进行了组织学观察和描述,配合系列的图文介绍,为脊椎动物的消化系统及神经系统的结构功能进化和其它相关的研究提供更加完整的组织学背景。方法 健康的成体稀有鮈鲫经固定、脱钙,脱水,透明,包埋蜡块制成3μm厚度的组织切片,H.E染色制片,于光学显微镜下观察拍摄组织学照片,进而对其相应组织器官进行描述。结果 稀有鮈鲫的口咽部可由咽齿与后续肠道分界,稀有鮈鲫的肠道前端呈“Z”字型膨大,但其后续肠道基本呈直线形。稀有鮈鲫的肝脏虽有清晰的中央静脉等结构,但不成典型的分叶状。胆囊独立存在,位于胸腔前端,与心脏毗邻。胰腺或肝胰腺未能在稀有鮈鲫中被发现。作为稀有鮈鲫神经中枢的脑部,其各部分结构较为完全,可见清晰的端脑、间脑、中脑、后脑和脑脊髓。并有脑神经从脑的背侧、腹侧发出。位于背侧脊椎的椎间孔中的脊髓可见分明的灰质与白质结构。结论 稀有鮈鲫的消化系统符合鲤科鱼类无胃特点,但其肠道前后段有明显差异。该物种神经系统发育较为完全。     

稀有鮈鲫的组织学切片制作和苏木精-伊红染色

目的目前鲜有专门针对稀有鮈鲫这种新型实验动物进行组织切片制作方法的研究,故我们对此进行了实践、摸索以建立一完整的组织学切片制作流程供参考交流。方法对正常生活状态下的健康稀有鮈鲫采用Bouin`s固定液固定,并用脱钙液软化骨骼后进行修块,组织块经梯度酒精脱水、松油醇透明之后,按照标准流程制成石蜡切片,HE染色后封片用显微镜观察。结果切片主要采取横断面和矢状面作为观察方位,并使用显微拍摄装备摄取了结构分明的各系统组织脏器的组织学照片。结论本文所述的方法经过多次探索和实践,制得的组织切片镜检结果清晰,质量稳定,可作为以稀有鮈鲫等小型硬骨鱼为实验动物的切片制作提供一些可行的建议。     

DBP与DEHP对稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)的急性毒性评价

为研究水体中DBP与DEHP对生物毒性效应,采用静态试验法进行了DBP、DEHP的鱼类急性毒性实验。结果显示:DBP对稀有鮈鲫的96 h-LC50为6.39 mg·L~(-1),95%置信限为5.68~7.44 mg·L~(-1);DEHP对稀有鮈鲫的96 h-LC502.95mg·L~(-1),DBP与DEHP混合液对稀有鮈鲫的联合毒性效应未见明显的协同作用或拮抗作用。     

稀有鮈鲫性腺分化的组织学观察

以丰年虫为饵料,运用组织学方法,对稀有鮈鲫性腺分化过程进行了观察.结果表明:在水温(25±1)℃条件下,稀有鮈鲫卵巢分化时间明显早于精巢.卵巢解剖学上的分化发生在孵出后21d左右,其主要标志为卵巢腔的形成以及形成成簇发育的卵原细胞群;细胞学上的分化发生在35日龄左右,标志为初级卵母细胞的形成.精巢分化的解剖学标志为输精管原基及精小叶雏形的形成,分别开始于50日龄及60日龄左右;细胞学上的分化发生在60日龄左右,标志为初级精母细胞的形成.     

稀有鮈鲫铜蓝蛋白基因 cDNA 克隆及组织表达分析

铜蓝蛋白(Ceruloplasmin,Cp)是一种重要的铜转运蛋白,合成于肝脏并参与生物体铁的代谢,在医学上是各种炎症、感染、中毒及癌症疾病的标志性蛋白.铜蓝蛋白的研究已在多种真骨鱼类中被报道,文中第一次在稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)中报道此基因.采用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)克隆了稀有鮈鲫铜蓝蛋白基因,使用荧光定量PCR的方法构建了该基因组织表达谱.序列分析表明稀有鮈鲫铜蓝蛋白基因包含3 264bp全长编码序列,该序列编码1 087个氨基酸,其核苷酸和氨基酸序列与斑马鱼同源性最高(分别为88.1%和90.3%).理论相对分子质量和等电点分别为124 429.1D和6.41.荧光定量PCR检测表明该基因在肝脏和脾脏中相对表达量最高,在肌肉和鳃中相对表达量最低.使用氨基酸序列进行蛋白结构保守域分析,结果表明铜蓝蛋白基因在脊椎动物中是相对保守的,推测其功能也与其他物种相似.这为进一步研究稀有鮈鲫该基因的功能及其应用奠定了基础.     

