稀有鮈鲫被皮、呼吸与心血管系统组织学观察

摘要：目的 本文对成体的雌性和雄性稀有鮈鲫进行了系统性的组织学观察和描述,为以该动物为实验对象的研究进一步完善动物背景材料和理论基础。方法 采用的成体稀有鮈鲫由中科院水生生物研究所提供。用Bouin’s液对样品固定24 h至48 h后进行脱钙,流水轻柔冲洗表面去除样品表面残余的酸液,对样品的整体和局部采取矢状面与冠状面进行双向修块,梯度酒精脱水后浸入松油醇透明,包埋蜡块制作3 μm厚度的切片,按Hematoxylin & Eosin染色标准流程完成染色制片后于镜下观察,并对其各个脏器按照各个系统的顺序依次进行了组织学照片的拍摄及描述。结果 稀有鮈鲫的皮肤分为表皮层和真皮层,表皮外侧被覆角质化的鳞片,不能同无鳞鱼类一般通过皮肤呼吸,故其呼吸作用主要在鳃部进行。作为携氧工具的稀有鮈鲫的红细胞,如禽类的红细胞一般具有未退化的细胞核,从切片上可以看到在其心脏(分为静脉窦、心房、心室和具高度弹性的动脉四个部分)和血管(动静脉、毛细血管)中均有大量充盈。结论 本文对稀有鮈鲫的皮肤以及呼吸系统、心血管系统的器官进行了较为完整的组织学形态描述,可为以之为实验对象的研究提供较为可靠的理论参考。     

稀有鮈鲫的组织学切片制作和苏木精-伊红染色

目的目前鲜有专门针对稀有鮈鲫这种新型实验动物进行组织切片制作方法的研究,故我们对此进行了实践、摸索以建立一完整的组织学切片制作流程供参考交流。方法对正常生活状态下的健康稀有鮈鲫采用Bouin`s固定液固定,并用脱钙液软化骨骼后进行修块,组织块经梯度酒精脱水、松油醇透明之后,按照标准流程制成石蜡切片,HE染色后封片用显微镜观察。结果切片主要采取横断面和矢状面作为观察方位,并使用显微拍摄装备摄取了结构分明的各系统组织脏器的组织学照片。结论本文所述的方法经过多次探索和实践,制得的组织切片镜检结果清晰,质量稳定,可作为以稀有鮈鲫等小型硬骨鱼为实验动物的切片制作提供一些可行的建议。     

DBP与DEHP对稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)的急性毒性评价

为研究水体中DBP与DEHP对生物毒性效应,采用静态试验法进行了DBP、DEHP的鱼类急性毒性实验。结果显示:DBP对稀有鮈鲫的96 h-LC50为6.39 mg·L~(-1),95%置信限为5.68~7.44 mg·L~(-1);DEHP对稀有鮈鲫的96 h-LC502.95mg·L~(-1),DBP与DEHP混合液对稀有鮈鲫的联合毒性效应未见明显的协同作用或拮抗作用。     

稀有鮈鲫β-肌动蛋白基因片段的克隆及其同源性分析

采用RT-PCR方法,从稀有鮈鲫肌肉组织中分离和克隆出β-肌动蛋白基因cDNA部分序列,长度为1029bp,编码343个氨基酸残基．序列分析表明,该cDNA序列与其他物种昏肌动蛋白基因同源性非常高．RT-PCR能够检出该基因在稀有鮈鲫肌肉、眼、脑、心脏、肝、肠、鳃、睥、卵巢等组织中广普表达,在胚胎不同发育时期持续恒量表达．并基于已知的鱼类β-肌动蛋白基因序列构建了进化树．     

稀有鮈鲫铜蓝蛋白基因 cDNA 克隆及组织表达分析

铜蓝蛋白(Ceruloplasmin,Cp)是一种重要的铜转运蛋白,合成于肝脏并参与生物体铁的代谢,在医学上是各种炎症、感染、中毒及癌症疾病的标志性蛋白.铜蓝蛋白的研究已在多种真骨鱼类中被报道,文中第一次在稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)中报道此基因.采用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)克隆了稀有鮈鲫铜蓝蛋白基因,使用荧光定量PCR的方法构建了该基因组织表达谱.序列分析表明稀有鮈鲫铜蓝蛋白基因包含3 264bp全长编码序列,该序列编码1 087个氨基酸,其核苷酸和氨基酸序列与斑马鱼同源性最高(分别为88.1%和90.3%).理论相对分子质量和等电点分别为124 429.1D和6.41.荧光定量PCR检测表明该基因在肝脏和脾脏中相对表达量最高,在肌肉和鳃中相对表达量最低.使用氨基酸序列进行蛋白结构保守域分析,结果表明铜蓝蛋白基因在脊椎动物中是相对保守的,推测其功能也与其他物种相似.这为进一步研究稀有鮈鲫该基因的功能及其应用奠定了基础.     

稀有鮈鲫性腺分化的组织学观察

以丰年虫为饵料,运用组织学方法,对稀有鮈鲫性腺分化过程进行了观察.结果表明:在水温(25±1)℃条件下,稀有鮈鲫卵巢分化时间明显早于精巢.卵巢解剖学上的分化发生在孵出后21d左右,其主要标志为卵巢腔的形成以及形成成簇发育的卵原细胞群;细胞学上的分化发生在35日龄左右,标志为初级卵母细胞的形成.精巢分化的解剖学标志为输精管原基及精小叶雏形的形成,分别开始于50日龄及60日龄左右;细胞学上的分化发生在60日龄左右,标志为初级精母细胞的形成.     

稀有鮈鲫饲料营养及饲养技术的实验研究

目的探索稀有鮈鲫应用型配合饲料及相应的养殖技术,促进实验稀有鮈鲫的营养学标准化。方法在营养学需求的研究基础上,探索并验证适合稀有鮈鲫日常养殖的应用型配合饲料。通过生长实验和繁殖实验,筛选得到适宜的饲料配方;研究了温度、投喂频率、饲养密度等饲养策略对生长、性腺发育的影响。结果 25%~40%蛋白水平的配合饲料均可满足幼鱼快速生长需求,其中30%蛋白、6%脂肪、总能为12.5 kJ/g的投喂效果生长最好,同时,繁殖性能较高,可达到对照组的69.4%;亲鱼的产卵间隔随饲料蛋白水平的降低而延长;在18~24℃范围内,温度越高,生长越快,当温度超过28℃时,体质量反而有所下降;不同投喂频率下,最大生长均出现在24℃时;特定生长率随养殖密度升高呈明显下降的趋势,养殖密度为0.8尾/L时饲料利用率最高,1.6尾/缸组稍降低,但无显著差异。结论 30%蛋白、6%脂肪、总能为12.5 k J/g的配合饲料可满足稀有鮈鲫幼鱼的快速生长,且能使亲鱼能保持规律性繁殖,满足实验稀有鮈鲫传代和生产需要;过高或过低的温度对生长不利,投喂频率的增加不一定能促进生长和饲料利用;稀有鮈鲫幼鱼适宜的养殖温度为24~26℃,每天投喂2次;养殖密度对生长和性腺发育均有很大影响,适宜的养殖密度应不超过1.6尾/L。     