稀有鮈鲫饲料营养及饲养技术的实验研究

目的探索稀有鮈鲫应用型配合饲料及相应的养殖技术,促进实验稀有鮈鲫的营养学标准化。方法在营养学需求的研究基础上,探索并验证适合稀有鮈鲫日常养殖的应用型配合饲料。通过生长实验和繁殖实验,筛选得到适宜的饲料配方;研究了温度、投喂频率、饲养密度等饲养策略对生长、性腺发育的影响。结果 25%~40%蛋白水平的配合饲料均可满足幼鱼快速生长需求,其中30%蛋白、6%脂肪、总能为12.5 kJ/g的投喂效果生长最好,同时,繁殖性能较高,可达到对照组的69.4%;亲鱼的产卵间隔随饲料蛋白水平的降低而延长;在18~24℃范围内,温度越高,生长越快,当温度超过28℃时,体质量反而有所下降;不同投喂频率下,最大生长均出现在24℃时;特定生长率随养殖密度升高呈明显下降的趋势,养殖密度为0.8尾/L时饲料利用率最高,1.6尾/缸组稍降低,但无显著差异。结论 30%蛋白、6%脂肪、总能为12.5 k J/g的配合饲料可满足稀有鮈鲫幼鱼的快速生长,且能使亲鱼能保持规律性繁殖,满足实验稀有鮈鲫传代和生产需要;过高或过低的温度对生长不利,投喂频率的增加不一定能促进生长和饲料利用;稀有鮈鲫幼鱼适宜的养殖温度为24~26℃,每天投喂2次;养殖密度对生长和性腺发育均有很大影响,适宜的养殖密度应不超过1.6尾/L。     

稀有鮈鲫β-肌动蛋白基因片段的克隆及其同源性分析

采用RT-PCR方法,从稀有鮈鲫肌肉组织中分离和克隆出β-肌动蛋白基因cDNA部分序列,长度为1029bp,编码343个氨基酸残基．序列分析表明,该cDNA序列与其他物种昏肌动蛋白基因同源性非常高．RT-PCR能够检出该基因在稀有鮈鲫肌肉、眼、脑、心脏、肝、肠、鳃、睥、卵巢等组织中广普表达,在胚胎不同发育时期持续恒量表达．并基于已知的鱼类β-肌动蛋白基因序列构建了进化树．     

水生动物用于科学实验的最新进展

随着科学技术的发展,越来越多的水生动物被用于科学实验.本文根据近5年来发表的文献,综述了斑马鱼、剑尾鱼、稀有鮈鲫、鲤鱼、鲫鱼、草鱼、非洲爪蟾、海蛙、文昌鱼等水生动物作为实验材料开展的生命科学基础研究、人类疾病动物模型研究、水产动物疾病模型研究、药物筛选、水产食品安全监测、环境监测、化学品标准测试和水产动物药品与饲料研发的最新进展.     

透射电镜制样中块染与片染的方法比较

为了克服传统切片染色中的切片污染和皱褶问题,尝试利用透射电镜制样中的标本块染方法．使用传统染色液在组织处理过程中对标本块进行染色,与传统的片染方法相比,可以简化制样步骤、减少切片污染和皱褶。但只有在样品浅层一定厚度范围内的切片才可以获得满意的观察效果．     

成体大凉疣螈肺脏的组织形态学观察

采用HE染色和Masson染色方法,研究了成体大凉疣螈肺脏的基本组织形态和纤维分布情况.结果表明,成体大凉疣螈肺脏大体解剖为一对有弹性的中空薄壁囊状结构,内表面呈蜂窝状;组织切片观察显示囊状肺分为气管、隔膜和肺泡的多级结构,与高等动物肺脏的基本结构相似,但肺泡数量少,表明其呼吸功能较弱.对纤维分布的观察结果表明,成体大凉疣螈肺脏的气管和肺泡壁拥有较为丰富的胶原纤维.该文首次对大凉疣螈做了肺脏的组织形态学观察,为更深入了解疣螈及其保护提供了基础资料.     

Sequences of cytochrome b gene for primitive cyprinid fishes in East Asia and their phylogenetic concerning

1140 bp of cytochrome b gene were amplified and sequenced from 14 species of primitive cyprinid fishes in East Asia. Aligned with other ten cytochrome b gene sequences of cyprinid fish from Europe and North America retrieved from Gene bank, we obtained a matrix of 24 DNA sequences. A cladogram was generated by the method of Maximum likelihood for the primitive cyprinid fishes. The result indicated that subfamily Leuciscinae and Danioninae do not form a monophyletic group. In the subfamily Danioninae, Opsariichthys biden and Zacco platypus are very primitive and form a natural group and located at the root. But the genera in subfamily Danioninae are included in different groups and have not direct relationship. Among them, Aphyocypris chinensis and Yaoshanicus arcus form a monophyletic group. Tanichthys albonubes and Gobiocypris rarus have a close relation to Gobioninae. The genus Danio is far from other genera in Danioninae. In our cladogram, the genera in Leuciscinae were divided into two groups that have no direct relationship. The genera in Leuciscinae distributed in Europe, Sibera and North America, including Leuciscus, Rutilus, Phoxinus, N. crysole, Opsopoeodus emilae, form a monophyletic group. And the Leuciscinae in southern China including Ctenopharyngodon idettus, Mylopharyngodon piceus, Squalibarbus and Ochetobius elongatus have a common origination.     