大鳞副泥鳅消化系统胚后发育组织学观察

利用组织学和组织化学的方法,对0~50日龄(Days after hatching,DAH)大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)消化系统胚后发育进行显微观察和研究。结果显示:大鳞副泥鳅初孵仔鱼口咽腔封闭,消化道为一条封闭的柱形直管;3DAH仔鱼卵黄囊体积明显减小,肠道前端开始膨大;4DAH时,仔鱼开口摄食,口咽腔可见味蕾和杯状细胞,消化道迅速发育,食道结构开始分化为前后两部;5DAH时,卵黄囊基本耗尽,肝脏呈网状结构,肝血窦出现;7DAH时,仔鱼的口咽腔味蕾和粘液细胞大量增加,肝脏出现脂肪空泡;15DAH后,食道前后段结构差异显著,后段呈"I"形状;20DAH时,食道粘液细胞丰富,肠道、肝脏和胰脏发育逐渐完成;50DAH幼鱼前肠粘膜褶皱结构复杂,粘液细胞丰富,中肠到后肠毛细血管逐渐丰富,管壁也逐渐变薄,形成明显的消化区与呼吸区。研究认为20DAH后大鳞副泥鳅消化系统逐渐发育完善;10~20DAH为肠道呼吸功能形成期,肠道呼吸功能的形成与之生存在静水低氧环境有关。     

大鳞副泥鳅消化系统胚后发育组织学观察

利用组织学和组织化学的方法，对0～50日龄(Days after hatching，DAH)大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)消化系统胚后发育进行显微观察和研究。结果显示：大鳞副泥鳅初孵仔鱼口咽腔封闭，消化道为一条封闭的柱形直管；3 DAH仔鱼卵黄囊体积明显减小，肠道前端开始膨大；4 DAH时，仔鱼开口摄食，口咽腔可见味蕾和杯状细胞，消化道迅速发育，食道结构开始分化为前后两部；5 DAH时，卵黄囊基本耗尽，肝脏呈网状结构，肝血窦出现；7 DAH时，仔鱼的口咽腔味蕾和粘液细胞大量增加，肝脏出现脂肪空泡；15 DAH后，食道前后段结构差异显著，后段呈“I”形状；20 DAH时，食道粘液细胞丰富，肠道、肝脏和胰脏发育逐渐完成；50 DAH幼鱼前肠粘膜褶皱结构复杂，粘液细胞丰富，中肠到后肠毛细血管逐渐丰富，管壁也逐渐变薄，形成明显的消化区与呼吸区。研究认为20 DAH后大鳞副泥鳅消化系统逐渐发育完善；10～20 DAH为肠道呼吸功能形成期，肠道呼吸功能的形成与之生存在静水低氧环境有关。
     

大熊猫舌解剖二例

大熊猫为我国珍贵动物之一,也是国际上的保护动物。对其食性的分析已有详细研究,与其食性相适应的消化系统各器官的大体解剖及组织学研究则甚少(张鹤宇等,1956;Keymer 1976;张庆藩等1981)。舌的解剖至今未见报导。为探讨对大熊猫的保护和饲养有关的基础理论,我们将所收集到的两例成体大熊猫,对其舌作了大体解剖和组织学观察,现将观察结果报导如下:     

沙蟒(Eryx miliaris)呼吸、消化系统的解剖及扫描电镜观察

本文报导了关于5条沙蟒的呼吸、消化系统解剖研究的结果:呼吸系统由鼻、喉、气管、肺组成,右肺较左肺发达,左肺退化,其长度约为右肺的41.5%。消化系统包括口腔、食道、胃、小肠、盲肠、大肠、泄殖腔,消化腺有肝、胰及胆囊等。扫描电镜下观察,喉和气管的粘膜表面均为柱状绒毛细胞,肺前部内面为显著的蜂窝状结构。小肠内壁具多数的扁形小肠绒毛。     

长鳍吻鮈消化系统组织学初步研究

长鳍吻鮈消化道由口咽腔、食道、肠和肛门几部分组成,食道粗短,肠较长,在活体内呈"N"形盘旋状;消化腺分为肝脏和胰腺,肝脏暗褐色,分被、腹两叶,胰为弥漫型,分布于口咽、食道肠壁和肝脏内,肉眼不可分辨;食道上皮为复层上皮,而肠上皮为单层柱状上皮,少量杯状细胞分布于食道、肠前段、肠中段上皮细胞之间,肠后段杯状细胞丰富;消化道肌肉层分2层,内层为环肌,外层为纵肌。肌肉层从肠前段到肠后段逐渐加厚;肝小叶不明显,肝细胞呈卵圆形或多角形。     

饲料中去皮豆粕替代鱼粉对埃及胡子鲇消化酶活力和肠道组织的影响

以初始体质量(22.40±0.30)g的健康埃及胡子鲇Clarias lazera为试验对象,在室内单循环控温养殖系统中进行8周饲养试验,以鱼粉为动物蛋白源,去皮豆粕为植物蛋白源,去皮豆粕分别替代0%(CK),15%,30%,45%和60%的鱼粉蛋白,配制成5种等蛋白(40%)等能(15.8 MJ/kg)的半精制饲料,研究去皮豆粕替代鱼粉对埃及胡子鲇消化酶活力及肠道组织的影响。结果表明,埃及胡子鲇胃蛋白酶活力去皮豆粕组显著低于对照组(P0.05),30%,45%和60%去皮豆粕替代组中肠和肝胰脏蛋白酶活力显著低于对照组(P0.05),45%和60%去皮豆粕替代组的前肠和后肠蛋白酶活力显著下降(P0.05)。当去皮豆粕替代鱼粉45%和60%时,后肠淀粉酶活力显著低于对照组(P0.05)。但埃及胡子鲇的胃、肝胰脏、前肠和中肠淀粉酶活力各组之间差异不显著(P0.05)。去皮豆粕对埃及胡子鲇的脂肪酶活力影响不显著(P0.05)。去皮豆粕替代鱼粉对埃及胡子鲇肠道组织结构具有一定的影响。当去皮豆粕替代鱼粉蛋白45%和60%时,埃及胡子鲇的中肠和后肠肠道组织结构完整性被破坏,部分肠绒毛脱落,部分上皮细胞与固有层分离,固有层结缔组织疏松,固有层变宽,肠长、肠体指数、肠长指数、肠道皱襞高度显著下降(P0.05)。     

Sequences of cytochrome b gene for primitive cyprinid fishes in East Asia and their phylogenetic concerning

1140 bp of cytochrome b gene were amplified and sequenced from 14 species of primitive cyprinid fishes in East Asia. Aligned with other ten cytochrome b gene sequences of cyprinid fish from Europe and North America retrieved from Gene bank, we obtained a matrix of 24 DNA sequences. A cladogram was generated by the method of Maximum likelihood for the primitive cyprinid fishes. The result indicated that subfamily Leuciscinae and Danioninae do not form a monophyletic group. In the subfamily Danioninae, Opsariichthys biden and Zacco platypus are very primitive and form a natural group and located at the root. But the genera in subfamily Danioninae are included in different groups and have not direct relationship. Among them, Aphyocypris chinensis and Yaoshanicus arcus form a monophyletic group. Tanichthys albonubes and Gobiocypris rarus have a close relation to Gobioninae. The genus Danio is far from other genera in Danioninae. In our cladogram, the genera in Leuciscinae were divided into two groups that have no direct relationship. The genera in Leuciscinae distributed in Europe, Sibera and North America, including Leuciscus, Rutilus, Phoxinus, N. crysole, Opsopoeodus emilae, form a monophyletic group. And the Leuciscinae in southern China including Ctenopharyngodon idettus, Mylopharyngodon piceus, Squalibarbus and Ochetobius elongatus have a common origination.     

花背蟾蜍胃肠的血供研究

用血管铸型法对15只花背蟾蜍（Bufo raddei)胃肠的动脉和静脉进行了解剖学观察,结果显示：花背蟾蜍胃肠的动脉均来自腹腔肠系膜动脉,胃的营养由胃左动脉和胃右动脉供应;肠由肠系膜前动脉和肠系膜后动脉共同营养,胃的静脉包插胃左静脉和胃右静脉,分别收集胃左侧面和胃右侧面胃壁的静脉血,经肝门静脉回流;肠的静脉有肠系膜前静脉和肠系膜后静脉,前者收集十二指肠和回肠前段肠壁的静脉血,后者收集回肠后段和直肠壁的静脉血,最后经肝门静回流,与此同时,将花背蟾蜍胃肠的血供与其它动物进行了比较。     