花背蟾蜍蝌蚪视神经再生与角膜诱导间关系的研究

以花背蟾蜍（Bufo raddei Srauch)后肢芽期蝌蚪为材料,切断其左眼视神经并进行角膜移植,在角膜诱导的不同时期取眼球固定,用环氧树脂Epon812包埋,制成兰薄切片,用次甲蓝、天青Ⅱ、硼砂染色后,在光学显微镜下观察切断视神经后视网膜的退化过程及在视神经再生的情况下视网膜诱导皮肤移植片转化为角膜的作用。结果表明,切断视神经,引起视网膜逐渐退化,移植的皮肤片与正常的皮肤其本相似;在分断的视神经发生再生并恢复其正常的生理功能的情况下,退化的视网膜逐渐恢复,同时被移植的皮肤片也出现表皮的去分化及表皮变薄等被诱导为角膜的过程,并对视神经的完整性与其诱导皮肤移植片转化为角膜之间的可能关系进行了讨论。     

Testing of the Splitting rate of PET/PA Composite Microfiber

The PET/PA composite microfiber yarn was cut into slices,which were viewed with an optical microscope and photographed with a digital camera.The gap-splitting rate and dislocated-splitting rate observed within the pictures were then counted.With the help of Matlab7.0 program,the results of splitting rate virtual values can be obtained with integral method.This creates a new testing method for determining the splitting rate of polyester and nylon composite microfiber fabric.     

石英试板的磨制方法

本文详细介绍了磨制石英试板的方法。此方法是根据石英晶体的形态,进行平行六方柱或者垂直于横条纹的方向切片,磨制成楔形,直到在正交偏光镜下出现四至五级干涉色为止。同时还详细介绍了制片过程中应注意的有关事项。此方法简单方便,易于推广。     

邻香草醛对稀有晌鲫的急性毒性研究

本文为研究邻香草醛对水生生物的毒害效应,采用流水式试验法研究了稀有的鲫的急性毒性,并进行了生态毒理学危害性评价。结果显示：邻香草醛对稀有的鲫的24h-LC50为12．20mg／L;95％置信限为10．53—14．14mg／L;48h-LC50为8．08mg／L;95％置信限为6．93～9．43mg／L;72h-LC50为5．92mg／L;95％置信限为4．80～7．29mg／L,96h-LC50为3．87mg／L;95％置信限为3．24～4．63mg／L,其生态毒理学危害性为高毒。     

运动对不同年龄大鼠直肠形态学的影响

本文探讨了运动对大鼠直肠形态学方面的影响,为运动对消化系统的影响提供了一个形态学方面的依据.分别将雄性的青年SD大鼠和老年SD大鼠随机分组,即分为青年运动组,青年对照组,老年运动组,老年对照组.运动组大鼠采用泳池游泳训练,对照组大鼠正常笼饲,自由饮食.处死后,取大鼠的直肠壁进行常规石蜡切片(10μm),光学显微镜观察,目镜测微计测量,分别比较青年运动组与青年对照组,老年运动组与老年对照组的直肠肠壁厚度和上皮细胞密度.结果显示,青年运动组大鼠与青年对照组大鼠相比,直肠壁厚度明显偏低,尤其是粘膜层厚度极显著降低;直肠上皮细胞密度显著高于青年对照组.老年运动组与老年对照组相比,两项指标差异均无显著意义.上述结果表明,运动使直肠的分泌功能增强,从而推论,运动对消化系统有良好的促进作用.     

心肌胞外间质的比较解剖学研究

借助S-570扫描电镜观察了五种脊椎动物(鱼、青蛙、蛇、鸡、鼠)的心肌胞外间质胶原的形态结构和分布。结果表明，心肌胞外间胶原的结构与分布随着几种动物进化阶段呈现出由简单到复杂、由低级向高级发展的趋势。本为进一步从心脏的超微结构揭示心脏与运动的关系提供了一定的理论基础。     

研究泥浆固相侵入岩芯深度的分段截割法

本文提出了利用渗透率测定仪检测泥浆固相颗粒侵入岩芯深度的方法——分段截割法。用该方法测定了不同条件下泥浆固相颗粒侵入岩芯的深度,研究了影响岩芯渗透率的主要因素,并评价了室内配出的完井液对岩芯渗透率的影响。试验结果说明,加有合适桥堵剂的完井液对低渗岩芯渗透率的损害主要是由滤液引起。在钻经储层的过程中,尽量缩短泥浆浸泡时间。     

建立Wistar大鼠全厚植皮模型的实验方法

目的 介绍一种建立Wistar大鼠全厚植皮模型的实验方法,提高Wistar大鼠植皮手术成功率。方法 清洁级Wistar大鼠12只,雄性,3月龄,体质量300～330 g,按照称重与麻醉、备皮与标记、大鼠固定与消毒、全厚皮片切取与修剪、全厚皮片回植以及采取避免大鼠啃咬及挠抓的措施这一实验流程,建立全厚植皮模型。结果 本组12只Wistar大鼠侧胸部植皮片全部成活,无一例发生皮片感染及坏死。术后大鼠进食正常,可自由活动,饲养1～2月,无大鼠发生非正常死亡。结论 本实验建立的实验方法简单有效,为相关的研究提供了具体的实验方法。