猴鼻咽部的解剖学

本文对10个猴头的鼻咽部作了肉眼形态学观察,组织学观察及测量了鼻咽部的10个部位,并研究了猴鼻咽部的周界。我们观察到:1、猴鼻咽部有鼻咽中隔,它是鼻中隔向后的延续,因而不存在有鼻后孔,故不能以鼻后孔作为鼻咽前界的定位点。2、鼻咽中隔为猴所特有,不见于人和免,鼠等动物。鼻咽中隔把鼻咽腔分为左右两个相等的牛角管形的腔,耳咽管开口于鼻咽侧壁中部偏后的位置。鼻咽中隔内有丰富的淋巴组织,向后部淋巴组织逐渐减少并上移至鼻咽顶壁。3、鼻咽侧壁于耳咽管前后均可见肌组织,由前向后肌组织逐渐加多。4、本文对猴鼻咽部10个部位作了测量,其平均数为:鼻咽顶壁长27mm,鼻咽底壁长33mm,耳咽管口至鼻咽前界11mm,耳咽管口至鼻晒后壁7mm,外鼻孔至鼻咽前界55mm。本研究观察复盖猴鼻咽部各部位的上皮,均为假复层纤毛柱状上皮,未见有鳞状上皮。     

大鳍刺鰟鮍消化系统的形态学观察

对大鳍刺鰟鮍的消化系统进行解剖观察,发现消化道可以分为口、口咽腔、食道、肠和肛门等5个功能区.口腔内有咽及鳃耙,鳃耙形成了对食物颗粒的屏障,面向食管保护鳃丝.短的食管起源于咽腔,终止于肠.肠发达,分前肠、中肠和后肠,肠终止于肛门.消化腺有肝和胰,胰弥散在肝中,与肝合称肝胰脏.     

Posterior-to-anterior transformation in engrailed wing imaginal disks of Drosophila

Segments in the Drosophila adult are divided into clonally distinct anterior and posterior compartments. Mutations at the engrailed locus can affect the pattern of cuticular structures in the posterior compartments of segments, but have no obvious effect on anterior structures; for example, bristles that are normally seen only on the anterior wing margin in wild-type flies can be found on the posterior margin of engrailed wings. These and clonal analysis data led to the hypothesis that engrailed causes a transformation of posterior to anterior identity in the wing cells. Despite some striking examples of this transformation, a common engrailed phenotype is the disruption or elimination of posterior pattern elements, without a clear replacement by anterior structures; this, together with indications that localized cell death can mimic some of the observed posterior-to-anterior transformations, has led some investigators to question the original engrailed hypothesis. Recently, monoclonal antibodies displaying region-specific binding patterns on the wing imaginal disk have been described, and one of these antibodies in particular provides a novel probe for the engrailed phenotype in the larval precursors of the adult wing. Here I compare the antibody binding patterns on engrailed and wild-type wing disks. The results strongly support the notion that engrailed mutations cause a posterior-to-anterior transformation in these cells.     

兔膝关节骨关节炎模型建立的探讨

摘要: 目的 探讨应用前交叉韧带和内外侧半月板切除的方法制作骨关节炎( OA) 动物模型的可行性及可靠性。 方法 成年雄性新西兰大白兔 20 只,于右后肢膝关节切断前交叉韧带和切除内外侧半月板,左后肢仅打开关节 囊,不对关节内部进行操作,观察术后兔子活动情况; 于第 2、6、10 周处死,观察其左、右两侧后肢膝关节软骨病理 改变。实验动物 2、6、10 周后取右后肢膝关节软骨为实验组,左侧肢体膝关节软骨标本为对照组,比较两组软骨病 变情况。结果 2、6、10 周后,从实验动物活动表现和大体标本观察,兔右后肢膝关节均呈典型的 OA 特征。结论 前交叉韧带和内外侧半月板切除是一个制作 OA 动物模型的较为理想的方法。